虎杖提取物抑菌作用的研究

2 结果与分析
用。
2.1 抑菌效果的测定 虎杖提取物与苯甲酸钠抑菌效果的比较见表 1、
表 2、表 3。
2.2 虎杖提取物对各供试菌的最低抑菌浓度（MIC） 最低抑菌浓度（MIC）的测定结果见表 4。
表 4 虎杖提取物 A、B 的最低抑菌浓度（MIC）
A
B
表 1 虎杖提取物 A 的抑菌效果 单位：mm
摘 要：测试虎杖提取物对食品腐败菌的抑制作用，与苯甲酸钠的抑菌效果相比较，并选择有代表性的食品进行防腐试验。 确定了虎杖提取物的最低抑菌浓度。
关键词:虎杖; 提取物; 抑菌作用
Study on Bacteriostatic Effect of Extracts from Polygonum cuspidate
Liu Xiaorong (Department of Food &Bioengineering, Guangdong Industry Technical College, Guangzhou,510300)
Abstract: The bacteriostatic effect of extracts from Polygonum cuspidate with a series of bacterium and fungi was studied, and compared with sodium benzoate. Antimicrobial effect on typical food was experienced. Minimum Inhibition Concentration (MIC) of the extracts was determined.
虎杖甙能抗细菌，其甙元白藜芦醇能抗真菌，其作用 机制尚不清楚[3]。鞣质有收敛作用，能使微生物原生 质凝固而具有抗菌作用[9]。
表 5 虎杖提取物对食物的防腐试验结果
食品 处理 A
茄子 B 对照 A
辣椒 B 对照
A
质地 无变化 无变化 腐烂变质 无变化 无变化 变软,开始 腐烂 无变化
色泽 无变化
微黑 黄色 无变化 微黑
青色较透明
黄色浑浊
微黑较青
黑青色
黄黑浑浊 微黄 微黄
黄黑浑浊
参考文献
1 李志澄编著. 蔬菜现代贮藏技术.上海：科学技术出版 社,1985.2
2 约翰•霍索恩.食品科学基础. 成都：四川大学出版社， 1990.71
3 朱廷儒等. 中药虎杖抗菌有效成分的研究. 中草药， 1985（3）
4 孙文基等. 天然药物成分提取分离与制备. 北京：中国 医药科技出版社，1994
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Vol.19 No3(总 76)
所得结果相吻合。同时从 2.1、2.2 的结果推出抗霉 DNA 结合，抑制了 DNA、RNA 和蛋白质的生物合成[5]。
菌成分主要存在于提取物 A 中。 2.3 防腐试验
提取物对茄子、辣椒、猪肉和桃子的防腐见表 5。
5 中国医学科学院药物研究所等编. 中药志（第一册）. 北
3 问题与讨论
3.1 关于虎杖的开发价值 试验结果表明，虎杖提取物对常见食品污染菌的
抑制作用较好，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制 作用显著，其作用超过苯甲酸钠。因此，虎杖可以开 发用作天然食品防腐剂。 3.2 关于虎杖的抑菌机理
虎杖中蒽醌衍生物的抑菌作用很强，可能是它与
A（%）
10
5
3
1
金黄色葡萄球菌 23.9 19.0 17.7 13.6
大肠杆菌
19.1 16.2 13.8 11.8
木菌
-
-
-
-
毛菌
18.4 14.9 12.8 11.6
供试菌种
金黄色葡萄 球菌
大wk.baidu.com杆菌 木菌 毛菌
MIC% 0.6 0.8 0.8
抑菌圈直 径 mm 9.0 9.8
9.4
MIC%
抑菌圈直 径 mm
将猪肉、茄子切成小块，分成若干份，煮熟；将 青辣椒、桃子小心洗净，晾干。分别加入提取物 A、 B 和凉开水，于 37℃下放置 3 天，肉眼观察食品变化 情况[7,8]。
B（%）
10
5
3
1
金黄色葡萄球菌 22.0 16.3 14.0 12.8
大肠杆菌
22.0 17.0 15.0 14.0
木菌
16.0 13.8 12.5 11.2
虎杖（Polygonum cuspidatum），是蓼科蓼属多 年生草本植物。虎杖在我国有较为广泛的分布，常见 于湖南、湖北、山东、陕西、河南、江西、福建、台 湾等地，此外，朝鲜、日本也有分布。虎杖有缓泻、 去瘀通经、解毒等作用，有收敛、止血的功效。民间 用于痹痛、湿热黄疸、经闭、瘕症、咳嗽痰多、水火 烫伤、跌打损伤、痈肿疮毒等。将虎杖开发成食品防 腐剂其安全性很有保障。为进一步开发利用这一资 源，本试验对虎杖提取物的抑菌效果作一些研究，以 讨论其作为天然防腐剂的前景。
取提取物 A、B 各 1ml，各加 10%NaOH 液 1ml，两 者均呈樱红色，加数滴 H2O2 液加热，红色不褪，再加 稀 HCl 使呈酸性，颜色即褪。证明提取物 A、B 中均 有蒽醌化合物[5]。 1.2.4 管碟法测定抑菌作用
将真菌培养基和细菌活化培养基制成下层平板 （培养皿直径为 12cm），取各种待试菌悬液 1ml 与冷 却至 45℃的相应培养基 20ml 摇匀制成上层含菌平 板，平稳、等距离放置灭菌牛津杯，于其中滴加不同 浓度的虎杖提取物，对照加 0.85%的生理盐水。每菌 3 个重复。霉菌 28℃培养 3 天，细菌 37℃培养 1 天， 移去牛津杯，精确量取各抑菌圈直径[6]。 1.2.5 防腐试验
黄色
无变化
猪肉 B
无变化
微黄
对照 变粘滑 A 变软,有褐斑
桃子 B 变软,有褐斑 对照 严重腐烂
黄黑色 黄褐色
褐色 深褐色
气味 无异味 微馊 生馊 无异味 微馊
生馊
无异味
微馊
生馊 馊
重馊 恶臭
菌况 未长 少量 长满 未长 少量
大量
未长 较厚菌
膜 长满 少量 大量 长满
悬液透明度 青色透明
青色较透明 黄色浑浊 青色透明
虎杖根茎干燥，粉碎→乙醇回流提取 4 次→减压浓缩，
回收乙醇→乙醚振荡萃取 3 次→乙醚液浓缩→提取物 A
↓ 热水浸泡残渣→水溶液过夜→活性炭脱色过滤→滤 液浓缩→提取物 B 。 [3,4]
1.2.2 菌悬液的制备 将上述各种待试菌用相应斜面培养基活化。以无
菌生理盐水配制成 106~107cfu/ml 的菌悬液，备用。 1.2.3 虎杖中蒽醌类化合物的定性鉴定
以上菌种均为本院微生物实验室保存。 1.1.4 培养基
细菌活化培养基：蛋白质 5g,酵母膏 3g,牛肉膏 1.5g,葡萄糖 1g,磷酸二氢钾 1.32g,磷酸氢二钾 3.5g 琼脂 20g,氯化纳 3.5g,水 1000ml。
细菌测试培养基：蛋白质 6g,酵母膏 3g,牛肉膏 1.5g,琼脂 20g,水 1000ml。
注：“-”表示无抑菌作用
结果表明，提取物 A、B 对供试细菌和青霉都有 抑制作用，对曲霉和根霉都无明显抑菌效果，A 对毛 霉、B 对木霉有抗性。表明虎杖提取物对细菌的抑制 效果好，且明显优于苯甲酸钠；而对霉菌仅有部分抑 制，抑菌效果不如苯甲酸钠；此外，提取物 A 对金黄 色葡萄球菌有较强的抑制作用，而 B 对大肠杆菌有较 强的抑制作用。同时也表明，提取物对细菌有明显抑 制作用的原因之一，可能是虎杖中蒽醌类化合物的作
1 材料与方法
1.1 材料
收稿日期:2003-4-10
1.1.1 虎杖：购自中药店 1.1.2 供试食品：新鲜猪肉（肥瘦各半）、茄子、青 辣椒和桃子。 1.1.3 供试菌种
细菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureu ); 大肠杆菌(Escherichia coli);真菌:黑根霉(Rhizopus nigricans);高大毛霉(Mucor mucedo);黑曲霉 (Aspergillus niger); 常 见 青 霉 (Penicillium frequentans) ;绿色木霉 (Trichoderma viride)
Key words: polygonum; cuspidate; extracts; bacteriostatic effect
食品腐败的主要因素之一是微生物的侵袭，我国 每年因此而损失的粮食约为总产量的 5%[1]。食品生产 加工和贮藏过程中，防腐剂历来有着重要的应用价 值。由于合成食品添加剂往往具有一定的毒副作用， 人们越来越倾向于选择天然物质作为食品防腐剂[2]。 目前，筛选具有抑菌作用的天然食品保鲜剂已成为国 内外研究备受瞩目的热点。
《广州食品工业科技》
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中图分类号：R282.71；文献标识码：A ；文章篇号:1007-2764(2003)03-0007-18
虎杖提取物抑菌作用的研究
Vol.19 No3(总 76)
刘晓蓉 （广东轻工职业技术学院食品与生物工程系 广州 510300）
真菌培养基:马铃薯 200g,葡萄糖 20g,琼脂 20g, 水 1000ml。 1.1.5 虎杖提取物 1.1.6 菌悬液 1.2 方法
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1.2.1 虎杖提取物的制备
表 2 虎杖提取物 B 的抑菌效果 单位：mm
京：人民出版社，1972 6 周德庆主编. 微生物学实验手册. 上海科技出版社，
1986：283~290 7 邓芳席，黄祖法. 林檎叶抑菌作用研究. 食品科学，1999，
20（8）：64~66 8 郭爱莲，吴重华. 几种香辛料防腐作用的初步研究. 食品
科学，1995，16（5）：7~10. 9 张继杰主编. 中药化学（第二版）. 北京：人民卫生出版
毛菌
-
-
-
-
根菌
-
-
-
-
青菌
14.1 12.7 10.0 8.7
曲菌
-
-
-
-
表 3 苯甲酸钠的抑菌效果 单位：mm
苯甲酸钠 A（%） 10
5
3
1
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 木菌 毛菌 根菌 青菌 曲菌
17.1 15.3 2.4 10.0 17.9 14.8 14.0 11.2 27.1 24.4 15.7 13.0 29.2 23.0 14.1 11.5 27.9 20.5 14.0 11.8 26.8 21.1 15.8 12.9 27.6 23.8 14.9 11.9
0.7
8.7
0.7
8.9
0.8
8.5
8.5
根菌
-
-
-
-
青菌
0.7
8.6
2.5
青菌 曲菌
22.3 19.1 13.8 11.1
-
-
-
-
由表 4 可见，提取物对细菌的 MIC 要小于霉菌。 A 对金黄色葡萄球菌有最低的抑制浓度，而 B 对金黄 色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果基本一致，与 2.1
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