实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定

实验五 蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定
2020/4/15
【实验目的】
1．掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。
2．熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 3．了解卵磷脂水解后的产物，巩固对卵
磷脂组成结构的认识。
2020/4/15
【实验原理】
残渣（蛋白质、脑磷
脂） 乙醇提取
蛋黄 过滤
蛋白质 脂肪 卵磷脂 脑磷脂
蒸去乙醇
乙醇溶液
油状物
脂肪
卵磷脂
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氯仿
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丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
脂肪 卵磷脂
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【实验步骤】
1．卵磷脂的提取
（1）取1个熟的鸡蛋黄，置于研钵中研细，加 入15mL 95％乙醇溶液，研磨，搅拌均匀。减 压过滤，收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内 ，加15mL 95％乙醇溶液，研磨，过滤(滤液应 完全透明)，将两次滤液合并于蒸发皿内。
2020/4/15
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（2）将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇，至 干，得到黄色油状物。
（3）冷却后，加入2mL～3mL氯仿，搅拌使 油状物溶解。
（4）在搅拌下慢慢加入10mL～15mL丙酮， 即有卵磷脂析出，搅动使其成团粘附于 玻棒上，溶液倒入回收瓶内。
2020/4/15
2．卵磺脂的水解及其组成鉴定 （1）卵磺脂的水解
（5）磷酸的检查 取一支干净试管，加入10滴滤液和5
滴95%乙醇溶液，用硝酸酸化，加1mL 钼酸铵试剂，观察有何现象产生？最后 直接用火加热5min～10min，观察有无 黄色磷钼酸铵沉淀生成？
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注意事项
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
2020/4/15
思考题
加丙酮之前为何要加少量的氯仿？
取一支干净试管，加入提取的卵磷脂和 5mL10％氢氧化钠溶液，放入沸水浴中加热 10min，并用玻棒搅拌，使卵磷脂水解。冷却 后，在玻璃漏斗中用棉花过滤，得滤液（供以 下检查用）。
2020/4/15
（2）脂肪酸的检查 取棉花上沉淀少许，加5mL水，搅
拌，有无泡沫生成？过滤，得滤液，以 浓硝酸酸化后加入数滴10％醋酸铅溶液 ，观察有何现象?
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（3）甘油的检查 取小试管一支，加入1滴5％硫酸铜溶液，
2滴10％氢氧化钠溶液，振摇，有氢氧化铜沉 淀生成。加入水解液，沉淀溶解后，得深蓝色 甘油铜溶液。 （4）胆碱的检查
取1mL滤液，滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊 试纸检查)，加克劳特试剂1滴，有砖红色沉淀 生成。
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