PKA和PKC系统对小鼠精原细胞增殖的影响

增 殖 的作 用 ， 一 作 用 可 被 Ｐ Ｃ 的抑 制 剂 Ｈ 这 Ｋ 所 抑 制 。说 明 Ｐ Ａ 和 Ｐ Ｃ信 号 通 路 在 小 鼠 Ａ 型 精 原 细 胞 的 发 育 过 Ｋ Ｋ 程 中发 挥 着 重 要 的调 控 作 用 ， 活 Ｐ 激 ＫＡ 和 Ｐ Ｃ信 号 转 导 途 径 能 够 促 进 Ａ型 精 原 细胞 的增 殖 。 Ｋ
两侧 睾丸 ， 除去被 膜 ， 分离 曲 细精 管 ， Ｐ Ｓ和 培养 经 Ｂ
液清洗 ， 复吹 打 曲 细精 管 以去 除 间质 细 胞 。将 组 反 织剪 碎成 小 组 织 块 后 用 １ｍｇ・ｍＬ 胶 原 酶 在 ３ ７ ℃消化 。滤 网过 滤 后 ， 胞离 心洗 涤 ３次 后 经 台 盼 细
第３ ５卷 第 ６期
２１ ０ １年 １ ０月
南 昌 大 学 学报 （ 科 版 ） 理
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＮａ ｃ ａ ｇ Ｕｎ ｖ ｒ ｉｙ Ｎａ ｕ ａ ｃｅ ｃ ） ｏ ｒ ａ ｎ ｈ ｎ ｉ ｅ ｓｔ （ ｔ ｒ １Ｓ ｉｎ ｅ ｏ
Ｖｏ ＿ ５ Ｎｏ ５ ｌ３ ．
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霉 素和 １ ０ｍｇ・ 链 霉 素 、 ０ｍｇ・ｍＬ 胰 岛 ０ ｍＬ １ 素 、 ｍｇ・ｍＬ 转 铁蛋 白 和 ３ １ ｍｏ ・Ｌ 亚 ５ × ０ ｌ 硒 酸钠作 为完全培 养 液 （Ｔ Ｉ Ｓ培 养 液 ） 。细胞 按 ５ × １ 个／ Ｌ ０ ４ 的密 度接 种 到 ９ ６孔 细胞 培 养 板 （ ｎ ） Ｎｕ ｃ ，
１ ｍｏ ０ ｌ・Ｌ ）、 Ｐｈｏ ｂｏ ２ ｍ ｙ ｉｔ ｔ ３ ａ ｅ ａ ｅ ｒ ｌ１ 一 ｒｓ ａ ｅ １ wk.baidu.com ｃ ｔ ｔ
（ ＰＭ Ａ ， ０ ～ １ ｍ ｏ １ ０ ｌ・ Ｌ ） Ｈ８ １ ～ １ 。 、 ９（ ０ ０
ｍｏ ・Ｌ ） Ｈ７ １ ～ １ ｍｏ ・Ｉ ） 独 处 理 ， ｌ 、 （０ ０ ｌ 单
摘 要 ： 用 精 原 细 胞 一体 细 胞 体 外 无 血 清 共 培 养 模 型 研 究 了蛋 白激 酶 Ａ（ ＫＡ） 蛋 白激 酶 ｃ（ Ｋ ） 统 对 小 鼠 利 Ｐ 和 Ｐ Ｃ系 Ａ 型 精 原 细 胞 增 殖 的 影 响 。结 果 表 明 ， Ｋ 的激 活 剂 ｆｒｋ ｌ （ ｓ 可显 著 刺 激 小 鼠 Ａ 型 精 原 细 胞 增 殖 ， 一 作 Ｐ Ａ ｏｓ ｏｉ Ｆ Ｋ） ｎ 这 用 可 被 Ｐ Ａ 抑 制 剂 Ｈ８ 抑 制 ； ＫＣ 的激 活 剂 ｐ ｏｂ ｂ ２ｍｙｉ ａｅ１一ｃｔｔ（ ＭＡ） 具 有 促 进 Ａ 型 精 原 细 胞 Ｋ 。 所 Ｐ ｈ ｒｏ １一 ｒ ｔｔ ３ａｅａｅ Ｐ ｓ 一 也
文 章 编 号 ： ０ ６０ ６ ２ １ ） ５ ０ ７ — ４ １ ０ — ４ ４（ ０ １ ０ — ４ ６ ０
Ｐ ＫＡ 和 Ｐ ＫＣ 系统 对 小 鼠精 原 细 胞增 殖 的影 响
张 大 雷 刘芳 明 杨 树 龙 杨 蓓 邹 挺 ， ， ， ，
（ 昌 大 学 ａ 基 础 医 学 院 ， 西 南 昌 ３ ０ ０ ； ． 书馆 ， 南 ． 江 ３ ０ ６ｂ 图 江西 南 昌 ３ ０ ３ ） ３ ０ １
维 细胞 和 雪 旺 氏 细 胞 增 殖 ］ ＫＣ信 号 途 径 能 。Ｐ
够 促进 视 网膜 神经 节 细胞 的存 活 和生 长 ¨ ， 导 心 ４ 介 ｊ
肌 细胞 凋亡［ ， 进 成 骨 细胞 、 纤 维 细 胞 、 经 干 ５促 ］ 成 神
细 胞 和胎 儿 肺 细 胞 增 殖 ｌ 。此 外 ， ＫＡ 和 Ｐ ６ ］ Ｐ ＫＣ 的激 活 能 够 促 进 原 始 生 殖 细 胞 增 殖ｌ ］ １ ” 。然 而 ， Ｐ ＫＡ 和 Ｐ ＫＣ通 道对 精原 细胞 发育 的调控 还 不是 很 清楚 。本试 验 利用小 鼠生 殖细 胞 一体细 胞无血 清共 培 养模 型研 究 Ｐ ＫＡ 和 Ｐ ＫＣ 的激 活 剂 和 抑 制 剂 对
蓝 染 料 排 除 法 计 算 细 胞 活 率 。培 养 液 为 高 糖
Ｄ ＭＥ 培 养 液 （ ｉｍａ ， 中添 加 １ ７ Ｍ Ｓｇ ） 其 ． ５ ｍｍｏ ｌ・ Ｌ Ｈｅ ｅ 、 ～ ｐ ｓ ２ｍｍｏ ・ 谷 氨酰 胺 、 ０ Ｕ／ ｌ Ｌ １ ０Ｉ ｍＬ青
介 导 的 信 号 传 递 过 程 中 起 着 重 要 作 用 。Ｐ ＫＡ 被
置 于 ３ Ｃ， ５ Ｃ 的培 养箱 中培养 。 ７。 含 Ｏ １ ２ 药物 处理 ． 在 细胞 培 养 的 同 时 添 加 Ｆ ｒｋ ｌ （ Ｓ １ ｏ ｓ ｏｉ Ｆ Ｋ， ０ ｎ
～
导 的信号转 导途 径 涉 及 到 多种 细 胞 的存 活 和增 殖 。
Ｐ ＫＡ 的激 活 能够抑 制黄 体细 胞 的凋亡 ［ ， 进 成纤 １促 ］
ｃ ＡＭＰ活 化 后 ， ＡＴ 的存 在 下 调 节 细 胞 的 物 质 在 Ｐ 代谢 和基 因表 达， 而影 响 细胞 的增 殖 和分 化。 从 Ｐ ＫＣ也 在调 节 细 胞增 殖 和改 变 细 胞 的离 子 通 道 方 面发 挥 着 重要 的作 用 。研 究 表 明 ， ＫＡ 和 Ｐ Ｐ ＫＣ介
关 键 词 ： 型 精 原 细 胞 ； 白激 酶 Ａ； 白激 酶 Ｃ； 胞 增 殖 Ａ 蛋 蛋 细
中 图 分 类 号 ： ５ Ｑ２ ３ 文 献 标 志码 ： Ａ
精原 细胞 是精 子 的前 体 细胞 ， 原 细 胞 的 发育 精
是一 个复 杂 的生殖 细 胞 增 殖 和分 化 的过 程 ， 到 多 受 种 内源性 和 外源性 因素 的共 同调 节 ， 而这 些 调 控 作 用 常常是 通 过 细 胞 间信 号 传 导 途 径 的改 变 而 实 现 的 。蛋 白激 酶 Ａ（ ＫＡ） Ｐ 和蛋 白激 酶 Ｃ（ ＫＣ 在受 体 Ｐ ）