手指 物表 空气采样方法
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测
曲阜市中医医院医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、层流洁净病房、重症监护病房、母婴同室、供应室等的空气净化与消毒质量进行监测。
2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央～高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。
房间面积＞10m2者，每增加10m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面～；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
环境卫生学监测采样方法
➢ ⑷采样方法：
➢ 用直径9cm的普通培养皿在采样点暴露（将平 皿盖打开，扣放于平皿旁）规定时间（Ⅱ类环 境暴露15分钟，Ⅲ及Ⅳ类环境暴露5分钟）， 盖上平皿盖及时送检。
➢ 2、物体表面采样方法 ➢ ⑴采样时间：选择消毒处理后进行采样。 ➢ ⑵采样面积：被采表面＜100cm2取全部表
面，被采面积≥100cm2取100cm2。
套、酒精灯、打火机、胶布、笔
➢四、采样方法
➢1.空气采样
➢⑴采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活 动之前采样。采样前应关好门窗，在无人走 动的情况下，静止10分钟进行采样。
➢⑵采样高度：与地面垂直高度80-150cm。
➢⑶布点方法：室内面积≤30m2,设一条对角 线上取3点，即中心点、两端各距墙1m处 取点；室内面积≥30m2,设东西南北中5点， 四边各点均距墙1m。
➢ 3、医护人员手的采样
➢ ⑴采样时间：在洗手后及接触病人或从事 医疗活动前进行采样。
➢ ⑵采样面积和方法：被检人五指并拢，用 浸有无菌生理盐水的棉拭子1支在双手指 掌面从指跟到指尖来回擦拭2次（一只手 涂擦面积约30cm2），边涂擦边转动棉拭 子，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有 10ml采样液的试管中送检，采样面积按平 方厘米计算。
面，被采面积≥100cm2取100cm2.
➢⑶采样方法：用浸有无菌生理盐水的棉 拭子在被检物体表面来回涂擦2次（特别 是器械 关节），剪去手接触部分，将棉 拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。
➢ 2、使用中消毒、灭菌剂采样 ➢ ⑴采样时间：采取更换前使用中的消毒、灭菌
剂。 ➢ ⑵采样方法：用无菌吸管吸取1ml被检液体，注
➢ ▲消毒和灭菌物品效果监测
➢ 灭菌物品监测是指灭菌后的物品或一次性 使用的医疗用品、无菌器械等是否达到灭 菌要求。消毒剂监测是指医院常用灭菌剂、 消毒剂（酒精、碘伏、戊二醛及含氯消毒 剂）的生物监测。
手指、物表、空气采样方法
脚卫死效验的监测要领之阳早格格创做1．采样时间正在交触患者、举止诊疗活动前采样.2．采样要领被检者五指并拢，用浸有含相映中战剂的无菌洗脱火液浸干的棉拭子正在单脚指直里从指跟到指端往返涂揩2次，一只脚涂揩里积约30cm2，涂揩历程中共时转化棉拭子；将棉试子搁进拆有10ml含相映中战剂的无菌洗脱液试管内，即时收检.细菌菌降数总数估计要领：细菌菌降总数（cfu/cm2）=仄板上菌降数×密释倍数/采样里积（cm2）3．脚消毒效验应达到如下相映央供：a）卫死脚浑毒，监测的细菌菌降总数应≤10cfu/㎝2b）中科脚消毒，监测的细菌菌降总数应≤5cfu/㎝2气氛消毒效验的监测要领1、采样时间：消毒处理后与举止调理活动前采样.2、要领：室内里积≤30M3，设一条对于角线上与3面，即核心一面、二端距墙1M处与一面；室内里积＞30 M3，设、东、北、西、北、中、5面，其中东、北、西、北布面部位均距墙1m处.中面加搁一只尺度皿（即灭菌培植皿没有挨启）.物体表面采样监测要领(1).采样时间：正在浑净或者消毒处理后举止采样.(2).采样里积：被采样原表面积＜100cm2 与局部表面；被采样原表面积≥100cm2，与100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个分歧部位）(3).采样要领：用5cm×5cm尺度灭菌规格板，搁正在被检物体表面，采样里积≥100cm2，连绝采样4个.用浸有含相映中战剂的无菌洗脱液的棉拭子1收，正在规格板内横横往返匀称涂揩各5次，并随之转化棉拭子，连绝采样4个面，将棉试子搁进拆有10ml含相映中战剂的无菌洗脱液试管内，将试管心战瓶塞搁正在火焰上烧，并坐将要瓶塞塞紧.采样后坐时收检.菌降数估计公式：仄板上菌降数×采样液密释倍数细菌菌降总数(cfu/cm2)＝—————————————————采样里积(cm2)表1百般环境物体表面细菌菌降总数卫死尺度致病性微死物：没有得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其余致病性微死物.母婴共室、早产女室、婴女室、新死女室、及女科病房的物体表面没有得检出沙门氏菌.。
空气、物体表面、医务人员手的监测方法
空气、物体表面、医务人员手的监测方法采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不﹥24小时。
一、空气监测：1、采样时间：消毒处理后，操作前2、采样方法：平板沉降法（1）布点方法：室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。
洁净手术室9个点。
（2）采样方法：将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8--1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5、15、30分钟，盖好立即送检。
( 3)注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。
二、医务人员手的监测：1、采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。
2、采样面积及方法：放被检人（五指并拢），用浸有无菌盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦各 2 次(双手涂擦面积约60平方厘米），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入 5ml 无菌盐水试管内，立即送检。
三、物体表面监测1、.采样时间：在消毒处理后4小时内进行采样。
2、.采样方法：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有无菌盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转棉拭子，连续采样4个，采样面积100cm2剪去手接触部位后，将棉拭子投入5ml含无菌盐水试管内，立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样4.注意事项：采集样本要有足够的数量且具有代表性，如层流洁净手术室，选择具有代表性采样地点（如手术台、治疗车、无影灯把手等）；采样时，棉拭子处于湿润状态，如处于饱和状态可将多余的采样液在采样管壁上挤压去除。
禁止使用干棉拭子采样。
四、消毒液的监测1、常用消毒液有效成分含量测定2、使用中消毒液细菌监测：1ml使用中消毒液+9ml中和剂3、结果判定：使用中的灭菌用消毒液、无细菌生长。
手指、物表、空气采样方法
手卫生效果的监测方法1．采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。
2．采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
细菌菌落数总数计算方法：细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）3．手消毒效果应达到如下相应要求：a）卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2b）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2空气消毒效果的监测方法1、采样时间：消毒处理后与进行医疗活动前采样。
2、方法：室内面积≤30M3，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端距墙1M处取一点；室内面积＞30 M3，设、东、南、西、北、中、5点，其中东、南、西、北布点部位均距墙1m处。
中点加放一只标准皿（即灭菌培养皿不打开）。
物体表面采样监测方法(1).采样时间：在清洁或消毒处理后进行采样。
(2).采样面积：被采样本表面积＜100cm2 取全部表面；被采样本表面积≥100cm2，取100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个不同部位）(3).采样方法：用5cm×5cm标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个。
用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个点，将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，将试管口和瓶塞放在火焰上烧，并立即将瓶塞塞紧。
采样后立即送检。
菌落数计算公式：平板上菌落数×采样液稀释倍数细菌菌落总数(cfu/cm2)＝—————————————————采样面积(cm2)致病性微生物：不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其它致病性微生物。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室、及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测
曲阜市中医医院医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1. 监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、层流洁净病房、重症监护病房、母婴同室、供应室等的空气净化与消毒质量进行监测。
2. 监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3. 采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4. 监测方法(1)洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m〜1.5m 高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30mi n。
房间面积〉10m2者，每增加10m2增设一个采样点；(2)未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积w30 m2设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积〉30 m2设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿(①90mm放置各采样点，采样高度为距地面0.8m〜1.5m;采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；(3)平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心(室) 、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
手指物表空气采样方法
手指物表空气采样方法 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】手卫生效果的监测方法1．采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。
2．采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
细菌菌落数总数计算方法：细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）3．手消毒效果应达到如下相应要求：a）卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2b）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2空气消毒效果的监测方法1、采样时间：消毒处理后与进行医疗活动前采样。
2、方法：室内面积≤30M3，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端距墙1M处取一点；室内面积＞30 M3，设、东、南、西、北、中、5点，其中东、南、西、北布点部位均距墙1m处。
中点加放一只标准皿（即灭菌培养皿不打开）。
物体表面采样监测方法(1).采样时间：在清洁或消毒处理后进行采样。
(2).采样面积：被采样本表面积＜100cm2 取全部表面；被采样本表面积≥100cm2，取100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个不同部位）(3).采样方法：用5cm×5cm标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个。
用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个点，将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，将试管口和瓶塞放在火焰上烧，并立即将瓶塞塞紧。
采样后立即送检。
菌落数计算公式：平板上菌落数×采样液稀释倍数细菌菌落总数(cfu/cm2)＝—————————————————采样面积(cm2)致病性微生物：不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其它致病性微生物。
手指物表空气采样方法
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。
2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。
房间面积＞10 m2者，每增加10 m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
环境卫生学监测及标本采集方法(PPT 69页)
常用消毒剂中和剂及其浓度表
消毒剂
甲醛
戊二醛
过氧乙酸 含氯消毒剂类
季铵盐类
碘（溴）制剂 酚类 氯已定 汞制剂 醇类 酸类 碱类
中和剂及其浓度
亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 氨水 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%）
甘氨酸（1.0%）；赖氨酸 亚硫酸钠（0.1%～0.5%） 双甲酮（0.1%～1.0%）+吗啉（0.6%～1.0%）
正确的微生物标本采集和运送， 是准确的病原学诊断的前提
基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作 4.采样后立即送检 5.棉拭子标本宜用运送培养基 7.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂. 8.送检标本应注明来源和检验目的
正确留取细菌培养的临床标本
2、抽血部位及抽血量 以无菌方法从患者肘静脉、股动 脉采血。采血量以培养基的1/10为宜，成人一次采血5～ 10ｍｌ，婴儿为1～2ｍｌ，血液抽出后，立即以无菌手续 注入血培养瓶，充分混合后送检。
采血培养前质量保证: 静脉穿刺程序 1.70%酒精擦拭静脉穿刺点 >30秒钟 2.1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点
三、医院各重点部门空气，物体表面，医护人员手 细菌数标准。
环境类别
范围
标准
空气
物体表面 医务人员手
（cfu/ m3） （cfu/ cm2） （cfu/ cm2）
I类
层流洁净手术室、层流洁净
病房
≤10
≤5
≤5
普通手术室、产房、新生儿室
（母婴同室病房）、早产儿室、
II类
普通保护性隔离室、供应室无 ≤200
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测
曲阜市中医医院医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准,请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、层流洁净病房、重症监护病房、母婴同室、供应室等的空气净化与消毒质量进行监测。
2。
监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2)洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测,并进行相应致病微生物检测。
3。
采样时间(1)采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样;（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；(3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4.监测方法(1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m～1。
5m高度，按采样器使用说明书操作,每次采样时间不应超过30min。
房间面积＞10m2者，每增加10m2增设一个采样点;（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法:室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿(Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0。
8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检;（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min.（4)将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数,若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。
医院常规空气细菌培养
7、操作步骤与质量标
1)着装整洁，帽子遮住全部头发，口罩遮盖口鼻；
(2)备齐用物：治疗盘或篮、酒精灯、火柴、 直径9cm普通营养琼脂平皿（根据需要备足量，分 别标记1,2,3,4,5；或东、西、南、北、中；或东 南、西南、东北、西北、中）、灭菌棉拭子、试管、 试管架、笔、纪录单、计时表、湿度、温度计。
(6)点燃酒精灯； (7）取一支灭菌棉拭子，取标记“物体表面” 的试管，打开试管塞； (8)火焰消毒试管口、试管塞，浸取灭菌采样液； (9）火焰消毒试管口、试管塞，盖严试管； （10）用棉拭子在规格板空心处
（11)横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子； （12）连续采样4个规格板面积； （13）打开试管塞，火焰消毒试管口、试管塞； （14）用无菌剪剪去棉拭子手接触部分，将棉 拭子放人装l0ml采样液的试管中； （15)对于曲线物体、小型物体等则（门把手等） 采用棉拭子直接涂抹物体的方法采样； （16）纪录采样面积、时间、物体名称、采样人。
2采样面积及方法被检人五指并拢将浸有无菌生理盐水采样液的棉试子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次一只手涂擦面积30cm并随之转动采样棉试子剪去手接触部位将棉试子放人装有l0ml采样液的试管内送检
医院感染管理操作规范
环境卫生学标本采集操作规范
医院感染管理操作规范
急诊 班丽萍 2014-8-15
六、附录
Ⅰ类区域：层流洁净手术室、层流洁净病 房（参照洁净室空气培养方法与标准）。 Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、 早产儿室、普通保护性隔离室、供应室无 菌区、烧伤病房、重症监护病房。 Ⅲ类区域：儿科病房、妇产科检查室、注 射室、换药室、治疗室供应室清洁区、急 诊室、化验室、各类普通病房和房间。 Ⅳ类区域：传染病科及病房。
环境卫生学监测及标本采集方法
采血培养前质量保证: 静脉穿刺程序 1.70%酒精擦拭静脉穿刺点 >30秒钟 2.1%2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒,从穿刺点 向外画圈消毒,直径>3cm 3.70%酒精脱碘 培养瓶接种程序 1.70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待60秒 2. 用无菌纱布清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然 后注入血液。
手消毒效果要求： 卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/c㎡ 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/c㎡
直接压印法：采样时被检人5指并拢，将平皿上培养 基表面直接压贴在手掌根部至指尖曲面10～20秒后送检。 将所采样本直接置36℃ ±1℃温箱培养24小时，根 据平皿面积计算细菌总数。
8、医疗用品的监测
包括一次性医疗用品和消毒灭菌处理后的医疗用品。
采样时间：在消毒或灭菌处理后存放至有效期内采样。
采样方法：操作人员在认真清洁消毒手后，在净化台内 用无菌的方法，将拟检测的医疗用品：缝合针、针头、手 术刀片等小件物品投入5ml灭菌的生理盐水或营养肉汤内， 对手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下用沾有无菌 生理盐水的棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml灭菌 的生理盐水溶液中。 检测方法：将采样管振打80次，用无菌吸管吸取1ml待检 样品于灭菌平皿内，加入已融化的45℃左右的营养琼脂 15～18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置37℃温箱培养 48小时，观察结果。若平皿上无菌生长为灭菌合格。
棉拭子涂布法
棉拭子涂布法
棉拭子涂布法
棉拭子涂布法
检验方法： 1、将每个采样管敲打80次或1分钟， 2、用灭菌吸管取0.2ml于营养琼脂平板中，再用无菌L棒涂 布整个平板表面，置36℃ ±1℃温箱培养24小时观察结果计 算菌落数
监测方法及手卫生知识
医院环境监测方法一．环境监测釆样原则釆样后的标本送检时间不得超过6h，若样品保存于0－40C条件时，送检时间不得超过24h。
二．空气消毒效果的监测1.采样时间：在消毒处理后、操作前进行采样。
2.采样高度：离地面垂直高度80－150cm。
3.布点方法：a、室内面积≤30m2,采三点（内、中、外），距墙一米，对角线。
（如图一）b、室内面积＞30m2，采五点（四角及中央）距墙一米。
（如图二）（图一）（图二）4．采样方法：沉降法（平皿暴露法）：将普通营养琼脂平皿（9cm直径）放在室内各采样点上，将平皿盖打开，叩放于平皿旁，暴露5min，盖好送检，在370C下培养24h，然后记录每个平皿上的菌落数，并分离致病菌。
5．注意事项：a、采样前，关好门、窗，进行空气消毒后，在无人走动的情况下，静止10min进行采样。
b、放培养基时应从内到外。
c、收培养基时应从外到内。
d、取送培养基时琼脂一面应在上，盖子在下。
e、掌握好时间（暴露5min）三．物体表面消毒效果的监测1．采样时间：选择消毒处理后4h内进行采样。
2．采样面积：被采表面＜100cm2,取全部表面；被采表面≥100cm2,取100cm2。
3．采样方法：棉拭子法：对物体表面采样时，将内径为5×5cm2的灭菌规格板放在被检物体的表面，用浸有无菌生理水采样液的棉拭子1支在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，移动规格板，按同样方法涂擦采样，連续采样1－4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌生理盐水的采样管内，振动80次，立即送检。
门把手等不规则物体的表面用棉拭子直接涂擦采样。
四．手卫生消毒效果的监测1.采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。
2.采样面积：60cm2（一只手面积约30cm2）。
3.采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指端到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
院感检测培养基及物表采样管理
院感检测培养基及物表采样管理1、院感监测项目掌握院感监测项目是合理选择培养基以及进行物表采样管理的前提，根据医院的实际环境综合考虑，院感监测项目主要包括：（1）空气监测，空气是医院中最常规的一个监测项目，根据室内面积情况合理进行监测，如果室内面积不足30平方米，需要设置三个监测点；如果室内面积超过30平方米，通常需要设置5个监测点；（2）医务人员手卫生监测。
医务人员日常与患者接触较多，并且会为多名患者提供护理服务，通过重视医务人员手卫生监测也能够达到降低院内感染目的，采样过程中，要求医务人员五指并拢，棉拭子通过生理盐水浸湿，通过棉拭子对医务人员手部采样，从手指根到指端曲面往返2次，将操作者用水触及区域剪掉，其余进入10ml洗脱液中，然后进行手卫生细菌总数检测；（3）物表监测，主要是对病房、手术室等相关物体表面进行采样与细菌检测；（4）一次性物品的细菌检测，通过洗脱液对5-10份一次性样品进行洗脱处理，然后接种并进行细菌培养；（5）消毒剂细菌检测，选择消毒剂进行细菌培养，计算菌落数；（6）透析水检测，透析水培养后计算菌落总数。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆2、院感检测培养基选择与操作针对不同的院感监测项目需要选择的培养基也有所不同，其中；（1）空气监测中选择的是琼脂平板，直径9cm，将其置于相应的空气监测点，暴露5min后送检，35-38℃培养48h，计算菌落总数；（2）医务人员手卫生监测中，需要将从洗脱液中的采样接种到灭菌平皿内，应用5ml营养琼脂，琼脂凝固后，37℃培养48h，计算菌落总数；（3）物表监测中对获取的样品同样需要置于灭菌平皿，加入营养琼脂完成监测；（4）一次性物品中A类无菌物品吸取的样品需要接种到平板中，35-37℃培养3-5天，然后检测，要求不能有细菌检出；对于B类无菌物品，需要将1cm*3cm样品置入增菌液中，如果出现细菌生长，则需要转入平板，要求不能有细菌检出；（5）消毒液样品需要加入含有对应中和剂的9ml肉汤中，然后选择1ml接种到灭菌平皿内，加入营养琼脂5ml，摇匀并在琼脂凝固后，37℃培养48h，计算菌落数；（6）透析水，1ml透析水加入到无菌平皿中，然后加入56度琼脂，冷却后在37℃下培养48h，计算菌落总数。
医院空气、物表与医务人员手卫生学监测
曲阜市中医医院医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》(2012年8月1日实施)及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。
一、空气净化效果的监测1。
监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、层流洁净病房、重症监护病房、母婴同室、供应室等的空气净化与消毒质量进行监测。
2。
监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；(2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。
3。
采样时间（1)采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样;（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。
4。
监测方法（1)洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法,参照GB50333要求进行监测。
浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。
监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度,按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min.房间面积＞10m2者,每增加10m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处;室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。
将普通营养琼脂平皿(Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0。
8m～1。
5m;采样时将平皿盖打开,扣放于平皿旁,暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；(3）平皿暴露时间:①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。
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手卫生效果的监测方法
1．采样时间在接触患者、进行诊疗活动前采样。
2．采样方法被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱水液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。
细菌菌落数总数计算方法：
细菌菌落总数（cfu/cm2）=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积（cm2）
3．手消毒效果应达到如下相应要求：
a）卫生手清毒，监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2
b）外科手消毒，监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2
空气消毒效果的监测方法
1、采样时间：消毒处理后与进行医疗活动前采样。
2、方法：室内面积≤30M3，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端距墙1M处取一点；室内面积＞30 M3，设、东、南、西、北、中、5点，其中东、南、西、北布点部位均距墙1m处。
中点加放一只标准皿（即灭菌培养皿不打开）。
物体表面采样监测方法
(1).采样时间：在清洁或消毒处理后进行采样。
(2).采样面积：被采样本表面积＜100cm2 取全部表面；被采样本表面积≥100cm2，
取100cm2（即5cm×5cm规格板，采4个不同部位）
(3).采样方法：
用5cm×5cm标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm2，连续采样4个。
用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个点，将棉试子放入装有10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，将试管口和瓶塞放在火焰
上烧，并立即将瓶塞塞紧。
采样后立即送检。
菌落数计算公式：
平板上菌落数×采样液稀释倍数
细菌菌落总数(cfu/cm2)＝—————————————————
采样面积(cm2)
表1各类环境物体表面细菌菌落总数卫生标准
致病性微生物：
不得检出乙型溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌及其它致病性微生物。
母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室、及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。