消毒灭菌知识
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微生物培训教材
第一部分 微生物基本知识
一、概念： 微生物：指广泛存在于自然界，形体微小，具有一定形态结构，并且能 在适宜的环境中生长繁殖以及发生遗转变异的一大类微小生物。由于个 体微小，肉眼不能看见。
微生物包括藻类、细菌类（包括细菌、放线菌、支原体、螺旋 体、衣原体、立克次体）、蓝藻细菌、真菌（包括酵母菌、霉菌）、原 虫、病毒。 二、分类 根据有无细胞及细胞核结构分为： （一）、非细胞型微生物：如病毒：个体极微小，能通过细菌滤器，由 单一的核酸和蛋白质组成，无细胞结构，只能在活细胞内增值。 （二）、原核细胞型微生物：包括细菌、放线菌、支原体、螺旋体、衣 原体、立克次体等，具有原始核，无核膜、核仁结构，不进行有丝分 裂，缺乏细胞器，具有DNA和RNA两类核酸。 （三）、真核细胞型微生物：包括藻类、真菌、原虫等，具有高度分化 的核，有核膜核核仁结构，进行有丝分裂，具有细胞器、DNA和RNA 两类核酸。 三、细菌 （一）概念 1、细菌：是原核生物中的一类单细胞微生物，以二分裂法繁殖，细胞 是所有生物的基本单位，一个单独的细菌细胞，就是一个独立的生活 体。细菌的个体很小，通常以um作为测量单位。 2、芽孢：某些细菌，特别是革兰氏阳性杆菌，在生活的某一阶段（营 养细胞繁殖到一定阶段，当营养消耗，碳、氮缺乏时），在细胞内形成 一个圆形或椭圆形，折光性强的特殊结构，称为芽孢。芽孢成熟后，菌 体崩解，芽孢游离于环境中，如遇适宜条件，芽孢萌发，发育成营养细 胞，芽孢是细菌的休眠状态。
芽孢与营养细胞相比，含水量少，酶活性低，但含类脂质多，细胞壁
的结构致密且厚，具有耐热性和难渗性。所以灭菌必须以消灭芽孢为 准。 （二）、分类 根据对细菌细胞壁进行革兰氏染色法不同分为两类： 革兰氏阳性菌：细胞壁主要成分肽聚糖、其次是壁磷酸。 革兰氏阴性菌：细胞壁薄，肽聚糖含量低，外面有内向外依次脂蛋白、 外膜和脂多糖组成。 （三）、细菌生长繁殖的条件 1、营养物质：水分、炭源、氮原、无机元素和一定类别的生长因子。 2、PH：大多数细菌最适宜的PH为6.8-7.4（中性），碱性次之，酸性最 不适宜微生物的生长。 3、温度：一般在25-32℃比较适宜生长。（真菌适宜温度25-28℃，细菌 适宜温度30-35℃，控制菌适宜温度35-37℃）。 4、氧气：环境中的氧气的有无对细菌的生长有很大的影响，按照对氧 气的需要，细菌分为： ——需氧菌：结核杆菌、枯草杆菌等。 ——厌氧菌：破伤风杆菌等。 ——兼性厌氧菌：大肠杆菌等。 （四）、细菌的繁殖方式和繁殖速度
灭菌的基本目的是：既要杀死或除去药剂中的微生物，又要保证药 物的理化性质稳定及临床疗效不受影响。微生物的繁殖很快，细菌的芽 胞具有较强的抗热力，不易杀死，故灭菌效果应以杀死芽胞为主。
灭菌的方法基本上分为二大类：物理方法（干热灭菌法、湿热灭菌 法、滤过除菌法、紫外线灭菌法、辐射灭菌法、火焰灭菌法等）和化学 方法（气体灭菌法、化学杀菌剂灭菌法等）。 2、灭菌的基本要求
煮沸灭菌法就是把安瓿或其他物品放入水中煮沸灭菌。 流通蒸汽灭菌与煮沸灭菌一般是100℃ 30min。此法不能保证杀死 所有的芽胞，例如破伤风菌等的芽胞，故制备过程中要采用避菌操作， 尽可能避免细菌污染。若加入适量抑菌剂时，药液经100℃ 30min加 热，可杀死抵抗力强的芽胞。 3、低温间歇灭菌法 此法是将待灭菌的制剂或药品，用60-80℃加热1h，将其中的细胞 繁殖体杀死，然后在室温或孵卵箱中放置24h，让其中的芽胞发育成为 繁殖体，再第二次加热将其杀灭。加热和放置需连续三次以上，至全部 芽胞消灭为止。 此法适用于必须用加热法灭菌但又不耐较高温度的制剂或药品。此法缺 点不仅需要时间长，并且消灭芽胞的效果常不够完全。 4、影响湿热灭菌的因素 （1）、微生物的种类与密度 各种微生物对热的抵抗力相差很大，同 一种微生物处于不同发育阶段，所需灾菌的温度与时间也不相同，繁殖 期的微生物对高温比衰老期的抵抗力小得多，细菌的芽胞的耐热性最 强。微生物体密度小（每个容器的微生物数，控制在10个以内），灭菌 时间短且灭菌效果好；菌体密度大，耐热个数出现的几率增大，故灭菌 效果降低，且即使杀死了细菌，而注射液中细菌尸体过多，亦会引起临 床上的不良反应，所以生产过程中应竭力避免污染机会。
银、砷、锌盐和结晶紫较敏感。 五、微生物在自然界的分布 （一）、土壤中的微生物
微生物在土壤中的分布很广，有细菌、放线菌、真菌等，其中以细 菌最多，放线菌、真菌次之。土壤中的微生物是一切自然界中微生物的 主要来源。 （二）、水中的微生物
水中的微生物主要来源于土壤，其分布情况也有很的差异，地下水 含微生物少，地面水则多，流动水比静止水含菌少，而沿岸水比中流水 多。如粪便和各种排泄物处理不当污染水源时，微生物的种类和数量将 会明显增加。
制剂中的微生物主要来源于制剂生产所处的环境、原辅料、工艺用 水（包括纯化水和注射用水）、制备过程中所用的设备、操作人员及包 装容器等。
1、 来自空气中的微生物：各种微生物均可存在空气中，种类和数量 随条件不同有很大变化。如静态含菌量较少，环境中有开动机器 或活动的人，空气中的含菌量增多；如空气中的湿度较高，雾滴 下降，空气中的含菌量下降；当有人讲话、咳嗽、打喷嚏时，空 气中的微生物数量增加。
干热灭菌设备 干热灭菌的主要设备有烘箱、干热灭菌柜、隧道灭菌系统等。
三、湿热灭菌法
湿热灭菌法是指物质在灭菌器内利用高压蒸汽或其他热力学灭菌手 段杀灭细菌的方法。由于蒸汽比热大，穿透力强，容易使蛋白质变性， 故其灭菌可靠，且操作简便、易于控制，湿热灭菌是制药、制剂生产应 用最广泛的一种灭菌方法，缺点是不适用于对湿热敏感的药物。 1、热压灭菌法
1、 细菌繁殖最基本的是营养物质，而药物大部分是应营养物 质，是细菌生长所必需的，生产结束后的环境卫生、工器 具的刷洗彻底，避免药液残留。
2、 生产结束后，规定环境卫生和工期具刷洗和灭菌的时间， 越短越好。
2.2避免进入对数生长期的措施 配好的药液在尽量短的时间内除菌过滤，在尽量短的时间内灌装灭
菌。（争取在对数生长期前灭菌）。
灭菌方法的灭菌效果与灭菌设备的性能、污染菌的特性、被灭菌品 的性质、受污染的程度等因素有关。因此，在药品生产的各个环节均应 采取各种有效的手段（包括除菌滤过等措施）来降低待灭菌产品灭菌前 的微生物污染及灭菌后的再次污染。
二、干热灭菌法
干热灭菌法：系指物质在干燥空气中加热达到杀灭细菌的方法。 由于空气是一种不良的传热物质，其穿透力弱，且不太均匀，所需 灭菌温度较高，时间较长，故容易影响药物的理化性质。在生产中除极 少数药物采用。 如繁殖性细菌用100℃以上的干热空气1h可被杀灭。对耐热性细菌 芽胞，需在140℃以上，灭菌效率急剧增加。 应用范围：大多用于玻璃、金属器皿和用具以及湿热不易穿透的物质或 易被湿热破坏的药物如甘油、液状石蜡、油类、油混悬液及脂肪类，软 膏基质或粉末等的灭菌。由于本法灭菌温度高，不适于橡胶、塑料制品 及大部分药物的灭菌。 《中国药典》通常的灭菌条件为：160-170℃，不少于2h；170180℃，不少于1h； 250℃，45min以上。采用干热250℃，45min.灭菌 也可除去热原物质。
二、真菌 1、概念：真菌是真核细胞型微生物，包括霉菌和酵母菌。霉菌不是分 类学上的名词，而是一些丝状真菌的统称。酵母菌为单细胞，形态较 小，无丝状菌丝体。 2、繁殖方式：真菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖，无性繁殖产 生个体多、快、简单，是常见真菌的繁殖形式。 3、真菌的生长条件：
1 真菌对营养要求不高，比较容易生长，有的真菌在任何有机物的基 质上都可生长。
有参考资料如： 1 洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时发菌量一般为10-300
个/（分钟．人）； 2 躯体一般活动时的发菌量为150-1000个/（分钟．人）； 3 快步行走时发菌量为900-2500个/（分钟．人）； 4 咳嗽一声发菌量一般为70-700个/（分钟．人）； 5 喷嚏一次发菌量一般为4000-60000个/（分钟．人）； 6 穿平常衣服发菌量一般为3300-62000个/（分钟．人）； 7 无口罩发菌量：有口罩发菌量（1：7）~（1：14）；
水中微生物有细菌、放线菌和真菌。水是生活中必不可少的，受病 原微生物污染的水，常会引起传染病的流行，因此水必须进行微生物学 的控制。 （三）、空气中的微生物
空气中的微生物主要来源于土壤，或由人和动物的的呼吸道和口腔 排出。空气中的微生物多属球菌、芽孢杆菌和产色素的细菌，真菌多为 真菌孢子，酵母菌等。 （四）、正常人体常见的微生物
操作人员、生产环境、设备、原辅料、容器、操作等方面制定制 度，并加强管理，具体就是按GMP组织生产，严格执行SOP、工 艺规程、BPR及各种规章制度。
2、 使用合适的防腐剂与抑菌剂：口服或外用的应用较多，注射剂使 用相对较少，尤其是输液不允许使用。
第二部分 消毒灭菌知识
一、灭菌的概念及基本要求
1、概念 灭菌系指用热力或其他适宜方法将物体上或介质中的微生物 杀死或除去，即获得无菌状态的总过程。
膜状物； 2、 液体药物有时出现泥土味，这也是微生物生长的早期标志； 3、 微生物分解后产生一些脂肪酸、硫化氢、酮类、胺类等，会有特
殊的恶臭； 4、 量大时可见到菌团或沉淀物产生； 5、 有时有色素形成，使药物带色； （二）、后果 含菌的药物进入人体（血液）后，可引起菌血症、败血症、毒血 症、浓毒血症等，给人体带来严重的危害，甚至死亡。 八、防止药物污染微生物的措施 1、 加强药物生产过程的管理：主要是加强药物生产的各个环节，如
自然界中广泛存在着各种微生物，因此人类的体表以及和外界相通的 腔道如口腔、鼻咽腔、泌尿生殖道、眼结膜等，经常有微生物的存在， 其中有一部分由于长期适应的结果，能长期寄存在以上部位，成为正常 菌群。但当人体受凉、过度疲劳、电离辐射、大面积烧伤时，某些正常 菌群就可以引起疾病。如大肠杆菌进入腹腔或泌尿道，引起腹膜炎、泌 尿道感染。 六、药物中的微生物
2 大多数真菌喜酸性环境，在PH3-6之间生长良好，在2-9之间也可生 长。
3 真菌生长的温度一般比细菌低，最适宜温度为23-28℃。 4、真菌（主要是霉菌）的菌落特征：由菌丝体和孢子组成，菌落疏 松，呈绒毛状，毡状，絮状，有的菌落周围出现同心圆或辐射纹，有的 呈黄、绿、青、橙、黑等颜色。 5、真菌的抵抗力：真菌对热的抵抗力不强，加热60-70℃在短时间内就 可杀死。但对低温0℃、干燥、渗透压和消毒剂有较强的耐性，对铜、
无性的二分裂法，一般细菌约20分钟繁殖一代，大约培养10小时， 肉眼就能看到细菌的生长集团。 1、细菌生长曲线
细 9.0
菌 8.5 (3) （4）
数 8Leabharlann Baidu0
目 7.5
的 7.0
对 6.5
(5)
数 6.0
5.5（1,2）
5 10 15 20 25 30h ——(1,2)：迟缓期：细菌适应环境和储备营养准备繁殖的时期，细菌部 分裂数目不增。约1-3小时。 ——（2）—（3）：对数生长期：细菌呈几何级增长
热压灭菌法系在热压灭菌器内进行的。热压灭菌器有密盖，可以使 饱和水蒸汽不逸出，由于水蒸气量不断增加，而使灭菌器内的压力渐渐 增大，利用高压蒸汽杀灭细菌，是一种公认的可靠灭菌法手提式热压灭 菌器、 热压灭菌柜（釜）、卧式热压灭菌柜、水浴式灭菌柜。 2、流通蒸汽灭菌和煮沸灭菌法
流通蒸汽灭菌法是在不密闭的容器内，用蒸汽灭菌。也可在热压灭 菌器中进行，只要打开排气阀门让蒸汽不断排出，保持器内压强与大气 压相等，即为100℃蒸汽灭菌。
空气中含有的微生物，在药品生产过程中，就会进入原辅料、 注射用水、药液、安瓶、输液瓶、罐和容器具等，从而对药品造成 污染。 2、 来自水中的微生物：配制用水和刷洗用水。因此水的制备、贮
存、分配、使用等均要有微生物污染的防治措施，具体见GMP。 3、 其他来源：原辅料、容器、操作人员等。 如糖类、维生素类等原辅料是微生物生长的良好的营养物质，因包装 破损或使用贮存不当，造成污染后，微生物极其容易大量繁殖。 另外，在生产过程中人员要进行操作，因而人体正常的微生物也可污 染药液，因此操作人员必须保持良好的卫生习惯，在操作中减少活动 与讲话，则污染的程度可大大降低。 七、微生物引起的药物变质及产生后果 （一）、药物污染微生物后，一般需在微生物大量繁殖后才出现明显变 化。主要表现为： 1、 微生物的生长首先在药物表面发现，液体药物首先在液体表面有
（20→21→22→23→24→25→26→2n），一般在10小时左右。 ——（3）—（4）：稳定期：代谢旺盛期，细菌增长数和死亡数基本相 等，总数基本保持不变，能形成芽孢的开始产生芽孢。约从10-18小 时。本期产生大量的细菌内毒素。 ——（4）—（5）：衰退期：细菌死亡数大于增值数，细菌总数开始下 降。 2、针对细菌生产曲线，生产上应该有针对性的控制：尽量延长迟缓 期，避免进入对数生长期。 2.1延长迟缓期措施：
第一部分 微生物基本知识
一、概念： 微生物：指广泛存在于自然界，形体微小，具有一定形态结构，并且能 在适宜的环境中生长繁殖以及发生遗转变异的一大类微小生物。由于个 体微小，肉眼不能看见。
微生物包括藻类、细菌类（包括细菌、放线菌、支原体、螺旋 体、衣原体、立克次体）、蓝藻细菌、真菌（包括酵母菌、霉菌）、原 虫、病毒。 二、分类 根据有无细胞及细胞核结构分为： （一）、非细胞型微生物：如病毒：个体极微小，能通过细菌滤器，由 单一的核酸和蛋白质组成，无细胞结构，只能在活细胞内增值。 （二）、原核细胞型微生物：包括细菌、放线菌、支原体、螺旋体、衣 原体、立克次体等，具有原始核，无核膜、核仁结构，不进行有丝分 裂，缺乏细胞器，具有DNA和RNA两类核酸。 （三）、真核细胞型微生物：包括藻类、真菌、原虫等，具有高度分化 的核，有核膜核核仁结构，进行有丝分裂，具有细胞器、DNA和RNA 两类核酸。 三、细菌 （一）概念 1、细菌：是原核生物中的一类单细胞微生物，以二分裂法繁殖，细胞 是所有生物的基本单位，一个单独的细菌细胞，就是一个独立的生活 体。细菌的个体很小，通常以um作为测量单位。 2、芽孢：某些细菌，特别是革兰氏阳性杆菌，在生活的某一阶段（营 养细胞繁殖到一定阶段，当营养消耗，碳、氮缺乏时），在细胞内形成 一个圆形或椭圆形，折光性强的特殊结构，称为芽孢。芽孢成熟后，菌 体崩解，芽孢游离于环境中，如遇适宜条件，芽孢萌发，发育成营养细 胞，芽孢是细菌的休眠状态。
芽孢与营养细胞相比，含水量少，酶活性低，但含类脂质多，细胞壁
的结构致密且厚，具有耐热性和难渗性。所以灭菌必须以消灭芽孢为 准。 （二）、分类 根据对细菌细胞壁进行革兰氏染色法不同分为两类： 革兰氏阳性菌：细胞壁主要成分肽聚糖、其次是壁磷酸。 革兰氏阴性菌：细胞壁薄，肽聚糖含量低，外面有内向外依次脂蛋白、 外膜和脂多糖组成。 （三）、细菌生长繁殖的条件 1、营养物质：水分、炭源、氮原、无机元素和一定类别的生长因子。 2、PH：大多数细菌最适宜的PH为6.8-7.4（中性），碱性次之，酸性最 不适宜微生物的生长。 3、温度：一般在25-32℃比较适宜生长。（真菌适宜温度25-28℃，细菌 适宜温度30-35℃，控制菌适宜温度35-37℃）。 4、氧气：环境中的氧气的有无对细菌的生长有很大的影响，按照对氧 气的需要，细菌分为： ——需氧菌：结核杆菌、枯草杆菌等。 ——厌氧菌：破伤风杆菌等。 ——兼性厌氧菌：大肠杆菌等。 （四）、细菌的繁殖方式和繁殖速度
灭菌的基本目的是：既要杀死或除去药剂中的微生物，又要保证药 物的理化性质稳定及临床疗效不受影响。微生物的繁殖很快，细菌的芽 胞具有较强的抗热力，不易杀死，故灭菌效果应以杀死芽胞为主。
灭菌的方法基本上分为二大类：物理方法（干热灭菌法、湿热灭菌 法、滤过除菌法、紫外线灭菌法、辐射灭菌法、火焰灭菌法等）和化学 方法（气体灭菌法、化学杀菌剂灭菌法等）。 2、灭菌的基本要求
煮沸灭菌法就是把安瓿或其他物品放入水中煮沸灭菌。 流通蒸汽灭菌与煮沸灭菌一般是100℃ 30min。此法不能保证杀死 所有的芽胞，例如破伤风菌等的芽胞，故制备过程中要采用避菌操作， 尽可能避免细菌污染。若加入适量抑菌剂时，药液经100℃ 30min加 热，可杀死抵抗力强的芽胞。 3、低温间歇灭菌法 此法是将待灭菌的制剂或药品，用60-80℃加热1h，将其中的细胞 繁殖体杀死，然后在室温或孵卵箱中放置24h，让其中的芽胞发育成为 繁殖体，再第二次加热将其杀灭。加热和放置需连续三次以上，至全部 芽胞消灭为止。 此法适用于必须用加热法灭菌但又不耐较高温度的制剂或药品。此法缺 点不仅需要时间长，并且消灭芽胞的效果常不够完全。 4、影响湿热灭菌的因素 （1）、微生物的种类与密度 各种微生物对热的抵抗力相差很大，同 一种微生物处于不同发育阶段，所需灾菌的温度与时间也不相同，繁殖 期的微生物对高温比衰老期的抵抗力小得多，细菌的芽胞的耐热性最 强。微生物体密度小（每个容器的微生物数，控制在10个以内），灭菌 时间短且灭菌效果好；菌体密度大，耐热个数出现的几率增大，故灭菌 效果降低，且即使杀死了细菌，而注射液中细菌尸体过多，亦会引起临 床上的不良反应，所以生产过程中应竭力避免污染机会。
银、砷、锌盐和结晶紫较敏感。 五、微生物在自然界的分布 （一）、土壤中的微生物
微生物在土壤中的分布很广，有细菌、放线菌、真菌等，其中以细 菌最多，放线菌、真菌次之。土壤中的微生物是一切自然界中微生物的 主要来源。 （二）、水中的微生物
水中的微生物主要来源于土壤，其分布情况也有很的差异，地下水 含微生物少，地面水则多，流动水比静止水含菌少，而沿岸水比中流水 多。如粪便和各种排泄物处理不当污染水源时，微生物的种类和数量将 会明显增加。
制剂中的微生物主要来源于制剂生产所处的环境、原辅料、工艺用 水（包括纯化水和注射用水）、制备过程中所用的设备、操作人员及包 装容器等。
1、 来自空气中的微生物：各种微生物均可存在空气中，种类和数量 随条件不同有很大变化。如静态含菌量较少，环境中有开动机器 或活动的人，空气中的含菌量增多；如空气中的湿度较高，雾滴 下降，空气中的含菌量下降；当有人讲话、咳嗽、打喷嚏时，空 气中的微生物数量增加。
干热灭菌设备 干热灭菌的主要设备有烘箱、干热灭菌柜、隧道灭菌系统等。
三、湿热灭菌法
湿热灭菌法是指物质在灭菌器内利用高压蒸汽或其他热力学灭菌手 段杀灭细菌的方法。由于蒸汽比热大，穿透力强，容易使蛋白质变性， 故其灭菌可靠，且操作简便、易于控制，湿热灭菌是制药、制剂生产应 用最广泛的一种灭菌方法，缺点是不适用于对湿热敏感的药物。 1、热压灭菌法
1、 细菌繁殖最基本的是营养物质，而药物大部分是应营养物 质，是细菌生长所必需的，生产结束后的环境卫生、工器 具的刷洗彻底，避免药液残留。
2、 生产结束后，规定环境卫生和工期具刷洗和灭菌的时间， 越短越好。
2.2避免进入对数生长期的措施 配好的药液在尽量短的时间内除菌过滤，在尽量短的时间内灌装灭
菌。（争取在对数生长期前灭菌）。
灭菌方法的灭菌效果与灭菌设备的性能、污染菌的特性、被灭菌品 的性质、受污染的程度等因素有关。因此，在药品生产的各个环节均应 采取各种有效的手段（包括除菌滤过等措施）来降低待灭菌产品灭菌前 的微生物污染及灭菌后的再次污染。
二、干热灭菌法
干热灭菌法：系指物质在干燥空气中加热达到杀灭细菌的方法。 由于空气是一种不良的传热物质，其穿透力弱，且不太均匀，所需 灭菌温度较高，时间较长，故容易影响药物的理化性质。在生产中除极 少数药物采用。 如繁殖性细菌用100℃以上的干热空气1h可被杀灭。对耐热性细菌 芽胞，需在140℃以上，灭菌效率急剧增加。 应用范围：大多用于玻璃、金属器皿和用具以及湿热不易穿透的物质或 易被湿热破坏的药物如甘油、液状石蜡、油类、油混悬液及脂肪类，软 膏基质或粉末等的灭菌。由于本法灭菌温度高，不适于橡胶、塑料制品 及大部分药物的灭菌。 《中国药典》通常的灭菌条件为：160-170℃，不少于2h；170180℃，不少于1h； 250℃，45min以上。采用干热250℃，45min.灭菌 也可除去热原物质。
二、真菌 1、概念：真菌是真核细胞型微生物，包括霉菌和酵母菌。霉菌不是分 类学上的名词，而是一些丝状真菌的统称。酵母菌为单细胞，形态较 小，无丝状菌丝体。 2、繁殖方式：真菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖，无性繁殖产 生个体多、快、简单，是常见真菌的繁殖形式。 3、真菌的生长条件：
1 真菌对营养要求不高，比较容易生长，有的真菌在任何有机物的基 质上都可生长。
有参考资料如： 1 洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时发菌量一般为10-300
个/（分钟．人）； 2 躯体一般活动时的发菌量为150-1000个/（分钟．人）； 3 快步行走时发菌量为900-2500个/（分钟．人）； 4 咳嗽一声发菌量一般为70-700个/（分钟．人）； 5 喷嚏一次发菌量一般为4000-60000个/（分钟．人）； 6 穿平常衣服发菌量一般为3300-62000个/（分钟．人）； 7 无口罩发菌量：有口罩发菌量（1：7）~（1：14）；
水中微生物有细菌、放线菌和真菌。水是生活中必不可少的，受病 原微生物污染的水，常会引起传染病的流行，因此水必须进行微生物学 的控制。 （三）、空气中的微生物
空气中的微生物主要来源于土壤，或由人和动物的的呼吸道和口腔 排出。空气中的微生物多属球菌、芽孢杆菌和产色素的细菌，真菌多为 真菌孢子，酵母菌等。 （四）、正常人体常见的微生物
操作人员、生产环境、设备、原辅料、容器、操作等方面制定制 度，并加强管理，具体就是按GMP组织生产，严格执行SOP、工 艺规程、BPR及各种规章制度。
2、 使用合适的防腐剂与抑菌剂：口服或外用的应用较多，注射剂使 用相对较少，尤其是输液不允许使用。
第二部分 消毒灭菌知识
一、灭菌的概念及基本要求
1、概念 灭菌系指用热力或其他适宜方法将物体上或介质中的微生物 杀死或除去，即获得无菌状态的总过程。
膜状物； 2、 液体药物有时出现泥土味，这也是微生物生长的早期标志； 3、 微生物分解后产生一些脂肪酸、硫化氢、酮类、胺类等，会有特
殊的恶臭； 4、 量大时可见到菌团或沉淀物产生； 5、 有时有色素形成，使药物带色； （二）、后果 含菌的药物进入人体（血液）后，可引起菌血症、败血症、毒血 症、浓毒血症等，给人体带来严重的危害，甚至死亡。 八、防止药物污染微生物的措施 1、 加强药物生产过程的管理：主要是加强药物生产的各个环节，如
自然界中广泛存在着各种微生物，因此人类的体表以及和外界相通的 腔道如口腔、鼻咽腔、泌尿生殖道、眼结膜等，经常有微生物的存在， 其中有一部分由于长期适应的结果，能长期寄存在以上部位，成为正常 菌群。但当人体受凉、过度疲劳、电离辐射、大面积烧伤时，某些正常 菌群就可以引起疾病。如大肠杆菌进入腹腔或泌尿道，引起腹膜炎、泌 尿道感染。 六、药物中的微生物
2 大多数真菌喜酸性环境，在PH3-6之间生长良好，在2-9之间也可生 长。
3 真菌生长的温度一般比细菌低，最适宜温度为23-28℃。 4、真菌（主要是霉菌）的菌落特征：由菌丝体和孢子组成，菌落疏 松，呈绒毛状，毡状，絮状，有的菌落周围出现同心圆或辐射纹，有的 呈黄、绿、青、橙、黑等颜色。 5、真菌的抵抗力：真菌对热的抵抗力不强，加热60-70℃在短时间内就 可杀死。但对低温0℃、干燥、渗透压和消毒剂有较强的耐性，对铜、
无性的二分裂法，一般细菌约20分钟繁殖一代，大约培养10小时， 肉眼就能看到细菌的生长集团。 1、细菌生长曲线
细 9.0
菌 8.5 (3) （4）
数 8Leabharlann Baidu0
目 7.5
的 7.0
对 6.5
(5)
数 6.0
5.5（1,2）
5 10 15 20 25 30h ——(1,2)：迟缓期：细菌适应环境和储备营养准备繁殖的时期，细菌部 分裂数目不增。约1-3小时。 ——（2）—（3）：对数生长期：细菌呈几何级增长
热压灭菌法系在热压灭菌器内进行的。热压灭菌器有密盖，可以使 饱和水蒸汽不逸出，由于水蒸气量不断增加，而使灭菌器内的压力渐渐 增大，利用高压蒸汽杀灭细菌，是一种公认的可靠灭菌法手提式热压灭 菌器、 热压灭菌柜（釜）、卧式热压灭菌柜、水浴式灭菌柜。 2、流通蒸汽灭菌和煮沸灭菌法
流通蒸汽灭菌法是在不密闭的容器内，用蒸汽灭菌。也可在热压灭 菌器中进行，只要打开排气阀门让蒸汽不断排出，保持器内压强与大气 压相等，即为100℃蒸汽灭菌。
空气中含有的微生物，在药品生产过程中，就会进入原辅料、 注射用水、药液、安瓶、输液瓶、罐和容器具等，从而对药品造成 污染。 2、 来自水中的微生物：配制用水和刷洗用水。因此水的制备、贮
存、分配、使用等均要有微生物污染的防治措施，具体见GMP。 3、 其他来源：原辅料、容器、操作人员等。 如糖类、维生素类等原辅料是微生物生长的良好的营养物质，因包装 破损或使用贮存不当，造成污染后，微生物极其容易大量繁殖。 另外，在生产过程中人员要进行操作，因而人体正常的微生物也可污 染药液，因此操作人员必须保持良好的卫生习惯，在操作中减少活动 与讲话，则污染的程度可大大降低。 七、微生物引起的药物变质及产生后果 （一）、药物污染微生物后，一般需在微生物大量繁殖后才出现明显变 化。主要表现为： 1、 微生物的生长首先在药物表面发现，液体药物首先在液体表面有
（20→21→22→23→24→25→26→2n），一般在10小时左右。 ——（3）—（4）：稳定期：代谢旺盛期，细菌增长数和死亡数基本相 等，总数基本保持不变，能形成芽孢的开始产生芽孢。约从10-18小 时。本期产生大量的细菌内毒素。 ——（4）—（5）：衰退期：细菌死亡数大于增值数，细菌总数开始下 降。 2、针对细菌生产曲线，生产上应该有针对性的控制：尽量延长迟缓 期，避免进入对数生长期。 2.1延长迟缓期措施：