尿液红细胞及形态

素、工作认真负责的技术人员外，还需对所用试验器材（标本收集器 皿、离心机及计数板）进行标准化。
自动尿沉渣分析仪
UF-100尿沉渣分析仪对尿液中有形成分直接作荧光染色，利用流式 细胞仪原理，通过前向散射光强度(Fsc)、前向散射光脉冲宽度(Fscw)、 荧光强度(Fls)、荧光脉冲宽度(Flw)以及细胞电阻抗等参数来检测尿中 有形成分的大小、长度、染色情况，从而区分尿中的各种有形成分， 具有操作简单、结果重复性好等特点。在红细胞检测方面，UF-100 的特点之一是同时提供尿红细胞均一型和非均一型指标，对鉴别尿中 红细胞的来源有较大参考价值。
（甲苯）。门诊病人将全部尿液送化验室体液检验窗口。
住院患者将全部尿液送护理站，混匀并量取总尿量后，留 取10-20ml尿液于一次性尿杯中送化验室检测，请务必在 化验单上记录总尿量。 注意：甲苯系有机溶剂，应避免与塑料制品直接接触。
OGTT试验
WHO建议：成人75g葡萄糖，孕妇100g，儿童
1.75g/kg体重，总量不超过75g葡萄糖，用250 ml 水溶解，5分钟内口服。
尿液后，用无菌容器接取中段尿；男患者应翻转包皮冲洗， 用碘伏或1：1000新洁尔灭消毒尿道口，排出前段尿液后，
用无菌容器接取中段尿。
标本的运送：标本采集后应立即送检，争取在1h之内送检 验科微生物室。
痰培养的标本采集
自然咳痰法：要求患者清晨留取，留取标本前用清水漱口 3次，之后用力将气管深部的痰液咳出。咳痰较困难者可 用雾化蒸气吸入以利痰液咳出。幼儿可用手指轻叩胸骨柄
相差显微镜检查
1968年，Kark研究小组开始应用相差显微
镜观察尿细胞等形态，1979年澳大利亚的 肾病学家Birch和Fairly应用于临床。相差显 微镜反映红细胞立体感强，是目前检查尿 红细胞形态最常用的方法。
扫描电镜
1983年，Fasseff用扫描电镜观察尿红细胞。 由于立体感强，可敏感地观察到红细胞表 面的细微变化。但因价格昂贵而难以普及 于临床。
细胞溶解、破坏；③渗透压较低（＜400mmol/L）时，出
现面包圈样、戒形红细胞且易溶血；④渗透压较高（＞ 900mmol/L）且pH增加时，则形成锯齿形、棘形红细胞。
标本要求
由于ｐＨ及尿渗透压会对ＲＢＣ形态产生影响，在采集标 本时，我们要求受检者检前限水，让尿液在膀胱中停留6 ｈ，严格取清洁中段晨尿，以期减小ｐＨ值及尿渗透压对
上方以诱发咳痰。
注意事项：留痰前不要过早打开无菌容器，留痰时不要接 触容器内层，留痰后应立即送检，争取在1小时内送达检
验科微生物室。
血培养的标本采集
采血时机：在患者发热期间越早越好，最好在抗菌治疗前， 以正在发冷发热时或发冷发热前半小时为宜。 采血部位：多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤
菌污染的可能。要避免从血管插管或静脉留置针内取血，
响尿红细胞形态检测对血尿定位诊断的可靠性。
近期本科新开展项目
24h尿蛋白定量
OGTT试验
尿红细胞形态检查
血、尿、痰培养
24小时尿蛋白定量标本留取方法
准确收集24小时尿液：例如：早晨7点起床解小便，弃去
不要。收集7点钟以后的所有尿液置干净容器内，至第二 天早晨7点钟止，并在第一次小便解入容器后加入防腐剂
显微镜检查法（镜检）
尿沉渣镜检的标准是：①医生要求镜检或病人的主诉、体征可能在尿 沉渣中出现除红、白细胞以外的有形成分如结晶、异常细胞等；②泌 尿系统疾病或可引发肾脏并发症的疾病；③尿液颜色、浊度、蛋白、 亚硝酸盐、红细胞、白细胞有任何一项异常者。 对于干化学筛选后的镜检问题，国内学者有争议，有学者认为镜检是 尿沉渣分析的参考标准，其重要意义是任何方法无可替代的，只要有 条件，最好每份标本都镜检。
粒的干扰。
观察红细胞体积分布图(RDW)：具有客观、快速、准确、
重复性好的特点。
畸形红细胞分类
大红细胞：细胞体增大，中心淡，无双盘凹陷感。 小红细胞：胞体小，外膜增厚，折光增强。 棘形红细胞：胞质常向一侧或多侧伸出、突起，如生芽样。 环形红细胞（面包圈红细胞）：因细胞内血红蛋白丢失或 胞浆聚集，形似面包圈样空心环状。 新月形红细胞：红细胞如半月形。 颗粒形红细胞：胞质内有颗粒状的间断沉积，血红蛋白丢 失。 皱缩红细胞：高渗尿中多见。 影红细胞：低渗尿中多见。 红细胞碎片
现报警时，必须用镜检确认。
尿红细胞形态学检查
主要用于鉴别肾性血尿和非肾性血尿。
主要方法有：普通光镜、相差显微镜 、扫
描电镜 、血液分析仪 、尿液有形成分分析
仪等 。
普通光镜检查
通常，在高倍镜下(400倍)识别非染色细胞 形态，此法由于缺乏色泽对比和立体感， 常要求观察者有丰富熟练的尿形态学经验。 改用染色法(甲基绿染色，结晶紫-沙黄染色， 或瑞氏染色)可增加形态鉴别特征。
下细胞浆粘滞性增加、顺应性下降,呈皱缩形;在低渗环境中细胞表面
积与体积比上升,滤过阻力下降,稀释的血红蛋白漏出细胞外而呈现环 形、戒形。因此,尿中畸形红细胞增多、但形态单一不能诊断肾小球性
血尿;肾小球性血尿的特征是尿中出现多种形态的畸形红细胞,且畸形
红细胞数目明显增多。
2、尿畸形红细胞并非肾小球性疾病所特有 尿畸形红细胞不只出现于肾小球性疾病,健康人尿中 的红细胞均为畸形红细胞,但其数量小于5×106/Ｌ。因
综合评价
单克隆抗体免疫法检查尿液红细胞具有很好的敏感性和特 异性，但由于其过于敏感，不能用于常规检测；在镜检和 干化学法检测结果不可解释时，其有重要的鉴别诊断价值。
尿流式细胞仪检查不仅对尿红细胞定量分析有意义，而且 还能对尿红细胞形态进行分析，以确定血尿来源。但分析
过程易受某些因素的干扰，如酵母菌、精子等，当仪器出
原理：利用尿液中红细胞内血红蛋白或其破坏释放出的血红蛋白均具 有过氧化物酶活性，可使过氧氢茴香素或过氧化氢烯钴释放出新生态 氧，后者可氧化有关色原(如邻甲苯胺) 显色。因此，它既可检测红细 胞，也可检测游离血红蛋白，还可作为红细胞镜检的筛选法。 不足：吩噻嗪类或吩嗪类药物、肌红蛋白、对热不稳定酶、氧化剂或 细菌过氧化物酶、尿pH值偏高等均可使隐血出现假阳性。尿液中存在 大量维生素C时，可由于竞争性抑制反应而使干化学隐血出现假阴性。
皮肤消毒、标本采取、运送、分离移种等，皆应十分注意。
用头皮针为新生儿和婴儿取血时，应更换针头再将血注入 培养瓶中。
谢 谢!
结果的影响，使结果更具可比性。
取刻度离心管，倒入混合后的新鲜尿10ml,400g离心力， 离心5min，待离心停止后，取出离心管，弃去上层清夜，
留下0.2 ml沉渣，轻摇离心管，使尿有形成分充分混匀。
取尿沉渣0.02ml，滴在载玻片上，用18mm×18mm的盖 玻片覆盖观察。
临床意义
肾性血尿疾病主要有：膜性肾小球肾炎、IgA肾病、狼疮 性肾炎、局灶性肾硬化、系统性血管炎、肾淀粉样变等。
判断界限
非肾小球性血尿：均一性红细胞>80%，畸形红细胞 <20% 。 肾小球性血尿：畸形红细胞>80%。红细胞呈多形性，如
粗棘状、菜花状、伪足状、面包圈状；或极度萎缩或极度
膨胀；或呈碎片状等。 混合性红细胞血尿：畸形红细胞>20%、<80%，为混合型 血尿。
影响因素
①碱性（pH＞9.0）尿中，红细胞膜脂质外层表面增加， 出现锯齿形红细胞和棘形红细胞；②酸性（pH＜4.0）尿 中，红细胞膜脂质内层表面增加，出现可逆口型红细胞或
尿液有形成分分析仪
1995年，日本推出流式细胞技术为原理的 尿液分析仪Sysmex UF-100，可将尿中成 分作荧光染色后识别，如为肾性红细胞， 散射光分布在图像左侧，非肾性红细胞在 图像右侧，能有效地区别血尿来源。
血液分析仪
测定尿红细胞平均体积(MCV)：肾性红细胞以小型为主， MCV小于血MCV； MCV＜72 fl；非肾性红细胞以正常为 主，MCV大于血MCV。但用MCV时，要注意排除其他微
结晶、菌尿 （草酸钙结晶和霉菌）导致假阳性，红细胞碎片及影红细 胞相对于普通红细胞而言其荧光染色敏感度下降，荧光强度弱而造成 仪器漏检。
单克隆体免疫法
可将尿液中的红细胞或Hb与试剂中单克隆抗体结合并显色。其优点是 敏感度高、特异性好。按每个红细胞Hb含量为30pg计，尿液中含有2 个红细胞/μl（相当于0.5/HFP）即可检出。其特异性体现在仅与人Hb 起反应，假阳性率很低。由于其过于敏感，在正常人尿内含红细胞 （0～3/HFP）时，即可发生反应。因此，不适合常规尿红细胞检查。 但当常规镜检与干化学法结果不能解释时，如尿中红细胞溶解和受某 些物质干扰干化学检查阳性，而镜检未找到红细胞，应用单克隆抗体
免疫法可为尿中红细胞的性质提供鉴别诊断依据。
综合评价
尿红细胞镜检是尿液红细胞检测的参考标准，但对尿中溶 解的红细胞不能检出。
干化学法可检测Hb，既有助于溶血性疾病的诊断，也可
弥补镜检不能检出破坏的红细胞之不足，还可作为尿红细 胞镜检的筛选方法。但必须注重尿液分析仪及试剂带的质 量及在工作中可能出现的干扰因素。
标本采集：于口服糖前、0.5、1、2、3h抽取静脉
血测定GLU，同时收集尿液标本查尿糖。
整个试验期间不可吸烟、喝茶或进食
尿液培养标本留取方法
标本收集：需在应用抗菌药物之前或停用抗菌药5d之后留 取尿液标本；尿液在膀胱内应停留6~8小时以上。 清洁排尿法：女患者以手指将阴唇分开，用肥皂水或碘伏
清洗外阴，然后以清水冲洗尿道口周围，擦干并排出前段
尿异形红细胞形态形成机制
①红细胞通过有病理改变的肾小球滤膜，受到挤压损伤； ②红细胞受到不同pH和渗透压持续变化的肾小管滤液的影响： 肾性血尿中由于红细胞本身受损，其形态已经发生变化， 因此极易受肾小管滤液pH和渗透压变化的影响而发生形 态畸变。非肾性血尿则不存在红细胞通过肾小球滤膜挤压 损伤的前提，而且红细胞在肾小管滤液中流经的时间短暂， 因而受滤液pH和渗透压变化的影响较小，故红细胞形态 保持正常或均一性轻度变化。