酪蛋白的制备(精)
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2. 抽滤装置(布氏漏斗,抽滤瓶,圆形抽滤管, 橡皮塞)
3. 40℃水浴 4. 通风柜
试剂材料
1. 牛奶 ( 40℃预热 ) 2. 95%乙醇 3. 无水乙醚 4. 0.2M pH4.7HAC-NaAC 缓冲液 ( 40℃预热 ) 5. 乙醇-乙醚混合液(V/V=1/1) 1000mL
Βιβλιοθήκη Baidu 操作
1. 将牛奶和pH4.7HAC-NaAC 缓冲液预加热至40℃, 2. 用离心管取50mL的牛奶再缓缓加入50mL的pH4.7HAC-NaAC
缓冲液,不时搅拌均匀,将悬浮液冷至室温,离心,3500r/min, 15min,弃上清,得酪蛋白粗制品。 3. 用蒸馏水洗沉淀(不要搅散)3次,再次离心,3000r/min, 10min,弃上清。 4. 在沉淀中加入约20mL95%乙醇,搅拌片刻,将悬浊液全部转移 到布氏漏斗中抽滤。用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次,最后用无水 乙醚洗沉淀2次,抽干。 5. 将沉淀摊开在表面皿上,风干(或烘干),得酪蛋白纯品。 6. 称量,计算含量和得率。 含量: 酪蛋白 g/100mL牛乳 (g%) 得率: 测得含量/理论含量×100% (理论含量为 3.5g/100mL牛乳)
酪蛋白的制备
目的
学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法
原理
牛乳中主要蛋白质是酪蛋白,含量35g/L, 酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,pI为 4.7。利用等电点时溶解度最低原理,将 牛乳的pH调至4.7,酪蛋白沉淀下来,再 用乙醇和乙醚洗涤沉淀除去脂类杂质可得 纯的酪蛋白。
主要器材设备
1. 离心机, 天平,滤纸(Φ=9cm),打孔器, 表面皿