麻黄药材HPLC指纹图谱的研究

（过６０目筛）精密称取１．２０ ｇ，置于５０ ｍＬ量瓶中，加入甲
１６４
醇．水（１：１）的水溶液４８ ｍＬ，超声提取５０ ｒａｉｎ，放至室温，加 甲醇一水（１：１）溶液至刻度，摇匀，０．２２斗ｍ微孔滤膜过滤后 进样８斗Ｌ，见图２。
３００
３ ２００ 《 Ｅ
１００
Ｏ
０
２０
４０
６０
８０
ｔ／ｒａｉｎ
图２麻黄样品Ｉ－ＩＰＬＣ色谱图 ５．麻黄碱６．伪麻黄碱
１ ０．４０３ ０．２０４ ｌ，２０９ ０．１２６ ０．１５９ ０．８７２ ０．４０５ ０．３６２ ０．３３９ ０．７２３ ０．１２３
Ｅ触Ｓｔａｐｆ
Ｅ ｅｑｕｉｓｅｔｉｎａ Ｂｇｅ
样品号 Ｇ Ｈ
Ｉ
Ｊ
Ｋ Ｌ
样品产地 内蒙赤峰 内蒙哲里木盟
内蒙伊克昭盟
宁夏灵武
宁夏灵武 宁夏陶乐
名称 蓝麻黄 草麻黄
木贼麻黄
中麻黄
草麻黄 木贼麻黄
拉丁文
Ｅ．ｇ缸ｍ Ｒｅｇｅｌ
Ｅ ｓｉｎｉｃａ ｓｔ且ｐｆ
Ｅ ｅｑｕｉｓｅｔｉｎａ Ｂｇｅ
Ｅ ｉｍｅｒｍｅｄｉａ ＆ｈｒｅｎｋ ｅｔａ Ｍｅｙ
精密称取盐酸麻黄碱０．０４９ ０ ｇ，盐酸伪麻黄碱 ０．０５５ ８ ｇ，用甲醇－水（１：１）溶液各定容至５０ ｍＬ，摇匀，０．２２ ｐ，ｍ微孔滤膜过滤后作为混合对照品溶液，进样２ ｐ，Ｌ，见图
１。
图ｌ对照品的ＨＰＬＣ色谱图 Ｅ．麻黄碱ＰＥ．伪麻黄碱
２．３供试品溶液的制备 将麻黄草在舳℃的烘箱中干燥４ ｈ，后经捣碎机粉碎后
Ｅ．Ｓｉｎｉｃａ Ｓｔａｐｆ Ｅ．ｅｑｕｉｓｅｔｉｎａ Ｂｇｅ
２实验方法 ２．１ 色谱条件
色谱柱：ＣＬＣ ｐｈｅｎｙｌ（５ Ｉｘｍ，４．６ ｍｍ×１５０ ｍｍ）；流动相： Ａ，乙腈；Ｂ，０．１％磷酸水溶液。采用二元泵梯度洗脱：０一１２ ｒａｉｎ，Ａ：Ｂ为２：９８；１２—６５ ｍｉｎ由．２：９８至２０：８０；６５—７０ ｍｉｎ 由２０：８０至２：９８。检测波长：２１５ ｒｉｍ；参比波长：３６０ ｒｉｍ；柱 温：４０℃；流速：Ｉ．０ ｍＬ／ｍｉｎ。 ２．２对照品溶液制备
［４］ 梁晓天．常用中药基础研究（第一卷）［Ｍ］．北京：科学出版社， ２００３：５６．
麻黄药材ＨＰＬＣ指纹图谱的研究
符继红。 张丽静 （新疆大学理化测试中心，新疆乌鲁木齐８３９６４６）
关键词：麻黄；高效液相色谱法；指纹图谱
摘要：目的：采用高效液相色谱法建立麻黄药材的指纹图谱，为其品质控制提供依据。方法：采用ＲＰ—ＨＰＬＣ，ＣＬＣ ｐｈｅｎｙｌ （５ ｐＬｍ ４．６ ｍｍ×１５０ ｒａｍ）色谱柱，乙腈－０．１％磷酸水溶液梯度洗脱，流速１．０ ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长２１５ ａｍ。结果：１０批产
２００８年２月 第３０卷第２期
中成药
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｍｄｉｔｉｏｎａｌ Ｐａｔｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２００８ Ｖ０１．３０ Ｎｏ．２
仪器精密度良好，样品稳定性、重现性亦较好，说明该方法建 立的指纹图谱准确可靠，特征指纹信息丰富，专属实用，对评 价太子参药材的质量有一定的参考价值。 ３．２在ＨＰＬＣ－ＭＳ指纹图谱探索过程中，初步标定１０共有 峰，占峰总面积百分比多在８０％以上，大多为太子参特征性 指标成分，具有一定的代表性。但共有峰７、８在一些产地样 品指纹图谱中不含有或其成分含量甚少，由于共有峰７、８各 占峰总面积的百分比较小，即成分含量较低，在实际应用中 这两个峰也可不标定为共有峰。可能为太子参环肽Ｂ的共 有峰６占峰总面积的百分比高达３０％以上，为突出的指标， 故以此作为参照峰分析指纹图谱。只有样品５中参照峰峰 面积极小，指纹图谱的整体概貌差异也显著。 ３．３应用模糊聚类法、色谱峰重叠率、共有峰百分比及相似 度评价作分析比较，能全面、综合、准确地反映不同产地药材 ＨＰＬＣ．ＭＳ指纹图谱的关系。聚类分析及相似度评价均表明， 样品５、７、１０的指纹图谱差异较显著；色谱峰重叠率，除样品 ５、７、１０外，样品３、９也较低；共有峰百分比以样品５、１０较 低。综合结果显示江苏地产太子参指纹图谱相似性较好，与 外省样品尤其是样品５区别明显。
比较。选择稳定性较好，吸收强，特征明显的色谱峰为共有 提示中药必须在固定原药材产地及提取工艺的前提下，才可
峰。结果表明，不同产地的１２批药材共有峰１７个，且共有 能保证中药质量稳定可控。
峰面积之和大于总峰面积的９０％。从指纹图谱中可以看出，
表２
各批样品共有峰的相对保留时ｆｍ＇ｌ
莲峰号 鲁Ａ Ｂ
ｃ
。
Ｅ
Ｆ
Ｇ
Ｈ
·
，
Ｋ
Ｌ Ａ一。 篇
Hale Waihona Puke ！％一表 ３样…品 ”
ｌ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ １０ １１ １２ １３ １４ １５ １６ １７
‘
Ａ
Ｂ
Ｃ
Ｄ
０．９８０ ０．０６２ ０．０７９ ０．１８１ ０．９０８
１ ０．３０５ ０．１９７ １。１０８ ０．１２ｌ ０．０８１ ０．７３１ ０。３７９ ０．１８７ ０．２１８ ０．６７７ ０．１２１
各地麻黄药材指纹图谱有１７个共有峰，峰面积之和大于总峰面积的９０％。对各产地的药材进行了相似度比较，建立了
麻黄药材的ＨＰＬＣ指纹图谱。结论：采用该法可为控制麻黄药材的内在质量提供依据。
中图分类号：Ｒ２８４．１
文献标识码：Ａ
文章编号：１００１·１５２８（２００８）０２－０１６３－０４
Ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｅｐｈｅｄｒａｅ ｂｙ ＨＰＬＣ
１．０１８ ０．０５２ ０．０７５ ０．０９１ ０．９０８
１ ０．２６１ ０．０９４ ０．９６４ ０．０８８ ０．０９２ ０．６９２ ０．２０８ ０．１０４ ０．３１２ ０．６９３ ０．０５２
０．９５４ ０．０９４ ０．０７８ ０．０９５ ０．８９７
１ ０．２２４ ０．２８２ １．１９５ ０．１２６ ０．０８７ ０．７３９ ０．３０８ ０．３９７ ０．３６９ ０．７８０ ０．０８６
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ‰竹．Ｕｒｕｍｑｉ ＦＵ Ｊｉ·ｈｏｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｌｉ－ｊｉｎｇ
（Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆＰｈｙｓｉｃｓ ａｎｄ
８３００４６，吼讹）
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：Ｈｅｒｂａ Ｅｐｈｅｄｒａｅ；ＨＰＬＣ；ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ．
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＡＩＭ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ａｎｄ ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｅｐｈｅｄｒａｅ．ＭＥＴＨＯＤＳ：ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ＷａＳ ｓｅｔ ｕｐ，ｕｓｉｎｇ ＣＬＣｐｈｅｎｙｌ ｃｏｌｕｎｍ（５ ｐ，ｍ ４．６ ｍｍ× １５０ ｍｍ）ｗｉｔｈ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ａｎｄ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ（Ｏ．１％），ｔｈｅ ＵＶ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ＷａＳ ａｔ ２１５ ｎｍ．ｗｉｔｈ ａ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １．０ ｍＬ／ｍｉｎ．ＲＥＳＵＬＴＳ：Ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ １７ ｃｏｍｍｏｎ
含有多种有机胺类生物碱，其主要活性成分为麻黄碱，其次
乙腈为色谱纯，磷酸为分析纯，蒸馏水为高纯水。盐酸麻黄
为伪麻黄碱等。多用于治疗风寒感冒，胸闷喘咳，风水浮肿、
碱、盐酸伪麻黄碱对照品由Ｓｉｇｍａ公司提供，所测麻黄草样
支气管哮喘等症状旧Ｊ。指纹图谱是国际公认的控制中药或
品见表１。
天然药物质量最有效的方法之一ｐ１。本实验采用反相高效
３．４本实验初步建立太子参ＨＰＬＣ．ＭＳ指纹图谱分析方法， 为太子参药材的质量评价和ＣＡＰ实施提供依据。至于指纹 图谱标准化工作还有待于至少连续３年对不同产地产品的 考察后进一步深入研究，尚需考虑栽培条件、采收加工、贮藏 等多种因素的影响。ＨＰＬＣ—ＭＳ指纹图谱只是更多地强调不 同地产太子参的相似性，根据实验所测试的ｌＯ不同产地太 子参总离子流色谱图，其图谱的整体慨貌有一定差异，即内 含化学成分有异，这需要对太子参化学成分进行深入研究， 结合指纹谱的深化研究，探讨道地药材中特征性成分。
ｌ仪器与试药
多种中药复方，而且在国外还将麻黄提取物添加到一些功能
Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＰｌｌ００高效液相色谱仪，包括在线真空脱气机，
和保健品中。麻黄主产于我国新疆及内蒙古地区，在我国具
四元高压梯度泵，自动进样器，恒温柱箱，二极管阵列检测
有悠久的药用历史，以其神奇的价值被誉为黄金植物，麻黄
器。超声波振荡器（ＢＲＡＮＳＯＮ ＳＢ３２００．Ｔ（２０ＫＨｚ），上海）。
３．１共有峰的确定以伪麻黄碱为参照物（６号峰），其保 留时间和峰面积为ｌ，计算其它各峰的相对保留时间和相对
万方数据
２００８年２月 第３０卷第２期
中成药
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｐａｔｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２００８ Ｖ０１．３０ Ｎｏ．２
峰面积值，结果见表２和表３。不同产地麻黄药材指纹图谱 虽然都出现了相应的主成分峰，但是峰面积比值不尽相同。
参考文献：
［１］唐宝莲，蔡宝昌，刘训红，等．太子参ＨＰＬＣ指纹图谱的研究 ［Ｊ］．南京中医药大学学报，２００５，２１（３）：１７１·１７２．
［２］ 刘训红．王媚．蔡宝昌，等．太子寥ＧＣ·ＭＳ指纹图谱的初步研 究［Ｊ］．中草药，２００７，３８（１）：１１３一１１６．
［３］ 刘训红，李伟东。蔡宝昌，等．太子参的毛细管电泳指纹图谱研 究［Ｊ］．南京中医药大学学报，２００７，２３（２）：１０５—１０８．
０．９９４ ０．１１２ ０．１１７ ０．１８９ ０．８６８
ｌ ０．２２０ ０．１８２ ｌ。２２ｌ ０．０８６ ０．０７９ ０．６８６ ０。３０８ ０．２２０ ０．３８６ ０．８６７ ０．１３４
各批样品共有峰相对面积 ，
Ｅ
Ｆ
Ｇ
Ｈ
Ｉ
Ｊ
Ｋ
Ｌ
Ａｖｅｒａｇｅ
１．１０５ ０．０５４ ０．１４３ ０．１８７ ０．８５９
中成药
Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｐａｔｅｎｔ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２００８ Ｖ０１．３０ Ｎｏ．２
ｐｅａｋｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｅｐｈｅｄｒａｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ １０ ｈａｂｉｔａｔｓ．Ｓｕｍ ｏｆ ｐｅａｋ ａｒｅａｓ ｗａｓ ｌａｒｇｅｒ ｔｈａｎ ９０％ｔｏｔａｌ ａｒｅａ． Ｔｈｅ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ ｗａｇ ｃｏｍｐａｒｅｄ ａｎｄ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ Ｗａｇ ｓｅｔ ｕｐ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：Ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｈｅｒｂａ Ｅｐｋｄ－ ｒｏｅ ｃａｎ ｂｅ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ ｂｙ ＨＰＬＣ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｓ．
麻黄为麻黄科植物草麻黄Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｉｎｉｃａ Ｓｔａｐｆ．中麻黄
液相色谱法，建立麻黄药材的指纹图谱，可确保麻黄草药材
Ｅ ｉｎｔｅｒｒａｅｄｉａ Ｓｃｈｒｅｎｋ Ｃ Ａ．ｅｔ ａ１．Ｍｅｙ或木贼麻黄Ｅ ｅｑｕｉｓｅｔｉｎａ
的质量稳定、可控及临床用药的疗效。
Ｂｇｅ的干燥草质茎…。麻黄草是一味重要的草药．不仅用于
表１
样品编号及来源
样品号 Ａ Ｂ
Ｃ
Ｄ
Ｅ Ｆ
样品产地 新疆和静 新疆伊犁
名称 蓝麻黄 中麻黄
新疆和硕
中麻黄
新疆博乐
蓝麻黄
新疆和硕 新疆伊犁
草麻黄 木贼麻黄
拉丁文 Ｅ ｇ／ａｕｒａ Ｒｅｇｚｅｌ
Ｅ／ｎｔｅｒｍｅｄ／ａ Ｓｅｈｒｅｎｋ ｅｔ ｅｘ Ｍｅ，／
Ｅ／ｎｔｅｒｍｅｄ／ａ Ｓｃｈｒｅｎｋｄ ａ Ｍｅｙ Ｅ ｇ缸ｌ＾∞Ｒｅｇｅｌ
收稿日期：２００７－０５一ｌｌ 基金项目：新疆大学青年教师科研启动基金项目（ＱＮ０４０１２５） 作者简介：符继红（１９７７一），女，硕士．讲师，主要从事分析化学的研究，Ｅ－ｍａｉｌ：ｔｉｈ５１８＠１６３．ｅｏｎｌ。电话：０９９１８５８３２７８．８３１８。
１６３
万方数据
２００８年２月
‘
第３０卷第２期
２．４方法学考察
２．４．１ 精密度实验精密吸取同一供试溶液８止，连续进
样５次，测得各共有峰面积的ＲＳＤ小于２％，表明进样与仪 器的精密度良好。 ２．４．２重复性实验取同一批麻黄草样品５份。按２．３项 下方法制备供试品溶液，分别进样，各供试品溶液主要共有 峰的峰面积ＲＳＤ均小于３％，表明方法重现性良好。 ２．４．３稳定性实验取同一份供试品溶液，分别在０，ｌ。２， ６，１０，１６，２４ ｈ测定。其主要共有峰面积ＲＳＤ均小于２％，说 明供试品溶液在２４ ｈ内稳定。 ３实验结果