甾体激素类药物
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
第五章 甾体激素类药物的分析
B
1
一、基本结构与分类
1. 具有环戊烷并多氢菲母核
可分为：
肾上腺皮质激素类
雄性激素及蛋白同 化激素类
孕激素类
雌性激素类
B
2
2. 肾上腺皮质激素类 代表药物： 氢化可的松、醋酸地塞米松等
主要活性基团 △4 – 3 – 酮
C17 – α – 醇酮基
性质 UV、与羰基试剂反应
➢溶剂的选择：
异烟肼、盐酸
无水乙醇或无水甲醇
➢酸、异烟肼的量：
盐酸：异烟肼 = 2：1
酸度↑
异烟肼盐↓
酸度↓
A↓
样品：异烟肼 = 1：8
B
12
➢水分、O2与光线的影响：
含水量↑
腙水解↑
A↓
溶剂不挥发、不吸收水分时
➢温度的影响：
O2与光线无影响
温度↑
反应速度↑
B
13
2. 四氮唑比色法 1）原理
强还原性
还原 性
B
3
3.雄性激素及蛋白同化激素类 代表药物： 甲睾酮、苯丙酸诺龙等
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 – β – 羟基
性质
UV、与羰基试剂反应
可成酯
B
4
4. 孕激素类 代表药物：黄体酮等
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 –甲酮基
性质 UV、与羰基试剂反应 与亚硝基铁氰化钠反应
λmax=465
λmax=515
B
18
Baidu Nhomakorabea
2）改良的Kober反应：
使用铁-酚试剂：
[(NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚] 也被称为：Kober反应---铁-酚试剂法 加强红色产物的稳定性；消除反应产生的荧光
3）特点：
优点 较高的灵敏度 具有一定的选择性
缺点 非化学计量反应
B
19
规定杂质斑点颜色
2）HPLC法
自身对照法
B
10
四、含量测定
包括HPLC法、紫外分光光度法、比色法等 1.异烟肼比色法
1）原理： C3-酮基
2）操作：
异烟肼
HCl
异烟腙
对照液 蒸干乙醇 CHCl3溶 异烟肼 55℃ 415nm
供试液
40min 测定A
B
11
3）注意事项： ➢反应速度和专属性：
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O， C11= O 不反应 C3-酮基有一定专属性
C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 C16无论何种取代基ν↓ ➢溶剂、水分的影响
含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 无水乙醇
含水30%→几无反应
醛 → A↑
无醛无水乙醇
B
15
➢O2与光线的影响
反应过程 反应产物
光敏感 O2影响产物颜 色和稳定性
避光，快速 充N2 ，密封
肾上腺皮质激素类 C17-α-醇酮基
C酮1基7-α-醇+
红四氮唑RT/TTC 蓝四氮唑BT
OH-三苯甲潜（红色） 还双原甲潜（兰色）
ChP采用TTC（RT） USP采用 BT
2）操作
对照液 TTC 氢氧化四丁基铵 25 ℃暗处 485nm
供试液
45min 测定A
B
14
3）注意事项
➢基团对反应速度的影响
B
8
三、杂质检查
1.主要的特殊杂质包括其他甾体、硒等 2. 其他甾体：
与标示药物结构不同的甾体化合物 来源：原料、中间体、异构体、降解产物
特点：可能存在多个甾体杂质；结构类似
方法： TLC法、 HPLC法
B
9
1）TLC法：
➢多采用自身对照法
➢显色方法：四氮唑盐、硫酸－乙醇
➢判定方法：
规定杂质斑点数目
➢碱的影响 反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序： 皮质激素 四氮唑 碱
B
16
➢温度和反应时间 t℃↑→ν↑ t℃↑ →甲潜分解↑
ChP 25℃ 40～45′ BP 30℃ 1h
B
17
2. Kober反应比色法 1） Kober反应原理：
雌 激 H S △ O 乙 素 黄 醇 H △色 O 桃
3.官能团反应
1） C17 – α – 醇酮基：
Fehling试剂
+ 氨制AgNO3
四氮唑盐 B
Cu2O（红色） Ag（黑色） 显色
7
2）酮基
+羰基试剂
显色（腙）
常见羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、
硫酸苯肼
3）甲酮基
+Na2[Fe(CN)5NO] 4）酚羟基
显色
+重氮苯磺酸盐 红色（偶氮染料）
B
5
5. 雌激素类 代表药物： 雌二醇、炔雌醇等
主要活性基团
性质
A环为苯环,3–OH UV、与重氮苯磺酸盐反应
C17 –羟基 C17 –乙炔基（部分）
可成酯 与AgNO3反应
B
6
二、鉴别
1.与强酸的呈色反应
与H2SO4、H3PO4、HClO4和HCl等反应后呈色 以H2SO4用的最广
2.制备衍生物测定熔点
B
1
一、基本结构与分类
1. 具有环戊烷并多氢菲母核
可分为：
肾上腺皮质激素类
雄性激素及蛋白同 化激素类
孕激素类
雌性激素类
B
2
2. 肾上腺皮质激素类 代表药物： 氢化可的松、醋酸地塞米松等
主要活性基团 △4 – 3 – 酮
C17 – α – 醇酮基
性质 UV、与羰基试剂反应
➢溶剂的选择：
异烟肼、盐酸
无水乙醇或无水甲醇
➢酸、异烟肼的量：
盐酸：异烟肼 = 2：1
酸度↑
异烟肼盐↓
酸度↓
A↓
样品：异烟肼 = 1：8
B
12
➢水分、O2与光线的影响：
含水量↑
腙水解↑
A↓
溶剂不挥发、不吸收水分时
➢温度的影响：
O2与光线无影响
温度↑
反应速度↑
B
13
2. 四氮唑比色法 1）原理
强还原性
还原 性
B
3
3.雄性激素及蛋白同化激素类 代表药物： 甲睾酮、苯丙酸诺龙等
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 – β – 羟基
性质
UV、与羰基试剂反应
可成酯
B
4
4. 孕激素类 代表药物：黄体酮等
主要活性基团 △4 – 3 – 酮 C17 –甲酮基
性质 UV、与羰基试剂反应 与亚硝基铁氰化钠反应
λmax=465
λmax=515
B
18
Baidu Nhomakorabea
2）改良的Kober反应：
使用铁-酚试剂：
[(NH4)2Fe(SO4)2 + H2SO4 + H2O2 + 苯酚] 也被称为：Kober反应---铁-酚试剂法 加强红色产物的稳定性；消除反应产生的荧光
3）特点：
优点 较高的灵敏度 具有一定的选择性
缺点 非化学计量反应
B
19
规定杂质斑点颜色
2）HPLC法
自身对照法
B
10
四、含量测定
包括HPLC法、紫外分光光度法、比色法等 1.异烟肼比色法
1）原理： C3-酮基
2）操作：
异烟肼
HCl
异烟腙
对照液 蒸干乙醇 CHCl3溶 异烟肼 55℃ 415nm
供试液
40min 测定A
B
11
3）注意事项： ➢反应速度和专属性：
C3= O ＞ C17= O 、 C20= O， C11= O 不反应 C3-酮基有一定专属性
C11= O＞ C11－OH C21－OH＞ C21-酯 C16无论何种取代基ν↓ ➢溶剂、水分的影响
含水量＞5%→ν↓ 含水10%→A↓10% 无水乙醇
含水30%→几无反应
醛 → A↑
无醛无水乙醇
B
15
➢O2与光线的影响
反应过程 反应产物
光敏感 O2影响产物颜 色和稳定性
避光，快速 充N2 ，密封
肾上腺皮质激素类 C17-α-醇酮基
C酮1基7-α-醇+
红四氮唑RT/TTC 蓝四氮唑BT
OH-三苯甲潜（红色） 还双原甲潜（兰色）
ChP采用TTC（RT） USP采用 BT
2）操作
对照液 TTC 氢氧化四丁基铵 25 ℃暗处 485nm
供试液
45min 测定A
B
14
3）注意事项
➢基团对反应速度的影响
B
8
三、杂质检查
1.主要的特殊杂质包括其他甾体、硒等 2. 其他甾体：
与标示药物结构不同的甾体化合物 来源：原料、中间体、异构体、降解产物
特点：可能存在多个甾体杂质；结构类似
方法： TLC法、 HPLC法
B
9
1）TLC法：
➢多采用自身对照法
➢显色方法：四氮唑盐、硫酸－乙醇
➢判定方法：
规定杂质斑点数目
➢碱的影响 反应应在强碱性（pH13.75）条件下进行 以氢氧化四甲基铵的结果最佳 加入顺序： 皮质激素 四氮唑 碱
B
16
➢温度和反应时间 t℃↑→ν↑ t℃↑ →甲潜分解↑
ChP 25℃ 40～45′ BP 30℃ 1h
B
17
2. Kober反应比色法 1） Kober反应原理：
雌 激 H S △ O 乙 素 黄 醇 H △色 O 桃
3.官能团反应
1） C17 – α – 醇酮基：
Fehling试剂
+ 氨制AgNO3
四氮唑盐 B
Cu2O（红色） Ag（黑色） 显色
7
2）酮基
+羰基试剂
显色（腙）
常见羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼、异烟肼、
硫酸苯肼
3）甲酮基
+Na2[Fe(CN)5NO] 4）酚羟基
显色
+重氮苯磺酸盐 红色（偶氮染料）
B
5
5. 雌激素类 代表药物： 雌二醇、炔雌醇等
主要活性基团
性质
A环为苯环,3–OH UV、与重氮苯磺酸盐反应
C17 –羟基 C17 –乙炔基（部分）
可成酯 与AgNO3反应
B
6
二、鉴别
1.与强酸的呈色反应
与H2SO4、H3PO4、HClO4和HCl等反应后呈色 以H2SO4用的最广
2.制备衍生物测定熔点