生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书

生化实验室尿酸UA氧化酶法作业指导书

1、前言

试验名称：尿酸测定，英文名称：UA,方法：氧化酶法。本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指

导工作人员正确的在科华KHB-450全自动生化分析仪上测定

血清、血浆、样本中的尿酸浓度，以保证测定结果的准确可靠。

尿酸是卩票吟、核酸的代谢产物，因此，尿酸水平异常可作为上述物质代谢异常的指征，高尿酸血症可见于：肾功能障碍、痛风、白血病、红细胞增多症、动肪粥样硬化、糖尿病、甲状腺机能减退、或其他遗传疾病，尿酸水平低可见于威乐逊氏病。

2、测定原理

本试验采用改良的Trinder氏方法，其反应原理：

尿酸+O2+H2O尿跡・尿囊素+CO2+H2O2

H26+AAP+TRHRA过隼化物酶醜亚胺色素+出0

上式中AAP为4■氨基安替比林

TBHBA为3■疑基・2,4,6三漠甲酸

在上述反应中，红色醞亚胺色素的生成量与样本中尿酸的浓度成正比，通过在520nm波长处测定吸光度的变化值，从而计算出尿酸的浓度，试剂中亚铁氧化钾可抑制样本中胆红素

的干扰。

3、试剂

试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。

剂型：液体双试剂。

包装量：Rl ： 4*40ml R2： 4*20ml

注册号：沪食药监械（准）字2010第2400028号。

生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。 基本成份： 试剂1: 过氧化物酶

3-疑基-2,4,6三澳甲酸

亚铁氧化钾

磷酸盐缓冲液

4 ■氨基安替比林

含非反应性填充物及稳定剂

试剂2：

磷酸盐缓冲液

尿酸酶 储存条件和有效期「试剂避光储存于2-8°C 可稳定12

个月。 启用后2-10°C 可稳定14天，若试剂混浊，或空白在520nm 下吸光度值高于0.4A 时，则不能使用。

4、标准品：使用试剂盒附带标准品

300u/l

2.5mmol/l

0.05mmol/l

150mmol/l

0.7mmol/l

150mmol/l 500u/l

5、质控品：

生产商：英国Randox公司。

剂型：干粉试剂，用5ml去离子水复溶，完全溶解30分钟后使用。

保存条件：未溶解时2-8°C稳定至有效期，复溶后2-8°C

稳定一周。

6、、样品要求：

样品采集前病人准备无特殊要求，空腹，用肝素锂抗凝管或促凝管常规方法肘静脉采血，血标本4000转离心3分钟，分离血清样本，应不溶血。

无污染血清样品室温可保存三天，冷冻保存可稳定6个月。样品拒收标准遵照《安阳鼎城医院标本收集管理制度》要求执行。

7、质控品分析要求：

每批分析需做高、低两个值。失控范围和失控后处理遵照《安阳151医院检验科室内质控操作规范》的规定设置。质控品分析操作见上述OLYMPUS AU640标准化操作规程。

8、校准品分析要求

校准操作见上述标准化操作规程。

9、设备

设备生产商：上海科华公司公司

设备型号：AU-400

10、操作步骤：

见KHB-450全自动生化分析仪标准化操作规程第四节

12、计算方法

尿酸浓度(mmol/1)=样本管吸光度/校准管吸光度*校准液浓度(mmol/l)o

13、技术参数：

可测定范围：0 --- 4720umol/l

试剂空白起始吸光度：^0.30A (520nm 37°C)O

相对偏差：W±10%

批内精密度：CV%W6%

批间精密度：相对极差(％) W6%

14、参考范围：

男性:208-428umol/l

女性：155-357umol/l

15＞报告方式：umol/1

16＞注意事项：

a、当样品中尿酸浓度大于900umol/l时，可用生理盐水稀释, 计算结果时乘以稀释倍数。

b、反应颜色可稳定15分钟。

c、试剂中含有防腐剂和稳定剂，可能存在一定的刺激作用或毒性，请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触，即用大量清水

清洗。请勿吞服。

17、替代方法：如因特殊情况本试验不能正常工作，在征得患者同意后在安阳地区医院用同样方法测定。