机采血小板采集前后血常规分析

PA法用针对G P b a的单抗PL1 64和PL2 46,针对G P1a a的单抗G i9、P16(N I BSC,英国)和AK7、针对GP !b ∀的GR P单抗及针对 2-微球蛋白的B1G6单抗,发现是1个新血清型。用父亲、母亲、患儿的DNA检测H PA -1、 3- 16,均无发现阳性带。为证实是1个新的抗原,又通过对父、母、患儿及正常对照者的G P Ia c DNA进行测序以分析G P!a基因的CD S,在父亲与患儿的标本中发现了1个杂合性的突变2235G>T引起了Q716H(G l n716H is),命名为Cab a。通过采用Cv i A 限制性内切酶的PCR RFLP法证实该突变位于GP!a第17外显子。

为分析新等位基因在我国汉族人群中的分布情况,以评估可能的输血反应,我们采用由美国G&T公司合成的Cab a+/-引物分别检测GP!a外显子17的2235G和2235T。本次分型共计299例均出现Cab a-阳性条带,无一例出现Cab a+阳性条带,得到的Cab a-基因频率为1 000,Cab a+基因频率为0 000。Cab a-/-的基因型频率为1 000,C ab a+/-、Cab a+/+的基因型频率均为0 000。不同的血小板等位基因存在于不同的糖蛋白上,从已经报道并正式命名的H PA1-17及最新发现的Cab a看,存在于G P!a上的HPA只有HPA-2、-5、-12、-13及Cab a,绝大部分H PA等位基因存在于GP a上。就H PA a/b等位基因频率而言,HPA-1--6、-15的a/b均有不同的多态性,以H PA-3、-15呈高度多态性,其余均为低频抗原。本次在我国汉族部分人群中所进行的H PA新等位基因Cab a基因分型中全部检出Cab a-(2235G),未检出Cab a+(2235T)。G e ra l d Bertrand等在他们的研究中调查了104名高加索人的Cab a基因,也均无检出Cab a+(2235T)。从本次的Cab a基因分型及频率统计及G er a l d Bertrand等的结果看,Cab a+(2235T)是低频抗原,Cab a-(2235G)应为高频抗原。

参考文献

[1]孙国栋,段现民,张彦平,等.献血者血小板1 16抗原基因

遗传多态性分析及已知H PA型供者数据库的建立.中国实

验血液学杂志,2005,13(5):889 895.

[2]刘衍春,薛敏,吴敏慧,等.血小板特异性抗原H PA 17b w基因

分型及基因频率调查.中国输血杂志,2009,22(5)353 354.

[3]B ertrand G,Jall u V,Saillan tD,et a.l The ne w p latelet all oanti gen

C aba:a s i ngle po i nt m utation G l n716H is on t h e a2i n tegri n.

Transfus i on,2009,49(10):2076 2083.

(2010 02 05收稿,05 13修回)

本文编辑:李弘武#尚云

∃实验研究∃

机采血小板采集前后血常规分析

胡玉秀#李聚林#李文初#葛建明#邹梅馨(广西血液中心,广西柳州545005)

##摘要:目的#了解机采血小板采集前后血常规变化情况,把握捐献者条件选择与机采效果,保障捐献者安全与机采质量。方法#无偿捐献机采血小板献血者142名,分为2组,比较机采1U(相当1个治疗量)与2U血小板前后血常规变化与机采质量并分析。结果#1U与2U血小板采集前后捐献者的外周血RBC与H ct均有明显差异, H ct上升2% 2 5%,RBC增高约0 25%1012/L;1U和2U的血小板总容量比较U=10 25,P<0 01;血小板比较 2=7 52,P<0 01;合格率为96 48%;142人采后P lt最低为115%109/L;捐血者除轻度低血钙症状,无其他不良反应。结论#捐献者条件选择合理,采集方法适当,效果稳定、安全、可靠,血小板制剂质量符合要求[1]。

关键词:机采血小板;捐献者;血常规

##中图分类号:R457 1#R331 1+43##文献标识码:A##文章编号:1004 549X(2010)12 1041 02

机采血小板以其高纯度、高含量、高疗效、副作用少而得到临床广泛应用。为更好把握捐献者条件、机采效果,把握捐献者安全和血小板质量状况,我们随机抽查2009年5月 2010年4月无偿捐献机采血小板献血者142名,并采集1U与2U血小板前后血常规变化分析,现将结果报告如下。

1#材料与方法

1 1#捐献者资料#随机抽取2009年5月 2010年4月本中心无偿捐献机采血小板献血者142名,采集前按性别、年龄、身高、体重、RBC、H ct、M CV等指标分为机采1U和2U 组(表1),捐献者条件符合文献[1]的规定,体重:男>55kg、女>50kg;H ct0 35 0 50;W BC(4 10)%109/L;Hb:男& 120g/L,女&110g/L;捐献1U血小板:P lt&150%109/L,捐献2U血小板:P lt&250%109/L。

表1#血小板采集前捐献者年龄、性别、身高、体重情况

(x∋S)

n男#女年龄(岁)身高(c m)体重(Kg)

1U8670#1632 58∋8 90166 87∋6 0266 11∋9 40 2U5639#1733 48∋9 96165 00∋6 7666 07∋9 43

1 2#材料#一次性使用塑料血袋 氯化钠注射液(上海输血

技术有限公司,批号:H31022233)。一次性使用塑料血袋 血液保存液(!)(上海输血技术有限公司,批号:H31022233)。

1 3#机采参数与方法#M CS+采血速度80m l/m in,ACD A 与全血比例为1(11,LDPLP程序,REF995E与REF995E2耗材;Am icus选择单针程序,耗材型号:R4R2336、R4R2316等。产量设定均为

2 5%1011或5 0%1011。

1 4#血液检测#取捐献者静脉血标本,单采血小板前后血象检测使用血球计数仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司BC 3000型和日本SYS M EX的KX 21型)。

1 5#统计学处理#采用SPSS13 0软件对数据进行统计学分析,资料以x∋s表示,采血前后数据比较采用U检验,P< 0 01为差异有统计学意义。

2#结果#(表2,3)

表2#机采血小板前后RBC、H c t、M CV、P lt比较

(x∋s)

RBC(%1012/L)H ct MCV(fl)P lt(%109/L)

血小板1U

采前(n=86)

4 83∋0 390 42∋0 0387 06∋3 8023

5 04∋41 07采后(n=86)5 07∋0 470 44∋0 038

6 85∋3 83181 09∋3

7 60血小板2U

采前(n=56)

4 90∋0 520 43∋0 0387 87∋3 20292 25∋3

5 21采后(n=56)5 15∋0 420 45∋0 0387 80∋3 09195 75∋32 83注:1U血小板采集前后比较RBC U=3 64,H ct U=4 26,P l t U=8 99,P均< 0 01;2U血小板采集前后比较RBC U=2 81,H ct U=3 81,P lt U=14 98P均<0 01;M C V U=0 12,P>0 05

表3#机采血小板1、2U血小板总容量

及血小板数下降情况(x∋s)

总容量(m l)下降率(%) 1U(n=86)455 77∋13 1123 14∋6 92

2U(n=56)487 13∋20 2833 44∋8 64

注:1U与2U血小板总容量比较U=10 25,P<0 01;采集后血小板下降率比较 2=7 52,P<0 01

142人捐献机采血小板最低为115%109/L。不合格5例,占3 52%,其中红细胞混入量不合格1例,发生率为0 70%,血小板含量不合格4例,发生率为2 82%。捐血者除轻度低血钙症状,无其他不良反应。

3#讨论

从表2可知,单采血小板后,由于捐献者体内损失了一定量血浆,血液被浓缩,1U或2U血小板机采前后捐献者静脉血RBC数与H ct值均有统计学意义,H ct随即平均上升了近2% 2 5%,单位体积RBC计数增加约0 25%1012/L,但对健康成年捐献者无碍[2],尤其是使用连续流动离心式血液成分分离机,体外循环血量少,可通过管道初始化等给捐献者补充适量生理盐水,血容量在整个采集过程变化不大,并且采集耗时短,分离效果好[3],将更受捐献者和使用者欢迎。

机采1U与2U血小板后捐献者将损失约450 500m l 血浆(表3),采集中与采集后适当补充水分不仅有助于血容量的恢复与防止血容量问题产生意外[3,4],还可改善血液粘稠度与血细胞密度而有利于血小板分离。建议在献血前后4h内需喝比平时要多一点的液体(流汁)与献血前一天最好多饮水[2]。采血前勿空腹,当日必须吃早餐。术前饮用一杯牛奶(200m l)还可有效预防低血钙的发生[3]。机采1U与2 U血小板后P lt比采集前平均大约下降23% 33%(表4),相当于人体1/4 1/3的血小板[2],下降幅度的大小主要取决于捐献者血液血小板总数与每单位血液中血小板数目,不同个体或不同区域群体血液血小板数目不同,正常人血小板数还随时间与生理状态改变,如一天之内可增减6% 10%,高原居民高于平原居民,午后高于早晨,冬季高于春季,运动、餐饮后增高。静脉血P lt比毛细血管血高10%[6]。正常人血小板含量为(100 300)%109/L,目视计数法参考区间成人男性为(85 303)%109/L,女性为(101 320)%109/ L[5]。血小板增多(>400%109/L)患者建议不宜献血,因为在不明原因的血小板增高标本中,约有50%来自恶性疾病患者[6]。如仅略偏高于正常值的人,经复查及多方排查证实为健康者可以献血。联合血小板直方图有助于分析红细胞碎片、小红细胞等对P lt的干扰。仪器计数存在许多干扰因素导致P lt不可靠,可以目视计数法进行复查校正[6]M CV降低,小红细胞越多,仪器计数时使血小板数假性越高,将此数据作为血细胞分离机单采血小板参数势必影响产品质量,而过多的小红细胞混入血小板终产品也容易发生受血者免疫反应或配血困难。红细胞凝集或微聚物增多造成的M CV假性增高、检测或机采工作液渗透压过高过低导致红细胞缩小或肿胀使M CV发生改变影响血小板检测[7]和检测体系稳定性与机采效果。所以选择M CV在正常值范围的献血者捐献机采血小板是重要的。采集1U按采前P lt&150%109/L和采集2U按P lt&250%109/L选择捐献者,142人单采血小板后外周静脉血中的P lt最低为115%109/L,无1例低于正常参考值水平[5]。M CV前后稳定,RBC、H ct变化不大,制品总不合格率仅为3 52%,捐血者除轻度低血钙症状,无其他不良反应。说明捐献者选择合理,检测系统稳定,机采参数及使用方法得当,制品合格率高,机采血小板安全、可靠。

参考文献

[1]#中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.全血及成分血质

量要求.GB18469 2001.

[2]#金宗骧.血液成分的制备//王培华.输血技术学.北京:人民卫

生出版社,2002:19 50.

[3]#田兆嵩.治疗性血液成分单采和置换术//田兆嵩.临床输血

学.北京:人民卫生出版社,2002:102 115.

[4]#刘景汉.外周血干细胞分离//杨成民,李家增,季阳.基础输血

学.北京:中国科学技术出版社,2001:384 396.

[5]#中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程.南京:

东南大学出版社,2006:1018.

[6]#杨祚升.血栓和止血一般检验//熊立凡.临床检验基础.北京:

人民卫生出版社,2004:84 86.

[7]#肖燕青,杨红玲,何家俊.红细胞平均体积降低对血小板计数的

影响.实用医学杂志,2006,22(13):1500.

(2010 06 28收稿,11 18修回)

本文编辑:刘晓明