微生物-培养方法

配制培养基
LB培养基: 蛋白胨： 10g 酵母粉： 5g NaCl： 10g 琼脂： 20g 将上述物质溶解后， 用蒸馏水定容至 1000ml， 分装后及时灭菌。
包器材
高压蒸汽灭菌 ： 通过加热使菌体内蛋白质凝固变性，从而达到杀菌目的。 条件：压力100 kPa 温度121 ℃ 时间15-30 min
固体培养基
半固体培养基
液体培养基
按 用 途 不 同 划 分
鉴别培养基
选择培养基
无菌技术
• 消毒：不能杀死芽孢和孢子。 • 煮沸、紫外线、化学药剂 • 灭菌：能杀死芽孢和孢子。 • 高压蒸汽灭菌、灼烧、干热、过滤。
实验操作——微生物的培养
配制培养基 灭菌 倒平板 接种 培养 观察记录 包器材 菌种扩增
灭 菌
灼烧 干热
微生物的营养
• 培养基：碳源、氮源、水、无机盐等。
• 适宜的环境条件：温度、pH、氧气等。 • 自养型：无机碳源；异养型：有机碳源。
细菌
• (1)结构：单细胞的原核生物，有球形，杆 形，螺旋形。 • 基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、 拟核。 • 特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞。 • • (3)繁殖: 二分裂。
选修一 专题2
微生物的培养与应用
微生物的种类
• 非细胞：病毒； • 原核细胞：细菌、蓝藻、放线菌、支原体等。 • 真核细胞：真菌、原生生物、藻类等。
• • • 细菌：大肠杆菌、乳酸菌等 真菌：酵母菌、霉菌； 原生生物：草履虫、变形虫等。
微生物的特点
• • • • • 体积小，面积大 吸收多，转化快 生长旺，繁殖快； 适应强，易变异; 分布广，种类多。
按浓度捆成一摞
恒温37℃培养
10-4 、 10-3,、 10-2
常见接种方法
• 平板划线法： • 主要用于分离、纯化培养 • 稀释涂布平扳法： • 主要用于分离菌种并计数
常用方法
消 毒
煮沸 紫外线
酒精溶液 次氯酸钠溶液等 高压蒸汽
微生物培养和组培中的 应用 玻璃仪器 实验室、操作台、衣物等 手、外植体等 外植体 培养基、玻璃仪器、棉塞、 牛皮纸等 接种环、涂布器 玻璃仪器
菌落
• 菌落： 单个细菌用肉眼是看不见的，当单 个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时， 便会形成一个肉眼可见的，具有一定形态 结构的子细胞群落。 • 菌落是菌种鉴定的重要依据。不同种 类的细菌菌落的大小，形状光泽度颜色硬 度透明度都不同。
培养基的种类及应用
按化学组成不同划分：合成培养基/天然培养基 按 物 理 状 态 不 同 划 分
倒平板
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
烧至暗红
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
菌液膜
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
接种、划线
划线分离
①
②
③
为什么通过划线分离可得到单菌落？
划线分离
•倒置后做好标记，写在培养皿侧面 我们的实验结果
灭 菌
菌种扩增
•摇床震荡培养12h（于LB液体培养基中）
本图来自十一学校
实验用具
• LB固体培养基 • 大肠杆菌菌液（LB液 体培养基） • 培养皿 • 接种环 • 酒精棉 • 酒精灯 • 镊子、火柴、记号笔
接种前准备
• 用肥皂洗手并使用酒精消毒。 • 顺序： 点燃酒精灯→酒精棉擦拭双手→酒精棉擦拭桌面
培养
为什么要ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ置培养？
恒温37℃培养
配制菌悬液
得10-2, 10-3, 10-4的菌悬液
1g土壤
1个99ml无菌水
2个9ml无菌水
稀释菌悬液 （10-4）
高浓度→低浓度，换枪头
接种
• 取200ul菌悬液(10-4)
涂布分离
低浓度→高浓度，可不用换枪头
涂布分离
涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？
37℃倒置培养