2.1微生物的实验室培养导学案
《微生物的实验室培养》 学历案
《微生物的实验室培养》学历案一、学习目标1、了解微生物实验室培养的基本条件和操作流程。
2、掌握培养基的制备方法和无菌操作技术。
3、学会微生物的接种、培养和观察方法。
4、培养科学实验的严谨态度和团队合作精神。
二、学习重难点1、重点（1）培养基的制备和无菌操作技术。
（2）微生物的接种和培养方法。
2、难点（1）无菌操作技术的规范操作和注意事项。
（2）微生物培养过程中的污染防控。
三、知识准备1、微生物的概念和种类微生物是指肉眼难以看清，需要借助显微镜才能观察到的微小生物。
包括细菌、真菌、病毒、原生生物等。
2、微生物的特点（1）个体微小，结构简单。
（2）代谢类型多样，繁殖迅速。
（3）适应环境能力强。
四、学习过程（一）实验室培养微生物的基本条件1、合适的培养基培养基是为微生物生长提供营养物质的基质。
根据微生物的种类和培养目的不同，培养基的成分和类型也有所差异。
常见的培养基有牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基等。
2、无菌环境微生物在自然环境中广泛存在，为了避免杂菌污染，实验室培养微生物需要在无菌环境中进行。
无菌环境的创建包括对实验器具的灭菌、操作空间的消毒以及操作人员的无菌操作等。
3、适宜的温度、pH 和氧气条件不同的微生物对生长环境的温度、pH 和氧气需求各不相同。
例如，细菌一般在 37℃左右生长良好，真菌则更适合在 25-28℃的环境中生长。
（二）培养基的制备1、计算根据要培养的微生物种类和培养目的，确定培养基的配方，并按照配方计算所需各种成分的用量。
2、称量准确称量所需的各种成分，包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等。
3、溶化将称好的成分加入适量的蒸馏水，加热搅拌至完全溶解。
4、调 pH用 pH 试纸或 pH 计测定培养基的 pH，并使用酸碱溶液进行调节，使其达到适宜的 pH 值。
5、灭菌将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅中，在 121℃、105kg/cm²的压力下灭菌 15-30 分钟。
灭菌的目的是杀死培养基中的所有微生物，包括芽孢和孢子。
高二生物《微生物的实验室培养》学案
微生物的实验室培养导学案一、培养基：1．种类：（1）按物理性质可分：培养基和培养基。
（2）按培养基用途可分：培养基和培养基。
（3）按培养基成分可分：培养基和培养基。
2．组成：培养基一般含有、、和，要满足微生物生长对、以及的要求。
二、无菌技术——获得纯净培养物的关键1．含义：在培养微生物的操作中，所有防止的方法。
项目条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物不包括芽孢和孢子煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法的液体化学药剂消毒法用擦拭双手用消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括灼烧灭菌法工具干热灭菌法、金属工具高压蒸汽灭菌法及容器的灭菌三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）操作步骤：→→→→。
问题：①牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？。
②在上述培养基的称量操作中，动作要迅速，为什么？。
③溶化操作中要不断用玻璃棒搅拌，为什么？。
（2）倒平板：待培养基冷却至℃（原因？）左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
①用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：。
②甲、乙、丙中的灭菌方法是。
③丁中的操作需要等待才能进行。
问题：①锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？。
②倒平板的目的是什么？。
③配制斜面培养基作用是什么？。
④试管为什么要加塞棉塞？。
2．纯化大肠杆菌（1）原理：在培养基上得到由一个细菌繁殖来的肉眼可见的菌落，获得较纯的。
（2）纯化大肠杆菌的关键步骤是。
常用的微生物接种方法有以下两种。
①平板划线法：通过在琼脂固体培养基表面的操作，将聚集的菌种分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
系列稀释操作：a．取盛有mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
b．用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。
高中生物2.1微生物的实验室培养学案新人教版选修1
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养学习目标1.说出培养基的类型、用途和基本成分。
2.举例说明常用的消毒与灭菌方法。
3.阐明培养基配制的方法和接种的方法。
学习重点培养基的营养成分、无菌操作的基本方法、配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。
学习难点配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。
课前预习使用说明与学法指导生物选修一专题二课题一知识准备搜集微生物实验室培养的资料。
教材助读（一）培养基1.概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养物质。
2.培养基的化学成分包括四类营养成分。
除此之外，培养基还要满足微生物生长对、特殊营养物质以及的要求。
3.分类方式（二）无菌技术1.关键防止的入侵。
2.无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与相接触。
3.比较消毒和灭菌（三）实验操作（大肠杆菌的纯化培养）1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基①计算：根据比例，计算100mL培养基各成分用量。
②称量：牛肉膏较黏稠，可用玻棒挑取，同一同称量。
称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
③溶化：加水加热熔化牛肉膏与称量纸→取出称量纸→加入蛋白胨和氯化钠继续加热→加入→用蒸馏水定容到100mL（整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）。
④灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用灭菌锅灭菌；所用培养皿用报纸包扎后用箱灭菌。
⑤倒平板：待培养基冷却至左右时在附近操作进行。
其过程是：a.在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；b.右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；c.左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖。
d.待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
2.纯化大肠杆菌①方法：微生物接种的最常用方法是和。
选修1专题2课题1微生物的实验室培养(第一课时)导学案教师版
专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养（第一课时）一、基础知识1．培养基(1)概念：人们按照微生物对__营养物质___的不同需求，配制出供其_生长和繁殖__的营养基质__。
(2)成分：一般含有__水__、__碳源_、__氮源__、_无机盐__，此外还要满足微生物对特殊营养物质(即生长因子)、____PH____以及氧气的需求。
常用于培养病毒的是活鸡胚。
⑭培养基配置原则：(1)目的要明确_(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基可由简单的无机物组成；生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。
(2)营养要协调_，注意各种营养物质的浓度和比例。
(3)pH要适宜_，各种微生物适宜生长的pH范围不同，细菌6.5～7.5、放线菌7.5～8.5、真菌5.0～6.0。
2．无菌技术(1)概念：防止一切外来杂菌的侵入，并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法，称为无菌技术。
注意在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是防止外来杂菌的入侵。
(2)无菌技术的具体内容①对实验操作的_空间、操作者的__衣着和手__进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的__器皿、接种用具和培养基等进行_灭菌_。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_酒精灯火焰附近_进行。
④实验操作时应避免已___灭菌_处理的材料用具与周围的物品相接触。
(3)消毒和灭菌的概念①消毒：消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的_对人体有害的微生物_(不包括芽孢和孢子)。
②灭菌：灭菌是指使用_强烈_的理化因素杀死物体内外_所有的微生物，包括_不包括芽孢和孢子_。
③消毒与灭菌的区别：两者最大的区别是__是否能杀死芽孢和孢子__。
拓展深化某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。
每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。
芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。
2.1微生物的实验室培养 教案(人教版选修1).docx
2.1微生物的实验室培养教案（人教版选修1）•课标要求进行微牛物的分离和培养。
用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。
•课标解读1.了解有关培养基的基础知识。
2.进行无菌技术的操作。
3.进行微牛物的培养。
•教学地位本课题介绍了最基本的微牛物技术，是开展其他两个课题的基础。
只有掌握了本课题所介绍的基本技术，才能完成本专题的其他课题。
同时，本课题小学习的无菌操作技术也有助于学习“植物组织培养技术”。
培养基的配置、微牛物的分离都是微牛物相关实验的必备操作技术。
•教法指导1.对于培养基的教学，首先介绍培养基的分类，在介绍液体培养基和固体培养基吋，教师可提供实物或图片，以加深学牛印象，并比较二者呈现不同物理状态的原因。
根据教材屮培养基配方的实例，以资料分析的形式，让学牛结合必修1屮“构成细胞的元素”这一•角度来分析培养基小为什么需要具备这些基本成分。
2.无菌技术的教学，首先应该结合学牛的牛活经验，让学牛意识到在我们H常牛活的环境屮，微牛物无处不在，在微牛物的培养过程屮，极有可能将环境屮的微牛物带入培养物屮，由此强调无菌操作的重耍性。
无菌操作贯穿整个微牛物实验屮，无论是培养基的配置、微牛物的接种，还是微牛物的培养，每--步都要注意无菌操作，熟练、规范的掌握无菌操作技术是成功培养微牛物的关键。
3.常用的消毒、灭菌的方法部分的教学，可先让学生阅读相关内容，然后建立比较表格，通过比较，理解并记忆消毒和灭菌的区别、二者的适用范围及具体操作方法。
可通过教材的旁栏思考题进行检测、巩固。
•新课导入建议专题1学习的传统发酵技术，所用的微牛物来自材料自身携带或者空气，教师可介绍工业发酵技术，所利用的微牛物是优良的菌种，而且是经过培养、纯化的菌种，然后设问：如何培养微生物？如何保证所使用的微生物屮没有混入其他微牛物？对人体健康有害的微牛物如何防止其扩散？这些问题不必给出答案，通过这些问题可引入本课题的学习。
•教学流程设计学牛课前预习：阅读教材比3 20,填写【课前自主导学】，完成“思考交流1、2”。
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案2 新人教版选修1 (2)
微生物的实验室培养课程目标：了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
课题重点：无菌技术的操作基础知识一、培养基：1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二)消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。
一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：、、、、。
〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是：①在火焰旁右手拿，左手；②使锥形瓶的瓶口；③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。
高中生物 2.1《微生物的实验室培养》实验教学设计 新人教版选修1
《微生物的实验室培养》教学设计1 教学目标确立知识目标：列举培养基的种类等基础知识，说明培养基配方及作用；概述无菌技术。
能力目标：尝试培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
熟练规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。
情感态度价值观方面：体验制作牛肉膏蛋白胨培养基，培养纯化大肠杆菌的方法；实验过程，体验实验操作领悟实验原理，交流实验体会；形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
2、教学重难点：无菌技术的操作。
由于微生物在自然界分布广泛，在实验室培养微生物除了要为微生物提供合适的营养和环境条件外，还需要确保其他微生物无法混入。
因此，实验时针对培养基、操作者、用于培养的器皿、接种工具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理。
在“无菌”的条件下接种和培养，获得纯净培养物，才能成功培养微生物。
可见无菌技术是微生物培养过程的关键。
教学中可联系医疗和生活实际深入理解无菌技术。
3 教学实施建议（1）拟定实验计划微生物实验室培养需要在无菌条件下进行，实验技术要求高。
对本课题教学组织采用实验探究的模式，注重微生物实验基本操作和技能的训练。
采用课上和课下统筹安排，理论和实践并举，在操作中理解原理，利用原理指导实践。
基于此，对本实验教学安排如下：实验计划教学目标教师活动学生活动设计意图第一课时学习有关培养基的知识和无菌技术提供相关材料，进行基础知识介绍明确实验原理通过讲解，设计表格进行知识归纳第二课时学习有关制备牛肉膏、蛋白胨固体培养基的方法；进行制备牛肉膏、蛋白胨培养基、倒平板操作提供实验器具，和培养基配方，指导学生操作进行实验培养基和器皿灭菌，倒平板操作尝试配制培养基及倒平板第三课时进行实验室纯化大肠杆菌操作介绍平板划线和稀释涂布平板原理，并指导学生接种操作利用各小组自己配制的培养基在无菌条件下接种大肠杆菌操作尝试利用牛肉膏蛋白胨培养基接种大肠杆菌并纯化培养第四课时培养观察、展示成果，分析原因和课题延伸组织交流和介绍菌种保藏观察记录结果并进行分析观察并分析成功和失败原因，拓展视野（2）理解实验原理：实验原理是实验所遵循的科学道理，具体地说它是进行实验设计和操作的理论依据。
选修一生物2.1微生物的实验室培养学案(人教版)
选修一生物2.1微生物的实验室培养学案（人教版）课题1 微生物的实验室培养问题导学一、培养基和无菌技术活动与探究1．配制培养基所用的琼脂的成分和作用是什么？．为什么有的微生物培养基中需加入特殊营养物质？．培养基是如何分类的？．消毒和灭菌的原理、实质相同吗？．请判断以下材料或用具是需要消毒还是灭菌。
培养细菌用的培养基与培养皿。
玻璃棒、试管、烧瓶和吸管。
实验操作者的双手。
迁移与应用1灭菌的标准是。
A．杀死所有的病原微生物B．杀死物体表面所有的微生物c．杀死所有的微生物，包括芽孢和孢子D．使病原菌不生长．培养基的类型及应用标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离，鉴定，计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保藏液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类鉴定目的用途鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培养基添加某种化学成分菌种的分离注：培养基中的营养物质是维持机体生命活动，保证生殖、发育所需的外源物质。
在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类；微生物共有的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物质。
．实验室常用的消毒或灭菌方法灭菌或消毒种类主要方法应用范围灼烧灭菌酒精灯火焰灼烧接种环、接种针及试管口等干热灭菌干热灭菌箱内，在160～170℃下加热1～2h玻璃器皿、金属用具等巴氏消毒70～75℃下煮30in牛奶、啤酒等一些不耐高温的液体高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅内，100Pa，121℃下持续加热15～30in培养基等紫外线消毒30紫外线灯照射30in接种室空气等化学药物消毒用体积分数为70%～75%的乙醇、碘酒涂抹等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，手术器械、玻璃器皿等消毒二、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基活动与探究2．用流程图表示该培养基的制备过程。
专题 课题1《微生物的实验室培养》导学案
班级：_____ ____ 组姓名_________ 教师评价_______专题 2课题1《微生物的实验室培养》【课程标准】具体内容标准：进行微生物的分离和培养活动建议：用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落【学习目标】知识目标：1.举例说明有关培养基的基础知识2.概述无菌操作技术包括的主要内容能力目标：掌握纯化大肠杆菌的基本操作【学习重难点】重点：说出有关培养基的基础知识难点：微生物培养中的有关实验操作【自主探究案】一、基础知识（一）培养基1.按照配置成的状态,培养基的种类包括培养基和培养基等。
2.培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分。
3.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、_ 以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供________的条件。
（二）无菌技术1.获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在____________________附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_______________________相接触。
2.消毒和灭菌（1）消毒是指使用____________________________________仅杀死物体表面或_________的部分微生物（不包括______和_______）。
常用的消毒方法有、。
此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。
此外，实验室里还用进行消毒。
（2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体__________的微生物，包括芽孢和孢子。
常用的灭菌方法有、、，二、实验操作：1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基→→→→倒平板,往往在灭菌前还需要_____________2.纯化大肠杆菌微生物接种的方法中最常用的是和。
微生物的实验室培养学案
微生物的实验室培养学案课题1:微生物的实验室培养（导学案）高二生物组目标制导1、通过学习知道培养基的种类、营养要素及如何配制培养基2、通过学习知道消毒灭菌的原理和方法3、通过自学你将晓得如何用牛肉膏蛋白胨液态培养基展开大肠杆菌的提纯培育问题导学一、培养基:写作课本培养基的有关内容，顺利完成以下问题：（1）培养基分为哪两类？二者的区别？培养基有何用途？（2）相同的微生物所须要的培养基配方相同吗？培养基的基本成分（主要营养物质）存有哪些？为什么大多数培养基都需要具备这些基本成分？（3）培养基巴戟为微生物生长提供更多几种主要营养物质外，培养基还须要满足用户微生物生长的哪些建议？（4）你知道牛肉膏、蛋白胨可以为微生物的生长提供哪些营养物质吗？二、无菌技术：写作无菌技术的有关内容，顺利完成以下问题：（1）获得纯净培养物的关键是什么？无菌技术围绕什么而展开？主要包括哪几个方面？（2）什么就是消毒与杀菌？二者的区别？实验室常用的消毒方法、杀菌方法存有哪些？分别适用于于那些用具？（3）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？（4）恳请你推论以下材料或用具与否须要消毒或杀菌。
如果须要，请选择最合适的方法。
①培养细菌用的培养基与培养皿。
②玻棒、试管、烧瓶和吸管。
③实验操作者的双手。
④注射环路、注射针和其他金属用具。
⑤接种室、接种箱、超净工作台⑥牛奶、啤酒、果酒等（5）无菌技术除了用以避免实验室的培育物被其他外来微生物污染外，除了什么目的？（6）使用后的培养基丢弃前要怎样处理？为什么？三、实验操作方式----大肠杆菌的提纯培育：（一）阅读课本制备牛肉膏蛋白胨固体培养基相关内容，思考回答以下问题：（1）用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养分哪两个阶段？（2）制取牛肉膏蛋白胨液态培养基的步骤？（3）称取牛肉膏和蛋白胨时要注意什么？（4）在展开熔化的操作方式时，重新加入水、牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂的顺序就是？为什么在琼脂熔融的过程中要不断用玻棒烘烤？（5）阅读倒平板操作的具体步骤，思考以下问题：①培养基杀菌后，须要加热至50℃左右时，就可以用以好像平板。
【人教版】生物选修一：2.1《微生物的实验室培养》教案设计
专题2 微生物的培养与应用课题2.1 微生物的实验室培养一、【课题目标】（一）知识与技能了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神二、【课题重点】无菌技术的操作三、【课题难点】无菌技术的操作四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
（二）进行新课1．基础知识1．1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。
【补充】培养基的类型及其应用：【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
1．3 培养基除满足微生物生长的 pH 、特殊营养物质和氧气等要求。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。
活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：1．4 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
1．5 无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。
微生物的实验室培养(导学案)确定版
高二年级生物学科导学案【课题】：微生物的实验室培养编写人：沈小军审核人:高二生物组【学习目标】1.说出无菌操作的基本知识2.阐述培养基的制备过程。
【学习导航】：活动1．阅读课本，梳理基础知识1．1 培养基的种类包括培养基和培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的，在配制培养基中用作为。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？1．2 培养基除满足微生物生长对、和等要求。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供、和等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加，培养霉菌时需要将培养基pH调节为，培养细菌时需要将pH调节为。
活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：1．3 获得纯净培养物的关键是。
1．4 无菌技术包括：（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行；（3）为避免周围微生物污染，实验操作应在旁进行；（4）避免已灭菌处理的材料用具与相接触。
1．5 比较消毒和灭菌（填表）1．6 消毒方法：（1）日常生活经常用到的是消毒法；（2）对一些不耐高温的液体，则使用消毒法；（3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒等溶液以增强消毒效果，然后使用进行物理消毒。
（4）实验操作者的双手使用进行消毒；（5）饮水水源用进行消毒。
1．7灭菌方法：（1）接种环、接种针、试管口等使用灭菌法；（2）玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是；（3）培养基、无菌水等使用高压蒸汽，所用器械是。
（4）表面灭菌和空气灭菌等使用灭菌法，所用器械是。
〖思考1〗对接种环灭菌时要用酒精灯的层火焰灼烧可能伸入试管或培养皿的部位。
〖思考2〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是__________________。
〖思考3〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
专题二课题1 微生物的实验室培养使用班级姓名小组【复习目标】1.了解培养基、消毒、灭菌等基础知识；2.理解无菌技术的操作。
【自主预习】一、培养基1．概念：人们按照微生物对__营养物质 _的不同需求，配制出的供其_生长繁殖__的营养基质。
2.种类：按照培养基的物理性质划分（1）_液体__培养基：配制成的__液体___状态的基质。
（2）__固体__培养基：在__液体___培养基中加入___凝固剂__，如琼脂后，配制成的____固体___状态的基质，是实验室中最常用的培养基之一，微生物在其上面生长，可形成肉眼可见的___菌落___。
3.组成成分：各种培养基的具体配方不同__，但一般都有__水___、__碳源___、_氮源__、_无机盐___，此外培养基还需要满足微生物生长对___PH___、_特殊营养物质__ 以及__氧气___的需求。
二、无菌技术获得纯净培养物的关键是___防止外来杂菌的入侵__。
1．消毒是指使用较为温和_____的物理方法或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分__ __对人体有害___的微生物（不包括__芽孢__和__孢子____）。
实验室常用的消毒方法有____煮沸消毒法___、__巴氏消毒法___、____化学药剂消毒法____。
2.灭菌是指使用____强烈_____的理化因素杀死___物体内外所有____的微生物，包括__芽孢___和___孢子__。
常用的灭菌方法有____灼烧灭菌___、__干热灭菌__、___高压蒸汽灭菌____。
3.实验操作中避免杂菌的污染，主要包括四方面的内容：（1）对实验操作的__空间____、操作者的___衣着和手_____进行清洁和消毒。
（2）将用于微生物培养的__器皿__、___接种用具____和___培养基____等进行灭菌。
（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在____酒精灯火焰____附近进行。
（4）实验操作时应避免___已经灭菌处理____的材料用具与周围物品相接触。
4.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被_____微生物污染____。
使用后的培养基丢弃前一定要进行___灭菌__处理，以免污染环境。
三、分离纯化大肠杆菌本实验使用的培养基为___牛肉膏蛋白胨___培养基。
进行大肠杆菌的纯化培养，可分为 _制备培养基___和___纯化大肠杆菌___两个阶段。
1.制备培养基的一般步骤为：__计算___、__称量___、__溶化__、__灭菌_、_倒平板__。
2.纯化大肠杆菌：微生物接种最常用的方法是__平板划线法___和____稀释涂布法____。
（1）平板划线法通过___接种环___在琼脂固体培养基表面连续___划线__的操作，将___聚集__的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
（2）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的___梯度稀释___，然后将不同稀释度的菌液___分布涂布__到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
3.菌落的概念：__由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体___。
4.结果分析：（1）如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，说明____接种符合要求____；（2）若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中___有杂菌未消化__；（3）未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若长出菌落，则说明_培养基灭菌___不彻底，实验失败。
四、菌种保存1.对于频繁使用的菌种，可以采用___临时保藏__的方法。
（1）过程：首先将菌种接种到试管的___固体斜面培养基上__，合适温度下培养，菌落长成后，放于____4℃__冰箱中保藏，每隔3—6个月，都要将菌种从旧的培养基上转移到新的培养基上。
（2）缺点：保存时间___短___，菌种容易被___污染___或产生__变异____。
2.对于需要长期保存的菌种，可以采用___甘油管藏___的方法，将培养的菌液与等体积灭菌后的甘油混匀于__-20℃___的冷藏箱内保存。
【知识拓展】1．消毒与灭菌的区别消毒是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。
例如一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法；对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行消毒处理的巴氏消毒法，等等。
灭菌是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
例如各种高温灭菌措施等。
2．微生物的营养类型异养微生物生命活动所需要的能源，主要靠有机物氧化分解释放能量，碳源是异养微生物的主要能源物质，碳源对异养微生物来说，不仅可为机体提供构成细胞物质，而且为机体提供完成整个生理活动所需能量。
某些异养微生物也可以光能作为能源，例如红螺菌，在环境中没有有机物的条件下，它可以利用光能，把环境中的CO2合成为自身有机物；在有有机物存在的条件下，可以利用有机物进行生长，其代谢类型为兼性营养型细菌。
自养微生物和异养微生物类型的划分，主要依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一碳源，而不是决定于氮源。
例如异养微生物最常用的氮源是无机氮源中的铵盐和硝酸盐。
3.生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
4.培养基的配制原则：①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。
【当堂练习】1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①②B．③④ C．①③D．②④2．下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源3．下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法4．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基5．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是 ( )A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源6．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。
培养36 h后，计算菌落数，结果如下表。
下列选项正确的是( )A.C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖7.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( )A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板8.有关倒平板的操作错误的是…………( )A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置9.有关平板划线操作正确的是…………( )A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞C．将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养10．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A利于大肠杆菌的接种 B防止杂菌污染 C利于培养的冷却 D 防止皿盖冷却水倒流入培养基11．下列有关培养基的叙述正确的是 ( )A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌12．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 ( )A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．再放在适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落13．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是……………( )A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放人未接种的培养基 D．为了下次接种时再使用14关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量15．作为自养生物唯一碳源的是（）A糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼16．大肠杆菌的代谢类型是（）A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧17．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质18．下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。
请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水用量5 g10 g5g20 g1000mL(1)__氮源__养基配方中能充当碳源的成分是_牛肉膏和蛋白胨__。
培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行__灭菌_处理。
该培养基从物理性质上分类属于_固体培养基_。
(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__平板划线法_和__稀释涂布平板法_。
(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么(列举两项)___稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。
_。
19． (2009·上海卷)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。
某研究小组依照下图所示的实验方案，筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。
培养基配方如表。
表培养基的组成液体蛋牛氯苯氯化硝酸无机蒸111__琼脂____。
(2)培养基配制时，灭菌与调pH 的先后顺序是__先调pH ，后灭菌_。
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于____基本(通用)___培养基和____选择_培养基。
在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____硝酸铵__。