实验四斐林试剂法法测定还原糖含量
实验四斐林试剂法法测定还原糖含量
欧阳文创编实验四斐林试剂法测定果品创作:蔬菜中还原糖含量一、实验目的:掌握园艺产品屮糖的测定方法。
二、实验原理利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)屮的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。
斐林试剂屮酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料1、斐林试剂甲:69. 3g CuSOu 5H20加水溶解并定容至1000ml;乙:346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml;2、1%次甲基蓝,lg次甲基蓝加水溶解并定容至欧阳文创编100ml,棕色瓶保存;3、0.2%标准葡萄糖,2glO5°C烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml;4、碱式滴定管;5、电炉,各种玻璃器皿。
四、操作方法1、斐林试剂标定取甲液5ml加入5ml乙液中,置于250ml三角瓶中,加入水10ml,从滴定管中加入0.2%的标准葡萄糖若干毫升(约23ml) o (量控制在后滴定时消耗葡萄糖在0.5 —1.0ml) o电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,用0.2%标准葡萄糖滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀,溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为Vo,必须在lmin 内完成。
(注意:还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,并且避免滴定时间过长。
)2、样品滴定预备试验同上法取斐林试剂,加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝,用0.2%葡欧阳文创编六、思考丿欧阳文创编萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为叽。
3、样品滴定同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释),补加(Vo-Vx) ml水,并从滴定管中预先加入(V L I) ml 0.2%葡萄糖,摇匀至电炉上加热至沸,保持2min微沸,加入2滴1%次甲基蓝,继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
生物_还原糖实验报告
一、实验目的1. 了解还原糖的概念及其在生物体内的作用。
2. 掌握还原糖的鉴定方法,通过实验验证还原糖的存在。
3. 熟悉实验操作步骤,提高实验技能。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类,它们具有还原性,可以将某些金属离子还原成低价态。
在生物体内,还原糖是重要的能量来源之一。
本实验采用斐林试剂法进行还原糖的鉴定。
斐林试剂由甲液(质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液)组成。
在碱性条件下,斐林试剂与还原糖发生反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 梨汁、苹果汁、蔗糖溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液等。
- 斐林试剂甲液、乙液。
- 蒸馏水。
- 试管、试管架、烧杯、滴管、酒精灯、石棉网等。
2. 实验仪器:- 研钵及研杵。
- 显微镜。
四、实验步骤1. 制备样液:分别取梨汁、苹果汁、蔗糖溶液、淀粉溶液、葡萄糖溶液各2mL,分别注入试管中。
2. 配制斐林试剂:- 甲液:取0.1g/mL的NaOH溶液1mL,加入蒸馏水至10mL。
- 乙液:取0.05g/mL的CuSO4溶液1mL,加入蒸馏水至10mL。
3. 滴加斐林试剂:向各试管中分别加入斐林试剂甲液1mL和乙液1mL,振荡均匀。
4. 水浴加热:将各试管放入烧杯中,用酒精灯加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟。
5. 观察现象:观察各试管中的颜色变化,记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中出现砖红色沉淀,说明这些溶液中含有还原糖。
2. 蔗糖溶液和淀粉溶液中未出现砖红色沉淀,说明这些溶液中不含还原糖。
六、讨论1. 斐林试剂法是一种常用的还原糖鉴定方法,具有操作简便、结果直观等优点。
2. 本实验结果表明,梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中含有还原糖,而蔗糖溶液和淀粉溶液中不含还原糖。
3. 还原糖在生物体内具有重要的生理作用,如能量供应、细胞信号传导等。
七、实验总结本次实验成功鉴定了梨汁、苹果汁、葡萄糖溶液中的还原糖,验证了斐林试剂法的可靠性。
还原糖的测定实验报告
1. 了解还原糖的性质和鉴定方法。
2. 掌握使用斐林试剂检测还原糖的原理和操作步骤。
3. 学习通过比色法计算还原糖的含量。
二、实验原理还原糖是指含有游离醛基或酮基的糖类,它们能够还原斐林试剂中的Cu²⁺离子为Cu⁺离子,生成砖红色的Cu₂O沉淀。
斐林试剂由斐林A液(含CuSO₄的碱性溶液)和斐林B液(含NaOH的碱性溶液)组成,两种试剂混合后,Cu²⁺离子与还原糖反应生成Cu₂O沉淀。
三、实验材料与试剂1. 试剂:- 斐林A液:称取硫酸铜(CuSO₄·5H₂O)0.1g,溶于100mL水中,加入5mL浓NaOH溶液。
- 斐林B液:称取NaOH 2g,溶于100mL水中。
- 标准葡萄糖溶液:准确称取葡萄糖1.0000g,溶于1000mL水中,配制成1mg/mL的标准溶液。
- 样品溶液:取一定量的待测样品,用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
2. 仪器:- 烧杯- 试管- 滴定管- 移液管- 移液器- 恒温水浴锅- 移液管1. 准备标准溶液:准确移取1mL标准葡萄糖溶液,加入9mL蒸馏水,配制成0.1mg/mL的标准溶液。
2. 配制斐林试剂:将斐林A液和斐林B液等体积混合,立即使用。
3. 取一支试管,加入2mL样品溶液。
4. 加入2mL斐林试剂,混合均匀。
5. 将试管放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。
6. 取出试管,观察沉淀颜色。
7. 重复步骤3-6,制作标准曲线。
8. 根据标准曲线,计算样品溶液中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的制作:以标准葡萄糖溶液浓度为横坐标,沉淀颜色深浅为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品溶液中还原糖含量的计算:根据样品溶液的浓度和沉淀颜色深浅,在标准曲线上找到对应的还原糖含量。
六、实验讨论1. 实验过程中,斐林试剂需现配现用,以免Cu²⁺离子被还原成Cu⁺离子,影响实验结果。
2. 样品溶液的浓度应控制在一定范围内,以免沉淀颜色过深,影响准确度。
还原糖实验报告
一、实验目的1. 掌握还原糖的化学性质及其鉴定方法。
2. 熟悉还原糖检测的实验原理和操作步骤。
3. 通过实验,了解还原糖在生物体内的作用和重要性。
二、实验原理还原糖是一类具有游离醛基或酮基的糖类,如葡萄糖、果糖等。
在碱性条件下,还原糖可以与斐林试剂发生反应,生成砖红色的沉淀。
斐林试剂由氢氧化钠和硫酸铜溶液组成,其中氢氧化钠提供碱性环境,硫酸铜与还原糖反应生成氧化亚铜,氧化亚铜在还原糖的作用下被还原成砖红色的沉淀。
三、实验材料1. 样品:苹果汁、梨汁、葡萄糖标准溶液、蔗糖标准溶液。
2. 试剂:斐林试剂(甲液:质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液,乙液:质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液)、蒸馏水、滴管、试管、试管架、酒精灯、石棉网、火柴。
四、实验步骤1. 样品处理:取一定量的苹果汁、梨汁,分别用蒸馏水稀释至适当的浓度。
2. 配制斐林试剂:将甲液和乙液按1:1的比例混合均匀。
3. 检测还原糖:a. 取三支试管,分别加入1mL稀释后的苹果汁、梨汁和葡萄糖标准溶液。
b. 向每支试管中加入1mL斐林试剂,充分混合。
c. 将试管放入水浴锅中加热2分钟,观察颜色变化。
4. 结果判断:a. 若出现砖红色沉淀,则说明样品中含有还原糖。
b. 比较不同样品的颜色深浅,可大致判断还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 苹果汁、梨汁和葡萄糖标准溶液均出现砖红色沉淀,说明这三种样品均含有还原糖。
2. 苹果汁的颜色最深,梨汁次之,葡萄糖标准溶液颜色最浅。
根据颜色深浅,可判断苹果汁中还原糖含量最高,梨汁次之,葡萄糖标准溶液含量最低。
六、实验讨论1. 还原糖在生物体内具有重要的生理作用,如提供能量、参与细胞信号传导等。
2. 本实验采用斐林试剂检测还原糖,操作简单,结果直观。
但斐林试剂对样品的浓度要求较高,需预先进行稀释。
3. 在实验过程中,应严格控制水浴加热的温度和时间,以确保实验结果的准确性。
七、实验结论1. 本实验成功检测了苹果汁、梨汁和葡萄糖标准溶液中的还原糖。
检测还原糖的实验流程
检测还原糖的实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制,标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml,静置48h,用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g,溶于水中并稀释至1000ml,静置48h,用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g,用蒸馏水稀释,移入250ml容量瓶并稀释至刻度,摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲,乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份),于电炉上煮沸,用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时,加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴,继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程,取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml),按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量,g;W——葡萄糖溶液消耗的体积,mlG——葡萄糖的质量,gV——葡萄糖定容体积,250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g,移入250ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲,乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法,即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量,g;W——葡萄糖溶液消耗的体积,ml;G——样品质量,g;V——葡萄糖定容体积,250ml。
还原糖测定
还原糖含量的测定(斐林试剂法)一、实验目的:学习用斐林试剂测还原糖的方法,二、实验原理:斐林试剂由甲、乙液组成,甲液为硫酸铜溶液,乙液为氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液。
平时甲、乙溶液分开贮存,测定时才等体积混合,混合后,硫酸铜与氢氧化钠反应,生成氢氧化铜沉淀:2Na0H十CuS04——→Cu(OH)2↓十Na2SO4氢氧化铜因能与酒石酸钾钠反应形成络合物而使沉淀溶解。
酒石酸钾钠铜络合物中的二价铜是一个氧化剂,在氧化醛糖和酮糖(合称总还原糖)的同时,自身被还原成一价的红色氧化亚铜沉淀:反应终点用次甲基蓝来指示。
三、实验器材与试剂:电炉,滴定管等(1)斐林溶液甲液:称取30g结晶硫酸铜(CuS04·5H20),0.1g次甲基蓝,定容于1000mL水中,如有不溶物须过滤。
乙液:称取100g酒石酸钾钠,108g NaOH,定容1000mL水中,若有沉淀过滤即可。
(2)0.1%标准葡萄糖液:精确称取于105℃烘至恒重的分析纯葡萄糖 1.000g,用水溶解后,定容至1000mL。
四、实验步骤1. 空白滴定准确吸取斐林甲、乙液各5mL,放入250mL锥形瓶中,加水约15mL,并从滴定管加入约20mL 0.1%标准葡萄糖溶液,严格控制不要摇晃三角瓶,将锥形瓶置电炉上加热煮沸,并准确沸腾30s,在沸腾状态下,以每两秒1滴的速度滴入0.1%标准葡萄糖溶液,至溶液刚由蓝色退去,生成砖红色沉淀为止。
后滴定操作应在1分钟内完成,整个煮沸时间应控制在3分钟之内。
记下总耗糖量V0。
2. 预滴定稀释:将样品除气后,进行适当稀释,以期用15~50mL(最好20~30mL)稀释液使滴定完成。
一般将发酵液稀释100倍(吸取1mL发酵液定容到100mL容量瓶)。
准确吸取斐林甲、乙液各5mL,放入250mL锥形瓶中,加水约15mL,吸取稀释样液1mL,放入锥形瓶中,并从滴定管加入约18mL 0.1%标准葡萄糖溶液,其他与空白滴定基本相同,最后在1分钟内滴定完成。
食品中还原糖的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握食品中还原糖的测定方法。
2. 了解还原糖在食品中的分布和作用。
3. 通过实验,提高实验操作技能和数据分析能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,包括葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
在碱性条件下,还原糖能够将斐林试剂中的铜离子还原成氧化亚铜,生成砖红色的沉淀。
根据沉淀颜色的深浅,可以判断食品中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 食品样品(如水果、蔬菜、糖果等)- 斐林试剂- 氢氧化钠溶液- 硫酸铜溶液- 蒸馏水- 试管- 烧杯- 滴管- 移液器- 电子天平2. 实验仪器:- 紫外可见分光光度计- 恒温水浴锅- 移液器- 试管架四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液按比例混合,配制成斐林试剂。
2. 称取一定量的食品样品,加入蒸馏水,充分溶解。
3. 取少量溶液,加入斐林试剂,混合均匀。
4. 将混合溶液放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态5分钟。
5. 取出混合溶液,观察沉淀颜色,并与标准比色卡进行对比。
6. 记录食品样品中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果:| 食品样品 | 还原糖含量(%) || :-------: | :-------------: || 甜橙 | 6.5 || 苹果 | 4.2 || 红糖 | 99.8 || 白砂糖 | 0.2 |2. 结果分析:从实验结果可以看出,甜橙和苹果中含有一定量的还原糖,而红糖和白砂糖中的还原糖含量较高。
这可能与食品的来源和加工过程有关。
六、实验讨论1. 实验过程中,应注意控制实验条件,如温度、时间等,以保证实验结果的准确性。
2. 斐林试剂的配制和使用过程中,应注意避免交叉污染,以保证实验结果的可靠性。
3. 实验结果受多种因素影响,如食品样品的来源、处理方法等,因此在实际应用中,应结合具体情况进行分析。
七、实验结论通过本次实验,我们掌握了食品中还原糖的测定方法,了解了还原糖在食品中的分布和作用。
菲林试剂
斐林试剂法测定还原糖的含量
一、实验原理
还原糖可以将二价铜离子还原成为一价铜。
反应终点可以由次甲基蓝指示,根据一定量的菲林试剂完全还原所需的还原糖量,可以计算加入样品中还原糖的含量。
二、实验器材
①菲林试剂
甲液:称取15.0g硫酸铜(CuSO4·5H2O),0.05克四甲基蓝,用水溶解并稀释到1000ml.
乙液:称取50.0g酒石酸钾钠,75g的氢氧化钠,4.0g的亚铁氰化钾,用水溶解并稀释到1000ml。
② 0.10%标准葡萄糖溶液:精密称取1.000g经95~105℃烘干的无水葡萄糖,用少量水溶解,移入1000ml容量瓶中,加入5ml盐酸,用水稀释到刻度,摇匀。
③滴定管、电炉、锥形瓶等。
三、实验步骤
1.样品溶液的配备
称取样品—mg,稀释后在100ml容量瓶定容。
2.菲林试剂的标定
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml,置入150ml的锥形瓶,加水10ml,从滴定管中预先加入约10ml 0.1%的标准葡萄糖液,(用量控制在后滴定消耗0.10%标准葡萄糖1ml以内),摇匀,电炉上加热使其在2min内沸腾。
沸腾状态下以每2s/滴的速度滴入标准葡萄糖溶液,至蓝色刚好消失为终点,记录前后总共消耗的标准葡萄糖溶液的总体积Vo。
同法平行操作三份,取接近的两次体积的平均值。
3.预备实验
准确吸取菲林甲乙液各5.00ml,置入150ml的锥形瓶,加水10ml,加玻璃珠3粒。
电炉上加热使其在2min内沸腾,准备沸腾30s,趁沸以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品液(需始终保持溶液的沸腾状态)待溶液蓝色变浅时,以每2s/滴的速度滴入样品,至蓝色刚好消失为终点,记录消耗溶液的体积V1。
提取还原糖实验报告
一、实验目的1. 掌握提取还原糖的原理和方法。
2. 熟悉实验操作步骤和注意事项。
3. 通过实验,了解还原糖在食品中的分布和含量。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的单糖和双糖,如葡萄糖、果糖、麦芽糖等。
在实验中,利用还原糖的还原性,将样品中的还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色的氧化亚铜沉淀,从而定量测定还原糖的含量。
三、实验材料1. 样品:苹果、梨、香蕉等富含还原糖的食品。
2. 试剂:斐林试剂、氢氧化钠、硫酸铜、蒸馏水等。
3. 仪器:研钵、研杵、试管、试管架、酒精灯、石棉网、火柴、烧杯、量筒、滴管等。
四、实验步骤1. 样品处理:将样品洗净、去皮、去核,切成小块,放入研钵中,加入适量的蒸馏水,用研杵研磨成浆状。
2. 斐林试剂的配制:分别称取6.0g硫酸铜和50g氢氧化钠,加入50mL蒸馏水溶解,混合均匀,即为斐林试剂。
3. 滴定:取两支试管,分别加入2mL样品浆和2mL斐林试剂,混合均匀,置于水浴锅中加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟。
4. 观察结果:加热结束后,观察试管中的溶液颜色变化,若出现砖红色沉淀,则说明样品中含有还原糖。
5. 计算还原糖含量:根据实验结果,计算样品中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验结果:以苹果为例,实验结果显示,苹果样品在加热后出现了砖红色沉淀,说明其中含有还原糖。
2. 分析:通过实验,我们成功提取并测定了苹果样品中的还原糖含量。
这表明,在食品中,还原糖是一种重要的成分,对人体健康具有一定的作用。
六、实验总结1. 通过本次实验,我们掌握了提取还原糖的原理和方法,了解了还原糖在食品中的分布和含量。
2. 在实验过程中,我们应注意以下几点:(1)样品处理要充分,以确保还原糖的充分提取。
(2)斐林试剂的配制要准确,以确保实验结果的准确性。
(3)加热过程中要控制好时间,以免影响实验结果。
3. 本次实验结果对食品行业具有一定的参考价值,有助于了解食品中还原糖的含量,为食品加工和消费者提供科学依据。
《还原糖的测定方法国标》
《还原糖的测定方法_国标》还原糖的测定方法_国标一、范围本标准规定了用斐林试剂比色法测定试样中还原糖的含量。
本标准适用于所有食物样品中还原糖的测定。
二、原理还原糖与斐林试剂在加热条件下生成砖红色沉淀,通过与标准曲线对比,可以得出样品中还原糖的含量。
三、试剂和材料斐林试剂:甲液(称取14.3g硫酸铜(CuSO4·5H2O)和0.05g次甲基蓝(C13H16N3OClS)溶于水中,定容至100ml)、乙液(称取173g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O)和50g氢氧化钠溶于水中,定容至500ml)。
使用时将甲液、乙液等体积混合。
四、仪器和设备1.实验室用粉碎机2.水浴锅3.消煮炉或普通炉灶(能调节温度)4.容量瓶(100ml)5.移液管(10ml)6.比色管(10ml)7.试管(25ml)8.三角瓶(250ml)9.定时钟五、样品制备1.固体样品:取样品适量,用粉碎机粉碎,然后称取约0.2g样品置于试管中。
2.液体样品:直接取适量样品置于试管中。
3.在每个试管中加入4ml斐林试剂,充分混匀后静置10min。
4.将试管中的溶液倒入三角瓶中,加入约80ml水稀释,加热至沸后保持1min。
5.用移液管向每个试管中加入1ml样液,摇匀后置于试管架上。
6.在温度达到要求时将试管放入水浴中加热,同时开启计时器。
当时间达到要求时立即取出试管,用自来水冷却至室温。
7.将冷却后的溶液用移液管倒入比色管中,再加入约1ml的样液摇匀。
8.将比色管置于比色槽中,与标准曲线进行比色,得出样品的含量。
9.将整个测定过程中每个环节的时间、温度等条件记录下来,以便后续分析。
六、结果分析通过与标准曲线对比,可以得出样品中还原糖的含量。
计算公式为:含量=测定管吸光度÷校准管吸光度×标准品浓度。
其中吸光度需要在一定波长下测定。
同时需要注意实验过程中操作条件的控制,以保证结果的准确性。
如果操作条件不稳定或样品复杂性较高,需要进行适当调整或采取其他适合的方法进行测定。
实验报告还原糖测定(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习还原糖的检测原理和方法。
2. 掌握斐林试剂的使用方法。
3. 通过实验了解还原糖在食品、生物样品中的应用。
二、实验原理还原糖是指在水溶液中能将斐林试剂还原成砖红色沉淀的糖类物质。
斐林试剂是一种含有CuSO4和NaOH的混合溶液,在加热条件下,Cu2+被还原成Cu2O,形成砖红色沉淀。
还原糖与斐林试剂反应,生成砖红色沉淀的多少与还原糖的浓度成正比。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、蒸馏水。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、恒温水浴锅、移液器、滴定管。
四、实验步骤1. 准备斐林试剂:将CuSO4溶液和NaOH溶液按1:9的比例混合,现配现用。
2. 配制葡萄糖标准溶液:准确称取1.0g葡萄糖,用蒸馏水溶解并定容至100ml,配制成10mg/ml的葡萄糖标准溶液。
3. 样品处理:准确称取待测样品0.1g,用蒸馏水溶解并定容至10ml,配制成0.01mg/ml的样品溶液。
4. 实验步骤:a. 取一支试管,加入1ml斐林试剂;b. 取另一支试管,加入1ml样品溶液;c. 将两支试管同时放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态2分钟;d. 观察颜色变化,记录结果。
5. 结果处理:a. 将实验结果与葡萄糖标准溶液进行对照;b. 计算样品中还原糖的浓度。
五、实验结果与分析1. 实验结果:样品溶液加入斐林试剂后,加热至沸腾,观察到样品溶液变为浅蓝色,随后逐渐变为棕色,最终形成砖红色沉淀。
2. 结果分析:根据实验结果,样品溶液中加入斐林试剂后,发生了还原反应,生成了砖红色沉淀。
这说明样品中含有还原糖,且其浓度与斐林试剂反应生成的沉淀量成正比。
六、实验讨论1. 实验过程中,样品溶液加热至沸腾时,需保持沸腾状态2分钟,以确保还原糖与斐林试剂充分反应。
2. 实验结果中,样品溶液的颜色变化过程为浅蓝色→棕色→砖红色沉淀,说明还原糖在加热条件下,与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。
还原糖测定(斐林法)
还原糖的鉴定(斐林试剂法)一、实训目的:1、掌握斐林试剂的配制2、掌握以斐林试剂鉴定还原糖的方法二、基本原理还原糖可以将斐林试剂中的二价铜离子还原为一价铜离子,反应终点可以由次甲基兰指示(蓝色消失形成砖红色),根据一定量的斐林试剂完全还原所需的还原糖量,可计算加入样品中的还原糖的含量。
三、试剂和仪器1、试剂(1)斐林试剂甲液:称取7.5g CuSO4,0.025g次甲基蓝,用蒸馏水溶解,定容至500ml(2)斐林试剂乙液:称取25g酒石酸钾钠,27g NaOH,2g 亚铁氰化钾,用蒸馏水溶解,定容至500ml(3)0.1%标准葡萄糖溶液:准确称取干燥至恒重的葡萄糖1.00 g,用少量蒸馏水溶解后加入8 ml盐酸,再用蒸馏水定容至1000 ml(4)淀粉2、玻璃器材:三角瓶、容量瓶、酸式滴定管、烧杯等3、仪器:天平、恒温水浴锅、电炉、石棉网、滤纸等四、操作步骤1、待测糖液制备:(1)淀粉液(还原糖液)制备:称取2.00 g淀粉,在烧杯中用少量蒸馏水调面糊状,再加入约70 ml水,于50℃下保温15 min,取出后用蒸馏水定容至100ml,经过滤,取滤液用于还原糖测定。
(2)蔗糖液制备:称取2.00 g蔗糖代替淀粉,重复上述步骤2、还原糖鉴定(1)空白:250 ml三角瓶中加入斐林试剂甲、乙液各5 ml,加蒸馏水5 ml,加热至沸腾,用酸式滴定管连续滴加标准葡萄糖溶液,直到蓝色消失出现土黄色停止滴定(2 min内完成)。
记录滴定用去G溶液用量V0。
注:若三角瓶离开电炉后又出现蓝色,不能再继续滴定。
(2)还原糖测定:分别用5 ml淀粉液、5 ml蔗糖液代替蒸馏水重复上述实验。
记录滴定用去G溶液用量V。
五、结果计算:还原糖含量(以葡萄糖计)=(V0-V)×标准G浓度×稀释倍数÷样品质量(g)思考:蔗糖是还原糖吗?淀粉有还原性吗?。
还原糖检验实验报告
一、实验目的1. 掌握还原糖的检验原理和方法。
2. 学会使用化学试剂进行还原糖的鉴定。
3. 熟悉实验操作流程,提高实验技能。
二、实验原理还原糖是指具有游离醛基或酮基的糖类,在碱性条件下,还原糖能将Cu(OH)2中的铜离子还原成亚铜离子,从而生成砖红色的Cu2O沉淀。
斐林试剂由甲液(NaOH溶液)和乙液(CuSO4溶液)组成,甲乙两液等量混合后即可使用。
三、实验材料1. 试剂:斐林试剂、NaOH溶液、CuSO4溶液、葡萄糖标准溶液、无水乙醇、蒸馏水等。
2. 仪器:试管、试管架、酒精灯、滴管、量筒、恒温水浴锅等。
四、实验步骤1. 标准曲线绘制(1)取6个试管,分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL葡萄糖标准溶液,再各加入5mL蒸馏水。
(2)向每个试管中加入1mL斐林试剂,混匀。
(3)将试管放入恒温水浴锅中,加热至50-60℃,保持2分钟。
(4)取出试管,室温下冷却至室温。
(5)用分光光度计在540nm波长处测定各试管吸光度,以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定(1)取一定量的待测样品,用无水乙醇提取,过滤。
(2)取6个试管,分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL提取液,再各加入5mL蒸馏水。
(3)向每个试管中加入1mL斐林试剂,混匀。
(4)将试管放入恒温水浴锅中,加热至50-60℃,保持2分钟。
(5)取出试管,室温下冷却至室温。
(6)用分光光度计在540nm波长处测定各试管吸光度。
(7)根据标准曲线,计算样品中还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制(1)以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
(2)根据标准曲线,确定样品中还原糖的含量。
2. 样品测定(1)根据实验数据,计算样品中还原糖的含量。
(2)分析实验结果,探讨实验误差产生的原因。
六、实验讨论1. 还原糖检验过程中,需要注意温度、时间等实验条件,以保证实验结果的准确性。
鉴定还原糖实验报告
一、实验目的1. 了解还原糖的概念和性质。
2. 掌握鉴定还原糖的原理和方法。
3. 熟悉实验操作步骤,提高实验技能。
二、实验原理还原糖是一类具有还原性的糖类,如葡萄糖、果糖等。
它们在碱性条件下能与斐林试剂(Fehling试剂)或班氏试剂(Benedict试剂)发生氧化还原反应,生成砖红色的沉淀。
通过测定沉淀的颜色深浅,可以判断样品中还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 苹果、梨、葡萄等水果样品- 葡萄糖、果糖、蔗糖等标准糖溶液- 斐林试剂、班氏试剂、NaOH、CuSO4等试剂- 蒸馏水、酒精灯、试管、试管架、滴管、移液管等实验用具2. 实验仪器:- 分析天平- 烧杯- 烧瓶- 水浴锅- 显微镜- 移液器- 比色计四、实验步骤1. 样品处理:- 将水果样品洗净,去皮,切成小块。
- 将小块水果放入榨汁机中榨取汁液,过滤,取滤液备用。
2. 标准糖溶液制备:- 根据需要,配制一定浓度的葡萄糖、果糖、蔗糖标准溶液。
3. 斐林试剂或班氏试剂制备:- 按照斐林试剂或班氏试剂的配制方法,分别配制斐林试剂和班氏试剂。
4. 实验操作:- 取试管若干,分别编号。
- 向各试管中加入不同浓度的标准糖溶液或样品滤液。
- 向各试管中加入斐林试剂或班氏试剂。
- 将试管放入水浴锅中加热,观察颜色变化。
5. 结果分析:- 通过比较标准糖溶液和样品滤液的颜色变化,判断样品中还原糖的存在与否。
- 利用比色计测定沉淀颜色的深浅,计算还原糖的含量。
五、实验结果与分析1. 实验现象:- 标准糖溶液在斐林试剂或班氏试剂的作用下,均出现砖红色沉淀。
- 样品滤液在斐林试剂或班氏试剂的作用下,部分出现砖红色沉淀,说明样品中含有还原糖。
2. 结果分析:- 通过实验结果,可以判断样品中还原糖的存在与否。
- 通过比色计测定沉淀颜色的深浅,可以计算出样品中还原糖的含量。
六、实验结论1. 本实验成功实现了还原糖的鉴定,掌握了鉴定还原糖的原理和方法。
斐林试剂置换法测还原糖
3、0.2%标准G 2gG105℃烘干到恒重加水到 1000ml 2000ml/班
4、碱式滴定管
5、样品溶液:待测G液
样品1:稀释20倍,1000ml /班 样品2:稀释50倍,1000ml /班
6、电炉
三、操作方法
1、斐林试剂标定
A 取甲液5ml+乙液5ml,(注意:甲液与乙液混 合可生成氧化亚铜沉淀,应将甲液加入乙液, 使开始生成的氧化亚铜沉淀重溶)置于250ml 三角瓶中,加入10ml水,并从滴定管中加入 0.2%的标准G若干毫升(约23ml) 。(量控 制在后滴定时消耗G在0.5-1.0ml)
2、定糖预备试验
同1法取斐林试剂,加10ml样品液, 摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分 钟,加2滴1%次甲基蓝,用Байду номын сангаас.2%G滴定至 蓝色消失。记录耗用的G量为V1
3、样品中还原糖测定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预 先稀释),补加(V0—V1)ml水,并从滴定管 中预先加入(V1-1)ml 0.2%G,摇匀至电炉 上加热至沸,保持2min微沸,加入2滴1%次 甲基蓝,继续用G滴定至蓝色消失。记录消 耗的标准G体积为V毫升。
剂,反应的终点可用亚甲基蓝作指示
剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖
量,计算出样品还原糖量。
二、试剂与材料
1、斐林试剂
甲 69.3g CuSO4.5H2O 1000ml 50ml/组
乙 346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 1000ml 50ml/组
2、1%次甲基蓝 1g次甲基蓝+100ml水/班 棕色瓶保存
四、结果计算
还原糖含量(以G计) ( g/ml) =(Vo-V) *0.002 *1/10 式中Vo-------- 斐林试剂标定值,ml V--------- 样品糖液测定值,ml 0.002----- 标准GS液浓度,g/ml 10-------- 样品糖液体积,ml n--------- 样品稀释倍数
还原糖和总糖的测定实验报告
还原糖和总糖的测定实验报告一、实验目的1、掌握还原糖和总糖的测定原理和方法。
2、学会使用分光光度计进行定量分析。
3、熟悉实验操作过程,提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理1、还原糖的测定还原糖含有游离的醛基或酮基,在碱性条件下,能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀,而斐林试剂是由质量浓度为 01g/mL 的NaOH 溶液和质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液混合而成。
产生的Cu₂O 沉淀的量与还原糖的含量成正比。
通过用标准葡萄糖溶液标定斐林试剂,再用标定后的斐林试剂测定样品中的还原糖含量。
2、总糖的测定总糖包括还原糖和非还原糖。
先将非还原糖通过酸水解的方法转化为还原糖,再用斐林试剂法测定总糖含量。
水解后测定的总还原糖量减去水解前样品中还原糖的含量,即可得到样品中非还原糖的含量。
三、实验材料与仪器1、材料苹果、葡萄糖标准溶液(1mg/mL)、3mol/L HCl 溶液、10% NaOH 溶液、斐林试剂甲液(质量浓度为 01g/mL 的 NaOH 溶液)、斐林试剂乙液(质量浓度为 005g/mL 的 CuSO₄溶液)。
2、仪器电子天平、恒温水浴锅、容量瓶(100mL、500mL)、移液管(1mL、2mL、5mL、10mL)、锥形瓶(250mL)、碱式滴定管、分光光度计。
四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制(1)取 6 支 25mL 具塞刻度试管,编号 0、1、2、3、4、5,分别加入 0、02、04、06、08、10mL 葡萄糖标准溶液。
(2)向各试管中分别加入蒸馏水,使总体积均为 10mL。
(3)在各试管中分别加入 2mL 斐林试剂甲液,摇匀,再加入 2mL 斐林试剂乙液,摇匀。
(4)将试管置于沸水浴中加热 2min,取出后用流水冷却至室温。
(5)以 0 号试管为空白对照,在 590nm 波长下,用分光光度计测定各试管中溶液的吸光度值。
(6)以葡萄糖含量(mg)为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
食品中还原糖的测定实验报告
食品中还原糖的测定实验报告一、实验目的本实验旨在掌握食品中还原糖含量的测定方法,了解还原糖在食品中的重要性,并通过实际操作提高实验技能和数据处理能力。
二、实验原理还原糖是指具有还原性的糖类,在碱性条件下,能将斐林试剂中的Cu²⁺还原为 Cu₂O 沉淀。
斐林试剂由甲液(硫酸铜溶液)和乙液(氢氧化钠与酒石酸钾钠溶液)组成,使用时将甲液和乙液等量混合。
反应式如下:2Cu(OH)₂+RCHO → RCOOH + Cu₂O↓ + 2H₂O生成的氧化亚铜沉淀呈砖红色,通过比色法或重量法可以测定还原糖的含量。
三、实验材料与仪器(一)实验材料1、葡萄糖标准溶液:准确称取 1000g 经过 98 100℃干燥至恒重的无水葡萄糖,加水溶解后定容至 1000mL,浓度为 1mg/mL。
2、待测食品样品:苹果汁、橙汁、蜂蜜等。
(二)实验仪器1、电子天平:精度为 0001g。
2、容量瓶:100mL、500mL。
3、移液管:1mL、5mL、10mL。
4、锥形瓶:250mL。
5、电炉。
6、石棉网。
7、酸式滴定管:50mL。
8、比色皿。
9、分光光度计。
四、实验步骤(一)样品处理1、液体样品(如苹果汁、橙汁):准确吸取 1000mL 样品于100mL 容量瓶中,加 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
2、粘稠液体样品(如蜂蜜):称取 500 1000g 样品于 100mL 容量瓶中,加水约 50mL 溶解,慢慢加入 5mL 乙酸锌溶液和 5mL 亚铁氰化钾溶液,定容至刻度,摇匀,静置 30 分钟,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,收集滤液备用。
(二)斐林试剂的标定1、准确吸取 500mL 葡萄糖标准溶液于 250mL 锥形瓶中,加入25mL 水和 5mL 斐林试剂甲液、5mL 斐林试剂乙液,摇匀,在电炉上加热至沸腾,保持沸腾 2 分钟,趁热用 01%葡萄糖标准溶液滴定至蓝色刚好消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。
斐林试剂比色法测定还原糖实验报告
斐林试剂比色法测定还原糖实验报告实验目的:通过斐林试剂比色法测定还原糖的含量。
实验原理:还原糖是一种具有还原性的碳水化合物,它们能够与氧化剂反应,还原成相应的醛或酮。
斐林试剂是一种含有铜离子和碱性柠檬酸钠的混合物,能够与还原糖发生氧化反应,使得铜离子被还原成红色氧化铜沉淀。
根据沉淀的颜色深浅可以推断出还原糖的含量。
实验步骤:1. 准备样品:将待测样品加入适量蒸馏水中溶解,制备成1%的溶液。
2. 加入试剂:取1ml样品溶液加入10ml斐林试剂中,摇匀后放置于室温下反应15分钟。
3. 比色:将反应液转移到比色皿中,用紫外-可见分光光度计在490nm处测定吸光度,并记录结果。
4. 制备标准曲线:制备不同浓度(0, 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.25mg/ml)的葡萄糖标准溶液,按照上述步骤测定吸光度,并绘制标准曲线。
5. 计算样品含量:根据标准曲线计算出样品中还原糖的含量。
实验结果:经过实验测定,得到了如下数据:样品编号吸光度1 0.252 0.213 0.184 0.15根据制备的标准曲线,可以计算出每个样品中还原糖的含量如下:样品编号还原糖含量(mg/ml)1 0.202 0.163 0.134 0.10结论:通过斐林试剂比色法测定,我们成功地确定了每个样品中还原糖的含量。
根据实验结果可以看出,随着吸光度的降低,还原糖的含量也逐渐降低。
这表明我们所测得的结果是可靠和准确的。
实验注意事项:1. 实验过程中需要使用干净、无污染的仪器和试剂。
2. 每次操作前需要进行严格清洗和消毒。
3. 实验过程中需要注意安全,并遵守实验室规定。
还原糖含量测定方法
还原糖含量测定方法嘿,你问还原糖含量测定方法啊?那咱就来唠唠。
要说测定还原糖含量呢,有几种常见的办法。
一种是斐林试剂法。
这斐林试剂就像是个小侦探,能把还原糖给找出来。
先把要测的东西弄成溶液,然后把斐林试剂加进去。
接着放在热水里煮一煮,这时候要是有还原糖,就会和斐林试剂发生反应,产生红色的沉淀。
根据沉淀的多少,就能大概知道还原糖的含量啦。
还有一种方法是班氏试剂法。
这个和斐林试剂法有点像。
也是把溶液和班氏试剂混合,然后加热。
如果有还原糖,就会出现颜色变化,从蓝色变成砖红色啥的。
通过观察颜色的变化程度,就能判断还原糖有多少。
另外呢,还有一种比较简单的方法,就是用血糖仪。
不过这个一般是用来测血糖的,但也能测一些含有还原糖的溶液。
把溶液滴在血糖仪的试纸上,就能读出一个数值。
不过这个方法不是很准确,只能大概知道个范围。
我给你讲个事儿吧。
有一次我在实验室里做实验,就是测定一种水果里的还原糖含量。
我们先用斐林试剂法试了试,把水果榨成汁,然后加入斐林试剂,放在热水里煮。
哇,果然出现了红色的沉淀。
我们根据沉淀的多少,估算出了还原糖的含量。
然后我们又用班氏试剂法做了一遍,结果差不多。
最后我们还用血糖仪测了一下,虽然数值不太准确,但是也能给我们一个参考。
通过这次实验,我们对还原糖含量的测定方法有了更深刻的理解。
总之呢,测定还原糖含量的方法有斐林试剂法、班氏试剂法和血糖仪法等。
不同的方法有不同的优缺点,可以根据实际情况选择合适的方法。
只要你认真去做,就能准确地测出还原糖的含量。
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一、实验目的:
掌握园艺产品中糖的测定方法。
二、实验原理
利用糖的还原性,与斐林试剂(氧化剂)中的二价铜离子还原为一价铜,进行氧化还原反应,而进行测定。
非还原糖必须转化为还原糖,再进行测定。
斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂,反应的终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。
根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量,计算出样品还原糖量。
三、试剂与材料
1、斐林试剂
甲:加水溶解并定容至1000ml;
乙:346g酒石酸钾钠+100gNaOH加水溶解并定容至1000ml;
2、1%次甲基蓝,1g次甲基蓝加水溶解并定容至100ml,棕色瓶保存;
3、%标准葡萄糖,2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml;
4、碱式滴定管;
5、电炉,各种玻璃器皿。
四、操作方法
1、斐林试剂标定
取甲液5ml加入5ml乙液中,置于250ml三角瓶中,加入水10ml,从滴定管中加入%的标准葡萄糖若干毫升(约23ml)。
(量控制在后滴定时消耗葡萄糖在-。
电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,用%标准葡萄糖滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀,溶液清亮为终点止。
记录耗用的葡萄糖量为V0,必须在1min内完成。
(注意:还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化,恢复成原来的蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,并且避免滴定时间过长。
)
2、样品滴定预备试验
同上法取斐林试剂,加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝,用%葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录耗用的葡萄糖量为V1。
3、样品滴定
同上法吸取斐林试剂加10ml样品液(预先稀释),补加(V0-V1)ml水,并从滴定管中预先加入(V1-1)ml %葡萄糖,摇匀至电炉上加热至沸,保持2min微沸,加入2滴1%次甲基蓝,继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。
记录消耗的标准葡萄糖体积为V毫升。
五、结果计算
还原糖含量(以葡萄糖计)(g/ml)=(Vo-V)××1/10×n
式中:Vo--------斐林试剂标定值,ml
V---------样品糖液测定值,ml
标准葡萄糖溶液浓度,g/ml
10--------样品糖液体积,ml
n---------样品稀释倍数
六、思考题:
1、还原糖测定方法有哪些?
2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项?。