血型的鉴定方法及操作

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分泌型血型物质的意义：
在RBC抗原弱表达个体中确定ABO血型。
检测唾液、羊水中的血型物质，辅助鉴定血型 和预测胎儿血型。
能中和天然抗体（IgM），有助鉴别Ab性质。
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3.ABO亚型：ห้องสมุดไป่ตู้
亚型：同一血型抗原的结构、性能（质）或抗 原位点数（量）存在一定差异。
A亚型：A1，A2，A3，Ax，Ay，Am B亚型：B1，B2，B3，Bx，Bm
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红细胞血型（系统，抗原）
是存在于红细胞上的化学结构，化学本质是糖 和多肽，是红细胞膜上的跨膜蛋白。
存在于红细胞膜上（完全抗原），也存在于上 皮细胞以及各种体液和分泌液中（半抗原）。
RBC
存在于体液、分泌液中
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红细胞血型抗体
天然抗体、免疫抗体 规则抗体、不规则抗体 完全抗体，不完全抗体 同种抗体，自身抗体
要求： 高效价：抗A、抗B≥1：128 高亲和性：15s内出现凝集，3min后凝集块 > 1mm2 单克隆抗体具有检出A2，A2B的能力 冷凝集素效价< 1：4 无菌，病毒灭活
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四、ABO和Rh血型鉴定
常用方法： 盐水介质法、酶介质法、抗人球蛋白法、聚凝 胺法
试管法、玻片法、微柱凝胶法
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1.盐水介质法（salt medium test）
原理：根据IgM类抗体与红细胞膜上特异性抗 原能发生凝集反应。
正定型：已知血型抗体试剂 + 红细胞
鉴定红细胞上血型抗原
反定型：已知标准红细胞 + 血清
自身抗体：针对自身抗原产生的抗体，如引起 自身免疫型溶血性贫血。
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红细胞血型
红细胞血型分类： ISBT（The International Society of Blood Transfusion)
2002年，29个系统，200多个抗原 目前，30个系统，300多个抗原
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一、ABO血型系统
分泌型血型物质：ABH抗原存在于红细胞、内 皮细胞、血小板、淋巴细胞、上皮细胞等，也 可出现在除脑脊液外的分泌液中，唾液中最丰 富。
Se，se基因——与体液分泌有关，Se编码α – L-fucocyltransferase，形成分泌液中的H抗 原，H也可转化为A或B抗原，Se不影响红细 胞上ABH形成，Se为分泌型；se为非分泌型； 19chr。
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天然抗体和免疫抗体
天然抗体：ABO血型系统中，A型个体血浆中 天然存在抗B，B型个体血浆中存在抗A。多数 天然抗体是IgM型，最佳反应温度为室温或更 低。
免疫抗体：一般通过输血、妊娠、注射三种方 式接受抗原刺激，多数免疫抗体是IgG型，最 佳反应温度是37oC。
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天然抗体和免疫抗体特性比较
A基因—— α –N-acetyl-0galactosaminyltransferase，
9chr
B基因——galactosyltransferase, 9chr
O基因——无效基因，不产生转移 酶，O型红细胞含有H物质
基因
酶
合成抗原
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思考：A、B、AB型红细胞是否存在H物质？
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（3）ABH可溶性抗原形成
基因位于1chr，分别命名为RHD，RHCE， RHD编码D抗原，RHCE编码不同组合的CE抗 原，ce，cE，Ce，CE。
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2.命名和种类
三种命名方式 Fisher-Race、数字命名法、现代命名法
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Fisher-Race命名法（CDE命名法）
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3.Rh血型种类
D、E、C、e、c 抗原的强弱次序
鉴定血清中抗体
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反应条件：生理盐水介质，室温，肉眼可见凝 集反应
平板法，试管法，微孔板法，试管离心法最可 信赖。
应用：ABO血型定型、RhD抗原定型 （IgG+IgM，IgM单克隆抗体），交叉合血
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结果判断
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注意事项（一）：
标准血清：健康壮年人混合血清，培养细胞株 的单克隆抗体
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完全抗体和不完全抗体
完全抗体：在盐水介质中能凝集红细胞抗体，多为IgM抗体。
不完全抗体：能使红细胞致敏，但在盐水质中不能凝集红细胞， 需要通过抗球蛋白法或其他非盐水介质法进行检测，多为IgG 抗体。
抗IgG
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同种抗体、自身抗体
同种抗体：针对患者缺乏的抗原所产生的抗体 即为同种抗体，如Rh阴性者输血后产生的抗 Ｄ抗体。
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规则抗体和不规则抗体
规则抗体：ABO系统产生抗Ａ、抗Ｂ是有规律的。 Landsteiner规律： Ａ型－抗Ｂ，Ｂ型－抗Ａ，Ｏ型－抗Ａ，抗Ｂ
不规则抗体：除ABO 系统外，其他系统产生的抗体 均不符合上述规律。 正常人血液中一般没有不规则抗体，又称为意外抗体 （unexpected antibody）。
1. ABO血型抗原和抗体特性
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2.ABO血型的遗传与生化
（1）ABO基因型与表型
A型——AA，AO B型——BB，BO AB型——AB O型——O
A，B是显性基因，O是隐性基因
ABO基因不是产生ABO抗原的遗传密码
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（2）ABO血型的生化合成
H基因—— α –Lfucocyltransferase，19chr
红细胞血型系统及其检测
重庆医科大学临床血液教研室
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血型的发现
1900年，ABO血型系统 1940年，Rh血型系统
Karl Landsteiner
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血型（blood type)
狭义地讲，存在于红细胞上的特异性同种抗原。
广义地讲，是人类遗传多态性的一种表现，血 液中各种成分都有其各自型别。
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二、Rh血型系统
1940年，Landerstein和Wiener用恒河猴 （rhesus）RBC免疫家兔或豚鼠，得到一种 抗体，可与85%白种人红细胞发生反应。
Rh系统有50个抗原，最复杂，重要性仅次于 ABO血型。
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1.遗传与发育规律
胎儿早期充分发育，脐带血/新生儿红细胞同 成人。
D>E>C>c>e
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5.Rh抗体
Rh抗体产生 天然抗体罕见 主要通过输血和妊娠免疫产生IgG 初次免疫后3~6月出现，再次免疫后3周达高峰
Rh抗体种类 抗D，抗E，抗C，抗c，抗e
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ABO和Rh血型系统的临床意义
安全输血的主要保证 新生儿溶血病的诊断 器官移植的必要条件 其他：遗传学研究，法医学鉴定