地高辛试剂盒说明书
地高辛 (Digoxin)使用说明书
地高辛 (Digoxin)使用说明书地高辛 (Digoxin) 使用说明书地高辛是一种常用的心脏疾病治疗药物，主要用于治疗心力衰竭和心律失常。
本说明书将详细介绍地高辛的用法、剂量、注意事项和可能的副作用，帮助患者正确使用地高辛，从而达到最佳疗效。
一、药物名称和成分药物名称：地高辛（Digoxin）成分：每片含地高辛0.25毫克。
二、适应症地高辛适用于下列疾病的治疗：1. 心力衰竭：用于改善心脏收缩力，增加心脏排血量。
2. 心房颤动：用于控制心脏节律，减少心房颤动的发作并减轻症状。
三、用法和剂量1. 使用方法：口服。
最好与饭后服用，以减少不适感。
2. 常用剂量：成人一般剂量为每日0.125-0.25毫克，根据患者具体情况，可在医生指导下微调剂量。
3. 用量调整：用地高辛治疗时，应根据患者的病情和耐受性进行用量调整。
请遵循医生的指导，并定期检查药物浓度和心脏功能。
四、注意事项1. 专科医生指导：地高辛使用需要在专科医生的监护下进行，不得擅自调整剂量或停药。
2. 定期检查：使用地高辛期间，应定期检查心脏功能、药物浓度等指标，以确保疗效和安全性。
3. 过敏反应：如果出现过敏反应，如皮疹、荨麻疹、呼吸困难等症状，请立即就医。
4. 注意相互作用：地高辛有一些药物相互作用可能导致心脏毒性增加，如抗心律失常药物、某些抗生素等，请告知医生所用的所有药物。
5. 年老体弱者：对于年老体弱、肝肾功能减退者，应特别谨慎使用，避免出现中毒症状。
五、可能的副作用地高辛的使用可能会出现以下副作用：1. 胃肠道反应：如恶心、呕吐、腹泻等，特别是在剂量过高的情况下。
2. 心脏毒性：如心律失常、心搏骤停等，请密切关注心脏状况，若出现异常请立即就医。
3. 颜面潮红：部分患者使用地高辛后可能出现颜面潮红的不适感。
4. 视觉障碍：可能出现视觉模糊、视物有影等，若出现此类问题，请及时就医。
六、妊娠和哺乳期使用妊娠和哺乳期妇女慎用地高辛，应在医生的指导下使用。
地高辛标记及检测试剂盒I(POD)说明书
DIG Random Labeling and Detection KitⅠ（POD）(for color detection withDAB)DNA探针标记和检测试剂盒Ⅰ产品编号：MK1008保存期：一年-20℃冰冻保存。
用途：用于DNA探针的随机引物标记及各种膜上杂交和原位杂交。
工作量：可用于标记0.1—3μg的探针6次及1000张切片的原位杂交或12次10×10cm膜上杂交检测。
原理所谓DNA探针，实质上是一段已知的基因片段，应用这一基因片段即可与待测样品杂交。
如果靶基因和探针的核苷酸序列相同，就可按碱基配对原则进行核酸分子杂交，从而达到检查样品基因的目的。
在随机引物法标记反应液中，有随机合成的六聚体核昔酸(hexanucleotide)作为引物，dATP、dCTP、dGTP、dTTP和D1G-11-dUTP作为合成底物，以单链DNA作为模板，在Klenow 酶的作用下，合成掺入地高辛的DNA链。
以地高辛标记的探针与靶基因DNA链杂交后，再通过免疫反应来进行检测。
一般通过酶标抗地高辛抗体来检测，就可以肯定杂交反应的存在。
免疫检测采用过氧化物酶系统，DAB显色。
敏感性很高。
可用于膜上杂交和原位杂交。
试剂盒内容：1. DIG Random Labeling Mix(高效)，25μl2.Biotin—MouseAnti—Digoxin200μl3. SABC—POD200μl4. DAB Stock Solution5ml5. Blocking Reagent，5g特点：（1）标记属高效标记反应。
以1μg DNA探针为例，1小时反应即可产生0.8μg标记探针，20小时可产生2μg左右的标记探针。
（2）试剂将标记反应所需的引物、核苷酸、DIG-11dUTP和Klenow酶等混合在一起。
一次标记只需吸取一次标记液，使用至为简便。
（3）标记反应适于下述对象：a.DNA从10ng—3μg。
b.不等的DNA长度100bp—10kb。
深圳依诺金生物地高辛杂交检测试剂盒 I 产品说明书
深圳依诺金生物科技有限公司 - 1 - 产品说明书地高辛杂交检测试剂盒 I目录号: DIGD-110装量: 10次显色检测反应保存期: 12个月.存储条件:NBT/BCIP显色底物–20℃抗DIG-AP酶结合物4℃其它组分室温试剂盒组成:阻断液母液(10x) 50 ml抗DIG-AP 酶结合物20 µl NBT/BCIP显色底物 2 ml检测缓冲液(5×) 50 ml顺丁烯二酸缓冲液母液(2x) 500 ml Tween-20 3 ml 10% SDS 20 ml 20×SSC 100 ml使用前先用DEPC/无RNase水将5×检测缓冲液及2×顺丁烯二酸缓冲液母液稀释成1×工作液.一.预杂交:1. 将膜从包装袋中取出，用干净的剪刀将膜溴酚蓝以下的部分剪去。
放入杂交袋中，在封口机上将杂交袋三面封口。
2. 加入65℃预热的Hyb高效杂交液5mL，排尽气泡，封口。
放65℃水浴振荡杂交1～2小时。
3. 如果使用杂交管杂交，则根据杂交管体积，加入适量的杂交液(5-10ml)。
如果膜的大小适中，也可以用无菌的50ml离心管(BD公司)进行，5ml杂交液已足够。
将杂交仪设定为65℃，8-15转/分钟预杂交1～2小时。
二.杂交:1. 探针的处理：将标记好的探针放100℃煮10分钟，立即放冰浴冷却10分钟。
2. 将杂交袋从水浴中取出，剪去一角并尽可能的排尽袋中的预杂交液，取5mLHyb高效杂交液，加入变性的探针(1-3µl/膜，5－20ng/mL Hyb杂交液)，混匀。
加入到杂交袋中，小心排尽气泡，封口，65℃水浴振荡杂交过夜。
3. 如果使用杂交管杂交，则倒出预杂交液，另取适量的Hyb高效杂交液(5-10ml)，加入变性过的探针(1-3µl/膜，或5－20ng/ml Hyb高效杂交液)，混匀。
加入到杂交管中，杂交仪设定为65℃，8-15转/分钟，杂交过夜。
地高辛染色液说明书 一类
地高辛染色液说明书一类地高辛染色液是一种常用的染色试剂，常用于组织学研究中的免疫组化染色实验。
下面我将从多个角度全面介绍地高辛染色液的说明书内容。
1. 产品简介：地高辛染色液是一种含有地高辛标记的二抗试剂，用于检测目标蛋白在组织切片中的表达情况。
它可以与免疫组织切片中的靶蛋白发生特异性结合，并通过染色反应显示出目标蛋白的位置和分布。
2. 试剂成分：地高辛染色液主要由以下成分组成：地高辛标记的二抗，这是地高辛染色液的核心成分，通过特异性结合目标蛋白进行染色。
缓冲液，提供适宜的酸碱度和离子强度，维持染色反应的稳定性。
阻断剂，用于阻断非特异性结合，减少背景信号。
保存剂，保护试剂的稳定性和活性。
3. 使用方法：地高辛染色液的使用方法如下：准备组织切片，将待染色的组织切片固定在载玻片上，并进行适当的抗原修复和膜通透处理。
涂抹试剂，将地高辛染色液均匀涂抹在组织切片上，确保完全覆盖。
孵育反应，根据实验要求，在适当的温度和时间条件下孵育反应，使地高辛与目标蛋白发生特异性结合。
洗涤步骤，使用缓冲液或洗涤液进行适当的洗涤步骤，去除非特异性结合的试剂。
显色和显微观察，根据实验需要，使用适当的显色试剂进行染色反应，并在显微镜下观察和记录结果。
4. 注意事项：在使用地高辛染色液时，需要注意以下事项：试剂存储，请按照说明书中的建议存储试剂，避免温度过高或过低，避免阳光直射。
使用前检查，使用前请检查试剂的外观和标记，确保没有异常。
防止污染，使用过程中，请使用干净的工具和试剂盒，避免交叉污染。
实验条件优化，根据不同的样本和实验要求，可能需要优化反应条件，包括孵育温度、时间和洗涤步骤等。
总结：地高辛染色液是一种常用的免疫组织化学染色试剂，通过特异性结合目标蛋白进行染色反应。
在使用时，需要按照说明书中的方法和注意事项进行操作，以获得准确可靠的实验结果。
希望以上内容能够对你有所帮助。
地高辛中文操作说明
所用试剂盒为Roche公司的DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I，具体操作过程如下：①向一个反应管中加入1μg 模板DNA（线性或超螺旋）和高压灭菌的双蒸水，终体积达16μL；②沸水浴10min以变性DNA，然后迅速插入冰水混合物中；注意：完全变性对于标记的有效性是十分重要的。
③充分混合DIG-High Prime(1号管)，并取4μL加入到变性DNA中，混合并简单离心；④37℃孵育，过夜；⑤65℃加热10min，终止反应。
2）探针的纯化与回收用PCR产物快速回收试剂盒（上海生工）回收标记好的探针，同时除去随机引物和未掺入的DIG-dUTP。
具体操作步骤如下所示：①在PCR反应液中加入5倍体积的Buffer B3，充分混匀；②8,000×g离心30秒。
倒掉收集管中液体；③加入500μl Wash Solution，9,000 ×g 离心30秒，倒掉收集管中液体；④重复步骤4一次；⑤空柱于9,000 ×g离心1分钟；⑥将吸附柱放入一个干净的 1.5 ml离心管中，在吸附膜中央加入15-40μl Elution Buffe r，室温静置1分钟后，离心1分钟。
保存管中DNA溶液。
⑦电泳检测探针的完整性，紫外分光光度法测定探针浓度，稀释到1 ng/μL 。
注：标记好的探针最好立即使用，最长使用时间一般不宜超过3天。
标记好的探针可以保存在-20℃。
3）检测探针标记的效率直接标记法：将地高辛标记DNA的一系列稀释梯度点到一小块带正电荷的尼龙膜上。
尼龙膜部分区域已经点好一系列稀释梯度的地高辛标记的对照DNA（2号管）作为标准。
具体操作步骤：（注意在全部的步骤中，用足够的缓冲液体积完全覆盖膜）①分别从你标记的探针和标记对照DNA的2-9号管中取出1 μL点在尼龙膜上；②通过120℃烘烤30min的方法将核酸固定在膜上；③将膜转移到一个装有20mL 马来酸缓冲液的塑料容器中，在15-25℃中振荡孵育2min；④在10mL 封阻液中孵育30min；⑤在10mL 抗体溶液中孵育30min；⑥用10mL洗涤缓冲液洗涤两次，每次15min；⑦在10mL检测缓冲液中平衡2-5min；⑧将膜上带有DNA的一面朝上，放在一个折叠夹上（或者杂交袋），向膜上加入2mL的新鲜配制的的底物显色液，均匀的铺平底物，且膜上不能有气泡。
地高辛标记及检测试剂盒说明书
仅仅研究于生命科学，不适合在诊断过程使用只能在体外使用地高辛DNA标记和检测试剂盒1和NBT/BCIP一起用于颜色检测通过酶联免疫法采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记，碱性标记和检测货号：11 745 832 910此试剂盒储存条件-15o C—-25o C此试剂盒可对10ng-3ugDNA进行12次标记反应可检测100cm2面积的杂交膜24张指导手册2009.11版1前言1.1内容表1前言 (2)1.1内容表 (2)1.2试剂盒内容 (3)2简介 (5)2.1产品概述 (5)3步骤和所需材料 (8)3.1开始之前 (8)3.2地高辛DNA标记 (9)3.3 标记效率的测定 (11)3.4 DNA 的转移和固定 (14)3.5杂交 (16)3.6免疫检测 (18)3.7 DNA印记的洗脱和再杂交 (20)4结果 (21)4.1典型的结果 (21)5附录 (23)5.1故障排除 (23)5.2引用 (24)5.3订购信息 (25)1.2 试剂盒内容附加仪器与所需试剂除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。
在下表中，你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。
*标记的产品可以从Roche Applied Science 获得2 介绍2.1 产品概况实验原则此试剂盒采用地高辛（DIG），一种甾类半抗原，去标记DNA探针从而通过酶免疫分析应用地高辛标记DNA探针可以用于：所有类型的滤膜杂交总基因组DNA中单拷贝基因的检测，甚至对于高度复杂的生物也可以进行检测，如人，大麦和小麦。
样品材料至少100bp的DNA片段线性的质粒，cos质粒或者λDNA超螺旋的DNA实验时间此表格列出了每一步实验所需的反应时间检测数量一个试剂盒足够用于：不超过3ug的模板DNA的12个标准的标记反应和100cm2有24个斑点的检测质量控制根据操作步骤中的描述，对未标记的对照品DNA（PBR328）进行标记，0.1pg同源DNA 在点杂交中通过16h的显色来检测（1pg同源DNA可以通过1小时的显色进行检测）。
地高辛-安全技术说明书MSDS
第1部分化学品及企业标识化学品中文名：地高辛化学品英文名：DigoxinCAS号：20830-75-5分子式：C41H64O14分子量：780.95产品推荐及限制用途：工业及科研用途。
第2部分危险性概述紧急情况概述：吞咽致命。
造成严重眼刺激。
吸入致命。
长期或反复接触会对器官造成伤害。
对水生生物毒性极大。
GHS危险性类别：急性经口毒性类别2严重眼损伤/眼刺激类别2急性吸入毒性类别1特异性靶器官毒性反复接触类别1危害水生环境——急性危险类别1标签要素：象形图：警示词：危险危险性说明：H300吞咽致命H319造成严重眼刺激H330吸入致命H372长期或反复接触会对器官造成伤害H400对水生生物毒性极大防范说明：•预防措施：——P264作业后彻底清洗。
——P270使用本产品时不要进食、饮水或吸烟。
——P280戴防护手套/穿防护服/戴防护眼罩/戴防护面具。
——P260不要吸入粉尘/烟/气体/烟雾/蒸气/喷雾。
——P271只能在室外或通风良好处使用。
——P284[在通风不足的情况下]戴呼吸防护装置——P273避免释放到环境中。
•事故响应：——P301+P310如误吞咽：立即呼叫解毒中心/医生——P330漱口。
——P305+P351+P338如进入眼睛：用水小心冲洗几分钟。
如戴隐形眼镜并可方便地取出，取出隐形眼镜。
继续冲洗。
——P337+P313如仍觉眼刺激：求医/就诊。
——P304+P340如误吸入：将人转移到空气新鲜处，保持呼吸舒适体位。
——P310立即呼叫解毒中心/医生——P314如感觉不适，须求医/就诊。
——P391收集溢出物。
•安全储存：——P405存放处须加锁。
——P403+P233存放在通风良好的地方。
保持容器密闭。
•废弃处置：——P501按当地法规处置内装物/容器。
物理和化学危险：无资料健康危害：吞咽致命。
造成严重眼刺激。
吸入致命。
长期或反复接触会对器官造成伤害。
环境危害：对水生生物毒性极大。
地高辛(Digoxin )标准操作程序SOP文件
·Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970
·Elecsys添加剂液（SysWash）货号11930346
·Elecsys系统清洗液支架（Adapter for SysClean)）货号11933159
·Elecsys 2010反应杯（Assay Cup)货号11706802
概述：
地高辛被广泛应用于充血性心功能衰竭的治疗和各种心率失常。地高辛能改善心肌收缩的强度,增加心脏血液输出,缩小心脏,降低静脉压和血容量。地高辛治疗也
可稳定和抑制室性心率。由于地高辛使用的经常性和治疗过程中的不谨慎,容易引起地高辛中毒。更危险的是地高辛中毒症状常以心率失常形式表现出来,而病人正是由于这种症状而用地高辛治疗的。公认的血清或血浆地高辛治疗浓度是0.9-2.0ng/ml。人类地高辛中毒症状一般只出现在地高辛浓度超过2.0ng/ml，但有时低至1.4ng/ml也可出现中毒症。地高辛中毒可出现在以下几种情况a)药物疗效比率较低(如达到治疗效果的组织浓度与产生中毒的组织浓度之间差异很小；b)个体对地高辛的反应程度不相同；c)各种地高辛药片的吸收率差异可达二倍以上d)年龄增高,对地高辛中毒的易感性明显增强。与其它临床资料结合,监测地高辛浓度可以为医生及时调整用药剂量提供有用的信息,从而达到理想的治疗效果,避免药物不足或过量引起中毒。Elecsys地高辛测定方法采用竞争法原理和一种地高辛特异的单克隆抗体。标本中的地高辛与生物素化的地高辛衍生物竞争钌标记的单克隆抗体。
原理：
采用竞争法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：10µl标本与钌（Ru）标记的抗地高辛单克隆抗体混匀，形成免疫复合物，其数量取决于标本中分析物的浓度。
地高辛DNA标记试剂盒II
灵敏性: 在1µg已消化的人类胎盘DNA的
Southern Blot实验中，可检测到单拷贝的基 因。
DNA探针标记方法
步骤
操作方法
在反应管（例如1.5ml微量离心管）
中加入10ng-3µg的模板DNA，然后
1 加入无核酸酶的水至15µl。对于对
照 反 应 ， 加 入 1µl 对 照 DNA 和 14µl
产品说明书
注意：孵育过程中应避光，避免摇动，可 短时观察显色进程。
7.用双蒸水或TE缓冲液洗涤5分钟终止反 应，照相记录结果。
图示：
标记的探针量：
模板DNA量 反应1小时
10 ng
15 ng
30 ng
30 ng
100 ng
60 ng
300 ng
Байду номын сангаас
120 ng
1000 ng
260 ng
3000 ng
530 ng
应。
二. 探针标记效率检测： 取1µl标记产物，用DNA稀释液稀释后点
样于试剂盒提供的标准膜条上，用紫外交联 仪或真空烘烤固定DNA探针，按下述方法进 行信号检测，然后与标准膜条上的信号强度 对比，推算出标记的探针浓度。
深圳莱伯克生物科技有限公司
稀释方法：
试管号
标记的 DNA(µl)
DNA 稀释液(µl)
应用领域： 地高辛标记的探针高度稳定，用途广泛。
可用于： z 非同位素的 Southern Blot z Northern Blot z 原位杂交（ISH） z 菌落杂交 z 斑点印迹杂交分析等。
质量控制: 用GAPDH对照DNA按照下述的操作
方法验证，在点杂交实验中，0.1 pg同源的 DNA在显色16小时后可检测到 (1 pg同源的 DNA，在显色1小时后可检测到)。
地高辛(Digoxin)使用说明书
地高辛（Digoxin）使用说明书地高辛（Digoxin）使用说明书一、药品名称地高辛（Digoxin）二、适应症地高辛主要用于心力衰竭和心律失常的治疗。
三、使用方法和剂量1. 成人用法：（1）心力衰竭：初始剂量：每日0.125-0.25毫克口服，分2-3次服用。
维持剂量：每日剂量根据患者的临床情况逐渐调整，但一般不超过0.5毫克。
（2）心律失常：房性心律失常：根据患者临床情况，起始剂量为0.25-0.5毫克每日1次。
随后根据患者反应和心电图监测结果逐渐调整剂量。
室性心律失常：根据患者具体情况，开始推荐剂量为1.0-1.5毫克每日1次。
剂量可根据患者反应和心电图监测结果逐渐调整。
2. 儿童用法：儿童剂量需根据患者的具体情况，结合体重和心功能状况进行调整。
首剂维持剂量通常为0.01-0.03毫克每千克，分剂2-3次口服。
四、禁忌症以下情况患者禁用地高辛：1. 对地高辛或其他洋地黄类药物过敏；2. 严重房室传导阻滞（第二度或二度以上）；3. 窦房结功能低下，除非也内步或外步植入物并同时应用心脏起搏器；4. 快速性心律失常，如心房颤动或心室颤动；5. 严重的左心室功能受损；6. 妊娠期间禁用。
五、不良反应地高辛可能引起以下不良反应：1. 心律不齐：如房性和室性心律失常；2. 消化系统反应：如恶心、呕吐、腹泻和胃肠不适；3. 神经系统反应：如头痛、视觉异常和混乱；4. 毒性反应：如地高辛中毒，表现为恶心、呕吐、心律失常、心绞痛等。
地高辛中毒危险性增加主要是因为剂量过高或过敏，或者临床情况发生改变。
六、注意事项1. 在使用地高辛前，应对患者进行全面评估，包括心功能、肾功能、电解质水平等。
2. 患者需要定期监测心电图、心率和血药浓度，以确保地高辛在治疗范围内。
3. 地高辛具有窄治疗范围，必须严格控制剂量，注意患者年龄、体重、肾功能等因素的影响。
4. 患者必须告知医生正在使用或打算使用的其他药物，以避免与地高辛产生不良相互作用。
地高辛测定试剂盒(荧光免疫层析法)产品技术要求丹大
地高辛测定试剂盒(荧光免疫层析法)适用范围：该产品用于体外定量检测人血清、血浆或全血中的地高辛含量。
1.1规格1人份/盒；10人份/盒；25人份/盒；50人份/盒；100人份/盒质控品(选配,1平) ：0.5mL×1 1mL×11.2组成试剂盒组成见表1表1地高辛测定试剂盒组成注：质控品赋值具有批特异性，每批次靶值详见标签。
2.1 外观试剂盒外观应整洁, 文字符号标识清晰，液体无渗漏，测试卡完整无破损，冻干品复溶后为无色至淡黄色液体。
2.2空白限应不高于0.2ng/mL。
2.3线性范围在[0.2，5] ng/mL内，相关系数R≥0.990。
2.4重复性重复测试（1.4±0.3）ng/mL和（2.8±0.6）ng/mL的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于15%。
2.5批间差测试（1.4±0.3）ng/mL和（2.8±0.6）ng/mL的样本，批间相对极差（R）应不大于15%。
2.6准确度回收率为85～115％。
2.7质控品赋值有效性试剂盒内的质控品，检测结果均在质控范围内。
2.8质控品瓶间差瓶间差CV≤15%。
2.9稳定性2.9.1 效期稳定性试剂有效期为18个月取到效期后3个月内进行检测，测定结果应符合2.2-2.8、2.9.2（2.5项除外）项要求。
2.9.2质控品复溶稳定性质控品复溶后在2～8℃密封避光保存24h。
检测复溶后的质控品，检测结果均在质控范围内。
2.10溯源性根据GB/T21415-2008的要求，校准曲线溯源至工作校准品，工作校准品可溯源至药品标准物质100015。
地高辛标记与检测DNA试剂盒说明书
地高辛标记与检测D N A试剂盒DIGDNALabelingandDetectionKit采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记，碱性标记，利用NBT/BCIP酶联免疫，随时即用。
此试剂盒可对10ng-3μgDNA进行25次标记反应，可检测10×10cm2面积的杂交膜50张指导手册1前言1.1内容表1前言1.1内容表1.2试剂盒成分2.介绍2.1产品简介3.操作步骤和所需材料3.1在你开始前3.2流程图3.3地高辛标记DNA3.4标记效率的确定3.5DNA的转移和固定3.6杂交3.7免疫检测3.8DNA印记的洗脱和再杂交1.2试剂盒的成分瓶号标记内容包括功能1 无标记对照DNA12 无标记对照DNA23 DNA稀释缓冲液2管1mL50μg/mL鱼精DNA,10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH8.0在25℃澄清溶液4 DIG标记的对照DNA20μL5μg/mL质粒pBR328DNA（用BamHI线性化）澄清溶液用于确定标记效率5 六聚核苷酸混合物6 标记用混合物7 DNA聚合酶1大片段标记级8 抗地高辛的碱性磷酸酶结合物200μL750U/mL从羊中获取的，Fab段，结合碱性磷酸酶澄清溶液9 NBT/BCIP10 封阻试剂附加仪器与所需试剂除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。
在下表中，你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。
在每个操作程序的前面提供了详细的信息。
操作程序仪器设备试剂3.3DIG-DNA标记水浴灭菌的双蒸水0.2MpH8.0灭菌的EDTA3.4标记效率的半定量带正电荷的尼龙膜* 地高辛洗涤和封阻缓冲组合*TE缓冲液或者洗涤缓冲液马来酸缓冲液检测缓冲液3.5DNA转移和固定紫外光盒或者商业化可用于紫外交联的其他设备2×SSC或者10×SSC3.6杂交尼龙膜，带正电荷*杂交袋*，或者耐热的塑料袋或者滚筒瓶（分子杂交炉）注意：当用地高辛杂交缓冲液工作时，不要用开口的托盘。
地高辛安全技术说明书MSDS
化学品安全技术说明书第一部分化学品及企业标识化学品中文名：地高辛化学品英文名：digoxin|lanoxin|rougoxin化学品别名：地戈辛|毛地黄叶毒苷CAS No.：20830-75-5EC No.：244-068-1分子式：C41H64O14产品推荐用途：请咨询生产商。
产品限制用途：请咨询生产商。
第二部分危险性概述| 紧急情况概述固体。
吞食后有剧毒。
| GHS 危险性类别根据 GB 30000-2013 化学品分类和标签规范系列标准（参阅第十六部分），该产品分类如下：急毒性-口服，类别 2 。
| 标签要素象形图警示词：危险危险信息：吞咽致命。
防范说明预防措施：作业后彻底清洗。
使用本产品时不要进食、饮水或吸烟。
事故响应：漱口。
如误吞咽：立即呼叫中毒急救中心/医生。
安全储存：存放处须加锁。
废弃处置：按照地方/区域/国家/国际规章处置内装物/容器。
| 危害描述物理化学危险无资料健康危害吸入该物质可能会引起对健康有害的影响或呼吸道不适。
意外食入本品可导致严重的毒性反应。
意外食入本品可能对个体健康有害。
通过割伤、擦伤或病变处进入血液，可能产生全身损伤的有害作用。
眼睛直接接触本品可导致暂时不适。
环境危害请参阅 SDS 第十二部分。
第三部分成分/组成信息第四部分急救措施| 急救措施描述一般性建议：急救措施通常是需要的，请将本 SDS 出示给到达现场的医生。
皮肤接触：立即脱去污染的衣物。
用大量肥皂水和清水冲洗皮肤。
如有不适，就医。
眼睛接触：用大量水彻底冲洗至少 15 分钟。
如有不适，就医。
吸入：立即将患者移到新鲜空气处，保持呼吸畅通。
如果呼吸困难，给于吸氧。
如患者食入或吸入本物质，不得进行口对口人工呼吸。
如果呼吸停止。
立即进行心肺复苏术。
立即就医。
食入：禁止催吐，切勿给失去知觉者从嘴里喂食任何东西。
立即呼叫医生或中毒控制中心。
对保护施救者的忠告：清除所有火源，增强通风。
避免接触皮肤和眼睛。
避免吸入粉尘。
地高辛试剂盒说明书
1DIG DNA Labeling and Detection Kit采用地高辛-dUTP 进行随机引物DNA 标记，碱性标记，利用NBT/BCIP 酶联免疫，随时即用。
酶联免疫，随时即用。
此试剂盒可对10ng-10ng-3μgDNA 3μgDNA 进行25次标记反应，次标记反应， 可检测10×10×10cm 10cm 2面积的杂交膜50张指导手册1 前言 1.1 内容表 1 前言 1.1 内容表内容表 1.2 试剂盒成分试剂盒成分 2.介绍 2.1 产品简介产品简介3. 操作步骤和所需材料3.1 在你开始前在你开始前 3.2 流程图流程图 3.3 地高辛标记DNA 3.4 标记效率的确定标记效率的确定 3.5 DNA 的转移和固定的转移和固定3.6 杂交杂交3.7 免疫检测免疫检测3.8 DNA印记的洗脱和再杂交印记的洗脱和再杂交1.2 试剂盒的成分 瓶号 标记内容包括功能1 无标记对照DNA1 2无标记对照DNA23DNA 稀释缓冲液2管1mL50μg/mL 鱼精DNA,10mM Tris-HCl,1mM EDTA, pH8.0 在25℃ 澄清溶液澄清溶液 4DIG 标记的对照DNA20μL5μg/mL 质粒pBR328 DNA （用Bam HI 线性化）化）澄清溶液澄清溶液用于确定标记效率用于确定标记效率5 六聚核苷酸混合物六聚核苷酸混合物6 标记用混合物标记用混合物 7DNA 聚合酶1大片段标记级标记级8抗地高辛的碱性磷酸酶结合物200μL750U/mL从羊中获取的，Fab 段，结合碱性磷酸酶段，结合碱性磷酸酶 澄清溶液澄清溶液9 NBT/BCIP10 封阻试剂封阻试剂附加仪器与所需试剂除了上表中列出的试剂外，除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。
你必须准备一些溶液。
你必须准备一些溶液。
在下表中，在下表中，在下表中，你可以找到不你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。
地高辛说明书【范本模板】
地高辛片说明书【药品名称】通用名:地高辛片英文名：Digoxin Tablets【成份】本品主要成份为地高辛。
【药理毒理】治疗剂量时1、正性肌力作用:本品选择性地与心肌细胞膜Na+—K+-ATP酶结合而抑制该酶活性,使心肌细胞膜内外Na+-K+主动偶联转运受损,心肌细胞内Na+浓度升高,从而使肌膜上Na+Ca2+交换趋于活跃，使细胞浆内Ca2+增多，肌浆网内Ca2+储量亦增多，心肌兴奋时，有较多的Ca2+释放；心肌细胞内Ca2+浓度增高，激动心肌收缩蛋白从而增加心肌收缩力。
2、负性频率作用：由于其正性肌力作用,使衰竭心脏心输出量增加,血流动力学状态改善，消除交感神经张力的反射性增高,并增强迷走神经张力，因而减慢心率。
此外,小剂量时提高窦房结对迷走神经冲动的敏感性,可增强其减慢心率作用。
大剂量(通常接近中毒量）则可直接抑制窦房结、房室结和希氏束而呈现窦性心动过缓和不同程度的房室传导阻滞。
3、心脏电生理作用：通过对心肌电活动的直接作用和对迷走神经的间接作用，降低窦房结自律性；提高普肯野氏纤维自律性；减慢房室结传导速度，延长其有效不应期，导致房室结隐匿性传导增加，可减慢心房纤颤或心房扑动的心室率；由于本药缩短心房有效不应期，当用于房性心动过速和房扑时，可能导致心房率的加速和心房扑动转为心房纤颤;缩短普肯野氏纤维有效不应期。
【药代动力学】本品为由毛花洋地黄提纯制得的强心苷，其特点是排泄较快而蓄积性较小。
口服主要经小肠上部吸收,吸收不完全，也不规则，口服吸收率约75％，生物利用度：片剂为60％-80%，口服起效时间0.5-2小时,血浆浓度达峰时间2—3小时，获最大效应时间为4-6小时.地高辛消除半衰期平均为36小时.分布；吸收后广泛分布到各组织一部分经胆道吸收入血,形成肝—肠循环。
血浆蛋白结合率低,为20％-25%,表观分布容积为6-10L/kg。
代谢与排泄：地高辛在体内转化代谢很少，主要以原形由肾排除，尿中排出量为用量的50%-70％。
地高辛(Dig)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求yuande
地高辛（Dig）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）适用范围：用于体外定量测定人血清或血浆中的地高辛（Dig）的含量。
1.1 产品规格试剂盒规格为48人份/盒、96人份/盒。
1.2 主要组成成分表1 地高辛（Dig）测定试剂盒（化学发光免疫分析法）主要组成成分a) 酶结合物以含1% BSA的0.9%Nacl缓冲液配制的联接HRP的Dig抗原，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂。
b) 反应抗体以含1% BSA的0.9%Nacl缓冲液配制的兔抗Dig，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂。
c) 校准品校准品以100%小牛血清为稀释液，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂，校准品A～F中含Dig的目标浓度分别约为0、0.5µg/L、1.0µg/L、2.0µg/L、3.0µg/L、5.0 µg/L。
校准品具体浓度详见标签及试剂盒参数IC卡。
d) 发光液发光液A主要成份为鲁米诺，发光液B主要成份为过氧化脲，两者均以pH8.6的Tris-HCl缓冲液配制。
e) 包被微孔板包被有羊抗兔抗体的白色聚苯乙烯微孔板，用铝箔袋真空包装。
f) 质控品（备选）以100%正常人血清为基质制备的冻干品，其中含0.5%ProClin300做为防腐剂，靶值浓度范围为1.62 µg/L～2.31 µg/L。
质控品具体浓度详见质控品参数表。
不同批号试剂盒中的相同组分不能互换。
2.1 外观a）液体组分应澄清，无沉淀或絮状物，实际装量应不小于标示装量；b）冻干组分呈白色或淡黄色疏松体，加水后应在3分钟内完全溶解；c）所有组分均无包装破损，标示清楚。
2.2 准确度试剂盒内校准品与相应浓度的国家标准品（编号：100015）同时进行分析测定，用Logit-Ln模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t检验）；以国家标准品为对照品，试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在0.900～1.100之间。
DIG试剂盒说明书(CSPD)中文翻译版讲解
只用于生命科学研究，不能用于诊断程序仅用于体外实验DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter KitⅡ采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记，碱性标记，利用CSPD化学发光检测，随时即用。
货号：11 585 614 910此试剂盒储存条件：-15℃到-25℃。
此试剂盒可对10ng-3μgDNA进行12次标记反应，可检测10×10cm2面积的杂交膜24张。
指导手册2005.12 版1 前言1.1 内容表1 前言1.1 内容表1.2 试剂盒成分2.介绍2.1 产品简介3. 操作步骤和所需材料3.1 在你开始前3.2 流程图3.3 地高辛标记DNA3.4 标记效率的确定3.5 DNA的转移和固定3.6 杂交3.7 免疫检测3.8 DNA印记的洗脱和再杂交4. 附录4.1 故障排除4.2 参考文献4.3 订购信息1.2 试剂盒的成分附加仪器与所需试剂除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。
在下表中，你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。
在每个操作程序的前面提供了详细的信息。
*标记的产品可以从Roche Applied Science 获得。
2.介绍2.1 产品概况实验原则此试剂盒采用DIG(地高辛)，一种甾类半抗原，steroid hapten 去标记DNA探针用于杂交和后续的免疫检测[1,2,3]。
图1 DIG-dUTP ，碱性标记图2 CSPD反应应用地高辛标记DNA探针可以用于：所有类型的滤膜杂交总基因组DNA中单拷贝基因的检测，甚至对于高度复杂的生物体也可以进行检测，如人，大麦和小麦。
样品材料至少100bp的DNA片段线性的质粒，cos质粒或者DNA超螺旋的DNA实验时间此表格列出了每一步实验所需的反应时间。
检测数量一个试剂盒足够用于:12个标准的标记反应，每个反应的膜板DNA不超过3μg；并可以检测24张10×10cm2的杂交膜。
(中文) DIG High Prime DNA标记及杂交检测试剂盒 I
DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit I DIG High Prime DNA标记及杂交检测试剂盒I说明书版本：Version11 （2010年8月）利用随机引物法及DIG-dUTP（碱不稳定）进行DNA标记反应，采用酶联免疫方法及发色底物NBT/BCIP进行杂交分子的显色。
本试剂盒可对10ng-3μg DNA进行12次标记反应，可进行24次杂交检测反应（100cm2杂交膜）。
产品目录号：11 745 832 910试剂盒于-15 ~ -25℃保存1. 概况1.1 说明书内容1. 概况 (2)1.1说明书内容 (2)1.2试剂盒组成 (3)2. 介绍 (4)2.1 产品概述 (4)3. 实验步骤和需要的材料 (7)3.1 实验开始前准备 (7)3.2 DIG-DNA标记 (7)3.3定量标记反应效率 (10)3.4 DNA转膜和固定 (12)3.5杂交 (13)3.6 免疫检测 (14)3.7探针洗脱和重探 (16)4. 结果 (17)4.1 典型结果 (17)5 附录 (18)5.1 疑难问题解决 (18)5.2参考文献 (18)1.2 试剂盒组成杂交反应所需的仪器和其他反应试剂请根据您的实验操作流程准备杂交反应所需的仪器和其他试剂，参见下表：带*的试剂为罗氏应用科学部提供的试剂。
2. 介绍2.1 产品概述反应原理DIG High Prime DNA标记检测试剂盒（I）采用地高辛（DIG，一种甾类半抗原）进行DNA 标记，所获得的探针用于后续的杂交反应，带有地高辛分子的杂交子通过酶联免疫反应进行显色检测。
应用DIG标记的DNA探针可用于：•所有形式的膜杂交反应•（微生物，人类，植物等）基因组DNA中的单拷贝基因检测样本•大小在100bp以上的DNA片段•线性化质粒，粘粒或λDNA•超螺旋DNA分析时间试剂盒反应次数本试剂盒包含•对10ng-3μg DNA进行12次标记反应• 24次杂交检测反应（100cm2杂交膜）质量控制对DNA对照品（pBR328，未标记）进行标准标记反应，将0.1pg同源DNA点膜后进行斑点杂交，显色16h呈阳性检测结果（1pg同源DNA的杂交反应显色1h后呈阳性检测结果）。
地高辛标记NorthernStarter试剂盒
地高辛标记NorthernStarter试剂盒名称：地高辛标记Northern Starter 试剂盒产品货号： 12039672910产地： Roche供应商：英文名： DIG Northern Starter Kit保存条件：低温包含标记DIG RNA探针及进行Northern 印迹的所有必需试剂,配合DIG Wash and Block BuffeRSet方便地进行Northern 印迹;能作10个标记反应及10次检测(100mm2膜),特别适合初用者使用;标记混合物经最优化,配合提供的化学发光底物CDP-Star,能产生最高的灵敏度.Catalog # Product name / Packsize12039672910(2039672) DIG Northern Starter Kit1 kit (10 labeling reactions and detection of 10 blots of 10 x 10 cm2)ApplicationThe DIG Northern Starter Kit produces DIG-labeled RNA probes that can be used in conjunction with the supplied chemiluminescent detection reagents for northern blotting techniques.Using linearized DNA as a template, SP6, T3, or T7 RNA Polymerases are used to incorporate DIG-11-UTP into the RNA transcript. After labeling, the DIG-labeled probe is immediately ready for use in hybridization. For convenience, DIG Easy Hyb can be used for hybridization. The DIG Easy Hyb granules are easily reconstituted by adding 64 ml DEPC-treated (RNase-free) water directly to the bottle (once reconstituted, DIG Easy Hyb is stablefor 1 month at room temperature). After hybridization, the hybridization solution containing the DIG-labeled RNA probe can be stored at · 15 to -25°C for future re-use (up to 1 year).Product DescriptionSensitivity and specificity: Using 1 μg of linearized template DNA, the labeling reaction typically yields 20 μg of newly synthesizedDIG-labeled RNA within 1 h. The DIG-labeled RNA probe can detect 0.1 pg of homologous DNA or RNA in a dot blot. Rare mRNAs can be detected in 0.1 μg of total RNA.Background InformationThe DIG Northern Starter Kit was designed for the novice DIG system user. It contains the reagents proven to provide successful, reproducibleresults in northern blots. Additionally, the more convenient forms of standard DIG system products are included (e.g., CDP Star, ready-to-use). The small number of reactions allows the user to gain a firm foundation using the DIG system, then “graduate” to the standard pack sizes. For optimum success, use this kit with the DIG Wash and Block Buffer Set.ContentsLabeling Mix, 40 μl, 5x conc.Transcription Buffer, 40 μl, 5x conc.SP6 RNA Polymerase, 20 μl, [20 U/μl]T7 RNA Polymerase, 20 μl, [20 U/μl]T3 RNA Polymerase, 20 μl, [20 U/μl]Anti-digoxigenin-AP, Fab fragments, 60 μl, [750 U/ml]DNase I, RNase free, 20 μl, [10 U/μl]CDP-Star, ready-to-use, 20 mlActin RNA Probe, DIG-labeled Antisense Probe, length 588bases, [10 ng/μl]DIG Easy Hyb Granules, 2 bottles for 100 ml solution each Blocking Solution, 2 x 100 ml, 10x conc.NORTHERN 试剂盒(含膜)(Amresco E685-5(15X15CM))产品详细参数名称：NORTHERN 试剂盒(含膜)(Amresco E685-5(15X15CM)) 产品货号：美国Amresco:E685-5(15X15CM)产地：美国品牌商标：美国Amresco英文名：TOTALBLOT NORTHERN KIT WITH MEMBRANES。
地高辛标记Northern Starter 试剂盒
名称：地高辛标记Northern Starter 试剂盒产品货号： 12039672910产地： Roche供应商：英文名： DIG Northern Starter Kit保存条件：低温包含标记DIG RNA探针及进行Northern 印迹的所有必需试剂,配合DIG Wash and Block BuffeRSet方便地进行Northern 印迹;能作10个标记反应及10次检测(100mm2膜),特别适合初用者使用;标记混合物经最优化,配合提供的化学发光底物CDP-Star,能产生最高的灵敏度.Catalog # Product name / Packsize12039672910(2039672) DIG Northern Starter Kit1 kit (10 labeling reactions and detection of 10 blots of 10 x 10 cm2)ApplicationThe DIG Northern Starter Kit produces DIG-labeled RNA probes that can be used in conjunction with the supplied chemiluminescent detection reagents for northern blotting techniques.Using linearized DNA as a template, SP6, T3, or T7 RNA Polymerases are used to incorporate DIG-11-UTP into the RNA transcript. After labeling, the DIG-labeled probe is immediately ready for use in hybridization. For convenience, DIG Easy Hyb can be used for hybridization. The DIG Easy Hyb granules are easily reconstituted by adding 64 ml DEPC-treated (RNase-free) water directly to the bottle (once reconstituted, DIG Easy Hyb is stable for 1 month at room temperature). After hybridization, the hybridization solution containing the DIG-labeled RNA probe can be stored at · 15 to -25°C for future re-use (up to 1 year).Product DescriptionSensitivity and specificity: Using 1 μg of linearized template DNA, the labeling reaction typically yields 20 μg of newly synthesizedDIG-labeled RNA within 1 h. The DIG-labeled RNA probe can detect 0.1 pg of homologous DNA or RNA in a dot blot. Rare mRNAs can be detected in 0.1 μg of total RNA.Background InformationThe DIG Northern Starter Kit was designed for the novice DIG system user. It contains the reagents proven to provide successful, reproducibleresults in northern blots. Additionally, the more convenient forms of standard DIG system products are included (e.g., CDP Star, ready-to-use). The small number of reactions allows the user to gain a firm foundation using the DIG system, then “graduate” to the standard pack sizes. For optimum success, use this kit with the DIG Wash and Block Buffer Set.ContentsLabeling Mix, 40 μl, 5x conc.Transcription Buffer, 40 μl, 5x conc.SP6 RNA Polymerase, 20 μl, [20 U/μl]T7 RNA Polymerase, 20 μl, [20 U/μl]T3 RNA Polymerase, 20 μl, [20 U/μl]Anti-digoxigenin-AP, Fab fragments, 60 μl, [750 U/ml]DNase I, RNase free, 20 μl, [10 U/μl]CDP-Star, ready-to-use, 20 mlActin RNA Probe, DIG-labeled Antisense Probe, length 588 bases, [10 ng/μl]DIG Easy Hyb Granules, 2 bottles for 100 ml solution eachBlocking Solution, 2 x 100 ml, 10x conc.NORTHERN 试剂盒(含膜)(Amresco E685-5(15X15CM))产品详细参数名称：NORTHERN 试剂盒(含膜)(Amresco E685-5(15X15CM))产品货号：美国Amresco:E685-5(15X15CM)产地：美国品牌商标：美国Amresco英文名：TOTALBLOT NORTHERN KIT WITH MEMBRANES。
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只用于生命科学研究，不能用于诊断程序
仅用于体外实验
DIG DNA Labeling and
Detection Kit
采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记，碱性标记，利用NBT/BCIP
酶联免疫，随时即用。
货号：11 093 657 910
此试剂盒储存条件：-15℃到-25℃。
此试剂盒可对10ng-3μgDNA进行25次标记反应，
可检测10×10cm2面积的杂交膜50张
指导手册
1 前言
1.1 内容表
1 前言
1.1 内容表
1.2 试剂盒成分
2.介绍
2.1 产品简介
3. 操作步骤和所需材料
3.1 在你开始前
3.2 流程图
3.3 地高辛标记DNA
3.4 标记效率的确定
3.5 DNA的转移和固定
3.6 杂交
3.7 免疫检测
3.8 DNA印记的洗脱和再杂交
除了上表中列出的试剂外，你必须准备一些溶液。
在下表中，你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。
2.介绍
2.1 产品概况
实验原则
此试剂盒采用DIG(地高辛)，一种甾类半抗原，steroid hapten去标记DNA
应用
地高辛标记DNA探针可以用于：
所有类型的滤膜杂交
样品材料
至少100bp的DNA片段
线性的质粒，cos质粒或者DNA
超螺旋的DNA
实验时间
此表格列出了每一步实验所需的反应时间。
检测数量
一个试剂盒足够用于:
25个标准的标记反应，每个反应的膜板DNA不超过3μg；
并可以检测50张10×10cm2的杂交膜。
质量控制
根据操作步骤中的说明对未标记的对照DNA 【pBR328】进行标记，并按
照下面的标准检测操作方法在点杂交中用0.1pg 同源DNA点在膜上16h后成色
显影检测。
试剂盒的储存和稳定性
未开封的试剂盒在保质期内可以稳定的存放在-15℃到-25℃（保质期印在标签上）。
在干冰中运输。
一旦开封，请根据下表选择适宜的储存条件。
采用southern杂交从1μg人胎盘DNA（经BglⅡ或EcoRⅠ酶切）中检测到单拷贝基因。
3．实验步骤和所需材料
3.1 在你开始前
主要的操作要求
此表中描述了地高辛标记和检测中主要的提示：
3.3 地高辛标记DNA
介绍
随机引物标记的DNA带有地高辛-11-dUTP,这一标记采用的是地高辛高效引物试剂，这是一种含有随机六碳糖，dNTP混合物的5×浓度标记混合物，其中dNTP混合物包括碱性标记的地高辛-11-dUTP，标记级的Klenow酶和适合的反应缓冲液。
附加设备和所需试剂
水浴
冰水混合物
此表中列出了成分，储存条件和除了试剂盒成分外所需试剂的用途。
模板DNA
下表中列出了模板DNA所需特征：
如果你想要完成基因组的southern 杂交，你应该利用琼脂糖凝胶电泳将插入载体的模板DNA从载体上分离出来。
为了从凝胶中分离DNA,你可以用琼脂糖凝胶DNA提取试剂盒(the Agarose Gel DNA Extraction Kit)进行大小在400bp-5kbp范围内DNA片段的回收。
这一试剂盒既可以用于标准琼脂糖凝胶也可用于低熔点琼脂糖凝胶。
然后，不需要进一步纯化即可对DNA片段进行高效的地高辛标记。
然后标记好的探针应该用高效的PCR产物纯化试剂盒（High Pure PCR Product Purification Kit）进行纯化，以去除残留的琼脂糖颗粒。
步骤
此步骤用于标记10ng-3μg DNA 。
可以通过扩大所有成分和体积标记更大量的DNA（最高达10μg）。
表1：
此表向您展示了在适宜条件下地高辛高效引物标记的产量。
在标准反应中每
个实验采用1μg DNA 作为模板。
1小时内，大约有15%的核苷酸参与到了0.8μg
新合成的地高辛标记DNA中。
20小时后消耗了大约38%的核苷酸。
1小时和反应20小时的差异。
地高辛标记DNA的产量由放射线示踪器进行测定，并通过斑点杂交进行证实（10个独立标记实验的平均值）。
3.4 标记效率的确定
介绍
地高辛标记DNA产量的确定对于获得最佳的，具有可重现性的杂交结果十分重要。
在杂交混合物中探针浓度过高容易产生背景，而太低浓度则容易导致信号弱。
实验原则
检测标记探针质量的好方法是直接检测法。
所需附加溶液的制备
请找出下表中的成分和所需制备的试剂。
下表中的缓冲液也可以在地高辛洗涤和封阻缓冲液无DNA酶和RNA酶系列产品中获得。
试剂盒工作溶液的制备
下表中列出试剂盒工作溶液的制备方法：
稀释系列
根据合成核苷酸的预期产量开始下面的的系列稀释，标记的探针和地高辛标记的对照DNA（Vial 4）应该稀释到1ng/μL。
利用第3.3章中图表可以最好的估计出在你的探针中地高辛标记DNA的预期产量。
产量取决于起始时的模板量和孵育时间。
注意：表1中给出的产量是采用高纯度的DNA模板在最佳条件下生产出的。
按照下表中的描述对你标记的探针和你的对照DNA进行一系列的梯度稀释。
操作步骤
下面的步骤描述的是直接检测。
注意：在全部的步骤中，用足够的缓冲液体积完全覆盖膜。
结果分析
比较对照与你的标记反应产生的点的强度差异，并计算出地高辛标记DNA 的量。
如果你的探针稀释后量达0.1pg的点与对照DNA的点均可见，那么说明标记的探针达到了预期的标记效率，能够满足杂交所需的探针浓度。
3.5 DNA的转移和固定
转移方法和膜
凝胶电泳的标准操作方法，胶的变性和中和均参照参考文献中Sambrook等的文章。
胶中不加入EB会更好，因为EB可能引起背景不均匀的问题。
所有普通类型的DNA转移方法都适用于后续的地高辛杂交实验；
在实验中，在20×SSC中采用毛细管转移的方法将DNA转移到带有正电荷的尼龙膜上可以获得最好的结果。
注意：碱性转移（如在0.4M NaOH中）不适用于地高辛标记分子量marker 的转移。
固定操作
将DNA固定到膜上可以通过下面的任何一种操作：
膜的储存
请根据下表选择膜的储存方法。
3.6杂交
需要的附加设备DIG EASY Hyb
冰水浴
震荡水浴
或杂交炉
耐高温的塑料或者玻璃盒，培养皿，滚筒瓶或者可密封的塑料袋
注意：不要用敞口的容器盛放杂交缓冲液
杂交温度
适宜的杂交温度是根据GC含量和探针与靶片段的相似百分数计算获得的，具体的公式如下：
Tm =49.82+0.41(%G+C)-(600/I) {I=能够杂交上的片段的长度，以碱基对进行计算}
T opt.= Tm -（20～25℃）
这一给出数字的方程式是根据杂交溶液中含有50%甲酰胺的标准方程式计算得到的。
用于地高辛杂交液进行杂交的实际杂交温度T opt.要比计算出的Tm低20-25℃。
T opt.可以作为一个严谨的杂交温度，允许探针和靶序列之间有18%的错配。
当你的探针与靶序列的相似度低于80%时，你应该相应的降低T opt（大约每1%的错配要降低1.4℃），同时相应的调整严谨洗涤步骤（即提高SSC浓度和降低洗涤温度）。
操作步骤请参照下表进行实验。
杂交液的储存
含有地高辛标记探针的地高辛杂交液可以储存在-15到-25℃，可以反复使用几次，在每次使用前需要68℃新鲜变性10分钟。
注意：不可以将杂交液煮沸。
严谨洗涤
对于大部分DNA:DNA应用,用0.5×SSC进行严谨洗涤已经足够。
针对每个探针来说，正确的洗涤条件应该依据经验来确定。
对于人基因组DNA，采用的条件是0.5×SSC，65℃。
探针长度大于150bp且GC含量高时，应在68℃下进行洗涤。
对于长度为100bp或更短的探针，洗涤温度应该降低。
此表描述了怎样完成后面的杂交洗涤。
3.7 免疫检测
需要附加的试剂
请找出下表中的成分和所需制备的试剂。
下表中的缓冲液也可以在地高辛洗涤和封阻缓冲液无DNA酶和RNA酶系列产品中获得。
试剂盒工作溶液的制备
下表中列出试剂盒工作溶液的制备方法：
操作步骤
此表描述了完成一张100cm2膜的免疫检测方法。
注意：所有的孵育均是在15-25℃下，振荡完成的。
如果膜还需要再次与探针杂交，那么任何时候都不要让膜干。
3.8 DNA印记的洗脱和再次探针杂交
主要信息印记中的碱性标记形式的DIG-11-dUTP 能够更容易更有效的被洗脱，以用于再一次的杂交实验。
所需附加的仪器和试剂
DMF
2×SSC
0.2N NaOH, 0.1% SDS
操作步骤
此操作描述的是膜的洗脱。
注意：如果计划印记需要洗脱和再次杂交，那么膜在任何时候都不能干。
洗脱后的膜需要的储存条件
一旦膜被洗脱，可以将膜放在马来酸缓冲液中或者2×SSC中准备再用。
5 附录
7.0，用水补足体积至1L。