自编基因工程操作步骤学案
《基因工程的基本操作程序》教案
《基因工程的基本操作程序》教案一、教学目标:1. 了解基因工程的概念和基本原理。
2. 掌握基因工程的基本操作程序和步骤。
3. 能够运用基因工程的方法和技术解决实际问题。
二、教学内容:1. 基因工程的概念和基本原理介绍基因工程的定义和背景知识。
解释基因工程的基本原理和操作过程。
2. 基因工程的操作程序和步骤介绍基因工程的操作程序和步骤,包括目标基因的获取、基因载体的构建、转化宿主细胞等。
解释每个步骤的重要性和操作方法。
3. 基因工程的应用实例介绍基因工程在农业、医学和工业等领域的应用实例。
分析这些应用实例的原理和实际效果。
三、教学方法:1. 讲授法:讲解基因工程的概念、原理和操作程序。
2. 案例分析法:分析基因工程的应用实例,引导学生运用所学知识解决实际问题。
3. 小组讨论法:分组讨论基因工程的操作步骤和应用实例,促进学生之间的交流和合作。
四、教学资源:1. 教材或教学PPT:提供基因工程的基本知识和操作步骤的详细介绍。
2. 案例资料:提供基因工程应用实例的相关资料和数据。
3. 网络资源:提供相关的学术文献和新闻报道,供学生进一步了解基因工程的进展和应用。
五、教学评估:1. 课堂参与度:观察学生在课堂上的发言和提问情况,评估学生对基因工程的理解程度。
2. 小组讨论报告:评估学生在小组讨论中的表现和合作能力,以及对基因工程应用实例的分析能力。
3. 课后作业:布置相关的练习题和思考题,评估学生对基因工程的基本概念和操作步骤的掌握情况。
六、教学重点与难点:1. 教学重点:基因工程的基本原理和操作程序。
基因工程在实际应用中的典型案例。
2. 教学难点:基因表达载体的构建过程。
基因工程在实践中可能遇到的问题及解决方法。
七、教学过程:1. 导入:通过一个简单的基因工程应用实例(如转基因植物)引出基因工程的话题,激发学生的兴趣。
2. 课堂讲解:详细讲解基因工程的基本原理、操作程序和步骤,穿插相关案例分析,帮助学生理解和掌握知识。
《基因工程的基本操作程序》 学历案
《基因工程的基本操作程序》学历案基因工程,这个听起来颇具科幻色彩的词汇,其实已经在我们的生活中发挥着越来越重要的作用。
从医疗领域的基因治疗到农业中的转基因作物,基因工程正以惊人的速度改变着我们的世界。
那么,基因工程究竟是如何实现的呢?这就涉及到一系列复杂而又精确的基本操作程序。
首先,获取目的基因是基因工程的第一步。
目的基因就是我们希望引入到受体细胞中的特定基因片段。
它可以是从生物体细胞中直接分离出来的,比如通过从细胞中提取 DNA ,然后用特定的限制性内切酶将其切割,从而获得含有目的基因的片段。
也可以通过化学方法人工合成目的基因,比如已知目的基因的核苷酸序列,就可以按照这个序列来合成。
还有一种常见的方法是利用 PCR 技术(聚合酶链式反应)来扩增目的基因。
PCR 就像是一个神奇的“复制机器”,能在短时间内大量复制出特定的 DNA 片段。
获取到目的基因后,接下来就要构建基因表达载体了。
这一步就像是给目的基因打造一个“专属座驾”,让它能够顺利地进入受体细胞并且发挥作用。
基因表达载体通常由目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分组成。
启动子就像是“发动机”,能够启动目的基因的转录;终止子则像是“刹车”,让转录过程在合适的位置停止;标记基因则是“标签”,方便我们筛选出成功导入了基因表达载体的细胞。
构建基因表达载体需要用到多种工具酶,比如限制性内切酶和DNA 连接酶。
限制性内切酶能在特定的位点切割 DNA ,产生粘性末端或平末端;而 DNA 连接酶则能够将切割后的 DNA 片段连接起来,形成一个完整的基因表达载体。
有了基因表达载体,下一步就是将其导入受体细胞。
受体细胞可以是细菌、真菌、动植物细胞等。
导入的方法也多种多样。
对于细菌这样的原核细胞,常用的方法是转化法。
比如用氯化钙处理细菌,增加其细胞壁的通透性,从而让基因表达载体更容易进入细胞。
对于动植物细胞,常用的方法有显微注射法、农杆菌转化法等。
显微注射法就像是用一个极细的注射器,将基因表达载体直接注射到细胞内;农杆菌转化法则是利用农杆菌这种天然的“基因搬运工”,将基因表达载体转移到植物细胞中。
基因工程的基本操作程序教案
一、教案基本信息基因工程的基本操作程序教案课时安排:45分钟教学目标:1. 让学生了解基因工程的基本概念。
2. 使学生掌握基因工程的基本操作程序。
3. 培养学生对基因工程技术的兴趣和好奇心。
教学重点:1. 基因工程的基本概念。
2. 基因工程的基本操作程序。
教学难点:1. 基因工程的技术操作步骤。
2. 基因工程在实际应用中的意义。
二、教学过程1. 导入(5分钟)通过展示基因工程的图片或相关案例,引发学生对基因工程的兴趣,激发学生的探究欲望。
2. 基因工程的基本概念(5分钟)介绍基因工程的定义、原理和应用领域,帮助学生建立对基因工程的基本认识。
3. 基因工程的基本操作程序(15分钟)a. 目标基因的获取:介绍PCR技术、基因克隆等方法。
b. 基因载体的构建:介绍载体选择、目的基因插入、连接酶等。
c. 目标基因的表达与检测:介绍转化、表达、检测等方法。
d. 基因工程产品的应用:介绍基因工程在医药、农业等领域的应用。
4. 案例分析(5分钟)提供几个基因工程的实际案例,让学生分析案例中基因工程技术的应用,加深学生对基因工程操作程序的理解。
5. 总结与展望(5分钟)总结基因工程的基本操作程序,强调基因工程技术在现代生物科学中的重要性,并展望其在未来的发展前景。
三、教学方法1. 讲授法:讲解基因工程的基本概念、基本操作程序等内容。
2. 案例分析法:分析实际案例,让学生更好地理解基因工程技术的应用。
3. 互动教学法:引导学生提问、讨论,提高学生的参与度和积极性。
四、教学评价1. 课堂问答:检查学生对基因工程基本概念的理解。
2. 小组讨论:评估学生在案例分析中的表现,检验学生对基因工程操作程序的掌握程度。
3. 课后作业:布置相关题目,巩固学生对基因工程知识的学习。
五、教学资源1. 课件:展示基因工程的基本概念、操作程序等内容。
2. 案例资料:提供基因工程实际案例,供学生分析。
3. 参考书籍:推荐相关书籍,供学生进一步学习。
《基因工程的基本操作程序》教案
《基因工程的基本操作程序》教案一、教学目标:1. 让学生了解基因工程的基本概念。
2. 让学生掌握基因工程的基本操作程序。
3. 让学生理解基因工程在生物科技领域的应用。
二、教学内容:1. 基因工程的概念。
2. 基因工程的操作程序:包括目的基因的获取、基因载体的构建、目的基因的导入和表达、基因工程的验证。
三、教学重点与难点:1. 教学重点:基因工程的基本操作程序。
2. 教学难点:基因载体的构建、目的基因的导入和表达。
四、教学方法:1. 采用讲授法,讲解基因工程的基本概念和操作程序。
2. 采用案例分析法,分析基因工程在实际应用中的具体案例。
3. 采用小组讨论法,让学生分组讨论基因工程的操作步骤和应用。
五、教学准备:1. 准备相关PPT课件,展示基因工程的基本概念和操作程序。
2. 准备基因工程的案例资料,用于课堂分析和讨论。
3. 准备实验材料,让学生动手操作,验证基因工程的基本步骤。
六、教学过程:1. 导入:通过讲解生物科技的发展,引入基因工程的概念。
2. 讲解:讲解基因工程的基本概念,包括基因、DNA、基因重组等。
3. 讲解:讲解基因工程的基本操作程序,包括目的基因的获取、基因载体的构建、目的基因的导入和表达、基因工程的验证。
4. 案例分析:分析基因工程在实际应用中的案例,如基因治疗、转基因生物等。
5. 小组讨论:让学生分组讨论基因工程的操作步骤和应用。
6. 实验操作:让学生动手操作,验证基因工程的基本步骤。
7. 总结:总结基因工程的基本概念和操作程序。
8. 作业布置:布置相关作业,巩固所学知识。
七、教学反思:在课后对教学效果进行反思,看是否达到了教学目标,学生是否掌握了基因工程的基本操作程序。
八、教学评价:通过学生的作业、实验操作和课堂表现来评价学生对基因工程的基本概念和操作程序的掌握程度。
九、课后作业:1. 复习基因工程的基本概念和操作程序。
2. 分析一个基因工程的实际应用案例。
3. 总结自己在实验操作中的收获和不足。
基因工程的基本操作程序教案
基因工程的基本操作程序教案基因工程是一项重要的生物技术方法,可以改变和调整生物体的遗传信息,用于生物学研究、医学诊断和治疗等领域。
基因工程的基本操作程序是进行基因操作的一系列步骤,包括基因克隆、基因表达和基因检测等。
本文将介绍基因工程的基本操作程序,并设计一份教案,以帮助学生了解基因工程的基本原理和技术。
一、教学目标:1.理解基因工程的基本概念和意义;2.了解基因工程的基本操作步骤;3.掌握基因克隆、基因表达和基因检测的基本方法;4.培养学生的动手能力和实验操作技能。
二、教学内容:1.基因工程的基本概念和意义(20分钟)a.什么是基因工程?b.基因工程的应用领域。
c.基因工程的意义和价值。
2.基因克隆(40分钟)a.DNA的提取与纯化。
b.质粒构建与选择。
c.DNA的限制性内切酶切割与连接。
d.DNA转化与筛选。
3.基因表达(40分钟)a.RNA的提取与纯化。
b.反转录与合成cDNA。
c.基因的重组与转染。
d.蛋白质表达与纯化。
4.基因检测(40分钟)a.PCR反应及其原理。
b.凝胶电泳与DNA片段分离。
c.杂交与探针检测。
d.基因测序与分析。
三、教学方法:1.授课讲解:通过PPT等多媒体工具展示基因工程的基本概念和操作步骤,引导学生理解并思考。
2.案例分析:讲解基因工程的应用案例,帮助学生理解基因工程在科学研究和医学领域的实际应用。
3.实验操作:分组组织学生进行基因工程相关实验操作,例如DNA提取、PCR反应和凝胶电泳等。
四、教学评估:1.课堂练习:设计选择题和简答题,考察学生对基因工程基本概念和操作步骤的理解。
2.实验报告:要求学生撰写实验报告,总结实验操作步骤和结果,评估学生的实验操作能力和科学研究能力。
五、教学资源:1.PPT讲解课件:展示基因工程的理论知识和实验步骤。
2.实验材料和器材:提供实验所需的DNA、RNA、限制性内切酶等材料,以及PCR仪、凝胶电泳仪等实验器材。
3.实验手册和操作指导:提供实验操作步骤和实验指导,指导学生进行实验操作。
《基因工程的基本操作程序》教案
《基因工程的基本操作程序》教案一、教学目标1. 了解基因工程的概念及其应用领域。
2. 掌握基因工程的基本操作程序。
3. 能够运用所学知识分析、解决实际问题。
二、教学重点1. 基因工程的基本操作程序。
2. 基因工程在各领域的应用。
三、教学难点1. 基因工程操作程序的原理及步骤。
2. 基因工程在实际应用中的操作方法。
四、教学准备1. 教材或相关教学资源。
2. 投影仪或白板。
3. 教学课件或教案。
五、教学过程1. 导入:通过展示基因工程在医学、农业等领域的实际应用案例,引发学生对基因工程的兴趣,从而导入本节课的主题。
2. 自主学习:让学生阅读教材,了解基因工程的概念及其应用领域。
3. 课堂讲解:讲解基因工程的基本操作程序,包括:a. 目的基因的获取b. 基因表达载体的构建c. 目的基因的导入与表达d. 基因工程产品的提取与鉴定4. 案例分析:分析基因工程在医学、农业等领域的应用实例,让学生了解基因工程在实际生活中的重要作用。
5. 课堂讨论:组织学生就基因工程操作程序的应用展开讨论,分享彼此的想法和观点。
6. 课后作业:布置相关课后练习,巩固所学知识,提高学生的实际操作能力。
7. 课堂小结:总结本节课的主要内容,强调基因工程在实际应用中的重要性。
8. 课后反思:鼓励学生反思自己的学习过程,发现不足,不断提高。
六、教学拓展1. 介绍基因工程在其他领域中的应用,如生物制药、环境保护等。
2. 探讨基因工程在伦理、法律和社会问题方面的挑战。
七、实践操作1. 安排实验室实践活动,让学生亲自体验基因工程的基本操作。
2. 引导学生运用所学知识解决实际操作中遇到的问题。
八、课程评价1. 设计课后测试题,评估学生对基因工程基本操作程序的理解和掌握程度。
2. 观察学生在实践操作中的表现,评价其运用所学知识解决实际问题的能力。
九、教学策略1. 采用问题驱动的教学方法,引导学生主动探索基因工程的奥秘。
2. 利用多媒体资源,直观展示基因工程的操作过程,提高学生的学习兴趣。
基因工程的操作程序 教案
基因工程的操作程序一. 引言基因工程是一项涉及对DNA进行操作和修改的技术。
基因工程的操作程序是指在基因工程实验中所需遵循的一系列步骤和操作方法。
本文将全面、详细、完整地探讨基因工程的操作程序,包括实验准备、DNA提取、DNA修饰、转化和筛选等内容。
二. 实验准备在进行基因工程实验之前,需要进行一些必要的准备工作,确保实验的顺利进行。
以下是实验准备的主要步骤:2.1 确定实验目的和方法在开始实验之前,需要明确实验的目的和采用的方法。
确定实验目的有助于确定实验的步骤和所需材料,而确定实验方法则是基于实验目的和已有的技术手段做出的选择。
2.2 准备实验所需材料和试剂根据实验目的和方法,准备实验所需的材料和试剂。
常见的实验材料和试剂包括实验器皿(如离心管、PCR管和琼脂糖凝胶板)、试管、移液器、平衡溶液、酶切酶等。
2.3 搭建实验所需设备根据实验方法,搭建实验所需的设备。
例如,进行PCR实验需要PCR仪,进行电泳实验需要电泳装置等。
2.4 制备工作台和杂耍台在进行实验之前,需要确保实验室工作台和杂耍台的清洁和无菌。
清洁工作台和杂耍台可以减少实验过程中的污染和干扰,保证实验结果的准确性。
三. DNA提取基因工程实验中常常需要从细胞中提取DNA,以用于后续的操作。
DNA提取的步骤如下:3.1 细胞的收集和裂解首先,收集要提取DNA的细胞样品,并使用裂解缓冲液使其裂解。
裂解缓冲液中的酶和表面活性剂有助于细胞的裂解,释放出DNA。
3.2 DNA的纯化和浓缩通过离心和滤筛等方法,将提取到的细胞裂解液中的杂质(如蛋白质和核酸)去除,从而纯化DNA。
然后,使用乙醇沉淀或硅胶柱等方法将DNA浓缩。
3.3 检测DNA的质量和浓度使用比色法、凝胶电泳或荧光定量仪等方法检测纯化后的DNA的质量和浓度。
确保提取到的DNA质量良好,浓度适合后续操作的要求。
四. DNA修饰在基因工程中,常常需要对DNA进行修饰,例如引入特定的限制性内切酶切位点、合成片段、插入外源基因等。
基因工程的基本操作程序教学设计
基因工程的基本操作程序教学设计基因工程是一门涉及到生物学、生物化学和生物技术的学科,它依靠人工手段对生物体的基因进行重组、改变及表达,以期得到新的功能基因或改良已有基因的方法。
基因工程的基本操作程序是进行基因工程实验的关键,下面是一份针对初学者的基因工程基本操作程序的教学设计。
一、实验目的:通过本实验,学生将了解到基因工程实验的基本操作过程,掌握基因工程实验中的常用技术和方法。
二、实验材料:1.实验材料:- E.coli菌株-目的基因DNA片段-原核表达载体-外源限制核酸酶-缓冲液-DNA连接酶-搅拌机、恒温器、离心机等实验设备2.实验步骤:步骤一:制备目的基因DNA片段-从生物体中提取目的基因DNA-通过PCR扩增、酶切等方法制备需要的目的基因DNA片段步骤二:制备原核表达载体-从菌株中提取原核表达载体DNA-通过酶切或PCR扩增等方法制备需要的原核表达载体步骤三:连接目的基因片段和原核表达载体-在特定条件下,将目的基因DNA片段和原核表达载体DNA进行连接-通过DNA连接酶和缓冲液等实验材料完成连接反应步骤四:转化目的菌株- 将连接后的重组DNA导入到E.coli中-通过电穿孔、热激转化等方法实现DNA转化步骤五:筛选重组菌株-通过抗生素筛选等方法,找出含有目的基因的重组菌株-通过PCR和限制酶切等方法确认重组菌株是否成功三、教学内容:1.基因工程实验的原理和基本概念-了解基因工程实验的定义、目的和基本原理2.实验设备与试剂的介绍-介绍实验中常用的设备和试剂,如搅拌机、恒温器、离心机、限制酶、连接酶等3.实验步骤的操作演示-对每个实验步骤进行详细的操作演示,包括实验设备的使用方法和试剂的配制方法4.实验操作的注意事项和技巧-提醒学生在实验操作中需要注意的事项和技巧,如实验条件、溶液浓度、操作时间等四、教学方法:1.理论讲解结合实例分析:首先通过理论讲解基因工程的原理和基本概念,然后结合实际案例进行分析,引导学生理解技术的应用和意义。
基因工程操作教案范文模板
课时安排:2课时教学目标:1. 知识目标:了解基因工程的基本概念、操作流程以及相关技术。
2. 能力目标:掌握基因工程的基本操作步骤,包括目的基因的提取、载体构建、基因导入受体细胞以及基因表达检测。
3. 情感目标:培养学生严谨的科学态度和团队协作精神。
教学重点:1. 基因工程的基本操作流程。
2. 基因表达载体的构建。
3. 基因导入受体细胞的方法。
教学难点:1. 基因工程操作过程中的细节处理。
2. 基因表达检测的方法。
教学准备:1. 教学课件、实验器材、实验材料。
2. 实验器材:DNA提取试剂盒、限制性内切酶、DNA连接酶、载体质粒、PCR仪、电泳仪等。
3. 实验材料:大肠杆菌、载体质粒、目的基因片段、DNA标记物等。
教学过程:第一课时一、导入新课1. 提问:什么是基因工程?它有哪些应用?2. 引入:基因工程是一种在分子水平上对基因进行操作的技术,它可以改变生物的遗传特性,具有广泛的应用前景。
二、基因工程基本概念及操作流程1. 基因工程的基本概念:介绍基因工程的基本概念,如目的基因、载体、受体细胞等。
2. 基因工程的操作流程:a. 目的基因的提取:介绍从基因组文库中获取或利用PCR技术扩增目的基因的方法。
b. 基因表达载体的构建:介绍构建基因表达载体的方法,包括目的基因的克隆、载体质粒的选择等。
c. 基因导入受体细胞:介绍将目的基因导入受体细胞的方法,如转化、显微注射等。
d. 基因表达检测:介绍基因表达检测的方法,如PCR、Western blot等。
三、课堂讨论1. 学生分组讨论:如何提高基因工程操作的效率?2. 学生汇报:各组讨论成果,教师点评。
第二课时一、实验操作1. 实验一:目的基因的提取2. 实验二:基因表达载体的构建3. 实验三:基因导入受体细胞4. 实验四:基因表达检测二、实验结果分析1. 学生分组讨论:分析实验结果,找出实验中存在的问题。
2. 学生汇报:各组讨论成果,教师点评。
三、总结与拓展1. 总结:回顾基因工程的基本操作流程及注意事项。
基因工程的基本操作程序教案
基因工程的基本操作程序精选教案1.1 背景介绍1.1.1 基因工程是在分子水平上对基因进行操作和改造的技术。
1.1.2 基因工程技术在生物科技、医学、农业等领域具有重要意义。
1.1.3 通过学习基因工程的基本操作程序,学生将了解其原理和应用。
二、知识点讲解2.1 基因克隆的基本原理2.1.1 基因克隆是指将目的基因插入到载体DNA中,形成重组DNA。
2.1.2 载体DNA通常选用质粒、噬菌体或人工染色体等。
2.1.3 基因克隆的关键步骤包括:目的基因的获取、载体的选择、连接、转化等。
三、教学内容3.1 目的基因的获取3.1.1 利用PCR技术扩增目的基因。
3.1.2 利用基因测序技术确定目的基因的序列。
3.1.3 利用 restriction endonuclease 切割目的基因和载体DNA。
四、教学目标4.1 学生能理解基因工程的基本操作程序。
4.2 学生能运用基因工程技术解决实际问题。
4.3 学生能掌握PCR、基因测序和 restriction endonuclease 等技术。
五、教学难点与重点5.1 教学难点:基因克隆的基本原理和操作步骤。
5.1.1 解释基因克隆的概念,明确其在基因工程中的重要性。
5.1.2 详细讲解载体DNA的选择和连接过程。
5.1.3 指导学生进行克隆实验,巩固所学知识。
以上是前五个章节的教案内容,后续章节将包括:六、目的基因的获取与验证七、载体的选择与构建八、基因克隆与表达九、基因工程的应用十、教学评估与反思每个章节都包含3条详细的小结,每个小结都由4条详细的细节及细节说明组成。
全文共计约1500字。
希望这个教案能满足您的需求。
如有需要,我可以继续为您编写后续章节的教案。
六、教具与学具准备6.1 教具准备6.1.1 电脑、投影仪、音响等多媒体设备。
6.1.2 实验仪器和试剂,如离心机、PCR仪器、限制性内切酶、连接酶等。
6.1.3 教学PPT和教学素材,包括图片、视频、动画等。
《基因工程的基本操作程序》 学历案
《基因工程的基本操作程序》学历案基因工程是现代生物技术的核心领域之一,它为人类解决许多难题提供了新的途径和方法。
要理解基因工程,掌握其基本操作程序是关键。
一、获取目的基因目的基因是我们期望获取或改造的特定基因。
获取目的基因的方法多种多样。
一种常见的方法是从基因文库中获取。
基因文库就像是一个基因的“大仓库”,里面存放着各种各样的基因。
我们可以根据目的基因的相关信息,在这个“大仓库”中进行筛选和查找。
另一种方法是利用 PCR 技术扩增目的基因。
PCR 技术能在体外快速大量地复制特定的 DNA 片段。
首先,要设计一对与目的基因两端序列互补的引物。
然后,经过多次高温变性、低温退火和适温延伸的循环,就能得到大量的目的基因。
如果目的基因的序列已知,还可以通过化学方法人工合成。
二、基因表达载体的构建获取了目的基因后,接下来要构建基因表达载体。
这就像是给目的基因打造一个“专车”,让它能够准确、有效地到达目的地并发挥作用。
基因表达载体通常由目的基因、启动子、终止子、标记基因等部分组成。
启动子是一段特殊的 DNA 序列,它就像一个“开关”,能够控制基因的转录起始。
终止子则像一个“刹车”,标志着转录的结束。
标记基因的作用是便于筛选含有目的基因的受体细胞。
构建基因表达载体时,要用同一种限制酶分别切割目的基因和载体,然后用 DNA 连接酶将它们连接起来,形成重组 DNA 分子。
三、将目的基因导入受体细胞有了基因表达载体,接下来要把它导入受体细胞,让目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。
导入植物细胞常用的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
农杆菌能够将其携带的 Ti 质粒上的 TDNA 转移并整合到植物细胞的染色体 DNA 上。
基因枪法是借助高速粒子将目的基因导入细胞。
花粉管通道法则是利用植物授粉后形成的花粉管通道,将目的基因导入胚囊。
导入动物细胞常用的方法是显微注射法。
将含有目的基因的表达载体直接注射到动物的受精卵中,使目的基因整合到受精卵的染色体DNA 上。
基因工程操作教案模板范文
课时:2课时年级:高中教材:《现代生物科技专题》教学目标:1. 知识与技能:了解基因工程的基本操作流程,掌握目的基因的获取、载体构建、导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定等操作步骤。
2. 过程与方法:通过实验模拟,培养学生观察、分析、实验操作和解决问题的能力。
3. 情感态度与价值观:激发学生对生物科学的兴趣,培养学生的科学精神和创新意识。
教学重点:1. 基因工程的基本操作流程。
2. 目的基因的获取、载体构建、导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定等操作步骤。
教学难点:1. 限制性核酸内切酶和DNA连接酶在基因工程中的应用。
2. 目的基因导入受体细胞的方法。
教学准备:1. 多媒体课件2. 实验材料:DNA模板、限制性核酸内切酶、DNA连接酶、载体、载体DNA、受体细胞、DNA分子杂交技术试剂、抗原抗体杂交试剂等。
3. 实验操作指导书教学过程:第一课时一、导入新课1. 提问:什么是基因工程?基因工程有哪些应用?2. 学生回答,教师总结:基因工程是利用分子生物学、生物化学和遗传学等方法,在分子水平上对基因进行操作的技术。
基因工程在医学、农业、工业等领域有着广泛的应用。
二、基本操作流程讲解1. 目的基因的获取:从基因组文库中获取或利用PCR技术扩增目的基因。
2. 载体构建:选择合适的载体,利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶将目的基因与载体连接。
3. 导入受体细胞:根据受体细胞类型,选择合适的导入方法,如电穿孔法、基因枪法、显微注射法等。
4. 目的基因的检测与鉴定:利用DNA分子杂交技术和抗原抗体杂交技术检测目的基因是否成功导入受体细胞。
三、实验模拟1. 教师演示实验操作步骤,学生观察并记录。
2. 学生分组进行实验模拟,教师巡视指导。
第二课时一、实验总结1. 学生汇报实验结果,教师点评。
2. 总结实验中遇到的问题及解决方法。
二、课后作业1. 撰写实验报告,总结实验过程、结果及心得体会。
2. 查阅资料,了解基因工程在医学、农业、工业等领域的应用。
基因工程操作教案范文模板
课时:2课时年级:高中学科:生物教学目标:1. 知识目标:了解基因工程的基本概念、原理和操作步骤;掌握基因克隆、表达和修饰的基本技术。
2. 能力目标:培养学生运用基因工程技术解决实际问题的能力;提高学生的实验操作技能和实验设计能力。
3. 情感目标:激发学生对生物科学研究的兴趣,培养学生严谨的科学态度和团队协作精神。
教学重点:1. 基因工程的基本概念和原理。
2. 基因克隆、表达和修饰的基本技术。
教学难点:1. 基因工程实验操作步骤的精确性和规范性。
2. 基因工程实验中可能出现的问题及解决方法。
教学准备:1. 实验器材:DNA提取试剂盒、PCR仪、凝胶电泳仪、离心机、显微镜、培养箱、移液器等。
2. 实验材料:大肠杆菌、质粒、DNA模板、引物、DNA连接酶、DNA聚合酶等。
3. 教学课件:基因工程基本概念、原理和操作步骤。
教学过程:第一课时一、导入1. 引导学生回顾分子生物学的基本知识,如DNA的组成、结构和功能等。
2. 提出问题:如何将特定的基因导入到目标生物中?二、讲授新课1. 基因工程的基本概念和原理:- 介绍基因工程的定义、目的和意义。
- 解释基因、DNA、RNA等概念。
- 阐述基因克隆、表达和修饰的基本原理。
2. 基因克隆:- 介绍克隆的定义和过程。
- 讲解DNA提取、PCR扩增、DNA连接等操作步骤。
- 强调实验操作的精确性和规范性。
3. 基因表达:- 介绍基因表达的定义和过程。
- 讲解基因载体、启动子、终止子等概念。
- 介绍基因表达载体的构建方法。
4. 基因修饰:- 介绍基因修饰的定义和目的。
- 讲解基因编辑技术,如CRISPR-Cas9等。
三、课堂小结1. 总结本节课所学的基因工程基本概念、原理和操作步骤。
2. 强调实验操作的精确性和规范性。
第二课时一、复习导入1. 回顾上节课所学的基因工程基本概念和原理。
2. 引导学生思考:如何将所学知识应用于实际问题的解决?二、实验操作演示1. 演示DNA提取、PCR扩增、DNA连接等操作步骤。
基因工程操作教案设计模板
一、教学目标1. 知识与技能:(1)了解基因工程的定义、原理和意义;(2)掌握基因工程操作的基本步骤;(3)熟悉常用基因工程操作工具及其作用;(4)学会利用基因工程技术解决实际问题。
2. 过程与方法:(1)通过小组合作,培养学生的团队协作能力;(2)通过实验操作,提高学生的动手实践能力;(3)通过分析讨论,培养学生的创新思维和解决问题的能力。
3. 情感态度与价值观:(1)激发学生对生物科学的兴趣,培养科学探究精神;(2)增强学生对生物技术的认识,树立正确的人生观和价值观;(3)培养学生关注社会热点问题,提高社会责任感。
二、教学重点与难点1. 教学重点:(1)基因工程操作的基本步骤;(2)常用基因工程操作工具及其作用。
2. 教学难点:(1)目的基因的获取与分离;(2)基因表达载体的构建;(3)目的基因的检测与鉴定。
三、教学过程(一)导入新课1. 提问:什么是基因工程?它有什么意义?2. 学生回答,教师总结并引入新课。
(二)讲授新课1. 基因工程的定义、原理和意义;2. 基因工程操作的基本步骤:(1)提取目的基因;(2)目的基因与运载体结合;(3)将目的基因导入受体细胞;(4)目的基因的检测与鉴定。
3. 常用基因工程操作工具及其作用:(1)限制性核酸内切酶;(2)DNA连接酶;(3)载体;(4)逆转录酶;(5)PCR技术。
(三)实验操作1. 分组实验:提取目的基因;2. 分组实验:目的基因与运载体结合;3. 分组实验:将目的基因导入受体细胞;4. 分组实验:目的基因的检测与鉴定。
(四)课堂讨论1. 分析实验过程中遇到的问题及解决方法;2. 总结基因工程操作的关键步骤;3. 讨论基因工程技术的应用及伦理问题。
(五)课堂小结1. 回顾本节课所学内容;2. 强调基因工程操作的基本步骤和常用工具;3. 引导学生关注基因工程技术的应用和发展。
四、课后作业1. 查阅资料,了解基因工程技术的最新进展;2. 结合实际,思考基因工程技术的应用领域及可能带来的伦理问题;3. 完成实验报告,总结实验过程及结果。
《基因工程的基本操作程序》教案
《基因工程的基本操作程序》教案教学内容:基因工程的基本操作程序教学目标:1.了解基因工程的基本概念和原理2.掌握基因工程的基本操作步骤3.学会在实验室中进行基因工程实验教学重点:1.基因工程的概念和原理2.基因工程的基本操作步骤3.基因工程实验的操作技巧教学难点:1.基因工程实验中的操作技巧2.实验室安全操作规范教学准备:1.实验室设备和材料2.基因工程实验操作步骤3.安全操作规范教学流程:一、导入(5分钟)教师引导学生讨论生命科学领域中的基因工程技术,并简要介绍基因工程的概念和应用领域。
二、基因工程的基本原理(15分钟)1.解释基因工程的概念和作用2.介绍基因工程的基本原理,包括基因克隆、DNA插入和转染等技术3.展示基因工程在生物学和医学领域中的应用案例三、基因工程的基本操作步骤(20分钟)1.DNA提取:介绍DNA提取的方法和步骤2.酶切:解释酶切的原理和操作步骤3.连接:介绍DNA连接的技术和操作步骤四、基因工程实验操作演示(30分钟)1.展示基因工程实验操作流程2.演示DNA提取、酶切和连接等操作步骤3.提醒学生注意实验室安全操作规范五、学生实验操作练习(30分钟)1.学生分组进行基因工程实验操作练习2.指导学生按照操作步骤进行实验操作3.辅导学生解决实验中遇到的问题和困难六、实验结果分析和讨论(20分钟)1.学生根据实验结果进行数据分析和讨论2.引导学生思考实验中所遇到的问题和解决方法3.分享学生实验结果和心得体会七、课堂总结(10分钟)教师总结本节课的教学内容,强调基因工程的重要性和应用前景。
鼓励学生继续深入学习和探索生命科学领域。
八、作业布置(5分钟)布置基因工程实验报告撰写任务,要求学生结合实验结果撰写实验报告,并分享实验心得和收获。
教学反思:通过本节课的教学,学生对基因工程的基本概念和原理有了更深入的了解,掌握了基因工程的基本操作步骤和技巧。
学生通过实验操作练习,提高了实验操作能力和团队合作意识。
自创基因工程的基本操作程序
自创基因工程的基本操作程序引言基因工程是一门重要的生物技术领域,它涉及对生物体的基因进行修改和重组,以达到特定目的的目的。
自创基因工程即是在已有的基因工程技术基础上,根据实际需求自行设计并实施基因工程相关操作的过程。
基本操作流程1. 设计基因序列•首先,根据需要确定所要设计的基因序列的功能和结构。
•确定基因序列的起始密码子和终止密码子,确保能够在目标宿主中进行有效的转录和翻译。
•设计引物序列,以用于合成目标基因的DNA片段。
2. DNA合成•将设计好的基因序列提交给DNA合成服务商,进行合成。
•选择适合的DNA合成方法,如化学合成或基因工程法等,来获得目标DNA片段。
3. 基因克隆•将合成得到的基因片段插入到适当的载体中,如质粒或病毒载体。
•载体中可能含有选择标记基因,便于筛选出带有目标基因的转化子。
•利用适当的限制酶和连接酶,将目标基因片段与载体连接。
4. 质粒转化•将得到的质粒转化到目标宿主细胞中。
•选择适当的转化方法,如热潮滴下法或电穿孔法等,使质粒能够成功地进入到目标细胞内。
5. 培养和筛选•将转化后的细胞培养在含有相应抗生素的培养基中,筛选出带有目标基因的克隆细胞。
•进一步培养筛选得到的重组克隆细胞,扩增目标基因的表达量。
6. 分析和验证•对得到的重组克隆细胞进行分析和验证,确定目标基因是否成功表达。
•可以通过PCR、蛋白质表达分析等方法来验证基因的表达情况和功能。
结论自创基因工程的基本操作程序包括设计基因序列、DNA合成、基因克隆、质粒转化、培养和筛选、分析和验证等步骤。
通过系统地执行这些步骤,可以实现对基因的设计、修改和重组,进而实现特定功能的目的。
随着基因工程技术的不断进步和创新,自创基因工程也将在生物技术领域发挥越来越重要的作用。
生物学案:基因工程的基本操作程序
1.2 基因工程的基本操作程序1.简述基因工程的原理及基本操作程序。
2.尝试设计某一转基因生物的研制过程。
一、目的基因的获取1.从基因文库中获取目的基因将含有某种生物不同______的DNA片段导入________的群体中储存,各个________分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。
基因文库包括两种:________文库,即包含一种生物所有基因的文库;________文库,即只包含一种生物的一部分基因的文库,如______文库。
2.利用PCR(1)PCR的含义:是一项在生物______复制特定DNA片段的核酸合成技术。
(2)目的:短时间内大量扩增目的基因。
(3)原理:__________。
(4)过程:第一步,加热至90~95 ℃,________________。
第二步,冷却至55~60 ℃,________________________________________________。
第三步,加热至70~75 ℃,________________________________________________。
如此重复循环多次.(5)特点:指数形式扩增。
3.用化学方法人工合成如果基因比较____,核苷酸序列又已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。
二、基因表达载体的构建基因表达载体的组成:必须有启动子、________、终止子以及________等。
1.启动子启动子是一段有特殊结构的______片段,位于基因的首端,是____________________的部位,可驱动基因______。
2.终止子终止子也是一段______短片段,位于基因尾端,使______在需要的地方停止。
3.标记基因标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有________,从而将含有________的细胞筛选出来。
三、将目的基因导入受体细胞1.转化________进入受体细胞内,并且在受体细胞内________和______的过程,称为转化。
《基因工程的基本操作程序》 学历案
《基因工程的基本操作程序》学历案一、学习目标1、阐明基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
2、解释获取目的基因的方法和适用范围。
3、理解基因表达载体的组成及构建目的。
4、比较不同受体细胞导入目的基因的方法。
5、掌握目的基因检测与鉴定的方法和原理。
二、学习重难点1、重点(1)基因工程基本操作程序的四个步骤。
(2)目的基因获取的方法。
(3)基因表达载体的构建。
2、难点(1)从基因文库中获取目的基因。
(2)PCR 技术的原理和过程。
(3)基因表达载体的构建。
三、知识链接1、基因的本质和功能基因是具有遗传效应的 DNA 片段,它能够控制生物的性状。
2、 DNA 分子的结构和复制DNA 是由两条反向平行的脱氧核苷酸链盘旋成双螺旋结构,其复制方式为半保留复制。
四、学习过程(一)目的基因的获取1、从基因文库中获取目的基因基因文库是将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。
基因文库包括基因组文库和部分基因文库(如 cDNA 文库)。
基因组文库包含了一种生物的全部基因,而 cDNA 文库只包含了一种生物的部分基因,是由 mRNA 反转录得到的 DNA 组成。
2、利用 PCR 技术扩增目的基因PCR 技术即多聚酶链式反应,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA 序列的方法。
PCR 技术的原理是 DNA 半保留复制。
其过程包括:变性(加热使DNA 双链解开)、退火(降低温度使引物与模板链结合)、延伸(在耐高温的 DNA 聚合酶的作用下,从引物的3’端开始合成新的 DNA 链)。
通过多次循环这三个步骤,就能使目的基因迅速扩增。
3、人工合成目的基因如果基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过 DNA 合成仪用化学方法直接人工合成。
(二)基因表达载体的构建1、基因表达载体的组成基因表达载体由目的基因、启动子、终止子、标记基因等组成。
12基因工程的基本操作程序 教案
12基因工程的基本操作程序教案标题:基因工程的基本操作程序教案目标:了解基因工程的基本操作程序,包括DNA提取、PCR扩增、核酸凝胶电泳和测序等。
教学目标:1. 了解基因工程的基本操作流程和步骤;2. 掌握DNA提取、PCR扩增、核酸凝胶电泳和测序的基本原理和步骤;3. 加深对基因工程的理解,培养实验操作的能力。
教学内容和步骤:1. DNA提取a. 学生了解DNA提取的原理和步骤,包括细胞裂解、蛋白质沉淀和DNA纯化等;b. 分发实验材料,组织学生进行DNA提取实验;c. 学生观察实验过程,记录结果,并进行讨论和总结。
2. PCR扩增a. 学生学习PCR扩增的基本原理和步骤,包括反应体系的准备、PCR循环和扩增产物的分析等;b. 展示PCR反应的实验过程和结果,引导学生分析和讨论;c. 分发PCR实验材料,让学生进行PCR扩增实验;d. 学生观察实验过程,记录结果,并进行讨论和总结。
3. 核酸凝胶电泳a. 学生了解核酸凝胶电泳的原理和步骤,包括凝胶制备、样品加载和电泳运行等;b. 展示电泳实验的过程和结果,引导学生分析和讨论;c. 分发电泳实验材料,让学生进行核酸凝胶电泳实验;d. 学生观察实验过程,记录结果,并进行讨论和总结。
4. 测序a. 学生了解测序的原理和步骤,包括DNA片段制备、测序反应和序列分析等;b. 展示测序实验的过程和结果,引导学生分析和讨论;c. 学生进行测序结果的序列比对和分析,讨论结果的意义和可能应用。
评估:1. 学生参与实验操作的记录和结果;2. 学生对实验过程和结果的分析和讨论;3. 学生对基因工程的应用和意义的理解和总结。
拓展活动:1. 学生可以设计和实施相关的基因工程实验,扩展自己的研究兴趣;2. 学生可以进行文献阅读和讨论,了解基因工程的前沿进展和潜在应用;3. 学生可以参加科研竞赛或展示活动,展示自己的研究成果和想法。
教学资源:1. 实验材料:细胞、DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、核酸凝胶电泳试剂盒、测序试剂盒等;2. 电脑投影仪和PPT演示;3. 相关文献和学术资源。
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山东省昌乐一中2011-2012高二生物学案必修三编号05 2012.1.4 班级姓名
1.2基因工程的基本操作程序
编制:王福玲徐军胜审核:王福玲审批:
【学习目标】:
简述基因工程原理及基本操作程序。
【重点难点】:
1.基因工程基本操作程序的四个步骤。
2.从基因文库中获取目的基因。
3.利用PCR技术扩增目的基因。
【自主学习】
基因工程的基本操作程序主要包括4个步骤:的获取、基因表达
的构建、将细胞、的检测与鉴定。
一、目的基因的获取
1、概念:目的基因主要是指编码蛋白质的。
也可以是一些具有调控作用的因子。
2、来源:(1)可以从自然界中已有中直接分离出来。
(2)从中获取目的基因。
3、获取目的基因的方法:根据基因的有关信息,如基因的序列,基因功能、基因在上的位置、基因的转录产物,以及基因的翻译产物等特性来获取目的基因。
(1)利用PCR技术扩增目的基因:①PCR技术是一项在生物体外复制片段的核酸合成技术。
②条件:提供已知的核苷酸序列,根据这段序列合成。
(2)人工合成方法:当基因较小,核苷酸序列已知时,可以用人工方法合成(例如,通过直接合成)。
二、基因表达载体的构建
1、表达载体的组成
表达载体:目的基因、、、标记基因。
启动子:它是一段有,位于基因的首端,它是的识别和结合部位,起动转录mRNA。
终止子:位于基因的尾端,终止过程。
标记基因:用于受体细胞是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
2、表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中存在,并且给下一代,同时使能够表达和发挥作用。
三、将目的基因导入受体细胞
1、将目的基因导入植物细胞
(1)农杆菌转化法:①转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程,称为。
②农杆菌特点:在自然条件下能感染植物和
植物,,对植物没有感染力;Ti质粒的可以转移至受体细胞,并整合到受体细胞的上。
(2)基因枪法又叫。
(3)花粉管通道法:利用花粉管通道使目的基因进入,然后进入。
2、将目的基因导入动物细胞
(1)方法:。
(2)操作程序:目的基因的提纯→取卵(受精卵)→→移植子宫内发育→新性状动物
3、将目的基因导入微生物细胞
(1)原核生物的特点:,。
(2)常用的受体细胞:。
(3)转化:处理细胞→细胞→表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收分子,完成转化。
四、目的基因的检测与测定
1、检测:(1)方法:。
(2)原理:碱基互补配对
(3)内容:①检测转基因生物的染色体DNA上的,原理是技术。
②检测目的基因是否转录出,原理是技术。
③检测目的基因是否翻译成蛋白质,原理是。
2、鉴定:个体生物学水平鉴定,如抗虫、抗病鉴定等。
【自学检测】
1.下列正确表示基因操作“四部曲”的是()
A.提取目的基因→目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测和鉴定B.目的基因的检测和鉴定→提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞C.提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定D.基因表达载体的构建→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定2.下列不属于
...获得目的基因的方法的是()
A.利用DNA连接酶复制目的基因 B.利用DNA聚合酶复制目的基因
C.从基因文库中获取目的基因 D.利用PCR技术扩增目的基因
3.下列哪项不是
..基因表达载体的组成成分()
A.启动子 B.终止密码子 C.标记基因 D.复制原点
4.下列哪项不是
..将目的基因导入植物细胞的方法()
A.基因枪法 B.显微注射法 C.农杆菌转化法 D.花粉管通道法
答案:CABB
【课堂探究】
一、目的基因的获取
1、如何从基因文库中获取目的基因?
2、PCR技术与DNA复制的异同点?
二、基因表达载体的构建
1.作为基因工程表达载体,只需含有目的基因就可以完成任务吗?为什么?
2、绘一个基因表达载体示意图:
三、将目的基因导入受体细胞
1、课本15页思考与探究第2题、第3题
2、.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理,你能分析出农杆菌不能将目的基因导入单子叶植物的原因吗?
3、思考:早期基因工程为什么选用原核生物作为受体细胞?
四、目的基因的检测与测定
1.导入目的基因后需要检测哪些方面?各采取什么方法?
2.什么是DNA分子探针?检测时的DNA探针通过什么原理来检测目的基因和相应的mRNA?
3.利用抗体-抗原杂交检测的原理是什么?
4.目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键是什么?检测和鉴定指的分别是什么水平?
【当堂检测】
1.PCR技术扩增DNA,需要的条件是()
①目的基因②ATP ③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体
A.①②③④ B.②③④⑤ C.①③④⑤ D.①②③⑥
2.下列不属于
...目的基因与运载体结合过程的是()A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端 B.用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C.将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处D.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增
3. 在基因表达载体的构建中,所需要的酶是()
①限制酶②DNA连接酶③解旋酶④DNA聚合酶
A.①② B.①②③ C.①②④ D.①②③④
4.植物学家在培育抗虫棉时,对目的基因作适当修饰,使目的基因在棉花植株的整个生长发育期都表达,以防止害虫侵害,这种对目的基因所作的修饰发生在()
A.终止子 B.引物 C.标记基因 D.启动子
5.在基因工程操作的基本步骤中,不进行
...碱基互补配对的是()
A.人工合成目的基因 B.目的基因与载体结合
C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测与鉴定
6.将目的基因导入微生物细胞之前,要用Ca2+处理细胞,处理过的细胞叫()
A.感受态细胞 B.敏感性细胞 C.吸收性细胞 D.接受细胞
7.农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞,目的基因的最终位置是()
A.Ti质粒上 B.受体细胞染色体上 C.裸露细胞核中 D.存在细胞质中
8.目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过鉴定和检测才能知道。
下列属于目的基因检测和鉴定的是()
①检测受体细胞是否有目的基因②检测受体细胞是否有致病基因
③检测目的基因是否转录mRNA ④检测目的基因是否翻译蛋白质
A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④
9.要检测目的基因是否成功地插入了受体DNA中,需要用基因探针,基因探针是指()
A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
C.合成β-球蛋白的DNA D.合成苯丙羟化酶的DNA片段
答案:ADADC ABCB
10.资料显示,近十年来,PCR技术(DNA聚合酶链式反应技术)成为分子生物实验的一种常规手段,其原理是利用DNA半保留复制的特性,在试管中进行DNA的人工复制(如下图),在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使分子生物实验所需的遗传物质不再受限于活的生物体。
请据图回答:
(1)加热至94℃的目的是使DNA样品中的_______键断裂,该过程在生物体细胞内是通过__________酶的作用完成的。
分析可知新合成DNA分子中A=T,C=G,这说明DNA分子的合成遵循______________________。
(2)与细胞内DNA复制相比,PCR技术所需要的DNA聚合酶的最适温度比较____________(高、低)。
(3)通过PCR技术使DNA分子大量复制时,若将一个用15N标记的模板DNA分子(第一代)放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制到第五代时,含15N标记的DNA分子单链数占全部DNA总单链数的比例为。
(4)PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。
若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的()A.白细胞DNA B.病毒蛋白质 C.血浆抗体 D.病毒核酸
答案(1)氢解旋碱基互补配对原则(2)高(3)1/16 (4) D。