LCMS及GCMS原理

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液相色谱质谱LCMS联用的原理及应用

进样系统离子源质量分析器检测接收器
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真空系统
真空系统
质谱仪的离子源、质量分析器和检测器必须在高真空状态下工作，以减少本底的干扰，避免发生不必要的离子-分子反应。所以质谱反应属于单分子分解反应。利用这个特点，我们用液质联用的软电离方式可以得到化合物的准分子离子，从而得到分子量。
ESI(Electrospray Ionization):电喷雾电离—属最软的电离方式。适宜极性分子的分析，能分析小分子及大分子(如蛋白质分子多肽等)
APCI(Atmospheric Pressure Chemical Ionization):大气压化学电离—同上，更适宜做弱极性小分子。
APPI(Atmospheric Pressure PhotoSpray Ionization):大气压光喷雾电离—同上，更适宜做非极性分子。
碎片离子：
准分子离子经过一级或多级裂解生成的产物离子.
碎片峰的数目及其丰度则与分子结构有关, 数目多表示该分子较容易断裂,丰度高的碎片峰表示该离子较稳定,也表示分子比较容易断裂生成该离子。
OH H N C3H
C3H
Ephedrine, MW = 165
多电荷离子：
指带有2个或更多电荷的离子,常见于蛋白质或多肽等
丰度比出现在质谱中,这对于利用质谱确定化合物及碎片的元素组成有很大方便, 还可利用稳定同位素合成标记化合物,如:氘等标记化合物,再用质谱法检出这些化合物,在质谱图外貌上无变化,只是质量数的位移,从而说明化合物结构,反应历程等
如何看质谱图：
(1)确定分子离子,即确定分子量
氮规则：含偶数个氮原子的分子，其质量数是偶数，含奇数个氮原子的分子，其质量数是奇数。与高质量碎片离子有合理的质量差，凡质量差在3~8和10~13，21~25之间均不可能，则说明是碎片或杂质。

GC-MS工作原理

GC-MS工作原理引言：气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）是一种常用的分析方法，它结合了气相色谱仪（GC）和质谱仪（MS）的优势。

GC-MS工作原理是通过样品的挥发性化合物在气相色谱柱中分离，然后通过质谱仪对其进行检测和鉴定。

本文将详细介绍GC-MS的工作原理。

一、气相色谱分离原理1.1 色谱柱选择：GC-MS中常用的色谱柱有毛细管柱和填充柱两种。

毛细管柱适用于分析挥发性有机物，填充柱适用于分析非挥发性有机物。

1.2 色谱柱操作条件：色谱柱的操作条件包括温度、流速和柱温程序等。

温度和流速的选择会影响分离效果和分析时间。

1.3 色谱柱分离机理：气相色谱柱的分离机理主要包括吸附、分配和离子交换三种机制。

不同的分析物有不同的分离机理。

二、质谱检测原理2.1 离子化方式：质谱仪常用的离子化方式有电子轰击离子化（EI）和化学电离（CI）等。

EI适用于挥发性有机物的分析，CI适用于非挥发性有机物的分析。

2.2 质谱仪工作模式：质谱仪的工作模式包括全扫描模式和选择离子监测模式。

全扫描模式可以获取样品的整个质谱图，选择离子监测模式可以提高检测灵敏度。

2.3 质谱仪数据分析：质谱仪的数据分析主要包括质谱图的解析和化合物的鉴定。

通过对质谱图的解析和与数据库的比对，可以确定样品中的化合物。

三、GC-MS联用技术3.1 GC-MS联用系统：GC-MS联用系统由气相色谱仪和质谱仪组成，两者通过接口连接。

接口的选择和调试对GC-MS的分析结果有重要影响。

3.2 GC-MS联用方法：GC-MS联用方法包括样品的预处理、色谱条件的优化和质谱条件的优化等。

合理的方法选择和优化可以提高分析的准确性和灵敏度。

3.3 GC-MS应用领域：GC-MS广泛应用于环境、食品、药物、化妆品等领域的分析。

其高分辨率、高灵敏度和高选择性使其成为分析化学的重要工具。

四、GC-MS的优势和局限性4.1 优势：GC-MS具有高分辨率、高灵敏度和高选择性的优势，可以对复杂样品进行准确鉴定和定量分析。

gcms的工作原理详解

GC-MS工作原理GC气相色谱MS 质谱GC 把化合物分离开然后用质谱把分子打碎成碎片来测定该分子的分子量一、气相色谱的简要介绍气相色谱法是二十世纪五十年代出现的一项重大科学技术成就。

这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究等都得到了广泛应用。

气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。

气固色谱的“气”字指流动相是气体，“固”字指固定相是固体物质。

例如活性炭、硅胶等。

气液色谱的“气”字指流动相是气体，“液”字指固定相是液体。

例如在惰性材料硅藻土涂上一层角鲨烷，可以分离、测定纯乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等杂质。

二、气相色谱法的特点气相色谱法是指用气体作为流动相的色谱法。

由于样品在气相中传递速度快，因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。

另外加上可选作固定相的物质很多，因此气相色谱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。

近年来采用高灵敏选择性检测器，使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。

三、气相色谱法的应用在石油化学工业中大部分的原料和产品都可采用气相色谱法来分析；在电力部门中可用来检查变压器的潜伏性故障；在环境保护工作中可用来监测城市大气和水的质量；在农业上可用来监测农作物中残留的农药；在商业部门可和来检验及鉴定食品质量的好坏；在医学上可用来研究人体新陈代谢、生理机能；在临床上用于鉴别药物中毒或疾病类型；在宇宙舴中可用来自动监测飞船密封仓内的气体等等。

四、气相色谱专业知识1 气相色谱气相色谱是一种以气体为流动相的柱色谱法，根据所用固定相状态的不同可分为气-固色谱(GSC)和气-液色谱(GLC)。

2 气相色谱原理气相色谱的流动向为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。

当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。

吸附力弱的组分容易被解吸下来，最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来，因此最后离开色谱柱。

gcms和lcms的色谱和质谱的关系

gcms和lcms的色谱和质谱的关系
GC-MS (气相色谱-质谱联用技术) 和LC-MS (液相色谱-质谱联用技术) 都是两个不同的分析技术，但它们可以通过色谱和质谱的结合来共同进行样品分析。

首先，色谱技术包括气相色谱（GC）和液相色谱（LC）。

这两种技术都是把样品分离成各个组分，通过检测它们的出现位置来确定它们的种类和数量。

然后，质谱技术可以通过对分离的组分进行短暂的加热或离子化来进行检测。

分离的组分会被转化为荷电离子，并在磁场作用下通过质谱仪器进行分析。

在GC-MS 技术中，样品通过气相色谱柱分离成单独的化合物，然后将它们转移到一台质谱仪中。

在质谱仪中，化合物会被加热并离子化，然后被磁场推向检测器进行分析。

由于气相色谱和质谱都需要在高真空的环境下进行，所以它们通常被放在一起使用。

在LC-MS 技术中，分离技术使用的是液相色谱。

样品通过液相色谱柱分离成单独的化合物，并在液体相中被溶解。

然后化合物被转移到一台质谱仪中，这台仪器使用液态离子源来把液相中的化合物转换成荷电离子，然后被磁场推向检测器进行分析。

总的来说，GC-MS 和LC-MS 技术使用的都是色谱和质谱的结合，通过这种结合就能够更准确地确定分析样品中的化合物组分。

这些技术在分析复杂的样品中
非常有用，并为很多科学研究提供了有效的工具。

LCMS原理详细讲解.

目前的有机质谱和生物质谱仪，除了GC-MS的EI和
CI源，离子化方式有大气压电离（API）（包括大气压电喷雾电离ESI、大气压化学电离APCI、大气压光电离APPI）与基质辅助激光解吸电离。前者常采用四极杆或离子阱质量分析器，统称API-MS。后者常用飞行时间作为质量分析器，所构成的仪器称为基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪（MALDITOF-MS）。API-MS的特点是可以和液相色谱、毛细管电泳等分离手段联用，扩展了应用范围，包括药物代谢、临床和法医学、环境分析、食品检验、组合化学、有机化学的应用等；MALDI-TOF-MS的特点是对盐和添加物的耐受能力高，且测样速度快，操作简单。
质谱原理简介：
质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比
分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。以检器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。
常见术语:
质荷比: 离子质量(以相对原子量单位计)与它所带电
荷(以电子电量为单位计)的比值,写作m/Z. 峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰. 离子丰度: 检测器检测到的离子信号强度. 基峰: 在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的离子峰称作基峰. 总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；多电荷离子；同位素离子
Ionic
IonSpray离子喷雾 Analyte Polarity
APCI大气压化学电离
GC/MS
Neutral 101 102
Molecular Weight
103
104
105
现代有机和生物质谱进展
在20世纪80及90年代，质谱法经历了两次飞跃。

GC-MS工作原理

GC-MS工作原理引言概述：气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）是一种广泛应用于化学分析领域的技术，它结合了气相色谱和质谱两种分析方法，能够高效地进行复杂混合物的分离和鉴定。

GC-MS的工作原理是基于样品分子在气相色谱柱中的分离和质谱仪器中的质谱分析，通过分析样品分子的质谱图谱，可以确定样品的成分和结构。

本文将详细介绍GC-MS的工作原理及其应用。

一、气相色谱分离1.1 气相色谱柱1.2 样品进样1.3 柱温控制二、质谱分析2.1 离子化2.2 质谱检测2.3 质谱图谱三、数据处理3.1 质谱数据获取3.2 数据分析3.3 结果解读四、应用领域4.1 环境监测4.2 食品安全4.3 药物分析五、发展趋势5.1 自动化技术5.2 多维气相色谱-质谱联用5.3 高分辨率质谱技术正文内容：一、气相色谱分离1.1 气相色谱柱：GC-MS中的气相色谱柱通常是由不同类型的固定相填料组成，样品分子在柱中根据其化学性质和分子大小进行分离。

不同的柱类型和填料可以实现不同的分离效果，如环境分析常用的DB-5柱用于分离挥发性有机物。

1.2 样品进样：样品进样是GC-MS分析的第一步，通常采用进样口将样品气体化后注入气相色谱柱中进行分离。

进样量和进样方式对分析结果有重要影响，需要根据样品特性进行合适的选择。

1.3 柱温控制：气相色谱柱的温度控制对样品分离效果至关重要，通过控制柱温可以调节样品在柱中的停留时间，从而实现不同成分的分离。

温度程序是根据样品特性和分析要求进行设计的。

二、质谱分析2.1 离子化：在质谱仪器中，样品分子首先被离子化，通常采用电子轰击或化学离子化等方式将分子转化为离子。

离子化过程会产生多种离子种类，其中主要的离子种类会被选择进行检测。

2.2 质谱检测：离子化后的离子进入质谱检测器进行检测，根据不同离子的质荷比和丰度进行分析。

常用的检测器包括飞行时间质谱仪（TOF-MS）和四极杆质谱仪（Q-MS），不同检测器有不同的检测灵敏度和分辨率。

gc-ms的工作原理详解

这是一种新的分离、分析技术，它在工业、农业、国防、建设、科学研究等都得到了广泛应用。

气相色谱可分为气固色谱和气液色谱。

气固色谱的“气”字指流动相是气体，“固”字指固定相是固体物质。

例如活性炭、硅胶等。

气液色谱的“气”字指流动相是气体，“液”字指固定相是液体。

例如在惰性材料硅藻土涂上一层角鲨烷，可以分离、测定纯乙烯中的微量甲烷、乙炔、丙烯、丙烷等杂质。

二、气相色谱法的特点气相色谱法是指用气体作为流动相的色谱法。

由于样品在气相中传递速度快，因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。

另外加上可选作固定相的物质很多，因此气相色谱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。

近年来采用高灵敏选择性检测器，使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。

四、气相色谱专业知识1 气相色谱气相色谱是一种以气体为流动相的柱色谱法，根据所用固定相状态的不同可分为气-固色谱(GSC)和气-液色谱(GLC)。

2 气相色谱原理气相色谱的流动向为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。

当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。

吸附力弱的组分容易被解吸下来，最先离开色谱柱进入检测器，而吸附力最强的组分最不容易被解吸下来，因此最后离开色谱柱。

lcms质谱仪原理

lcms质谱仪原理
LC-MS质谱仪是一种联合液相色谱（LC）和质谱（MS）技术的仪器，主要用于分析和鉴定复杂样品中的化合物。

LC-MS
质谱仪的基本原理如下：
1. 液相色谱（LC）部分：在LC部分，样品溶液通过进样器
被注入进一个色谱柱中。

在色谱柱内，样品中的化合物会与柱填料上的固定相互作用，并在流动相的作用下，根据其化学性质的不同以不同的速率进行分离。

2. 质谱（MS）部分：在MS部分，离子化源将样品中的化合
物转化为荷电的离子。

这通常通过电离技术（如电喷雾（ESI）或化学电离（APCI））实现。

3. 离子聚焦：离子化后，离子被引入质谱仪中的离子门。

离子门的作用是选择性地传输特定质量/荷比（m/z）的离子。

这样，仪器可以选择性地传递特定的离子种类，以便进一步分析。

4. 分析和检测：离子在进入质谱部分之前可能需要进行解离和/或聚焦。

在质谱仪的分析部分，离子会遭受一系列的分析步骤，如质谱分析器中的离子解离，以及质谱检测器的荧光检测。

这些步骤将离子按照其质量和荷电比分开并检测。

5. 数据分析：最后，仪器会生成一个离子流谱图，其中离子的质量和相对丰度用图形显示。

这个谱图可以用于鉴定和分析样品中的化合物。

这是LC-MS质谱仪的基本原理。

通过结合液相色谱和质谱技术，LC-MS质谱仪可以对复杂样品进行高效、高灵敏度、高选择性的分析。

LC、LCMS(MS)检测原理及维护培训教材(PDF 68页)

溶剂前处理-过滤
过滤：0.45 μm或更小孔径滤膜
目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液
滤膜类型：聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。
醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。
尼龙66滤膜：
适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于 DMF，THF， CHCl3 等溶剂
• APCI：对样品的基质和流动相组成的敏感度小；可使用稍高浓度的挥发性强的缓冲液；有机溶剂的种类和溶剂分子的加成影响离子化效率和产物
ESI和APCI的比较(3)——溶剂
• ESI：溶剂pH对在溶剂中形成离子的分析物有重大的影响；溶剂pH的调整会加强在溶液中非离子化分析物的离子化效率
• APCI：溶剂的选择非常重要并会影响离子化的过程；溶剂的 pH值对离子化效率有一定的影响
去离子水重蒸；二次或三次重蒸水；
不管采用何种途径，配制流动相应用新鲜水
水的等级
未注入样品时空白梯度的色谱图
水中不纯物的出峰
水中的不纯物保留在柱中，随之被乙腈洗脱
有机溶剂的等级
有机溶剂的等级
HPLC级优级纯分析纯
微量分析、梯度洗脱
都经过蒸馏和0.45 μm的过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒）优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂 HPLC级经过0.2 μm的过滤,且除去有紫外吸收的杂质
正离子模式还是负离子模式?
• 质谱数据以正离子还是负离子模式采集，需考虑被测样品结构和特性等
– 由于C-O、C-N、双键、三键及碱性化合物具有较强的质子亲和力，上述基团或化合物更倾向于形成正离子
– 含–COOH, -F, -Cl, -HSO3 的化合物由于具有较强的质子给予能力，更倾向于形成负离子

GCMS工作原理

GCMS工作原理GCMS（Gas Chromatography-Mass Spectrometry）是一种常用的分析技术，结合气相色谱和质谱技术，用于分离和识别复杂混合物中的化合物。

下面将详细介绍GCMS的工作原理。

1. 气相色谱（GC）部份的工作原理：GC是一种基于物质在固定相上的分配和吸附特性的分离技术。

样品首先被注入到气相色谱柱中，柱内填充有固定相，如聚硅氧烷。

样品在柱中被分离成不同的组分，根据它们在固定相上的吸附和解吸特性。

不同组分在柱中停留的时间不同，分离出来的化合物将在不同的时间点浮现在柱出口。

2. 质谱（MS）部份的工作原理：质谱是一种通过测量份子离子的质量和相对丰度来识别化合物的技术。

在GCMS中，柱出口的化合物进入质谱部份。

首先，化合物被电子轰击，使其份子内部发生断裂，产生离子片段。

然后，离子片段根据其质量-电荷比（m/z）被分离和分析。

这种分离和分析过程通常使用四极杆质谱仪进行。

3. GCMS联用的工作原理：GC和MS之间的联用是通过将GC柱出口与MS接口连接实现的。

GC柱出口的化合物进入MS接口，然后进入质谱仪进行离子分析。

在MS中，离子根据其质量-电荷比被分离并检测，生成质谱图。

质谱图显示了化合物的离子片段和相对丰度，通过与数据库中的标准质谱图进行比对，可以确定化合物的结构和组成。

4. GCMS的应用：GCMS广泛应用于环境、食品、药物、毒理学等领域的分析。

它可以用于定性和定量分析，可以检测和鉴定微量的化合物，具有高灵敏度和选择性。

例如，在环境领域，GCMS可用于检测土壤、水体和空气中的有机污染物；在食品领域，GCMS可用于检测食品中的农药残留和食品添加剂；在药物领域，GCMS可用于药物代谢和药物残留的研究。

总结：GCMS是一种强大的分析技术，结合了气相色谱和质谱的优势。

它能够分离和识别复杂混合物中的化合物，具有高灵敏度和选择性。

GCMS在许多领域都有广泛的应用，为科学研究和工业生产提供了重要的分析工具。

《lcms质谱》ppt课件

Historical Perspective
Atmospheric Pressure Interfaces (API) – Early 1990’s (commercialization) – Now most common interface – Electrospray (ESI) Initial interfaces required lower flows (1-5
Uses a “reagent gas〞 – Mobile phase buffer – Added buffer solution – Similar spectra to GC/MS CI Reagent gas is ionized – Volatilization – EI with high energy electrons Charge transfer to the analyte(s)
Moving Belt Interface
From: Niessen
(4) Particle Beam Interface 〔PB，粒子束接口〕
Column effluent is nebulized – Pneumatic or thermospray nebulization Desolvation chamber is under a moderate vacuum A momentum separator is used for analyte enrichment – High MW compounds favored Analytes into the EI or CI source as small particles – Evaporative collisions with the walls
on the ionization – Limited availability of LC/MS

GCMS工作原理

GCMS工作原理一、引言GCMS（气相色谱质谱联用技术）是一种先进的分析技术，广泛应用于环境监测、食品安全、药物研发等领域。

本文将详细介绍GCMS的工作原理，包括气相色谱和质谱两个部份的工作原理及其联用的优势。

二、气相色谱（Gas Chromatography，GC）的工作原理1. 样品进样GCMS分析的第一步是将待测样品进样到气相色谱仪中。

通常采用自动进样器或者手动进样的方式，将样品溶解在挥发性溶剂中，然后通过进样口输入到气相色谱柱中。

2. 柱温控制GC柱是气相色谱的核心部份，其内部充满了固定相。

样品份子在柱中的分离速度取决于柱温的控制。

通过控制柱温的升降，可以实现对样品分离的优化。

3. 气相载气在GC分析中，气相载气是必不可少的。

常用的载气有氢气、氦气和氮气等。

载气的选择取决于分析物的特性以及分析目的。

载气将样品份子从进样口推动到柱中，并且在柱中实现样品分离。

4. 样品分离样品份子在柱中的分离是通过样品份子与固定相之间的相互作用实现的。

固定相可以是液态或者固态的，根据分析目的的不同选择不同的固定相。

样品份子在固定相上的相互作用会导致它们在柱中以不同的速度挪移，从而实现分离。

5. 检测器GC分析的最后一步是通过检测器检测样品分离后的化合物。

常用的检测器有火焰离子化检测器（FID）、热导检测器（TCD）和质谱检测器等。

检测器将样品分离后的化合物转化为电信号，并输出相应的信号强度。

三、质谱（Mass Spectrometry，MS）的工作原理1. 离子化GC分析后的样品份子进入质谱部份，首先需要进行离子化。

离子化的方式有多种，常用的有电子轰击离子化（EI）和化学电离（CI）等。

离子化后，样品份子会转变为带电的离子。

2. 质量分析离子化后的样品离子进入质量分析器进行分析。

质谱仪中的质量分析器通常是四极杆质谱仪或者飞行时间质谱仪。

质量分析器会根据离子的质量-电荷比（m/z）进行分析，从而确定离子的质量。

LC、LCMS(MS)检测原理及维护--中检所培训班-2012.7昆明

LC分析条件向LCMS分析条件的转化
适于LCMS分析的分离方式
105 分子量
体积排阻
104
非水相
HILIC
10
3
水相正相
反相
非极性
中等极性
高极性
LC分析条件向LCMS分析条件的转化
• 电离源的选择 • 正、负离子分析模式的选择 • 流动相和流速的选择
• 温度的选择
大气压下离子化适用范围
105 ESI -2
再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂
溶剂前处理-脱气
脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动
管线材料
不锈钢 (可用于所有连接) 能承受几百MPa 压力酸性或高浓度盐环境中易腐蚀 (尤其在pH小于2时) PEEK (可用于所有连接) 能承受高达 25 MPa压力可在整个pH范围(pH 1-14)内使用不适用高溶解性溶剂如三氯甲烷、四氢呋喃等 Teflon (用于柱后阻尼管、反应管和排液管) 化学惰性大仅能承受 0.5 MPa压力
对于ESI: 可使用分流器控制流速在0.2 mL/min
能否使用磷酸缓冲盐?
• 由于下述原因，磷酸盐缓冲液被广泛使用：
– 在短波长区的低吸收； – 宽的pH缓冲作用范围 (pH=2-4, 6-8, 11-13)；
• 使用磷酸盐的一大缺陷是其易结晶，结晶将会使LCMS接口堵塞； • 最好使用挥发性缓冲盐，如醋酸铵或甲酸铵替代磷酸缓冲盐； • 如果应用挥发性缓冲盐调节pH，有时能够获得用磷酸盐相似的结果。
水的等级

GC-MS和LC-MS数据采集以及处理

GC- Ms数据的采集有机混合物样品用微量注射器由色谱仪进样口注入，经色谱柱分离后进入质谱仪离子原在离子源被电离成离子。

离子经质量分析器，检测器之后即成为质谱仪号并输入计算机。

样品由色谱柱不断地流入离子源，离子由离子源不断的进入分析器并不断的得到质谱，只要没定好分析器扫描的质量范围和扫描时间，计算机就可以采集到一个个的质谱。

如果没有样品进入离子源，计算机采集到的质谱各离子强度均为0。

当有样品过入离子源时，计算机就采集到具有一定离子强度的质谱。

并且计算机可以自动将每个质谱的所有离子强度相加。

显示出总离子强度，总离子强度随时间变化的曲线就是总离子色谱图，总离子色谱图的形状和普通的色谱图是相一致的。

它可以认为是是用质谱作为检测器得到的色谱图。

质谱仪扫描方式有两种：全扫描和选择离子扫描。

全扫描是对指定质量范围内的离子全部扫描并记录,得到的是正常的质谱图,这种质谱图可以提供未知物的分子量和结构信息。

可以进行库检索。

质谱仪还有另外一种扫描方式叫选择离子监测(select ion Moniring SIM)。

这种扫描方式是只对选定的离子进行检测,而其它离子不被记录。

它的最大优点一是对离子进行选择性检测，只记录特征的、感兴趣的离子，不相关的，干扰离子统统被排除，二是选定离子的检测灵敏度大大提高。

在正常扫描情况下，假定一秒钟扫描2-500个质量单位，那么，扫过每个质量所花的时间大约是 1/500秒,也就是说，在每次扫描中，有1/500秒的时间是在接收某一质量的离子。

在选择离子扫描的情况下，假定只检测5个质量的离子，同样也用一秒，那么，扫过一个质量所花的时间大约是1/5秒。

也就是说，在每次扫描中，有1/5秒的时间是在接收某一质量的离子。

因此，采用选择离子扫描方式比正常扫描方式灵敏度可提高大约100倍。

由于选择离子扫描只能检测有限的几个离子，不能得到完整的质谱图,因此不能用来进行未知物定性分析。

但是如果选定的离子有很好的特征性,也可以用来表示某种化合物的存在。

分离科学GCLCMS

柱温↑---挥发度↑---低沸点重叠---tR↓；柱温↓---低沸点易分离---tR↑；程序升温防止冷凝
高效液相色谱法
1.结构
高压输液泵进样装置色谱柱检测器过滤装置固定相颗粒极细，必须配备有高压输液系统六通阀、一般为C18柱紫外（可梯洗）、光电二极管阵列、示差折光（不可梯洗）、荧光防止堵塞、保护仪器
固定相非极极性极性出峰顺序沸点，沸点低先出峰极性，极性小先出峰极性，非极性组分先出峰
EI CI
分流比：液体样品蒸发后，少部分蒸汽进入柱子而大部分从分流、吹扫口流出，两者的比例为分流。
3.MS中离子类型
分子离子准分子离子碎片离子同位素离子多电荷离子分子失去一个电子所形成的离子，也叫母离子，m/z值为分子质量加合离子，CI源产生较多，如：[M + H]＋、[M + Na]＋、 [M + K]＋能量较高电离源轰击分子，使分子进一步碎裂，如EI源分子离子峰的右边1-2个质量单位，常出现含重同位素的分子离子峰形成m/2e，m/3e等多电荷离子，常用于分析大分子量化合物
4.MS中离子化方式
EI
电子直接与样品分子作用分子离子，多碎片离子
CI
样品分子电离经过分子—离子反应准分子离子，碎片少 ( 软电离)
有利于测定结构有标准谱库
有利于测定分子量无标准谱库
5.图谱类型
总离子流色谱图
选择离子流色谱图质谱图
全扫描，检测质量范围内的所有离子，得到 t-离子流强度图，图中的峰可进一步得到该组分质谱图
只选择特定质量离子进行检测，用于定量分析不同质荷比的离子经质量分析器分开后，得到 m/z-离子流强度图
LC-MS 联用

液质联用(LCMS)原理简析

液质联用（LCMS）原理简析1.质谱法质谱分析是先将物质离子化，按离子的质荷比分离，然后测量各种离子谱峰的强度而实现分析目的的一种分析方法。

质谱的样品一般要汽化，再离子化。

不纯的样品要用色谱和质谱联用仪，是通过色谱进样。

即色谱分离，质谱是色谱的检测器。

离子在电场和磁场的综合作用下，按照其质量数m和电荷数Z的比值(m/z，质荷比)大小依次排列成谱被记录下来，以检测器检测到的离子信号强度为纵坐标，离子质荷比为横坐标所作的条状图就是我们常见的质谱图。

2.质谱仪质谱仪由以下几部分组成数据及供电系统┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓进样系统离子源质量分析器检测接收器┗━━━━━╋━━━━━━┛真空系统质谱仪一般由进样系统、离子源、分析器、检测器组成。

还包括真空系统、电气系统和数据处理系统等辅助设备。

（1）离子源：使样品产生离子的装置叫离子源。

液质的离子源有ESI，APCI，APPI，统称大气压电离(API)源，实验室常用液质的离子源为ESI源。

电喷雾（ESI）的特点通常小分子得到[M+H]+ ]+,[M+Na]+ 或[M-H]-单电荷离子，生物大分子产生多电荷离子。

电喷雾电离是最软的电离技术，通常只产生分子离子峰，因此可直接测定混合物，并可测定热不稳定的极性化合物；其易形成多电荷离子的特性可分析蛋白质和DNA等生物大分子；通过调节离子源电压控制离子的碎裂（源内CID）得到化合物的部分结构。

（2）质量分析器：由它将离子源产生的离子按m/z分开。

离子通过分析器后,按不同质荷比(M/Z)分开,将相同的M/Z离子聚焦在一起,组成质谱。

质量分析器有：磁场和电场、四极杆、离子阱、飞行时间质谱、傅立叶变换离子回旋共振等。

实验室目前液质的质量分析器类型：三重四极杆（QqQ）：离子源→第一分析器→碰撞室→第二分析器→接收器MS1 MS2Q1 q2 Q3QqQ仪器可以方便的改变离子的动能，因此扫描速度快，体积小，常作为台式进入常规实验室，缺点是质量范围及分辨率有限，不能进行高分辨测定，只能做到单位质量分辨。

LCMS及GCMS原理公开课获奖课件

LC-MS
◆ 一.送样注意事项
• 1. 均匀取样: 将样品混合好再取样。
• 2. 送样量：固体约为1mg 、液体约为10ul。
• 3. 要求样品必须澄清透明，以免损坏色谱柱；
•
若样品混浊,请用滤头过滤后再测样.
• 4. 请使用甲醇、乙腈、水、THF、DMSO、
•
DMF等极性溶剂溶解样品，尽量防止使用正
◆三. 送样要求:
• 1.样品中不应具有强酸及强碱以及其他对色谱柱产生损害旳物质
• 2.样品中不应具有较大量旳无机盐，预防堵塞柱子及流路。
• 3.目旳化合物含量应尽量不小于20%，样品颜色深含量低旳可先过柱（薄板）后再送制备。
• 4. 送样时请附上制备前旳分析图谱， • 5. 样品溶解性差、稳定性差旳要对制备人员说清
• 己烷等非极性、弱极性溶剂溶样.
◆ 二.仪器旳配置
LC/MS (Agilent 1100 LC , VL MS; Shimadzu 2023 A )
ESLD (SEDEX 75; PL1000 )
•
→ESLD
Hale Waihona Puke •HPLC → DAD→
•
→MSD
•
样品先经过色谱柱旳分离后进行DAD测试，
再分流两路进入ELSD和MS检测器测试。
×××××××××××××
三. 图谱旳特殊阐明
1.无机盐在ELSD上有信号,而MS,UV无信号.
2.样品旳分子量小,易挥发,ELSD出现无信号
3.不易电离旳化合物，MS 出现无信号,需外送做EI；极性弱，易挥发样品,需外送做GC-MS
S N
F NHSO2CH3
4.溶剂（DMSO、THF、ETAC等）在UV214 有信号，而在MS、ELSD上无信号。

LCMS液质联用仪原理及基础知识介绍

集电极离子聚焦透镜
EI源：电子轰击电离源可得经典的质谱谱图
可查询质谱库，质谱结果可用工业标准谱库检索，是绝对的化合物鉴定
相对易得，耐受性好
谱图可解析，阐明结构信息
但是，电离效率较差，测定的分子量范围、流速范围有限；可测的化合物类型有限
Waters China Ltd.
EI源LC/MS系统：Waters Integrity 系统
Inj. # 1 Inj # 509 >25Hrs.
Waters China Ltd.
液质联用技术的应用范围
100,000
生
Electrospray
物大
分
子
分子量
Particle Beam GC
APcI
0 共价型
极性
注意座标：不是化合物种类的数量！
Dynamic FAB
药物农药，杀虫剂离子型
(Atmospheric Pressure Chemical Ionization - APCI)
相转化过程
Waters China Ltd.
什么是电喷雾电离(ESI)？
毛细管+4kV
2)
--+ -
+ -
+
+
+ - ++
--+ -
+ -
+
+
+ + -+
1) 含各种离子
的液滴
随着液滴的挥发,电荷密度增大, 离子集中到液滴表面
OH
OH H
OH
TIC 色谱
保留时间
Waters China Ltd.

LCMS及GCMS原理..

LC-MS
◆ 一.送样注意事项
• 1. 均匀取样: 将样品混合好再取样。
• 2. 送样量：固体约为1mg 、液体约为10ul。
• 3. 要求样品必须澄清透明，以免损坏色谱柱；
•
若样品混浊,请用滤头过滤后再测样.
• 4. 请使用甲醇、乙腈、水、THF、DMSO、
•
DMF等极性溶剂溶解样品，尽量避免使用正
图3：MSD TIC 总离子色谱图图4：EIC提取离子色谱图;正离子模式（pos,positive +H，+Na ）或负离子模式（neg ，negative -H）。图5：质谱棒状图。
积分结果表：分别表示ELSD、DAD 214nm色谱峰的面积百分比, 其中MSBase项提供的数据因软件问题有所出入，该项数据不作参考。
所形成的谱图
三. 色谱条件:
◆酸性条件: 0.05%-0.01% TFA in ACN and H2O; gradient 10% to
90%;
酸法 1-L-P 1-L-P-S 1-L-P- CN
常规酸法正离子短柱酸法正离子 CN基柱酸法正离子
◆碱性条件: ACN/10mM NH4HCO3 in H2O; gradient 10% to 90%;
5.562
1500
1000
500
0
1
2
3
4
5
6
7
8
min
DAD1 B, Sig=214,4 Ref=360,80 (08054103.D)
5.05 8
mAU
S
700
600
500 400
N
300 200
F
100
0
5.428