约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii)的分离及其聚磷特性的研究

约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii)的分离及其聚磷特

性的研究

连丽丽;姜华;朱昌雄

【摘要】采用定性、定量相结合的方法,从城市污水中筛选到一株高效聚磷菌(CH-1),经生理生化特征及16 rDNA序列分析,鉴定该菌株为不动杆菌属的约氏不动杆菌(Acinetobacter johnsonii).进行了该菌株的生长曲线、含磷培养液的pH、磷酸盐浓度变化及去磷效果等测定.结果表明:该菌在培养6～8 h时繁殖量达到最大(0.54 mg/L),培养液pH值达到最高(8.88),而磷酸盐浓度降至最低(1.08 mg/L).好氧条件下,含磷培养液培养72h后,培养液中磷浓度由10 mg/L降至3.476 mg/L,去磷率高达65.24%.CH-1菌处理模拟废水的除磷率高达68.88%,具有较强的聚磷能力.

【期刊名称】《辽宁农业科学》

【年(卷),期】2009(000)002

【总页数】4页(P18-21)

【关键词】聚磷菌;筛选;聚磷特性

【作者】连丽丽;姜华;朱昌雄

【作者单位】辽宁师范大学生命科学学院,辽宁,大连,116029;辽宁师范大学生命科学学院,辽宁,大连,116029;中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所,北

京,100081

【正文语种】中文

【中图分类】农业科学

辽宁农业科学 2009(2)：18~21 LiaoningAgriculturalSciences文章编号：1002-1728( 2009) 02-0018-04约氏不动杆菌（ Acinetobacterjohnsonii ）的分离及其聚磷特性的研究连丽丽1 ，姜（

1 ．辽宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029 ；京 100081 ）华 1 ，朱昌雄

2 2．中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所，北摘要：采用定性、定量相结合的方法，从城市污水中筛选到一株高效聚磷菌 (CH-1) ，经生理生化特征及16rDNA 序列分析，鉴定该菌株为不动杆菌属的约氏不动杆菌（ Acinetobacterjohn,sonii ）。进行了该菌株的生长曲线、含磷培养液的 pH 、磷酸盐浓度变化及去磷效果等测定。结果表明：该菌在培养 6 —8h时繁殖量达到最大(0.54mg/L) ，培养液 pH 值达到最高(8.88) ，而磷酸盐浓度降至最低 (1.08mg/L) 。好氧条件下，含磷培养液培养 72h 后，培养液中磷浓度由 10mg/L 降至 3.476mg/L ，去磷率高达 65.24% 。 CH-I 菌处理模拟废水的除磷率高达 68.88% ，具有较强的聚磷能力。关键词：聚磷菌；筛选；聚磷特性中图分类号：X172文献标识码：B近年来，随着工农业生产的发展、人口的急剧膨胀，大量含氮、磷丰富的污水未经处理或处理不达标便被排入水体中，引起藻类大量繁殖，导致绝大多数地表水体出现富营养化现象。研究证明，磷是水体富营养化的最主要的限制性因素… ，采用生物修复技术，处理污废水中的磷，无二次污染、效果好，已成为人们的共识，所以，生物除磷是当前环保领域的研究热点。国内外学者研究发明了多种生物除磷工艺‘ 舶，但是，目前对生物除磷机理的研究尚不完善，筛选出来的高效聚磷菌也比较少。鉴于此，本文以筛选高效聚磷菌为出发点，从山东省微山县筛选出了一株具有高效聚磷能力的细菌

（ CH-1 ），并研究了该菌株的聚磷特性以期为污水的生物修复、除磷菌的应用提供理论依据及优良菌种。 1材料与方法1.1 水样采集水样采自山东省微山县城内污水。 1.2 培养基使用的培养基及配方有 (l)YG 培养基-31 ； (2) MOPS培养基(10 × )‘ 引；(3) 聚磷培养液‘5] ；(4)牛肉膏固体培养基‘ 引；(6) 模拟废水‘ 叫。1.3聚磷菌的筛选 (1)菌种的分离、纯化：采用常规的微生物学方法‘ 引；(2) 蓝白斑筛选：将筛选出的菌种接种到 MOPS 限磷、过磷平板中，28 ℃ 条件下培养2d观察蓝白斑生长情况；(3) 菌体多聚磷酸盐 ( poly-P)的染色：染色方法采用甲苯胺蓝染色法‘ 引。1.4 好氧试验和培养液中PO 。。 3 一P 变化特点的测定培养液中的 P04.

3 ．P 含量的测定采用钼酸铵分光光度法【 9 。。1.5菌种鉴定形态观察及生理生化鉴定：根据《常见细菌系统鉴定手册》！… 1 和《伯杰氏细菌鉴定手册》Lj 。16SrDNA序列测定及同源性分析：DNA 提取使用北京全式金公司的 easypuregenomicDNA 提取试剂盒；PCR 反应引物‘ ” 3 为：PA:5 ’-AGAGTTT-。收稿日期： 2009- 02-23 基金项目：“1 ‘ 一五” 国家水体污染控制与治理科技重大专项 ( 2008ZX07425) ；辽宁省教育厅项目(2008S135)作者简介：连丽丽（ 1982- ），女，山东省威海人，辽宁师范大学生命科学学院，硕士研究生。研究方向为污染环境的生物修复。辽宁农业科学2009(2) LiaoningAgriculturalSciences文章编号：1002-1728( 2009) 02-0018-04约氏不动杆菌（ Acinetobacterjohnsonii ）的分离1姜（．宁师范大学生命科学学院，辽宁大连 116029 ；京100081）华朱昌雄2摘要：采用定性、定量相结合的方法，从城市污水中筛选到一株高效聚磷菌(CH-1) ，经生理生化特征及 16rDNA 序列分析，鉴定该菌株为不动杆菌属的约氏不动杆菌（ Acinetobacterjohn,sonii ）。进行了该菌株的生长曲

线、含磷培养液的 pH 、磷酸盐浓度变化及去磷效果等测定。结果表明：该

菌在培养 6 — 8h时繁殖量达到最大(0.54mg/L) ，培养液 pH 值达到最高(8.88) ，而磷酸盐浓度降至最低 (1.08mg/L) 。好氧条件下，含磷培养液培养 72h 后，

培养液中磷浓度由 10mg/L 降至 3.476mg/L ，去磷率高达 65.24% 。 CH-I 菌

处理模拟废水的除磷率高达 68.88% ，具有较强的聚磷能力。近年来，随着工农业生产的发展、人口的急剧膨胀，大量含氮、磷丰富的污水未经处理或处理不达标便被排入水体中，引起藻类大量繁殖，导致绝大多数地表水体出现富营养化现象。研究证明，磷是水体富营养化的最主要的限制性因素…染、效果好，已成为人们的共识，所以，生物除磷是‘舶但是，目前对

生物除磷机理的研究尚不完善，筛选出来的高效聚磷菌也比较少。鉴

于此，本文以筛选高效聚磷菌为出发点从山东省微山县筛选出了一株

具有高效聚磷能力的细菌（ CH-1 ），并研究了该菌株的聚磷特性材

料与方法 1.1水样采集水样采自山东省微山县城内污水。 1.2培养基使用

的培养基及配方有 (l)YG 培养基-31；引；(3)聚磷培养液5] (4)牛肉膏固体培养基；(6) 模拟废水叫 1.3方法；(2)蓝白斑筛选：将筛选出的菌种接种

到MOPS限磷过平板中，28℃条件下培养2d法1.4好氧试验和培养液中PO 。3一P变化特点的测【9 1.5！…和《伯杰氏细菌鉴定手册》Lj 16SrDNA使用北京全式金公司的 easypuregenomicDNA 提”为：PA:5’-AGAGTTT-收稿

日期： 2009- 02-23基金项目：“一五国家水体污染控制与治理科技重大专项( 2008ZX07425) ；辽宁省教育厅项目(2008S135)作者简介：连丽丽（ 1982-），女，山东省威海人，辽宁师范大学生命科学学院，硕士研究生。研究方

向为污染环境的生物修复。第 2 期连丽丽等：约氏不动杆菌

（ Acinetobacierjohnsonii ）的分离及其聚磷特性的研究 GATCCTGGCTCAG-3’ :PBl:5 ’-TACGGCTACCTT- GTTACGACTT -3'; PCR扩增条件参考文献