实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定

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实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定

实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
取一支干净试管,加入提取的卵磷脂和 5mL10%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热 10min,并用玻棒搅拌,使卵磷脂水解。冷却后, 在玻璃漏斗中用棉花过滤,得滤液(供以下检查 用)。
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(2)脂肪酸的检查 取棉花上沉淀少许,加5mL水,搅
拌,有无泡沫生成?过滤,得滤液,以浓 硝酸酸化后加入数滴10%醋酸铅溶液,观 察有何现象?
蒸去乙醇
乙醇溶液
油状物
脂肪
卵磷脂
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氯仿
丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
脂肪 卵磷脂
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【实验步骤】
1.卵磷脂的提取
(1)取1个熟的鸡蛋黄,置于研钵中研细,加 入
15mL 95%乙醇溶液,研磨,搅拌均匀。减压过滤,
收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内,加15mL 95 %乙醇溶液,研磨,过滤(滤液应完全透明),将 两次滤液合并于蒸发皿内。
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(2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇,至 干,得到黄色油状物。
(3)冷却后,加入2mL~3mL氯仿,搅拌使 油状物溶解。
(4)在搅拌下慢慢加入10mL~15mL丙酮, 即有卵磷脂析出,搅动使其成团粘附于 玻棒上,溶液倒入回收瓶内。
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2.卵磺脂的水解及其组成鉴定 (1)卵磺脂的水解
滴95%乙醇溶液,用硝酸酸化,加1mL钼 酸铵试剂,观察有何现象产生?最后直接 用火加热5min~10min,观察有无黄色磷 钼酸铵沉淀生成?
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注意事项
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
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思考题
加丙酮之前为何要加少量的氯仿?
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卵磷脂的提取和纯化

卵磷脂的提取和纯化

剂中,在密闭的层析缸中展层。
由于各种物质的结构和性质的不同,其在吸附 剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸
附,而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被
吸附剂吸附,而易被展层剂携带至较远的距离。这
样,各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被
吸附与解吸附,就表现出不同的迁移率而得以分离, 并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。
7、显色:用喷雾器向薄层板上均匀喷洒1%碘液溶
液,热风吹干至色斑显现。
五、实验结果
1、卵磷脂收率 卵磷脂收率 = 卵磷脂粗品重量 / 蛋黄重量×100% 2、计算各组分的Rf 值 3、判断卵磷脂粗提物的组分 四种磷脂标准品的Rf值分别为:溶血卵磷脂0.18;神 经鞘磷脂0.33;卵磷脂0.65;磷脂酰乙醇胺0.96


HO
二、实验原理
(一)卵磷脂的提取和纯化
磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿,部分溶于乙醇,极难溶于丙酮; 卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂,但不溶于 丙酮; 丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。
因此,本实验用乙醇、乙醚为溶剂,丙酮为沉淀剂,干燥后
获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为 白色蜡状物 ,与空气接 触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈 黄褐色 。卵磷脂中的胆碱,
将本试 验的4个 因素依 次放在 L9表的 第1,2, 3,4列, 再将各 列的水 平数用 该列因 素相应 的水平 写出来, 就得到 上表的 试验安 排。
(二)薄层层析
薄层层析(TLC)是一种微量而快速的层析方法。 其层析是在吸附剂(固相支持物)均匀涂布的的薄 层上进行的,故称薄层层析。而待分析的样品,是 点加到薄层板的一端,然后将该端浸入适宜的展层
表1
抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平

蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测 实验报告

蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测 实验报告

实验申请实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料:鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂: 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇,均为分析纯试剂.实验仪器: 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。

辅助器材:毛细管(两支)、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒(2个)、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。

实验目的:1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。

2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。

3. 巩固抽滤等基本操作。

4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。

实验原理:卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中,蛋黄中含量较高,约10%。

可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质,从蛋黄中分离得到。

吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同,及展开剂对它们的解吸附能力的不同,使各成分达到分离。

在硅胶薄层板上,样品中的两成分是两种结构近似的染料,在展开剂四氯化碳的作用下。

在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸,再吸附,再解吸,由于极性不同从而分离,展开结束以后,会在薄层板上形成斑点,混合物中的成分得以分离。

参考文献: 刘宝全,所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋,分别将其刨壳,把四个鸡蛋的总的蛋壳,蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。

2.将所得蛋黄全部放入烧杯中,用筷子捣碎,取100ml丙酮倒入其中,搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤,收集滤渣。

3.将滤渣再次放入烧杯,取100ml丙酮倒入杯中,重复上步操作,收集滤渣。

4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。

用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇,放入烧杯中混合均匀。

5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中,搅拌30min后用布氏漏斗抽滤,收集滤液。

6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中,再取100ml混合液浸泡搅拌30min,然后抽滤,将所有滤液收集,倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发,旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。

【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定

【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定

【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质;2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法;3.通过提取和鉴定,初步了解卵磷脂的含量。

二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类,具有良好的亲水性和亲油性能。

卵磷脂是细胞膜的组成成分之一,并参与了许多生命过程的调节和控制。

由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基,因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上,形成磷双层结构和微乳液,从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。

2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄,用盐水洗净表面的蛋白质,然后压成泥,称取25g,加入160 ml乙醇和70 ml氯仿,振荡提取24h,滤去蛋黄泥,得到提取液。

用氮气吹干提取液,再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上,加热显色,可以看到卵磷脂的蓝色斑点。

通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点,可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。

三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器:薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。

药品:鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。

三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通;2.对于采用氮气吹干的提取液,需要注意气压和吹干时间,以免造成温度过高或时间过长的现象;3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制,避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常;4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间,尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定;5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。

四、实验结果分析通过本实验,我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量,并通过对标准试剂和实验结果的对比,也可以得到质量较好的卵磷脂含量。

通过初步检测,我们可以确定卵磷脂含量的多少,并初步判断蛋黄的质量。

实验五__高纯度卵磷脂的制备

实验五__高纯度卵磷脂的制备
高纯度卵磷脂的制备
一、实验目的
• 根据物质在不同溶剂中溶解能力不同原理, 学习从蛋黄中提取高纯度卵磷脂的一般方法。
二、简介
• 卵磷脂是磷脂中的一种,是生物体组织细胞的重要成分,是 构成生物体细胞膜的重要成分之一,在膜结构中起着骨架的 作用,广泛存在于动植物体内。
• 作用:是一种重要而安全的食品乳化剂,又是一种保健食品, 此外它还广泛应用于临床上心脑血管及肝、肿瘤等疾病的治 疗和作为药物载体。 • 目前,卵磷脂产品主要是从大豆油、菜籽油等植物的水化油 脚,动物的肝、脑、脾、心等组织和蛋黄中提取得到,尤其 在蛋黄中含量较多(10 %左右) 。
四、实验操作
• 1. 取鸡蛋2只,分离出卵黄,称重,记录重量,约 W1克。 • 2. 蛋黄放入一个小烧杯内,加入150 ml 95%的乙 醇溶液,充分搅碎卵黄,室温提取1小时,过滤。 • 3. 提取液加氯化钙溶液(1%蛋黄重的氯化钙,溶 于少量水),沉淀析出,离心 (9000rpm, 7 min) 分离。 • 4. 沉淀用丙酮洗涤,至白色蜡状。干燥,称重W2。 • 5. 计算产率P=W2/W1。时间过长,则呈现褐色。
• 蛋黄由51% 水分,14.8% 蛋白质,34.6%脂质(胆固醇, 甘油三酯,磷脂等)所构成。 • 利用卵磷脂可溶于乙醇的性质,将卵黄溶于乙醇时, 卵磷 脂从卵黄中转移到乙醇溶液中,分离提取出来,而且蛋白 质等某些杂质从沉淀物中除去。 • 但由于乙醇溶剂抽提时,其它脂质也一起被抽提,如甘油 三酯、甾醇、酯等。利用卵磷脂不溶于丙酮的性质,用丙 酮处理卵黄或用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂都能使卵 磷脂与其它脂质和胆固醇分离开来,故使用丙酮处理是最 有效和最常用的一种方法。
三、实验原理
• 纯卵磷脂不溶于水,易溶于乙醇、氯仿、 乙醚和二硫化碳,但不溶于丙酮。利用后 一个性质,可使它与脂肪分离。卵磷脂可 与蛋白质、糖及金属盐(如氯化镉、氯化 钙、氯化锌、胆汁盐等)形成络合物。

卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告

卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于动植物细胞膜中,对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。

本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂,了解其提取方法和鉴定技术,为进一步研究和应用提供参考。

1. 提取卵磷脂的方法。

首先,我们需要准备卵黄,将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂,使卵磷脂从卵黄中溶解出来。

然后,通过离心将上清液和沉淀分离,将上清液转移到锥形瓶中,加入等体积的0.9%氯化钠溶液,摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。

最后,将沉淀离心,得到卵磷脂。

2. 卵磷脂的鉴定。

为了鉴定卵磷脂的纯度和结构,我们可以利用薄层色谱和质谱技术。

首先,将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中,然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品,放入薄层色谱仪中进行分离。

通过比色试剂或者紫外灯照射,我们可以观察到卵磷脂的斑点,并计算Rf值来确定其纯度。

另外,质谱技术也是一种常用的鉴定方法,通过质谱仪的分析,我们可以得到卵磷脂分子的质谱图,进而确定其分子结构和质量。

3. 实验结果与讨论。

经过提取和鉴定,我们成功得到了卵磷脂,并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。

通过比色试剂和紫外灯照射,我们观察到了卵磷脂的斑点,并计算出了其Rf值,证明了其纯度。

同时,质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰,进一步确认了其结构和质量。

在实验过程中,我们也发现了一些问题,比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰,导致提取得到的卵磷脂不够纯净。

因此,在今后的实验中,我们需要进一步优化提取方法,提高卵磷脂的纯度。

4. 结论。

通过本次实验,我们成功提取和鉴定了卵磷脂,了解了其提取方法和鉴定技术。

同时,我们也发现了一些问题,为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。

希望通过我们的努力,能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。

鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定

鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定
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注意事项
1. 注意安全:本实验中的乙醚、丙酮及乙醇 均为易燃药品。氯化锌具腐蚀性。
2. 实验过程要细致,培养耐心。
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将上述加热过的溶液过滤。滤液性状:
2.磷酸的检验 取干净试管一支,加入10滴上述滤液,加入10滴95%乙
醇,摇匀,再加入10滴钼酸铵试剂,观察现象;最后将试管 放入热水浴中加热5~10min,观察有何变化。
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七、思考题
1. 卵磷酯的用途? 2. 医药工业中制备卵磷酯的方法? 3. 本实验有哪些步骤可以改进? 4. 文字与照片记录实验过程的重要性? 5. 通风橱的重要性?
并以希腊文命名为Lecithos(
卵磷脂)。
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二、卵磷脂的理化性质
• 化学名称:磷脂酰胆碱(Phosphatidylcholine) • 简称:PC • 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体,由于制
取或精制方法、储存条件不同被氧化而呈现淡黄色至棕色 。白色蜡状物质,无熔点,有旋光性,在空气中因不饱和 脂肪酸烃链氧化而变色。极易溶于乙醚及乙醇,不溶于水 和丙酮 • 磷脂酰胆碱(PC)在醇中的溶解度比磷脂酰乙醇胺( PE)及磷脂酰肌醇(PI)高,故根据溶解性能的不同使之 分离提纯。
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6、有效地化解胆结石
• 体内过多的胆固醇会发生沉淀,从而形成胆结石,胆结石90% 是由胆固醇组成。胆汁中的主要成分是卵磷脂,此外还有水份、 胆固醇、矿物质及色素等,卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、 消化及吸收,从而使胆汁中的胆固醇保持液体状。如果每天摄 取一定量的卵磷脂可以有效地防止胆结石的形成,并对已形成 的胆结石也能起到化解的作用。
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g (两吸管)蛋黄于50 mL小烧杯中

实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定

实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定
实验体会
实验过程中,我们遇到了许多困难和挑战,如提取效率不高、鉴定结果不稳定等。通过不断尝试和改 进,我们逐渐找到了解决问题的方法,提高了实验技能和解决问题的能力。
实验不足与改进建议
实验不足
在实验过程中,我们发现提取卵磷脂的 效率不够高,且鉴定结果有时不够准确 。此外,实验过程中也存在一些操作不 规范的问题。
02
常用的提取溶剂有氯仿-甲醇混合 溶剂、石油醚等,通过反复提取 可提高卵磷脂的提取率。
卵磷脂的鉴定原理
通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法等现代分析手段对提取的卵磷脂进行结构 分析,确定其化学组成和分子结构。
通过色谱法(如薄层色谱法、高效液相色谱法)对提取的卵磷脂进行纯度鉴定, 确定其中所含杂质和溶剂残留量。
讨论
根据分析结果,与前人研究进行比较, 提出可能的改进措施和未来研究方向。
结论总结
总结
对整个实验过程和结果进行总结,概述实验的主要发现和结论。
展望
提出实验的局限性和不足之处,以及对未来研究的建议和展获与体会
实验收获
通过本次实验,我们成功地从蛋黄中提取了卵磷脂,并对其进行了鉴定。实验过程中,我们掌握了卵 磷脂的提取和鉴定方法,加深了对卵磷脂性质和作用的理解。
展望
未来,卵磷脂的研究将继续深入开展,探索 其在生物体内的生理功能和作用机制。同时, 随着人们对健康饮食的关注度不断提高,卵 磷脂在食品、保健品等领域的应用也将得到 更广泛的发展。我们相信,随着研究的不断 深入和应用领域的拓展,卵磷脂将会为人类 健康事业做出更大的贡献。
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学习卵磷脂的鉴定技术
薄层色谱法
利用薄层色谱法分离和鉴定卵磷脂中 的主要成分,了解其组成和比例。

提取卵磷脂实验报告

提取卵磷脂实验报告

一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。

2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。

3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质,广泛存在于动植物细胞膜中。

它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。

卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。

本实验采用乙醇作为溶剂,通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂,并对其进行鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。

2. 实验仪器:离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。

四、实验步骤1. 取鸡蛋,去壳取蛋黄,用玻璃棒搅拌成糊状。

2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇,搅拌均匀。

3. 将混合液倒入烧杯中,用玻璃棒搅拌,使卵磷脂充分溶解。

4. 将烧杯置于冰箱中,低温处理2小时,使卵磷脂沉淀。

5. 取出烧杯,用漏斗和滤纸过滤沉淀物,得到卵磷脂粗提液。

6. 将粗提液倒入离心管中,离心分离,取下层卵磷脂沉淀。

7. 将沉淀物用乙醚洗涤,去除杂质,得到纯净的卵磷脂。

8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中,晾干至恒重。

五、实验结果与分析1. 提取结果:通过实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,得到白色蜡状物质。

2. 鉴定结果:a. 硫酸铜试验:取少量卵磷脂,加入硫酸铜溶液,振荡,若出现蓝色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有磷酸基团。

b. 氯化钠试验:取少量卵磷脂,加入氯化钠溶液,振荡,若出现白色絮状沉淀,则说明卵磷脂中含有胆碱。

六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂,能够有效提取蛋黄中的卵磷脂,提取率较高。

2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀,提高提取纯度。

3. 通过硫酸铜和氯化钠试验,对提取的卵磷脂进行了鉴定,验证了其纯度。

七、实验结论通过本实验,成功提取了蛋黄中的卵磷脂,并对其进行了鉴定。

实验结果表明,本实验方法可行,提取的卵磷脂纯度较高,为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。

八、实验注意事项1. 实验过程中,注意操作规范,避免交叉污染。

卵磷脂的提取实验报告

卵磷脂的提取实验报告

卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言:卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物,存在于生物体细胞膜中,具有重要的生理功能。

本实验旨在通过提取卵磷脂,了解其提取方法和应用。

实验材料与方法:材料:鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器:搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤:1. 取适量鸡蛋,将蛋黄与蛋清分离。

2. 将蛋黄放入搅拌器中,加入适量乙醇,搅拌均匀。

3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心,离心后分为两层,上层为乙醇层,下层为沉淀层。

4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

5. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。

6. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。

7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

8. 加入适量水,摇匀后放置静置。

9. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。

10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

11. 加入适量氯仿,摇匀后放置静置。

12. 静置后,分为两层,上层为氯仿层,下层为水层。

13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中,加入适量氯化钠,摇匀。

14. 加入适量水,摇匀后放置静置。

15. 静置后,分为两层,上层为水层,下层为氯仿层。

结果与讨论:经过多次提取,我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。

实验过程中,通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用,能够有效地分离出卵磷脂。

乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂,而氯化钠则用于调节溶液的渗透压,帮助分离。

氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂,能够与卵磷脂形成复合物,从而实现分离。

卵磷脂作为一种重要的生物大分子,具有多种生理功能。

首先,卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一,能够维持细胞膜的完整性和稳定性。

其次,卵磷脂还参与细胞信号传导,调节细胞功能。

此外,卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能,常被用作食品添加剂和药物载体。

在实际应用中,卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。

例如,可以根据不同来源的卵磷脂进行提取,以获得特定的卵磷脂种类。

蛋黄卵磷脂的提取

蛋黄卵磷脂的提取

六、注意事项


提高提取温度有利于提高产率,但是也 不宜过高。 使用丙酮、乙醚,室内应严格避免明火 且有良好的通风条件。
蛋黄卵磷脂的提取
一、实验目的

学习蛋黄卵磷脂的提取方法 学习搅拌器的使用
二、实验原理



卵磷脂是自然界中广泛分布的和所有细胞中存 在的甘油磷脂和神经鞘脂类的统称。 蛋黄的组成是51%水分,14.8%蛋白质; 34.6%的卵磷脂 使用溶剂提取卵磷脂时要注意,蛋黄是一种相 当稳定的乳状液,其中乳化剂是磷脂与蛋白质 结合的脂蛋白复合物。要充分把磷脂提取出 来,所用溶剂必须能破坏这种复合。
三、实验装置
四、试剂与仪器


试剂:氯仿,乙醇,乙醚,氯化钠溶液 (10%),无水硫酸钠,丙酮,鸡蛋 仪器:三口烧瓶,烧杯,分液漏斗,机 械搅拌器,水减压蒸馏装置。
五、实验操作


新鲜鸡蛋一个,煮熟完整取出蛋黄,置于装 有搅拌器、回流冷凝管、温度计的100ml三口 烧瓶中。加入20ml混合溶剂(氯仿:乙醇 =1:3),控制温度为35~40℃,搅拌30min。 抽滤,滤饼在同样条件下再提取一次。滤液 转入分液漏斗,以5ml氯仿淌洗抽滤瓶后一并 倒入分液漏斗,加入40ml10%氯化钠溶液洗 涤,分出氯仿层,用无水硫酸钠干燥。


干燥后氯仿层用水减压蒸馏近干(水浴加热, 温度小于40℃)。加入10ml丙酮,搅拌,冰水 冷却后分离沉淀物。倾去上层丙酮层(尽量倒 净)。用尽可能少的乙醚溶解沉淀,转入烧 杯,另用1ml乙醚淌洗圆底烧瓶后也转入烧 杯。 搅拌下缓缓加入10ml丙酮,冰水冷却后倾去丙 酮层,在真空干燥箱中使固体产物挥发掉残留 溶剂后称量,得到白色或蛋黄色蜡状卵磷脂产 品。

鸡蛋黄中磷脂的提取及分析

鸡蛋黄中磷脂的提取及分析

三、仪器和药品 仪器:研钵 布氏漏斗 蒸发皿 棉花 药品:熟鸡蛋黄 20%NaOH 溶液 10%Pb(AC)2
丙酮 碘化铋钾溶液
1%CuSO4 溶液
硫酸 95%乙醇 氯仿

四、实验步骤 1.卵磷脂的提取 (1)取熟鸡蛋蛋黄一只,于研钵中研细,先加入 10ml 95%乙醇研磨,再加入 10ml 95%
乙醇充分研磨,减压过滤,布氏漏斗上的滤渣经充分挤压滤干后,移入研钵中,再加 10ml 95% 乙醇研磨,减压过滤,滤干后,合并二次滤液,如浑浊可再过滤一次,将澄清滤液移入蒸发 皿内。
六.思考题: 1.蛋黄中分离卵磷脂根据什么原理? 2.卵磷脂可以皂化,从结构分析应作何解释? 3.卵磷脂可作乳化剂,这是为什么? 4.为什么实验中要进行减压过滤?操作时应注意哪些地方?
脂肪酸的检查:取棉花上沉淀(滤饼)少许,加 1 滴 20%氢氧化钠溶液与 5ml 水,用玻棒搅 拌使其溶解,在玻璃漏斗中用棉花过滤得澄清液,以硝酸酸化后加入 10%醋酸铅 2 滴,观察 溶液的变化 甘油的检查:取试管一支,加入 1%硫酸铜溶液 1ml(二十滴),2 滴 20%氢氧化钠溶液,振 摇,有氢氧化铜沉淀生成,再加入 1ml 水解液振摇,观察所得结果。 胆碱的检查:取水解液 1ml,滴加硫酸使其酸化(以 pH 试纸试之)加入 1 滴碘化铋钾溶液, 有砖红色沉淀生成。
(2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干,得到黄色油状物。 (3)冷却后,加入 5ml 氯仿,搅拌使油状物完全溶解。 (4)在搅拌下慢慢加入 15ml 丙酮,即有卵磷脂析出,搅动使其尽量析出(溶液倒入回收瓶 内)。 2.卵磷脂的水解及其组成分析 (1)水解:取一支干燥大试管,加入提取的一半量的卵磷脂,并加入 5ml 20%氢氧化钠溶 液,放入沸水浴中加热 10 分钟,并用玻棒加以搅拌,使卵磷脂水解,冷却后,在玻璃漏斗中 用棉花过滤。滤液供下面检查用。 (2)检查

鸡蛋黄中的卵磷脂提取和分析

鸡蛋黄中的卵磷脂提取和分析

3 产品回收率
回收纯化产物,并计算产物回收率。
表1 蛋黄脂质提取率随乙醇用量的变化:
数量/g 生蛋黄 乙醇 n-己烷 提取脂 质 1000 1000 1500 300 数量/g 数量/g 数量/g 1000 750 1500 298 1000 500 1500 265 1000 250 1500 1.9
实验分析
1 冷冻与加盐
直接冷冻蛋黄可以使蛋白质变态,有利于解除 乳化,可提高提取卵磷脂的效率,但适宜地少量 (0.01% 0.3%) 加入一些食盐(0.01%~0.3%)可以减少蛋白质的 变性。
2 溶剂的用量
从食品和医用要求考虑溶液采用乙醇和n己烷,但乙醇的量以占蛋黄量的50%~ 100%为宜,n-己烷的量以占蛋黄量的 100%~200%为宜,且只出一种溶剂效果 不好,蛋黄脂质提取率随乙醇量的增加而 提高,见表1数据。
试实验仪器和试剂
1 . 仪器 : 冰箱、离心机、超滤膜。
2 . 试剂 : 蛋黄、乙醇、n-己烷、NaCl。
实验方法
• 1. 在1000g冷冻的蛋黄中加入1500ml n-己烷和 500mL乙醇的混合溶剂,用搅拌器搅拌5min后,离 心分离(3000r/min),得到1958mL溶剂层。 •2. •2.在该溶剂层中加入200mL 3%食盐水,混合后 200mL 3% 静放,然后倾析,得到1630mL己烷层。己烷中 脂质含量为24.8%, 3.然后用日本产的超滤膜Mps-3400(划分子量为 30000~40000)用3000mL己烷对该脂质层进行定容 过滤,得到高纯度达的蛋黄卵磷脂。
实验注意事项
• 1 该法单纯使用非极性溶剂难以分离提取 • 2 使用前先对蛋黄冷冻处理。 • 3 乙醇和n-己烷以适当比例使用。

鸡蛋中卵磷脂提取鉴定

鸡蛋中卵磷脂提取鉴定

卵磷脂在药物研发中的应用
卵磷脂在药物生产中的应用
卵磷脂在药物质量控制中的应 用
在化妆品行业中的应用前景
卵磷脂在化妆品中的功效:保湿、抗氧化、抗衰老等
卵磷脂在化妆品中的安全性:无毒、无刺激、无过敏反应
卵磷脂在化妆品中的应用范围:护肤品、彩妆、洗发水、沐浴露等 卵磷脂在化妆品中的市场前景:随着消费者对健康和环保的关注度提高, 卵磷脂在化妆品中的应用前景广阔
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汇报人:
目录
鸡蛋卵磷脂提取原理
卵磷脂的溶解性:卵磷脂在油脂中 的溶解度较高,因此可以利用这一 性质将其从鸡蛋中提取出来。
卵磷脂的纯化:提取出的卵磷脂往 往含有一定的杂质,需要进行纯化 处理,常用的纯化方法包括重结晶、 柱层析等。
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卵磷脂的提取方法:通常采用有机 溶剂萃取法,将鸡蛋中的油脂溶解 后,再利用不同溶剂对卵磷脂和油 脂的选择性不同,将卵磷脂从油脂 中分离出来。
观察溶解性:卵磷脂难溶于水,易 溶于有机溶剂
化学性质鉴定
溶解性:卵磷脂溶于氯仿等有 机溶剂
皂化值:卵磷脂具有皂化特性
酸碱度:卵磷脂在酸性条件下 稳定,在碱性条件下易水解
红外光谱:卵磷脂具有特征红 外光谱峰
仪器鉴定
气相色谱-质谱联用法:鉴定 卵磷脂中脂肪酸组成的有效 方法
红外光谱法:鉴定卵磷脂中 官能团的有效方法
提取步骤
萃取:使用有机溶剂提取卵 磷脂
分离:通过离心、过滤等方 法分离出卵磷脂
预处理:去除蛋壳,收集蛋 黄
鉴定:通过色谱、质谱等方 法鉴定卵磷脂的出卵磷脂
鉴定步骤
卵磷脂鉴定:通过光谱、色谱等技 术,对卵磷脂进行鉴定
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蛋黄中卵磷脂的提取项目报告

蛋黄中卵磷脂的提取项目报告

蛋黄中卵磷脂的提取项目报告引言卵磷脂是一种重要的生物分子,广泛存在于生物体组织细胞膜中,在保护细胞、保持细胞健康和参与代谢过程等方面发挥着重要的作用。

蛋黄中富含卵磷脂,因此从蛋黄中提取卵磷脂具有重要的意义。

本报告旨在介绍卵磷脂提取的方法和操作过程,并探讨蛋黄中卵磷脂提取的优化条件。

材料和方法1. 实验材料鸡蛋黄,氯仿,乙醇,硫酸钠,硫酸铜,脱色活性炭。

2. 实验步骤(1) 蛋黄分离将鸡蛋清与蛋黄分开,将蛋黄逐个捞出并洗净。

(2) 蛋黄液的制备将洗净的蛋黄放入搅拌机中,加入适量的盐水,混合均匀,制成蛋黄液。

(3) 卵磷脂的提取取一定量的蛋黄液,按体积比例1:1加入氯仿,搅拌30秒,放置静置。

收取上层乳白色的液体,转移到新的容器中。

(4) 脱色处理加入少量的脱色活性炭,并摇晃混匀。

静置15分钟,然后用过滤器分离出脱色后的液体。

(5) 卵磷脂提取量的测定将卵磷脂溶解在正丁醇中,然后用硫酸钠和硫酸铜定量,计算出卵磷脂的提取量。

结果和讨论本实验通过以上步骤从蛋黄中成功提取卵磷脂,并计算出提取量。

但是,在实验过程中也发现了一些问题,如提取效率低、脱色效果不理想等,需要进一步优化。

提高提取效率的主要方法是改变溶剂体系、控制温度和加入乳化剂等。

比如,可以将氯仿与丙酮混合使用,或使用丙酮-水混合液代替氯仿。

此外,将温度控制在15-20℃范围内也有助于提高提取效率。

最后,加入乳化剂,如十六烷基三甲基溴化铵等也可以提高提取效率。

对于脱色效果不理想的问题,可以通过添加更多的脱色活性炭和增加脱色时间来解决。

同时,调整溶液的pH值也可能改善脱色效果。

结论本实验成功地从蛋黄中提取了卵磷脂,但提取效率和脱色效果需要进一步优化。

通过改变溶剂体系、温度控制和加入乳化剂等方法,可以提高提取效率。

此外,采用更多的脱色活性炭和延长脱色时间以及调整溶液pH值可以改善脱色效果。

鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定

鸡蛋中卵磷脂的提取鉴定

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8、消除青春痘、雀斑并滋润皮肤
• 正常人体内含有许多毒素,特别是在肠道内,当这些毒素含量 过高时,便会随着血液循环沉积在皮肤上,从而形成色斑或青 春痘。卵磷脂正好是一种天然的解毒剂,它能分解体内过多的 毒素,并经肝脏和肾脏的处理排出体外,当体内的毒素降低到 一定的浓度时,脸上的斑点和青春痘就会慢慢消失。卵磷脂还 具有一定的亲水性,并有增加血红素的功能,如果每天服用一 定量的卵磷脂,就能为皮肤提供充分的水分和氧气,使皮肤变 得光滑柔润。
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10、良好的心理调和剂
• 社会竞争日趋激烈,人们长期处在紧张的环境和种种压力下, 常患有焦虑、急躁、易怒、失眠、耳鸣等症,即植物神经紊 乱,通常被称为神经衰弱。经常补充卵磷脂,可使大脑神经 及时得到营养补充,保持健康的工作状态,利于消除疲劳, 激化脑细胞,改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等 症。
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9、预防老年痴呆症的发生
• 人随着年龄增长,记忆力会减退,其原因与乙酰胆碱含量 不足有一定关系。脑部的神经传导物质(乙酰胆碱)减少 是引起老年痴呆的主要原因,乙酰胆碱是神经系统信息传 递时必需的化合物。而且“胆碱”是卵磷脂的基本成分, 卵磷脂的充分供应将保证机体内有足够的胆碱与人体内的 乙酰结合为“乙酰胆碱”,从而成为大脑提供充分的信息 传导物质,大脑能直接从血液中摄取卵磷脂及胆碱,并很 快转化为乙酰胆碱。长期补充卵磷脂可以减缓记忆力衰退 的进程,预防或推迟老年痴呆的发生。
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以蛋黄为原料的制备工艺
(一)卵磷脂粗品的提取 取约10 g (两吸管)蛋黄于50 mL小烧杯中
搅拌加入95%乙醇30 mL
滤纸过滤
将滤液置于蒸发皿内,水浴 锅中蒸干,所得干物即为卵 磷脂粗品。

卵磷脂的制备及鉴定

卵磷脂的制备及鉴定

卵磷脂的制备及鉴定卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。

2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。

二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。

三、实验原理将卵黄中加乙醇,卵磷脂溶于乙醇溶液中,分离提取,蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。

但由于乙醇抽提时,其他脂质也一起被抽提,如甘油三酯、甾醇等。

利用卵磷脂不溶于丙酮的性质,用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂,能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。

无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀,因此,可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来,由此除去蛋白质、脂肪等杂质,再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。

四、实验仪器、试剂与材料1、仪器:离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。

溶液:取氯化锌10g,加水溶解并稀释至100ml,摇匀,2、试液:l0%的ZnCl2即得。

3、试剂与材料:氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。

五、操作步骤1、粗提:取鸡蛋卵黄适量,用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取,离心分离(300Or/min,5min),将沉淀物重复提取3次,回收上清液。

然后减压蒸馏(45℃)至近干,用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。

加入丙酮溶解,抽滤,分离出沉淀,真空干燥(40℃,3Omin),得到淡黄色的粗卵磷脂,称重。

2、精制:取一定量的卵磷脂粗品,加无水乙醇溶解,得到约10%的乙醇粗提溶液,室温搅拌0.5h。

分离沉淀物,液。

加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl2加适量冰丙酮(4℃)洗涤,搅拌lh,再用丙酮反复研洗,直到丙酮洗液为近无色止,得到白色蜡状的精制卵磷脂;干燥;称重。

3、鉴定:(1)薄层色谱分析:取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液,用GF254硅胶板以氯仿:甲醇:水(65:25:4)为展开剂,展开,取出,干燥,碘蒸气显色。

(2)紫外吸收光谱测定:将一定量卵磷脂制成0.l%无水乙醇溶液,照紫外分光光法在190~40Onm处测定,卵磷脂的紫外最大吸波长在215nm。

卵磷脂的提取与TLC检测

卵磷脂的提取与TLC检测

实验项目:蛋黄中卵磷脂的提取与TLC检测
实验原料:鲜鸡蛋、纯化卵磷脂
实验试剂:
实验仪器:旋转蒸发仪、恒温水浴箱、真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平烘箱、固定厚度涂布器、方形层析缸、玻璃板、研钵
辅助器材:毛细管、玻璃棒、滤纸、漏斗、10ml量筒、50ml量筒、烧杯,圆底烧瓶等
操作步骤: 操作说明及结果纪录:
取10.0g 鸡蛋黄
蛋黄用30ml 丙酮(
pH8)搅拌1h
过滤
后,滤渣用丙酮洗2-3次 用30ml 乙醇-石油醚(3:1)混合试剂搅拌浸 提1h 抽滤 旋转蒸发(40℃) 收集产品,进行检测 TLC 检测 制板 称取 20 g 孔径为 6 nm 的硅胶 60, 用 45mL 1- 1mol ·L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 用涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。

点样
用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。

展开
将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约 6 cm/h当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。

显色
将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现。

卵磷脂的提取、鉴定和应用 实验指导书

卵磷脂的提取、鉴定和应用 实验指导书

卵磷脂的提取、鉴定和应用实验指导书一、实验目的通过实验,进一步加深对卵磷脂特性和用途等相关知识的理解,掌握卵磷脂的提取和鉴定方法。

二、实验原理卵磷脂是甘油磷脂中的一种,由磷酸、脂肪酸、甘油及胆碱组成:其中,R1为硬脂酸或软脂酸;R2为油酸、亚油酸、亚麻酸或花生四烯酸等不饱和脂肪酸。

卵磷脂广泛分布于动植物中,在植物种籽和动物的脑、神经组织、肝、肾上腺以及红细胞中含量较多;蛋黄中含量最丰富,高达8~10%,因而得名。

卵磷脂可溶于乙醚、乙醇等,因而可以利用这些溶剂进行提取。

本实验以乙醚作为溶剂提取生蛋黄中的卵磷脂。

通常粗提取液中含有中性脂肪和卵磷脂,两者浓缩后通过离心进行分离,下层为卵磷脂。

新提取的卵磷脂为白色蜡状物,遇空气即氧化变成黄褐色,这是由于其中不饱和脂肪酸被氧化所致。

卵磷脂的胆碱基在碱性溶液中可以分解为三甲胺,三甲胺有特异的鱼腥臭味,可以此鉴别之。

卵磷脂在食品工业中广泛用作乳化剂,抗氧化剂和营养添加剂。

三、实验材料、试剂和仪器鸡蛋;花生油;乙醚;10%NaOH;磁力搅拌器;离心机等。

四、实验内容1、卵磷脂的提取取15g生鸡蛋黄(通常含水50%,脂类32%,蛋白质16%,灰分2%),于150mL三角锥瓶中加入40mL乙醚,放入磁力搅拌器,室温下搅拌提取15分钟,然后静置30分钟,上层清液于带棉花塞到50mL烧杯中过滤,往残渣中再加入15mL乙醚,搅拌提取5分钟。

第二次提取液过滤后,与第一次提取液合并,于60o C热水浴蒸去乙醚,将残留物倒入烧杯中,约可得5g粗提取物。

粗提取物进行离心(4000转/分)10分钟,下层为卵磷脂,约得2.5~2.8g。

卵磷脂可以通过冷冻干燥得无水的产物。

2、卵磷脂的鉴定取以上提取物约0.1g,分为两份于试管内加入10% 氢氧化钠溶液2mL,水浴加热数分钟,嗅之是否有鱼腥味,以确定是否为卵磷脂。

3、乳化作用在两支试管中各加入3~5mL水,一支加卵磷脂少许,溶解后滴加5滴花生油;另一支也滴入5滴花生油,加塞极力振摇试管,使花生油分散。

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(5)磷酸的检查 取一支干净试管,加入10滴滤液和5
滴95%乙醇溶液,用硝酸酸化,加1mL 钼酸铵试剂,观察有何现象产生?最后 直接用火加热5min~10min,观察有无 黄色磷钼酸铵沉淀生成?
2020/4/15
注意事项
乙醇、氯仿、丙酮用量一定要控制好
2020/4/15
思考题
加丙酮之前为何要加少量的氯仿?
蒸去乙醇Biblioteka 乙醇溶液油状物脂肪
卵磷脂
2020/4/15
氯仿
丙酮
油状物
氯仿溶液
卵磷脂
脂肪
脂肪 卵磷脂
2020/4/15
【实验步骤】
1.卵磷脂的提取
(1)取1个熟的鸡蛋黄,置于研钵中研细,加 入15mL 95%乙醇溶液,研磨,搅拌均匀。减 压过滤,收集滤液。将漏斗的残渣移入研钵内 ,加15mL 95%乙醇溶液,研磨,过滤(滤液应 完全透明),将两次滤液合并于蒸发皿内。
实验五 蛋黄中卵磷脂的提 取及鉴定
2020/4/15
【实验目的】
1.掌握从动物中提取有效成分的一般原 理和方法。
2.熟悉从蛋黄中提取卵磷脂的操作。 3.了解卵磷脂水解后的产物,巩固对卵
磷脂组成结构的认识。
2020/4/15
【实验原理】
残渣(蛋白质、脑磷
脂) 乙醇提取
蛋黄 过滤
蛋白质 脂肪 卵磷脂 脑磷脂
2020/4/15
2020/4/15
(2)将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇,至 干,得到黄色油状物。
(3)冷却后,加入2mL~3mL氯仿,搅拌使 油状物溶解。
(4)在搅拌下慢慢加入10mL~15mL丙酮, 即有卵磷脂析出,搅动使其成团粘附于 玻棒上,溶液倒入回收瓶内。
2020/4/15
2.卵磺脂的水解及其组成鉴定 (1)卵磺脂的水解
2020/4/15
(3)甘油的检查 取小试管一支,加入1滴5%硫酸铜溶液,
2滴10%氢氧化钠溶液,振摇,有氢氧化铜沉 淀生成。加入水解液,沉淀溶解后,得深蓝色 甘油铜溶液。 (4)胆碱的检查
取1mL滤液,滴加浓硫酸中和(以蓝色石蕊 试纸检查),加克劳特试剂1滴,有砖红色沉淀 生成。
2020/4/15
取一支干净试管,加入提取的卵磷脂和 5mL10%氢氧化钠溶液,放入沸水浴中加热 10min,并用玻棒搅拌,使卵磷脂水解。冷却 后,在玻璃漏斗中用棉花过滤,得滤液(供以 下检查用)。
2020/4/15
(2)脂肪酸的检查 取棉花上沉淀少许,加5mL水,搅
拌,有无泡沫生成?过滤,得滤液,以 浓硝酸酸化后加入数滴10%醋酸铅溶液 ,观察有何现象?
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