地中海贫血基因检测的临床应用

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地中海贫血基因检测操作规程益生堂

α-地中海贫血基因检测操作规程（益生堂）一、目的：对筛查出来的地贫疑似病例和需要进行地贫产前诊断的夫妇提供进一步的确认。

二、适用范围：适用于益生堂PCR扩增、琼脂糖电泳技术等分析的操作。

三、原理：应用特异的PCR引物选择性地扩增不同类型的α-地中海贫血基因，通过琼脂糖凝胶电泳的带型分析，诊断α-地中海贫血基因缺失型。

四、操作规程（一）标本收集、标本保存、标本转运1、静脉采血：从肘静脉或手背静脉抽取静脉血1mL以上，将血液沿管壁缓慢注入加有EDTA或枸橼酸钠的试管内，轻轻混匀，即为抗凝全血。

羊水的采集：由临床医师经腹壁行羊膜穿刺取得。

采集羊水时速度不宜太快，标本抽取量也不宜太多，一般10-15mL即可。

2、标本一经采集，则应尽快送至实验室检测，抗凝全血室温放置不超过4小时，4℃保存不超过一周，-20℃保存不超过半年，应避免反复冻融。

3、标本装入试管密封，再装入塑料袋中，置冰壶或泡沬箱加冰袋密封运输，在运输过程中应避免剧烈震荡。

4、注意事项（1）抗凝时，不能用肝素抗凝。

（2）采集羊水穿刺羊膜要在妊娠16周羊水达到200mL以后才能进行。

（二）全血DNA提取操作规程1、所需试剂及仪器：试剂由益生堂生物技术（深圳）有限公司提供，包含核酸提取试剂、扩增管、模条、无水乙醇，1.5mL离心管.仪器有黑马和博日扩增仪、台式高速离心机、旋涡振荡器、真空旋转干燥仪、电泳仪、电泳槽、分子杂交仪、凝胶成像系统。

2、实验前准备工作2.1、准备好1.5mL无菌离心管及无菌吸头。

2.2、变性液在每次使用前应充分摇匀以保证提取质量。

3、操作步骤（1）在1.5mL离心管中加入250μL充分摇匀的变性液及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟。

也可选择以下操作步骤，以获得更高质量的DNA：在1.5mL离心管中加入1mL无菌水及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟以裂解红细胞。

13000rmp离心1分钟，弃上清，保留管底白细胞块。

地贫基因检测在临床诊断中的应用

减少和防止重症地贫儿的出生及优生优育具有重要的临床意义
地贫防控从婚前孕前开始！
• 技术方法：PCR-反向点杂交法 • 检测基因突变型：17个位点的19种突变
稀有地中海贫血基因检测服务
• 多技术平台综合分析
α-地贫基因检测
α -地中海贫血
α-地中海贫血（简称α-地贫）是一种由于α-珠蛋白基因突变导致肽链表达失衡而产生的单基因遗传血液病。
多由α-珠蛋白基因的缺失突变所致。中国地区常见的3种缺失型 α-地贫主要由 --SEA、-α3.7、 -α4.2缺失引起。
-地贫基因型与表型的关系
-地贫表现型
亚能生物β-地中海贫血基因检测试剂盒
• 利用基因芯片技术可以同时检测中国人群8个常见位点和9个少见位点共17个位点的19种β -地贫基因突变类型
β-地中海贫血基因诊断操作流程
β-地中海贫血基因诊断结果判读
41-42N 41-42M
43M
654N 654M －32M
－28N －28M －29M
71-72N 71-72M －30M
17N 17M 14-15M
β EN β EM CAPM
31N 31M IntM
27/28M IVS1-1M IVS1-5M
654M/71-72M 17M/N
β EM/β EM 41-42M/N
β -地贫基因检测临床意义
对患者进行基因确诊可广泛用于β -地贫的筛查，对β -地贫基因缺陷携带者进行鉴别，对于
亚能生物地中海贫血基因检测整体解决方案
α-地中海贫血基因检测试剂盒
• 技术方法：GAP-PCR法 • 检测基因突变型：-α3.7，-α4.2，--SEA
非缺失型α-地中海贫血基因突变检测试剂盒

基因检测技术在地中海贫血诊断中的意义

于基因的点突变，少数为基因缺失；α 珠蛋白生成障碍性贫
二分之一的机会成为轻型贫血患者，四分之一的机会成为中
血（ α 地中海贫血）。大多数 α 珠蛋白生成障碍性贫血（地
型或重型贫血患者。鉴于本病缺少根治的方法，临床中、重
病理相当复杂，已知有１００种以上的 β 基因突变，主要是由
轻型或轻型地贫患者，子女将有四分之一的机会完全正常、
血胎儿的价值分析［Ｊ］．中国当代医药，２０１５（１０）：４－６．
［５］．唐爽．绵阳地区孕前人群地中海贫血基因型分布情
况［Ｊ］．医药前沿，２０１８（２６）：３９－４０．
作者简介：
朱林，三台县人民医院。
但输血治疗后的血液学检查会与实际结果有所不同。所以
进行遗传学和分子生物学检查才能最后确诊。遗传学检查
可确定为纯合子、杂合子以及双重杂合子等。
·１７４·
参考文献：
［１］陈建文，叶菀华，李颖清．彩色多普勒在早孕期诊断
重度 α 地中海贫血胎儿中的应用［Ｊ］．中国继续医学教育，
２０１７（９）：８６－８９．
列一种或数种方法给予治疗。输血和去铁治疗，在目前仍是
散发病例，北方则少见。它的医学专用名称是珠蛋白生成障
重要治疗方法之一。
碍性贫血又称海洋性贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病。
地中海贫血由于遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种
或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理
（１）注意休息和营养，积极预防感染，适当补充叶酸和维

基因检测技术在地中海贫血诊断中的意义
朱林
地中海贫血病例广泛分布于世界许多地区，东南亚即为
轻型地贫无需特殊治疗。中间型和重型地贫应采取下

HKαα地中海贫血的基因诊断及临床表型分析

ＨＫαα地中海贫血的基因诊断及临床表型分析杜丽　王继成　秦丹卿　胡听听　袁腾龙　张艳霞　梁驹卿　尹爱华（广东省妇幼保健院医学遗传中心、广东省妇幼代谢与遗传病重点实验室，广东广州５１１４４２）【摘要】　目的　对ＨＫαα地中海贫血病例进行基因诊断，分析ＨＫαα病例临床表型，为遗传咨询提供指导。

方法　对在本院就诊的ＨＫαα病例进行血常规、血红蛋白电泳、基因诊断及产前诊断，分析病例的临床表型。

结果　共检测出ＨＫαα病例３３例，包括ＨＫαα／αα１５例、－－ＳＥＡ／ＨＫαα１６例、αＷＳα／ＨＫαα１例、－α４．２／ＨＫαα１例。

并对５个家庭进行了产前诊断，检出－－ＳＥＡ／ＨＫαα胎儿１例，通过遗传咨询，避免了选择性终止妊娠。

结论　结论ＨＫαα地中海贫血的基因诊断可以减少病例的漏诊或误诊，临床表型的分析可以为精准的遗传咨询提供指导。

【关键词】　地中海贫血；基因诊断；ＨＫαα【中图分类号】　Ｒ７１４．５５【文献标识码】　Ａ犇犗犐：１０．１３４７０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｐｄ．２０１７．０３．００４通讯作者：尹爱华，Ｅｍａｉｌ：ｙｉｎａｉｗａ＠ｖｉｐ．１２６．ｃｏｍ【犃犫狊狋狉犪犮狋】　犗犫犼犲犮狋犻狏犲　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｇｅｎｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａａｎｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｇｅｎｅｔｉｃｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ．犕犲狋犺狅犱　Ｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄｃｅｌｌａｎａｌｙｓｉｓ，ｃａｐｉｌｌａｒｙｚｏｎｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＣＺＥ），ＧａｐＰＣＲａｎｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｒｅｖｅｒｓｅｄｏｔｂｌｏｔ（ＰＣＲＲＤＢ）ａｓｓａｙｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｔｈｅＨＫααＴｈａｌａｓｓｅｍｉａ，ａｎｄａｎａｌｙｚｅｔｈｅｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌｐｈｅｎｏｔｙｐｅｄａｔａｏｆＨＫααＴｈａｌａｓｓｅｍｉａ．犚犲狊狌犾狋狊　３３ｃａｓｅｓｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ１５ｃａｓｅｓｏｆＨＫαα／αα、１６ｃａｓｅｓｏｆ－－ＳＥＡ／ＨＫαα、１ｃａｓｅｏｆαＷＳα／ＨＫααａｎｄ１ｃａｓｅｏｆ－α４．２／ＨＫαα．５ｐｅｄｉｇｒｅｅｓｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｐｒｅｎａｔａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄ１ｆｅｔｕｓｏｆＨｂ－－ＳＥＡ／ＨＫααｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅｃｏｕｐｌｅｃｈｏｏｓｅｄｔｏｃｏｎｔｉｎｕｅｔｈｅｐｒｅｇｎａｎｃｙ．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀狊　ＧｅｎｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａｃａｎｍａｋｅａｃｃｕｒａｔｅｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ａｖｏｉｄｉｎｇｔｈｅｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ．ＴｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｃａｎｐｒｏｖｉｄｅａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｇｅｎｅｔｉｃｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ．【犓犲狔狑狅狉犱狊】　ｔｈａｌａｓｓｅｍｉａ；ｇｅｎｅｄｉａｇｎｏｓｉｓ；ＨＫαα α地中海贫血（简称α地贫）是我国南方各省携带率最高、影响最大的遗传病，广东省育龄人群α地贫的基因携带率达１３％［１］。

β-地中海贫血基因检测(PCR-反向点杂交法)

pcr扩增
DNA提取
利用特定的试剂从血细胞中提取出DNA。
pcr扩增
使用聚合酶链式反应（PCR）技术对DNA进行扩增，使其数量增加，便于后续的检测。反向点Fra bibliotek交制备探针
将目标基因序列设计成特定的探针，并固定在尼龙膜上。
杂交反应
将扩增后的DNA与固定在膜上的探针进行杂交，通过碱基互补配对原则，将目标基因序列特异性地结合在膜上。
纳米技术
利用纳米材料和纳米技术提高检测的灵敏度和特异性，降低检测误差。
要点二
基因组编辑技术
利用CRISPR-Cas9等基因组编辑技术，对β-地中海贫血基因进行精确编辑和修复，从根本上治疗地中海贫血。
临床应用的拓展
早期筛查
将β-地中海贫血基因检测纳入新生儿筛查计划，实现早期发现和干预，降低疾病对患儿的影响。
β-地中海贫血基因检测(pcr反向点杂交法)
• β-地中海贫血基因检测介绍 • pcr-反向点杂交法介绍 • β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点
杂交法)流程 • β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点
杂交法)的临床意义
• β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点杂交法)的未来发展
01
β-地中海贫血基因检测介绍
03
耗时长：需要进行PCR扩增和杂交反应，整个过程需要一定时间。
04
对实验条件要求高：需要严格控制实验条件，避免交叉污染和假阳性结果。
03
β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点杂交法)流程
样本采集和处理
血液样本采集
从患者静脉抽取适量血液，用于后续的基因检测。
样本处理
将采集的血液进行离心，分离出血浆和血细胞，保留血细胞用于后续的DNA提取。

地中海贫血基因检测临床应用

全球有3.5亿人为地中海贫血基因携带者（占总人口的2%）
流行情况
疾病概述
第一章
省份
携带率（%）
α-地贫
β-地贫
合计
广西
17.6
6.4
24.0
广东
13.3
4.5
16.8
云南
9.8
7.3
17.1
海南
12.7
2.7
15.4
贵州
4.2
5.1
9.3
香港
7.3
1.2
8.5
重庆
5.2
2.0
7.2
江西
3.5
2.9
6.4
地中海贫血基因检测临床应用
C O N T E N T S
目录
地中海贫血疾病概述地中海贫血的分类及临床表现地中海贫血的筛查与诊断地中海贫血的遗传咨询与产前诊断
SECTION TITLE
疾病概述
01
地中海贫血
地中海贫血是由于珠蛋白基因缺失或突变导致血红蛋白中的某种珠蛋白链合成障碍，造成α链或β链合成失去平衡而导致的溶血性贫血。是一种典型的血红蛋白病。根据合成障碍的肽链不同，可将地中海贫血分为α-地贫和β-地贫。
疾病分类
第二章
α-地贫
a2
a1
a2
a1
1
Exon 1 Exon 2 Exon 3
CD125 (CTG>CCG or Leu>Pro )
CD142 (TAA>CAA or Thr>Gln)
CD122(CAC>CAG,or His>Gln)
鼓励县、市妇保院申请试点单位试点单位需具备血红蛋白电泳初筛能力试点单位筛查及诊断费用由省、市、县财政统一拨款

孕检地中海贫血3385例筛查结果分析及临床意义

Ｂ一地贫；ＨｂＡ２和ＨｂＦ正常参考区间为２．Ｏ％～３．５％和＜１．５％：以上任意一项或多项异常则判断为异常血１．５统计学方法采用统计学软件ＳＰＳＳ１３．０对数据进行统计学分析。计量资料用土ｓ表示，用ｔ检验；
轻型为ＨｂＡ２介于３．５％～８％，ＨｂＦ正常或轻度增加
地贫基因携带率为８．５３％，Ｂ一地贫基因携带率为红蛋白带。若ＨｂＡ２ ≤２．０％，或出现异常血红蛋白带２．５４％ｔ ” 。一方面由于血红蛋白的珠蛋白肽链合成障
碍，另一方面由于合成速率降低致使血红蛋白的成３．５％或出现异常血红蛋白带（ＨｂＦ＞２．Ｏ％），则判为Ｂ一
（不超过５％）；中间型为ＨｂＦ介于５％～３０％；重型为ＨｂＦ介于３０％一９０％。若出现其他异常血红蛋白区带则判为异常血红蛋白病阁。１．３基因诊断基因诊断是地贫诊断的金标准，对于初筛可疑阳性标本进行基因检测．用美国应用生物
布于世界多地，东南亚是高发地之一。我国以广东、广西、海南等沿海地区人群携带率最高，广东省仪一的Ｇ２６全自动琼脂糖电泳仪。地贫诊断Ｈｂ电泳标准：成人男女ＨｂＡ２为２．Ｏ％～３．５％，并且未出现异常血（ＨｂＨ、ＨｂＢａｒｔｓ），判为０ｌ地贫表型阳性；若ＨｂＡ２＞地贫表型阳性。Ｂ一地贫按病情轻重可分如下３型：

地中海贫血基因检测

地中海贫血简介地中海贫血（thalassemia），又称海洋性贫血，简称地贫，是由于人体珠蛋白基因突变或者缺失而导致的某种珠蛋白链合成障碍，造成α，β-珠蛋白肽链合成速率的不平衡而导致的溶血性贫血。

重型地贫会引起胎儿水肿症、贫血、甚至死亡；中间型地贫患儿需经常输血，长大基本丧失劳动能力，生活质量明显下降。

地中海贫血是一种累及全世界且具有高发病率的遗传病，我国以广东、广西、海南、四川、重庆为地贫高发区（表1）。

由于目前地贫尚无有效根治办法，患儿家庭背负着极大的精神压力和经济负担。

地中海贫血基因诊断可在临床上对患者的基因型进行确诊，对家族成员基因型进行追踪及监控，并应用于婚前检查、产前诊断，以预防和减少重症地中海贫血儿的出生，降低地中海贫血发生率，提高人口素质地贫治疗现状地中海贫血目前尚无有效的疗法,因而预防重型地中海贫血患儿出生是控制本病的可行方法,为此,人群中地贫携带者的筛查、基因诊断和产前诊断显得尤为重要。

常用的诊断方法如下：1.Southern 印迹法优点：分析缺失型α-地中海贫血分子缺陷的可靠技术缺点：操作繁冗，不宜作为常规手段2.联合检测平均红细胞参数（MCV、MCH）+红细胞脆性检测+Hb（血红蛋白）电泳MCV：平均红细胞容积 MCH：平均红细胞血红蛋白量优点：这一检测方法简便、迅速，也较为普及缺点：不能有效地把缺铁性贫血区别开来，对于α-地中海贫血和β-地中海贫血的诊断也没有特异性。

3.PCR-RDB法（PCR/寡核苷酸探针反向斑点杂交法）检测中国南方常见的17种β地贫突变：CD41～42(-TCCT)、IVS-2 nt654 C →T、-28 A→G、CD71～72（+A）、CD71～72（+T）、CD17 A→T、CD26 G→A、CD31（-C）、CD27～28（+C）、CD43 G→T、-32 C→A、-29 A→G、-30 T→C、CD14～15（+G）、CAP、Int及IVS-1 nt5 G→C优点：在一次实验可同时辨别多种点突变，其准确性仅次于DNA测序缺点：突变位点附近存在的多态性位点易导致假阴性结果4.Gap-PCR采用单管四重PCR法（多重PCR技术）对其基因组DNA进行扩增，同时检测-α3.7、-α4.2、--SEA和正常对照4种等位基因型，采用1.2％琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物，通过片断大小判断患者的基因型。

β-地中海贫血基因检测(PCR-反向点杂交法)

【原理】
PCR技术原理
DNA的半保存复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶的参与下，依据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
PCR技术的根本原理类似于DNA的自然复制过程，其特异性依靠于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
【原理】
PCR技术原理
【操作步骤】
1.DNA猎取〔已预备好了〕
2.PCR扩增〔承受试总体积25微升
参加 2ul DNA溶液
反响体系各组分的用量见理论课内容
PCR扩增条件
50℃， 95℃， 94℃， 55℃， 72℃， 72℃，
15min 10min 1min 30sec 30sec 7min
PCR由变性--退火--延长三个根本反响步骤构成：
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右肯定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反响作预备；
②模板DNA与引物的退火〔复性〕：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
反向斑点杂交技术
反向斑点杂交(reverse dot blot，RDB)是Saiki等提出的一种斑点杂交技术，该技术承受固化了多种特异性探针的膜条与扩增靶序列杂交，使一次杂交即可同时筛查被检DNA中的多种突变。这种以膜上固定探针取代固定靶DNA的方式，转变了传统杂交法一次只能检测一种突变的模式，具有快速、简便、高敏感度和特异性强的特点，尤其在基因突变检测、基因分型、病原体的检测等领域有其独特的优势。
71-72N 17N
βEN
71-72M 17M
βEM

α地中海贫血3种点突变基因检测（CS、QS、WS）项目简介

α地中海贫⾎3种点突变基因检测（CS、QS、WS）项⽬
简介
α地中海贫⾎3种点突变基因检测（CS、QS、WS）
项⽬简介
地中海贫⾎是全球⼴为流⾏的遗传性溶⾎性疾病，属于常染⾊体隐性遗传的⼈类⾎红蛋⽩病，全世界⾄少有3.45亿⼈携带地中海贫⾎的致病基因。

全球地中海贫⾎基因携带者频率⾼达2.62%，包括中国南⽅在内的东南亚地区，印度次⼤陆、地中海地区、中东、北⾮和太平洋地区都是该病的⾼发地区，尤其我国⼴西的携带率⾼达24%、⼴东⾼达11%。

由于携带者没有症状，然⽽婚配的下⼀代却有1/4的机会罹患严重溶⾎性贫⾎症状的重症地中海贫⾎，因⽽构成了严重的公共健康问题。

⽬前，对此类遗传病尚⽆有效的治疗⽅法，但通过产前诊断可避免重症地中海贫⾎患⼉的出⽣，这是⽬前国际上公认的⾸选预防措施。

临床意义：
地中海贫⾎基因突变位点众多，α地中海贫⾎基因突变类型主要为缺失，点突变⽐较少见，本项⽬针对相对常见的三个α地中海贫⾎基因点突变进⾏检测，可作为地中海筛查和诊断的辅助检测。

适检情况
1、地贫基因全套查⽆α地贫基因缺失，但患者有地贫临床表现，需进⼀步检测较为常见的三种α地贫基因点突变
2、家族中有地中海贫⾎疾病的⾼危⼈群，联合地贫基因全套进⾏较全⾯的筛查
标本采集要求
1、填写地贫基因检测的专⽤申请单。

2、EDTA抗凝管取全⾎2ml，2-8℃保存，当天送检
临床项⽬收费标准。

地中海贫血的基因诊断与产前筛查

ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ选择性终止妊娠
对于确诊患有严重地中海贫血的胎儿，父母可以选择性终止妊娠，避免患儿出生后面临的痛苦和负担。
优生优育
产前筛查有助于实现优生优育，提高人口整体遗传素质。
产前筛查的策略
01
02
03
综合评估
结合家族遗传史、临床表现、实验室检查等多方面信息进行综合评估。
基因检测
采用先进的基因检测技术，如PCR、基因芯片等，对孕妇及胎儿进行地中海贫血相关基因检测。
地中海贫血的基因诊断与产前筛查
汇报人：XXX 2023-11-23
目录
• 地中海贫血概述 • 基因诊断的原理与技术 • 产前筛查的策略与流程 • 案例分析与讨论 • 前景展望
01
地中海贫血概述
定义和类型
定义
地中海贫血是一种遗传性血液疾病，主要表现为贫血、骨骼变形和发育不良等症状。它是由基因突变导致血红蛋白合成异常引起的。
4. 胎儿基因检测
在孕妇同意的前提下，通过无创产前检测（NIPT）或羊膜腔穿刺等方式获取胎儿遗传物质，进行地中海贫血基因检测。
5. 结果解读与遗传咨询
对检测结果进行解读，评估胎儿患病风险，为孕妇提供针对性的遗传咨询和建议。
6. 后续跟进与关怀
对确诊患有地中海贫血的胎儿家庭，提供心理支持、生育建议和后续治疗指导等综合关怀服务。
联合筛查
与其他遗传性血液病进行联合筛查，提高筛查准确性和效率。
地中海贫血的产前筛查流程
1. 遗传咨询
对孕妇进行遗传咨询，了解家族遗传史和个人病史，评估地中海贫血风险。
2. 临床检查
对孕妇进行临床检查，观察是否有地中海贫血相关症状。

地中海贫血筛查指标的临床应用价值

① 从
血红蛋白电泳筛查地中海贫血可疑病例，并对可疑病例进行地中海贫血基因诊断和血清铁蛋白检查。结果
３６４例受检者中筛查出６６例可疑地中海贫血患者，红细胞脆性、Ｖ、Ａｎ者检出率分别为１．１．４３ＭＣＨｂ二７％、７１５％、
ＡｎｌｓｓｏｌｉａｕｆＴｈｌｓｅａｉｖｓｉａｉｎａｙｉｆｅｉｃｖｌｅｏａａｓｍｉｅｔｔｎｎｇｏＬｕｚｕｓＤｕ－ｕ，ＯＵＪｎＡ０ａ－ｉＬｎＩＹ－ｈ，ＨｆｎｙｎＬｉ，ＴＸｉｏｍｅ，ＩＭｉ昏
ＤＵＸｉ．ｈｎｈｎＳｃｎｅｐｅＨｏｐｔｌＧｕｎｄｎ８３ｎＳｅｚｅｅｏｄＰｏｌｔｓｉ，ａｇｏｇ５０５。Ｃｉａｓａｈｎ
【ｂｔａｔｏｂｅｔｅＴｖｓｇｔｔｅｃｎａｕｆｈｌｓｍａｉｅｔａｏ．ｔｏｓｌｅｐｏｏｉｓｗｓＡｓｃ】ｒｊｃｉｏｉｅｔａｅｈｌｉｖｌｅｏａｓｅｉｎｓｇｔｎＭｅｈｄ１ｒｓｕａｖｎｉｉｃｔａｖｉｉ１ｐｔ
７１可疑地中海贫血患者中，．％；红细胞脆性＜０ＭＣ＜０ｆ、ｂ２．％的患者分别为１０９．４．７％、Ｖ８ＨＡ ≥３５Ｌ０％、７８０４％、％。② 可疑地中海贫血患者中，红细胞脆性＜５６％组与脆性为６％～０５７％组比较，中海贫血基因诊断符合率差异有统计学意地
ＭＣＶ＜０ｆ，ｎＡ２３５ｗｅｅｃｒｓｏｄｎｌｏ％，７８ａｄ４．％．Ｉｏａｉｏｔｒｔｒｃｔｓｔ８ＩａｄＨＢ ≥ ．％ｒｏｒｐｎｉｇｙｌｏｅ９．％ｎ０４（ｎｃｍｐｒｎｗｉｅｙｈｏｙｅｏｍｏｉｓｈｃ

地中海贫血产前基因检测的应用与结果分析

地中海贫血产前基因检测的应用与结果分析对于不少新手妈妈来说，地中海贫血症是威胁宝宝身体健康的一种遗传性疾病，简单而言就是幼儿的先天性贫血。

这种情况在我国南方沿海地区特别是两广、湖南、湖北、四川及浙江、福建、台湾中比较常见。

不少医院也在孕妈妈产检的过程中告知她们需要进行基因检测，为此不少孕妈妈都十分想知道产前的基因检测对于宝宝的身体健康都有哪些帮助？接下来就让我们来看看吧。

什么是地中海贫血?地中海贫血症又被称为地贫，是一种由珠蛋白基因缺失或是发生突变所引发的珠蛋白链合成性障碍，这种障碍可以随着母体向幼儿进行转移，因此也是一种遗传性疾病。

在临床上，依据合成障碍的肽链各有不同，可以将地贫大致分α和β两种。

我国华南沿海地区是地中海贫血症的高发区，2005年时广东省遗传学会公布的省内地中海贫血症发生率约在18%左右，等到了2015年时地中海贫血症的发生率上升到了25%左右，由此可见地贫是现阶段威胁母体与宝宝身体健康的最重要问题之一。

那么又有孕妈妈要问了，地贫是怎么发生在自己身上的，在没进行产检之前有没有什么特殊的症状。

首先地中海贫血症是因为红细胞内的血红蛋白数量与质量发生了异常，进一步导致了红细胞的寿命减短，因此这种遗传疾病目前并没有有效的根治方式，只能依靠间断输血或是输送浓缩的红细胞来补充细胞的不足。

因此患者妈妈会长期贫血，机体内发生严重缺氧或是其他营养成分不足，导致自身免疫力下降，非常容易感染各种疾病，对于自身及胎儿的健康都带来了十分严重的影响。

地中海贫血的遗传概率当夫妻二人同时都属于轻微地中海贫血基因携带者，那么宝宝就有四分之一的概率是重型地中海贫血症患者，有二分之一的概率是轻微地中海贫血症患者，有四分之一的概率是正常人。

当夫妻二人有一方是地中海贫血基因的携带者，那么宝宝就有二分之一的概率是正常孩子，四分之一的概率是轻微地中海贫血症患者，并且不会出现重型的可能性。

因此广大孕妈妈不用过度担心，虽然地中海贫血症比较难以治愈，但是其可防可控，只要加强进行婚检、孕检与产检工作，就可以从源头上降低重型地中海贫血症患儿出现的可能性，为宝宝的身体健康打下良好的基础。

地中海贫血的诊治进展

地中海贫血的诊治进展
地中海贫血是一种遗传性疾病，主要见于地中海沿岸国家的人群中，由于红细胞色素合成缺陷而导致贫血、骨骼畸形等症状。

过去几十年中，科学家们在诊治该疾病方面做出了巨大进展，下文将对这些进展进行总结。

1.基因筛查技术的普及
目前，地中海贫血主要通过基因遗传方式传播，因此，对于有家族史或有地中海沿岸国家血统的人，基因检测可以预测出其遗传风险。

近年来，随着基因检测技术的不断提高和普及，人们能够更早、更便捷地了解自己和家人的患病风险。

同时，基因筛查也可以有效地避免患者误诊、漏诊或延误治疗等问题。

2.干细胞技术
干细胞技术是一种新兴的医疗技术，通过使用干细胞，可以制作出供体无关的红细胞、白细胞和血小板，可供地中海贫血等疾病患者使用。

该技术还有可能开发出可持续补充血细胞的方法，有效地治疗慢性血液疾病。

3.成人干细胞移植
当地中海贫血患者无法通过其他治疗方法得到缓解时，成人干细胞移植可能是一种治疗的选择。

该方法需要使用完整的
配型，以确保移植干细胞与患者的组织相容，但是这种治疗方法的风险高，患者需要进行长时间的住院治疗和密切监测。

4.基因治疗
基因治疗是最新的治疗方式，旨在通过改变被遗传病毒感染的基因来治疗地中海贫血等疾病。

在该方法中，可以使用负载额外基因的病毒矢量来将修改后的基因传输到患者的细胞中。

这种方法虽然仍在测试和开发中，但是前景广阔，有望成为治疗地中海贫血的首要治疗方法。

总之，地中海贫血患者的治疗方案正在不断发展。

虽然这种疾病没有完全治愈的方法，但是随着技术的不断进步，医生们可以通过早期诊断、基因筛查和现代治疗方法来帮助患者减轻疼痛和改善生活质量。

地贫基因检测实验报告(3篇)

第1篇一、实验背景地中海贫血（Thalassemia）是一种由于珠蛋白基因缺陷引起的遗传性溶血性贫血病。

根据珠蛋白基因突变的不同，地中海贫血可分为α-地中海贫血和β-地中海贫血两大类。

本实验旨在通过分子生物学技术对疑似地中海贫血患者进行基因检测，以确定其基因型，为临床诊断和治疗提供依据。

二、实验目的1. 确定疑似地中海贫血患者的基因型。

2. 为临床诊断和治疗提供科学依据。

三、实验材料1. 样本：疑似地中海贫血患者的血液样本。

2. 试剂：DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、DNA测序试剂盒等。

3. 仪器：PCR仪、电泳仪、测序仪等。

四、实验方法1. 样本DNA提取：采用DNA提取试剂盒提取疑似地中海贫血患者的血液样本DNA。

2. PCR扩增：根据α-地中海贫血和β-地中海贫血的基因突变位点，设计特异性引物，进行PCR扩增。

3. PCR产物检测：通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，观察条带情况。

4. DNA测序：对扩增产物进行DNA测序，确定基因突变位点。

5. 基因型分析：根据测序结果，分析疑似地中海贫血患者的基因型。

五、实验结果1. 样本DNA提取：成功提取疑似地中海贫血患者的血液样本DNA。

2. PCR扩增：成功扩增出α-地中海贫血和β-地中海贫血的基因片段。

3. PCR产物检测：电泳结果显示，扩增产物大小与预期相符。

4. DNA测序：测序结果显示，疑似地中海贫血患者的基因存在突变。

5. 基因型分析：根据测序结果，确定疑似地中海贫血患者的基因型为α-地中海贫血杂合子。

六、讨论与分析1. α-地中海贫血是一种常染色体隐性遗传病，主要由于α-珠蛋白基因缺陷引起。

本实验通过PCR和DNA测序技术，成功检测出疑似地中海贫血患者的基因突变，为临床诊断提供了依据。

2. α-地中海贫血的基因型可分为纯合子和杂合子。

本实验结果显示，疑似地中海贫血患者的基因型为α-地中海贫血杂合子，提示其可能表现为轻型α-地中海贫血或无症状携带者。

地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用

地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用摘要：目的探讨血常规筛查、血红蛋白电泳、地贫基因诊断在孕产妇中的应用。

方法随机抽取2018年1月至2018年6月来我院产检的1000名孕妇，以地贫基因诊断结果为金标准，对血常规指标（MCV、MCH）以及血红蛋白电泳对诊断地中海贫血的检出率进行比较，并且分析地中海贫血的基因类型。

结果 1000份标本中，确诊为地中海贫血的有71例，其中缺失型α地贫基因：-SEA缺失型杂合子31例，-α3.7缺失型杂合子19例，-α4.2缺失型杂合子2例；β地贫基因：CD41-42突变杂合子9例，IVS-Ⅱ-654突变杂合子3例，-28突变杂合子3例，CD17突变杂合子1例；非缺失型α地贫基因：QS突变杂合子1例，WS突变杂合子1例。

αβ复合型地中海贫血1例，为-SEA/CD41-42基因型。

血常规指标（MCV、MCH）异常，地贫检出率为63%；血红蛋白电泳异常，地贫检出率为49%；二者联合，地贫检出率为91%。

结论地中海贫血诊断在产前诊断中具有重要意义，血常规参数与血红蛋白电泳相结合，地贫的筛查率和检出率均会提高。

关键词地中海贫血；血常规参数；血红蛋白电泳；地贫基因地中海贫血是由于血红蛋白的珠蛋白链有一种或几种的合成受到部分或完全抑制所引起的一组遗传性溶血性贫血【1】。

其中，α珠蛋白基因缺失或缺陷，导致α珠蛋白链合成减少或缺乏，称为α地中海贫血。

β珠蛋白基因缺陷导致β珠蛋白链合成减少或缺乏，称为β地中海贫血。

α地中海贫血根据发生的不同程度分为静止型或标准型α地中海贫血、血红蛋白H(HbH)病、血红蛋白Bart胎儿水肿综合征。

β地中海贫血是常染色体显性遗传，可分为轻型、中间型、重型三种。

广东是地中海贫血的高发地区之一，因此，对孕妇进行地贫筛查，对地中海贫血的早期预防具有重要意义。

1资料、方法1.1对象 2018年1月-2018年6月来我院产检的1000名孕妇，年龄在21-40岁之间，平均年龄31岁，对其血常规参数(MCV、MCH)，血红蛋白电泳，地贫基因结果进行分析。

液相芯片技术在地中海贫血基因诊断中的应用

液相芯片技术在地中海贫血基因诊断中的应用黄培坚;邓文成;尹志军【摘要】目的探讨液相芯片技术在地中海贫血(以下简称地贫)基因诊断中的临床价值.方法收集南方医科大学附属小榄医院2017年1～6月已确诊的各类地贫基因型患者血液标本832份,采用液相芯片技术进行地贫基因检测;同时采用跨越断裂点PCR法(Gap-PCR)对α缺失型进行验证,采用PCR反点膜杂交法(PCR-RDB)对α和β突变型进行验证,并比较两种方法的检测结果;若两种检测方法结果不一致则用基因测序作最终验证.结果两种方法检测结果总符合率为99.199％,总Kappa值为0.982,液相芯片法出现黄区或灰区标注的结果,使用分析软件进行人工判读后,一致率达到100％.结论液相芯片技术能同时检测α地贫缺失型和α、β地贫突变型,适合大批量标本运作,具有极大的临床应用潜力.【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2018(029)015【总页数】3页(P2128-2130)【关键词】地中海贫血;液相芯片;基因诊断【作者】黄培坚;邓文成;尹志军【作者单位】南方医科大学附属小榄医院检验科,广东中山 528415;南方医科大学附属小榄医院检验科,广东中山 528415;南方医科大学附属小榄医院检验科,广东中山 528415【正文语种】中文【中图分类】R556液相芯片技术是以100种不同荧光编码的微球作为探针的载体，生物分子间的反应在悬浮液态体系中进行的一类新的生物芯片技术，液相芯片技术被用于检测方法的生物大分子，如DNA检测、免疫检测、细胞因子检测、激素检测、环境调查与分析[1]。

地中海贫血(thalassemia)是世界上最常见的人类单基因遗传性血液病，是一组由于珠蛋白基因缺陷导致珠蛋白链合成比例失衡引起的遗传性溶血性贫血，而跨越断裂点PCR技术和PCR反点膜杂交法技术(以下简称传统方法)是现时地中海贫血基因诊断主流而传统的检测方法[2-3]。

本研究旨在探讨液相芯片技术用于地贫基因诊断的优势与临床价值。

地中海贫血诊治进展与我国现状

结论总的来说，地中海贫血的诊治进展为患者带来了新的希望和选择。然而，在实际应用中仍需不断完善和提高。我们呼吁广大医务工作者、科研人员、政策制定者和公众共同地中海贫血这一疾病，加强协作与交流，共同推进地中海贫血诊治事业的发展。展望未来，随着科技的进步和研究的深入，我们有理由相信，地中海贫血的治疗效果将越来越好，患者的生命质量也将得到显著提高。
研究不足
尽管中国南方地区地中海贫血的研究取得了一定的进展，但仍存在一些不足之处。首先，在治疗方法方面，尽管基因治疗为地中海贫血的治疗提供了新的思路，但其临床应用前景仍需进一步探索。目前，基因治疗仍存在安全性、有效性等问题需要解决。此外，现有的治疗方法如输血和去铁治疗也面临着一些问题，如铁过载等。
临床应用思考在实际应用中，地中海贫血的诊治仍面临诸多问题和挑战。首先，由于地中海贫血的遗传特性，患者在出生时可能无法立即确诊，往往需要依靠家族史和临床表现进行推断。其次，治疗方法的选择和疗效的评估需要综合考虑患者的病情、年龄、性别、经济状况等多方面因素。针对这些问题，我们提出以下解决方案：
3、优化治疗方案：对于地中海贫血患者，应根据其具体情况制定个体化的治疗方案。例如，对于轻型患者，可采用补铁、祛铁等保守治疗；对于重型患者，在条件允许的情况下，可考虑采用基因治疗、干细胞移植等先进治疗方法。
4、加强社会支持和心理辅导：地中海贫血是一种长期甚至终身性疾病，患者需要长期治疗和。因此，社会各界应给予患者及其家庭更多的支持和关爱，同时提供专业的心理辅导，帮助他们更好地应对疾病带来的心理压力。
广东省在防控地贫方面做了很多工作，首先就是婚前检查和产前诊断。通过对准备结婚的男女进行地贫筛查，以及在怀孕期间进行基因检测，可以有效地预防重型地贫患儿的出生。目前，广东省的婚前检查和产前诊断覆盖率已经达到了95%以上。

地贫实验报告思考

一、实验背景地中海贫血（Thalassemia），又称地中海型贫血，是一种遗传性血红蛋白合成障碍的疾病。

该病主要发生在地中海沿岸、东南亚以及我国南方等地区。

地中海贫血患者由于血红蛋白合成不足，导致红细胞形态异常、寿命缩短，严重者可引发贫血、肝脾肿大、骨骼变形等并发症，甚至危及生命。

近年来，随着分子生物学技术的不断发展，地中海贫血的基因诊断技术逐渐成熟。

本研究旨在通过实验，探究地中海贫血基因诊断方法，为临床诊断和治疗提供理论依据。

二、实验目的1. 掌握地中海贫血基因诊断的基本原理和操作步骤；2. 了解地中海贫血基因突变类型及其对血红蛋白合成的影响；3. 评估不同基因诊断方法在临床应用中的优势和局限性。

三、实验材料与方法1. 实验材料（1）实验样本：选取10份地中海贫血患者样本和10份正常对照样本；（2）试剂：PCR试剂盒、DNA提取试剂盒、限制性内切酶、DNA连接酶、Taq DNA聚合酶等；（3）仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统等。

2. 实验方法（1）DNA提取：采用酚-氯仿法提取实验样本中的基因组DNA；（2）PCR扩增：针对地中海贫血基因突变位点设计特异性引物，进行PCR扩增；（3）限制性内切酶酶解：将PCR产物进行限制性内切酶酶解，观察酶切产物条带；（4）电泳分析：将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，观察条带变化，判断是否存在突变。

四、实验结果与分析1. DNA提取结果实验成功提取了10份患者样本和10份正常对照样本的基因组DNA，A260/A280比值在1.8-2.0之间，符合实验要求。

2. PCR扩增结果通过PCR扩增，成功扩增出地中海贫血基因的突变位点。

10份患者样本均出现异常条带，而10份正常对照样本则无异常条带。

3. 限制性内切酶酶解结果对PCR产物进行限制性内切酶酶解，发现10份患者样本酶切产物与正常对照样本存在差异。

患者样本酶切产物条带数量、位置和大小均与正常对照样本不同。

4. 电泳分析结果电泳结果显示，患者样本与正常对照样本在特定位置出现差异条带。