HepaCA通过SMAD23caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡
三氧化二砷诱导A375细胞凋亡过程中NF-κB、C-IAP2及Caspase-3的信号传..
三氧化二砷诱导A375细胞凋亡过程中NF-κB、C-IAP2及Caspase-3的信号传导途径研究摘要目的：观察三氧化二砷（arsenic trioxide, As2O3）诱导人黑素瘤A375细胞凋亡过程中NF-κB、C-IAP2、Caspase-3的变化，以及As2O3对A375细胞和正常成纤维细胞的生长抑制作用。
方法：As2O3作用于A375细胞和正常成纤维细胞，HE染色法观察细胞的形态学变化，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测As2O3对细胞生长的影响；As2O3和Caspase-3特异性阻断剂Ac-devd-cho（N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp -CHO）单独或联合作用于A375细胞，MTT法检测对A375细胞的生长抑制作用；Western blot法检测NF-κB核蛋白的表达和Caspase-3蛋白的活化、免疫组织化学法检测Caspase-3激活蛋白的表达、半定量RT-PCR法检测C-IAP2 mRNA的表达。
结果：①HE染色显示As2O3能引起细胞形态改变，相同作用浓度对A375细胞形态改变比成纤维细胞显著。
②2.5～12.5μmol/L的As2O3对A375细胞和正常成纤维细胞均有抑制生长的作用，相同条件下A375细胞生长抑制率高于成纤维细胞，差异具有统计学意义（P<0.05）。
③As2O3对A375细胞的生长抑制具有浓度和时间依赖性，As2O3单独作用24h和48h的半数抑制浓度（IC50）分别为11.52μmol/L 和4.43μmol/L；As2O3与20μmol/L Ac-devd-cho联合作用24h和48h的IC50分别为18.76μmol/L和9.82μmol/L。
④2.5、5.0、10.0μmol/L As2O3作用于A375细胞24h，Western blot结果显示NF-κBp65核蛋白表达比值分别为（39.60±7.76）%、（10.17±0.90）%和（4.43±0.91）%；Caspase-3蛋白比值分别为（10.03±2.06）%、（23.43±3.28）%和（35.70±4.61）%；RT-PCR法检测C-IAP2 mRNA表达的比值为（66.78±15.46）%、（30.16±5.52）%、（6.46±4.54）%，上述各指标与相应对照组比较及组内两两比较差异均具有统计学意义（P<0.01）结果表明随着As2O3作用浓度的增加，Caspase-3激活型蛋白增多、NF-κBp65核蛋白和C-IAP2 mRNA表达下降。
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》摘要本研究主要探讨了大黄素对人宫颈癌HELA细胞凋亡的影响及其机制。
通过激活Caspase-3等因子，揭示了大黄素诱导HELA 细胞凋亡的潜在机制。
本论文首先介绍了研究背景和意义，随后详细描述了实验材料和方法，接着对实验结果进行了分析讨论，最后总结了研究的主要发现和结论。
一、引言宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，其发生与发展与多种基因表达和细胞凋亡过程有关。
大黄素作为一种天然活性成分，在肿瘤治疗中展现出潜在的应用价值。
因此，本研究旨在探讨大黄素激活Caspase-3等因子对HELA细胞凋亡的影响及其机制，为宫颈癌的治疗提供新的思路和方法。
二、材料与方法1. 材料（1）细胞株：人宫颈癌HELA细胞。
（2）药物：大黄素。
（3）实验仪器和试剂：包括细胞培养相关设备、荧光显微镜、PCR仪等。
2. 方法（1）细胞培养：培养HELA细胞并使其处于对数生长期。
（2）药物处理：将不同浓度的大黄素加入培养基中处理HELA细胞。
（3）凋亡检测：通过流式细胞术、Western Blot等方法检测细胞凋亡情况及Caspase-3等因子的表达水平。
（4）数据统计与分析：采用SPSS软件进行数据处理和统计分析。
三、实验结果1. 大黄素对HELA细胞生长的抑制作用实验结果显示，大黄素能够显著抑制HELA细胞的生长，并呈剂量依赖性。
随着大黄素浓度的增加，细胞生长抑制率逐渐提高。
2. 大黄素激活Caspase-3等因子诱导HELA细胞凋亡流式细胞术检测结果显示，大黄素处理后，HELA细胞的凋亡率显著增加。
同时，Western Blot结果显示，大黄素能够激活Caspase-3等因子，促进其表达水平上升。
这表明大黄素通过激活Caspase-3等因子诱导HELA细胞凋亡。
3. 大黄素诱导HELA细胞凋亡的机制进一步研究发现，大黄素能够调节相关基因的表达，如Bcl-2家族基因、P53基因等，从而影响线粒体功能，导致线粒体膜电位下降，释放细胞凋亡相关因子。
大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究
大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究谢国海;严泽军;程跃;蒋军辉;胡嘉盛【期刊名称】《现代实用医学》【年(卷),期】2011(23)12【摘要】目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制.方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组[对照组、大黄素组、Caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)组及大黄素+Z-VAD-FMK组].观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,RT-PCR检测各组肿瘤组织中线粒体蛋白凋亡诱导因子(AIF)和核酸内切酶G(Endo G)的mRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和Endo G蛋白的表达.结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组和大黄素+Z-VAD-FMK组肿瘤较其他2组轻,差异均有统计学意义(均P＜0.01),大黄素组与大黄素+Z-VAD-FMK组差异也有统计学意义(P＜0.01).大黄素+Z-VAD-FMK组中AIF和Endo G的表达水平显著上调,与其他各组比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01).结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关.【总页数】4页(P1343-1345,1347)【作者】谢国海;严泽军;程跃;蒋军辉;胡嘉盛【作者单位】315000宁波,宁波市第一医院;315000宁波,宁波市第一医院;315000宁波,宁波市第一医院;315000宁波,宁波市第一医院;315000宁波,宁波市第一医院【正文语种】中文【中图分类】R733.7;R285.5【相关文献】1.SN50联合5-氟尿嘧啶通过调节NF-κB信号通路抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长的研究 [J], 刘静;刘婷;徐睿玲;王新红;刘冰熔2.白杨素抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的初步研究 [J], 李卿;何娅娣;罗子寰;陈晓波;高新;李辽源3.人参皂苷Rg3通过内质网应激PERK通路抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的研究[J], 黄捷;吴可人;徐涛;金法;叶志鹏;阎九亮;李宁4.基于Bax/Bcl-2-Caspase-3通路芍药软肝方抑制裸鼠肝癌生长及机制研究 [J], 李骏飞;郑小蓉;姜建伟;章红燕5.姜黄素下调HIF-1α/MMP-9通路抑制人胃癌裸鼠移植瘤生长 [J], 何丽琳;沈永祥;周中银;徐禹;刘梓良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Caspase-3在膀胱癌组织中的表达及意义
Caspase-3在膀胱癌组织中的表达及意义谢庆祥;林吓聪;张闽峰【期刊名称】《中国医学工程》【年(卷),期】2005(013)001【摘要】目的探讨caspase-3在膀胱癌发病过程中的作用及与细胞凋亡之间关系.方法应用免疫组织化学方法和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法,检测55例膀胱癌和12例正常膀胱组织中caspase-3和细胞凋亡的表达水平.结果膀胱癌中caspase-3阳性表达率为41.8%,显著低于正常膀胱组织的75.0%(P ＜0.05).caspase-3表达与膀胱癌病理分级、临床分期和肿瘤复发之间无关(P＞0.05).膀胱癌中caspase-3阳性表达者的细胞凋亡指数为9.3±3.1显著高于阴性表达者的6.8±2.4(P＜0.001).结论 caspase-3表达下调导致细胞凋亡减少,可能在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用.【总页数】2页(P44-45)【作者】谢庆祥;林吓聪;张闽峰【作者单位】福建省漳州市解放军第175中心医院泌尿外科,福建,漳州,363000;福建省漳州市解放军第175中心医院泌尿外科,福建,漳州,363000;福建省漳州市解放军第175中心医院泌尿外科,福建,漳州,363000【正文语种】中文【中图分类】R737.14【相关文献】1.乳腺癌组织中caspase-3及caspase-8的表达及意义 [J], 赵丽敏;赵帅;毕仁杰;贾军利;李海峰;张晓丽2.survivin在膀胱移行细胞癌组织中的表达及与Caspase-3、p53相关性的研究[J], 陈智彬;曹建伟;宋彦;祝兴旺;宋永胜3.Caspase-3和c-IAP1在胃癌组织中的表达及意义 [J], 杨静;齐洁敏;王明娟4.膀胱尿路上皮癌组织中SRSF1及Caspase-3的表达水平及临床意义 [J], 宰国真;王旭东;马梅;李彦伟5.Livin及Caspase-3在下咽癌组织中的表达及临床意义 [J], 丁凌雁;唐朝晖;李立志;黄洪林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
Caspase-8、caspase-3在5-氟尿嘧啶诱导肝癌细胞凋亡中的作用
Caspase-8、caspase-3在5-氟尿嘧啶诱导肝癌细胞凋亡中的作用杨连粤;易彤波;吕军;杨建青【期刊名称】《中华肝脏病杂志》【年(卷),期】2003(011)005【摘要】@@ Caspase蛋白酶与细胞凋亡密切相关,凋亡可能就是caspase蛋白酶级联切割的过程[1, 2].研究证实caspase-3在5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导人肝癌细胞凋亡中发挥重要作用[3].而在5-Fu诱导人肝癌细胞凋亡中caspase-8的作用及其与caspase-3活化之间的关系尚不明了.我们进一步研究5-Fu诱导人肝癌细胞凋亡中caspase-8的活性变化及其与caspase-3间的活化关系,旨在探讨caspase-8和caspase-3在化疗诱导肝癌细胞凋亡过程中的作用,为阐明化疗的确切分子机制提供理论依据.【总页数】2页(P314-314,317)【作者】杨连粤;易彤波;吕军;杨建青【作者单位】410008,长沙,中南大学医学院湘雅医院外科;410008,长沙,中南大学医学院湘雅医院外科;410008,长沙,中南大学医学院湘雅医院外科;410008,长沙,中南大学医学院湘雅医院外科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.Caspase-8、caspase-3在5-氟尿嘧啶诱导肝癌细胞凋亡中的作用 [J], 易彤波;杨连粤;吕军2.Caspase-8、caspase-3与Fas介导凋亡信号传导及其在肝癌细胞凋亡中的作用[J], 杨连粤;易彤波3.白杨素对5-氟尿嘧啶诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的增敏机制研究 [J], 宋秀道; 毛晨梅; 马锦4.重组腺病毒Ad-IκBαM在5-氟尿嘧啶诱导胃癌细胞凋亡中的作用 [J], 胡丽红;刘冰熔;刘丹;关景明;吕志武;杜雅菊5.他克莫司对5-氟尿嘧啶诱导肝癌细胞凋亡的影响及其机制的初步探讨 [J], 曹晓伟;傅志仁;唱浩;丁国善因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
华蟾素通过ROS-MAPK和NF-κB信号通路促进食管癌细胞凋亡
华蟾素通过ROS-MAPK和NF-κB信号通路促进食管癌细胞凋亡华蟾素通过ROS/MAPK和NF-κB信号通路促进食管癌细胞凋亡食管癌是一种高度侵袭性的恶性肿瘤，其发生和发展与多种信号通路的异常激活密切相关。
近年来的研究表明，华蟾素作为一种天然产物，具有抗肿瘤的活性。
本文将重点探讨华蟾素在通过ROS/MAPK和NF-κB信号通路促进食管癌细胞凋亡中的作用机制。
华蟾素（Bufalin）是一种从华蟾科动物的皮肤中提取出来的中草药活性成分，已被证实具有抗癌活性。
研究表明，华蟾素能够通过影响细胞周期、促进细胞凋亡、调节基因表达等多种途径来抑制肿瘤生长。
最近的研究发现，华蟾素通过ROS/MAPK和NF-κB信号通路也起到了抗食管癌的作用。
氧化应激（ROS）是一种细胞内外的氧化代谢产物，在细胞内发挥着重要的调节作用。
适量的ROS能够通过改变细胞信号传导途径来调控细胞生长和凋亡。
由于食管癌细胞的代谢紊乱和缺氧状态，导致了ROS的异常积累。
研究发现，华蟾素能够显著增加食管癌细胞内ROS的水平，进而影响了MAPK信号通路的激活。
MAPK是一种重要的细胞信号传导途径，包括ERK、JNK和p38等下游效应分子。
华蟾素的作用通过增加ROS的水平来激活MAPK信号通路，进而抑制食管癌细胞的增殖和诱导其凋亡。
此外，NF-κB信号通路在多种癌症的发生和发展中起着重要的作用，包括食管癌。
NF-κB是一种转录因子，能够调控多种基因的表达，包括细胞凋亡相关的基因。
而华蟾素能够通过抑制NF-κB的激活来促进食管癌细胞的凋亡。
研究显示，华蟾素能够抑制NF-κB的核转位和DNA结合能力，从而抑制凋亡抑制基因的表达，增加细胞凋亡相关基因Bax和caspase-3的表达，最终促进食管癌细胞的凋亡。
除了ROS/MAPK和NF-κB信号通路外，华蟾素还能通过其他多个信号通路来发挥其抗癌作用。
例如，华蟾素能够抑制食管癌细胞中表达的MDR1 P-gp蛋白，增加化疗药物的敏感性；能够阻断食管癌细胞的线粒体功能，导致线粒体膜电位降低，释放细胞色素c，从而诱导细胞凋亡等。
百里醌诱导膀胱癌细胞凋亡作用机制的研究
百里醌诱导膀胱癌细胞凋亡作用机制的研究王大文;朱诗建;木海琦;李晟;周鹏飞;杨森;南存金;陈映鹤【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2015(044)003【摘要】目的探讨百里醌对人膀胱癌细胞株BIU-87细胞凋亡的影响及对其诱导凋亡的潜在作用机制.方法应用CCK8法检测细胞增殖活性,Hoechst33258染色法检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测基因Bcl-2、Bax、caspase-3、c-myc mRNA 的表达水平,Wsetern blot法检测不同浓度百里醌作用后Bcl-2、Bax、c-myc蛋白表达水平的变化.结果细胞增殖抑制曲线结果显示百里醌能明显抑制BIU-87细胞增殖,其24、48、72h半数抑制浓度(IC50)分别是38.75 ±0.58、34.33±1.01和32.43±0.71 μmol/L.百里醌能以剂量依赖性方式诱导膀胱癌细胞凋亡.百里醌作用于BIU-87细胞后,Bcl-2、c-myc mRNA及Bcl-2、c-myc蛋白的表达量呈浓度依赖性降低,而caspase-3、Bax mRNA及caspase-3、Bax蛋白表达水平呈浓度依赖性递增.结论百里醌能抑制BIU-87细胞的增殖,且能诱导BIU-87细胞的凋亡,其诱导凋亡机制可能与Bcl-2、c-myc表达水平降低及caspase-3、Bax表达水平上调有关.【总页数】4页(P93-96)【作者】王大文;朱诗建;木海琦;李晟;周鹏飞;杨森;南存金;陈映鹤【作者单位】325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院;325000 温州医科大学附属第二医院【正文语种】中文【中图分类】R694【相关文献】1.聚维酮在阿霉素诱导膀胱癌EJ细胞凋亡模型中的作用机制 [J], 孔万仲;杨军军2.聚维酮在阿霉素诱导膀胱癌EJ细胞凋亡模型中的作用机制 [J], 杨军军;孔万仲;倪莉3.百里醌抑制膀胱癌细胞生长的实验研究 [J], 木海琦;杨森;王怡君;陈映鹤4.百里香醌对脂多糖诱导大鼠心肌纤维化的保护作用及机制研究 [J], 蔡伟;杨佳丹;高珊;李世琴;王述蓉5.百里香醌调控Caspase-3/Bax/Bcl-2信号通路诱导人皮肤鳞状细胞癌增殖和凋亡的作用机制研究 [J], 周晓谦;金星姬;杨竹生;杨秀敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
细胞凋亡信号转导通路及其在癌症发生中的作用
细胞凋亡信号转导通路及其在癌症发生中的作用细胞凋亡是一种自然的程序性细胞死亡。
正常细胞的生命周期通常较短，当细胞功能失调或DNA损伤等，会触发细胞自身死亡，保证身体健康。
然而，在癌症发生中，癌细胞往往逃避了细胞凋亡信号转导通路的调节，从而大量破坏身体健康。
因此，探究细胞凋亡信号转导通路在癌症发生过程中的作用，具有重要的科学意义和临床价值。
细胞凋亡依赖于复杂的信号通路，其中形成死亡信号复合物（death-inducing signaling complex，DISC）、激活半胱氨酸蛋白酶（cysteinyl aspartate-specific proteinase，caspase）家族酶和参与线粒体外向信号的BH3相互作用等环节是细胞凋亡最主要的调节过程。
当细胞受损后，死亡受体（death receptors）与配体结合，会招募一系列蛋白分子形成DISC，激活caspase-8分子并向下信号通路传导，进而激活效应性caspase致死细胞。
同时，细胞内蛋白、染色质和核酸低分子片段通过线粒体外向信号途径活化BH3粘附分子Bcl-2，因此将Bcl-2从线粒体膜上释放出来并抑制凋亡。
这种抑制可以被Bcl-2家族中其他的抑制因子-Bcl-XL-Bcl-W-LAFA1等削弱或抵消。
这中间互相配合协调调控，使得在正常的生长发育过程中，细胞周期调控中的细胞增殖和凋亡平衡，身体能够保持健康。
在恶性肿瘤中，凋亡信号通路遭到失调，从而导致凋亡被阻碍。
针对癌细胞中的死亡受体招募转录因子DAXX的产生，并抑制与DISC的相互作用，从而使得DISC分子无法激活caspase分子，致使凋亡不能够产生。
此外，癌细胞还通过多种机制协同作用，抑制caspase活化和细胞凋亡信号转导通路中其他关键分子的表达和致孔治疗进展或化疗的正常效果。
目前，癌症治疗中的凋亡通路治疗主要是通过增强凋亡信号途径的激活和抑制抗凋亡信号的产生，而一些有效的癌症治疗药物，如多西他赛、奥沙利铂等，正是通过刺激凋亡信号通路的激活来抑制癌细胞的生长。
细胞凋亡信通路详细与总结
p53
➢ p53 是一种抑癌基因;其生物学功能是在G期监视 DNA的完整性; 如有损伤;则抑制细胞增殖;直到 DNA修复完成; 如果DNA不能被修复;则诱导其调亡;
➢ 在依赖P53蛋白的细胞凋亡中;P53蛋白能特异地抑 制 Bcl2 的表达;但对 Bax 的表达则有明显的促进作 用; 在这些细胞中; P53蛋白的积累和活动引起了细 胞凋亡;
解 DNA; –CAD 为caspaseactivated Dnase脱氧核苷酸酶;存在于胞质中;
细胞色素释 放引起的凋 亡线粒体凋 亡通路
死亡受体凋亡通路
fas 又称作 APO1; TNFR 肿瘤坏死因子受体和 NGF 受体家族; 1993 年人白细胞分型国际会议统一命名为 CD95; Fas 蛋白受体与 Fas 配体组成 Fas 系统;二者的结合 导致靶细胞走向凋亡;
信号转导研究方法
• 免疫共沉淀 • 荧光共振能量转移FRET • 荧光漂白恢复 • 荧光相关光谱 • 免疫荧光显微技术 • 电镜显微技术
=TNF
• Fas 具有三个富含半胱氨酸的胞外区 和一个称为死亡结构域Death domain;DD的胞内区;
• Fas 的配体 FasLFas ligand与 受Ffa体ass家又结族称;合作后AP;OFa1;s属三TN聚F化肿瘤使坏死因子受体和 NGF 胞后19内与93的接年D头人D蛋白区白细构胞象分改型国变际;然会议统一命名为 CD95;
凋亡促进剂，亦可作抑制剂，可与 BCL-2，BCL-X 和 E1B19K 结合
凋亡抑制剂
凋亡促进剂，与 BCL-2 和 BCL-XL 结合 线虫中的凋亡抑制剂，BCL-2 同源物 腺病毒凋亡抑制剂，与 Bax 和 Bak 结合
Bcl2家族 引自Katja C Zimmermann等2001
5-杂氮脱氧胞苷逆转膀胱癌T24细胞死亡相关蛋白激酶的转录表达
5-杂氮脱氧胞苷逆转膀胱癌T24细胞死亡相关蛋白激酶的转录表达徐宁儒;刘春晓;郑少波;李虎林;徐亚文;许凯【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2009(029)009【摘要】目的研究膀胱癌细胞T24中死亡相关蛋白激酶(DAPK)启动子区的甲基化状态,探讨使用5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-dc)处理T24细胞后对DAPK转录表达的影响及其细胞生物学效应.方法使用不同浓度去甲基化药物5-aza-dc处理膀胱癌细胞株T24后,使用MTT法、流式细胞仪分别检测5-aza-dc对T24细胞的增殖抑制作用及凋亡率.应用甲基化特异性PCR(MSP)方法分别检测5-aza-dc(12.5μmol/L)处理前后T24细胞中DAPK启动子区甲基化状态的变化情况.应用RT-PCR、Western-blotting分别检测5-aza-dc(12.5 μmol/L)处理前后T24细胞中DAPK转录、表达的变化情况.结果 MTT法显示不同浓度5-aza-dc对T24细胞有明显的增殖抑制作用,流式细胞仪检测T24细胞的最大凋亡率为(24.12±1.4)%.正常培养条件下T24细胞中DAPK启动子区出现高甲基化且DAPK mRNA无表达,在5-aza-dc(12.5μmol/L)作用24 h后,T24细胞中DAPK启动子区恢复为未甲基化状念且DAPK mRNA及蛋白重新恢复表达.结论膀胱癌细胞株T24中DAPK启动子区高甲基化可能是抑制其转录表达的重要原因;5-aza-dc可以通过去甲基化作用使DAPK恢复表达,从而抑制T24细胞的增殖并诱导细胞凋亡.5-aza-dc有望成为膀胱癌化疗的有效药物.【总页数】5页(P1882-1886)【作者】徐宁儒;刘春晓;郑少波;李虎林;徐亚文;许凯【作者单位】南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282;南方医科大学珠江医院泌尿外科,广东广州510282【正文语种】中文【中图分类】R737.14【相关文献】1.5-氮-2′-脱氧胞苷逆转膀胱癌细胞hepaCAM基因的表达及对其生长的抑制 [J], 刘琪;潘翠翠;徐新;张彦懿;吴小候;罗春丽2.5-氮-2'-脱氧胞苷对膀胱癌T24细胞株RUNX3表达及生物学行为的影响 [J], 周琦;周祥福;肖运政;张涛;王林;刘志华3.5-氮杂-2'-脱氧胞苷酸对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及Runt相关转录因子3基因表达的影响 [J], 白和平;代志军;康华峰;陆王锋;刘小旭;马小斌;刁岩;王西京4.5-氮杂-2'-脱氧胞苷对人胃癌细胞株BGC803生长及死亡相关蛋白激酶基因表达的影响 [J], 沈薇;胡金瑶;高伟;赵慧5.5-氮杂-2-脱氧胞苷对MEG3启动子超甲基化逆转及膀胱癌细胞凋亡的作用 [J], 姜应传;陈炳;邬嘉波;王婕;张小荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
5-氮-2′-脱氧胞苷逆转膀胱癌细胞hepaCAM基因的表达及对其生长的抑制
5-氮-2′-脱氧胞苷逆转膀胱癌细胞hepaCAM基因的表达及对其生长的抑制刘琪;潘翠翠;徐新;张彦懿;吴小候;罗春丽【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2013(033)001【摘要】目的研究5-氮-2-脱氧胞苷(5-aza-CdR)逆转hepaCAM表达及抑制膀胱癌细胞的生长.方法 MTT法检测细胞增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；RT-PCR 检测hepaCAM mRNA的表达.结果在T24细胞中,3.0和10.0 μmol/L5-aza-CdR药物浓度的抑制率明显高于0.3和1.0 μmol/L 5-aza-CdR(P＜0.05),在BIU-87细胞中,5.0 μmol/L5-aza-CdR药物浓度的抑制率明显高于0.1和0.5μmol/L(P ＜0.05),并且药物处理细胞72 h的抑制率明显高于24和48 h(P＜0.05)；5-aza-CdR处理细胞后,T24和BIU-87细胞凋亡数明显增加(P＜0.05)；并可逆转hepaCAMmRNA表达.结论 5-aza-CdR可使hepaCAM基因重新表达,并通过诱导凋亡而抑制膀胱癌细胞的生长.【总页数】5页(P55-59)【作者】刘琪;潘翠翠;徐新;张彦懿;吴小候;罗春丽【作者单位】重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016;重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016;重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆400016;重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室重庆市重点实验室,重庆400016【正文语种】中文【中图分类】R979.1;Q786;R737.14;Q255【相关文献】1.5-杂氮-2'脱氧胞苷对肝癌细胞SMMC-7721 miR-1247-5p基因表达及其启动子区甲基化的影响 [J], 郭文伟;徐广贤;段相国;赵瑾;杨丽;张议心;魏军2.5-氮-2'-脱氧胞苷对人膀胱癌细胞系T24细胞及其Apaf-1、APC基因甲基化状况的影响 [J], 王文卫;潘俊;陈凌武;林焕懿;曾令友3.5-氮-2'脱氧胞苷对T24膀胱癌细胞RUNX3基因去甲基化的转录调节作用 [J], 崔军;于秀月;刘勇;李建武4.5-氮杂-2-脱氧胞苷对MEG3启动子超甲基化逆转及膀胱癌细胞凋亡的作用 [J], 姜应传;陈炳;邬嘉波;王婕;张小荣5.5-氮杂胞嘧啶核苷联合hepaCAM腺病毒通过抑制p-AKT诱导膀胱癌细胞T24凋亡 [J], 王晓荣;杨雪;王胤;吴小候;唐敏;罗春丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》摘要：本文旨在探讨大黄素激活Caspase-3等因子在诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡过程中的作用机制。
通过实验研究，我们发现大黄素能够显著激活Caspase-3等凋亡相关因子，进而诱导HELA 细胞发生凋亡。
本文将详细阐述这一过程的相关机制，为进一步研究大黄素在抗肿瘤领域的应用提供理论依据。
一、引言人宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，其发病机制复杂，治疗难度较大。
近年来，天然药物及其活性成分在抗肿瘤研究领域备受关注。
大黄素，作为一种从大黄中提取的天然活性成分，已被证实具有抗肿瘤活性。
本文将重点研究大黄素如何激活Caspase-3等因子，进而诱导人宫颈癌HELA细胞发生凋亡的机制。
二、材料与方法1. 材料（1）细胞系：人宫颈癌HELA细胞系。
（2）药物：大黄素。
（3）实验试剂与仪器：包括细胞培养相关试剂、酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂、流式细胞术相关试剂及仪器等。
2. 方法（1）细胞培养与处理：培养HELA细胞，并使用不同浓度的大黄素处理细胞。
（2）凋亡检测：通过ELISA法检测Caspase-3等凋亡相关因子的活性变化。
（3）流式细胞术：分析细胞凋亡率及细胞周期变化。
（4） Western Blot：检测相关蛋白的表达水平。
三、结果1. 大黄素对HELA细胞中Caspase-3活性的影响实验结果显示，随着大黄素浓度的增加，Caspase-3的活性逐渐增强。
这表明大黄素能够激活Caspase-3，进而触发细胞凋亡。
2. 大黄素诱导HELA细胞凋亡的机制通过流式细胞术和Western Blot实验，我们发现大黄素能够引起HELA细胞的凋亡率显著增加，同时伴随着凋亡相关蛋白（如Bcl-2、Bax等）的表达变化。
这表明大黄素通过调节凋亡相关蛋白的表达来诱导HELA细胞的凋亡。
3. 大黄素对HELA细胞周期的影响实验结果显示，大黄素处理后，HELA细胞的周期发生了明显的变化，S期细胞比例减少，G0/G1期细胞比例增加。
Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用
Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用张俊峰;陆敏强;蔡常洁;杨扬;李华;易慧敏;陈规划【期刊名称】《癌症（英文版）》【年(卷),期】2006(025)012【摘要】背景与目的:雷帕霉素是从吸水性链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)发酵液中提取,最近研究发现雷帕霉素具有免疫抑制作用和广泛的抗肿瘤作用.本研究主要探讨Caspase-3在雷帕霉素诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用.方法:以不同浓度(5、10、20、30、40、50 nmol/L)的雷帕霉素作用于BEL-7402细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡形态学变化,采用Caspase-3试剂盒和Western blot蛋白电泳测定Caspase-3活性.结果:雷帕霉素可显著抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,具有量-效与时-效关系;雷帕霉素作用BEL-7402细胞48 h后,Hoechst 33258荧光染色可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征;凋亡过程中Caspase-3酶原蛋白的激活,出现20 ku亚单位,Caspase-3特异性抑制剂z-DEVD-FMK能阻断凋亡的发生.结论:雷帕霉素能抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞凋亡发生,Caspase-3酶的激活在雷帕霉素诱导细胞凋亡机制中起到重要作用.【总页数】4页(P1508-1511)【作者】张俊峰;陆敏强;蔡常洁;杨扬;李华;易慧敏;陈规划【作者单位】中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630;中山大学附属第三医院肝移植中心,广东,广州,510630【正文语种】中文【中图分类】R735.7因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》摘要：本文旨在探讨大黄素激活Caspase-3等因子在诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡过程中的作用机制。
通过实验研究，我们发现大黄素能够显著激活Caspase-3等凋亡相关因子，并进一步触发HELA细胞的凋亡过程。
本文将从实验材料与方法、实验结果、数据分析与讨论等方面展开研究，为抗肿瘤药物的研究提供新的思路。
一、引言人宫颈癌是一种常见的妇科恶性肿瘤，其发生与多种遗传和环境因素有关。
目前，化疗是治疗宫颈癌的重要手段之一，然而化疗药物的耐药性和副作用成为亟待解决的问题。
大黄素作为一种天然产物，具有抗肿瘤、抗炎等多种生物活性。
因此，研究大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡的机制，对于开发新型抗肿瘤药物具有重要意义。
二、实验材料与方法1. 材料实验所用的人宫颈癌HELA细胞购自ATCC（美国模式培养物集存库）。
大黄素购自Sigma公司。
实验所需试剂及仪器均符合相关标准。
2. 方法（1）细胞培养与处理：HELA细胞在适宜条件下培养，并分别进行不同浓度的大黄素处理。
（2）凋亡检测：采用流式细胞术、Western blot等方法检测细胞凋亡及Caspase-3等凋亡相关因子的表达情况。
（3）数据分析：运用统计软件对实验数据进行处理与分析。
三、实验结果1. 大黄素对HELA细胞生长的影响实验结果显示，大黄素处理后，HELA细胞的生长受到明显抑制，且呈剂量依赖性。
高浓度的大黄素处理后，细胞生长受到更为显著的抑制。
2. 大黄素激活Caspase-3等因子流式细胞术和Western blot结果显示，大黄素处理后，Caspase-3等凋亡相关因子的表达明显增加，表明大黄素能够激活这些因子。
3. 大黄素诱导HELA细胞凋亡通过流式细胞术检测，我们发现大黄素处理后，HELA细胞的凋亡率显著增加，且呈剂量依赖性。
这一结果进一步证实了大黄素能够诱导HELA细胞凋亡。
三氧化二砷对裸鼠膀胱癌细胞凋亡的影响
三氧化二砷对裸鼠膀胱癌细胞凋亡的影响王岩;赵晓梅;杨倩;潘尚哈;王涌泉;安瑞华【期刊名称】《中华地方病学杂志》【年(卷),期】2006(025)006【摘要】目的探讨三氧化二砷(As2O3)抑制膀胱癌细胞生长的作用.方法体外培养膀胱癌T24细胞,取指数生长期T24细胞裸鼠皮下接种,成瘤后连续7 d尾静脉分别注射As2O3(5、10 mg·kg-1·d-1)、丝裂霉素(MMC)及生理盐水.应用电镜、流式细胞术和免疫组化等方法检测了癌细胞的超微结构变化、细胞的凋亡和Caspase 3蛋白的表达.结果电镜下As2O3组可见典型癌细胞凋亡的形态学改变;流式细胞分析,As2O3组可见癌细胞凋亡峰,凋亡率分别为10.67%和23.42%,明显高于对照组(0.83%);免疫组化检测As2O3组Caspase 3蛋白表达(33.54%和56.22%)也明显高于对照组(6.25%).结论 As2O3可以通过诱导膀胱癌细胞凋亡,抑制膀胱癌细胞生长.【总页数】2页(P636-637)【作者】王岩;赵晓梅;杨倩;潘尚哈;王涌泉;安瑞华【作者单位】150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科;150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科;150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科;150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科,中心实验室;150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科;150001,哈尔滨医科大学附属第一医院泌尿外科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.PDECGF特异性RNA抑制片段诱导裸鼠膀胱癌细胞凋亡的研究 [J], 金宁;张灵;肖博晗;常喜华2.三氧化二砷对人结肠腺癌裸鼠肝转移癌胚抗原水平的影响 [J], 孙华君;姜立新;董国生;郭吉田;吕忠船;郑海涛;陈红兵3.三氧化二砷联合TNP-470对裸鼠人肝癌移植瘤的影响 [J], 王耀;秦叔逵;刘琳;赵伟4.三氧化二砷联合紫杉醇对A549细胞增殖和裸鼠异位肿瘤生长的影响 [J], 吴晓鹏;刘孝民;刘勤;郭艳珍5.人参皂甙Rg3联合三氧化二砷对人肝癌裸鼠MVD和PCNA的影响 [J], 何芳;曾文铤;沈浩贤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》
《大黄素激活Caspase-3等因子诱导人宫颈癌HELA细胞凋亡机制的研究》摘要：本文通过研究大黄素对HELA细胞的凋亡作用及其机制，深入探讨了Caspase-3等因子的激活情况及其在凋亡过程中的角色。
通过对细胞凋亡过程中的分子事件进行探讨，揭示了该凋亡诱导剂在抗肿瘤治疗中的潜在应用价值。
一、引言人宫颈癌HELA细胞是一种常见的肿瘤细胞模型，其研究对于理解肿瘤发生、发展和治疗具有重要意义。
大黄素作为一种天然的植物活性成分，近年来在抗肿瘤领域引起了广泛关注。
本研究旨在探讨大黄素激活Caspase-3等因子诱导HELA细胞凋亡的机制，为抗肿瘤药物的开发提供理论依据。
二、材料与方法1. 材料本研究所用材料包括HELA细胞、大黄素、细胞培养基、酶、抗体等。
2. 方法（1）细胞培养与处理：HELA细胞在适宜条件下培养，并分别用不同浓度的大黄素处理。
（2）凋亡检测：通过流式细胞术、免疫印迹等方法检测细胞凋亡程度。
（3）Caspase-3激活及信号通路分析：采用特定试剂检测Caspase-3的活性，并通过蛋白质印迹分析相关信号通路的变化。
（4）数据统计与分析：使用统计软件对实验数据进行处理与分析。
三、结果与讨论1. 大黄素诱导HELA细胞凋亡实验结果显示，随着大黄素浓度的增加，HELA细胞的凋亡率逐渐增加。
流式细胞术的结果表明，大黄素能够有效触发HELA细胞的凋亡过程。
2. Caspase-3的激活与凋亡关系Caspase-3作为细胞凋亡的关键因子，在大黄素处理后被显著激活。
蛋白质印迹分析显示，Caspase-3的活性与大黄素的浓度呈正相关，表明Caspase-3的激活在HELA细胞凋亡过程中发挥了重要作用。
3. 信号通路分析通过蛋白质印迹分析，我们发现大黄素处理后，与凋亡相关的信号通路如MAPK通路等发生了显著变化，这可能与Caspase-3的激活和细胞的凋亡过程有关。
4. 讨论本部分详细讨论了大黄素诱导HELA细胞凋亡的机制，包括Caspase-3的激活及其在凋亡过程中的作用，以及相关信号通路的改变等。
去甲斑蝥素通过半胱氨酸天冬氨酸酶诱导HeLa细胞凋亡
去甲斑蝥素通过半胱氨酸天冬氨酸酶诱导HeLa细胞凋亡安巍巍;王敏伟;龚显峰;田代真一;小野寺敏;池岛乔【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2005(021)003【摘要】目的:研究去甲斑蝥素(NCTD)通过半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase)途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制.方法: 采用MTT法、形态学观察、DNA凝胶电泳、乳酸脱氢酶(LDH)检测及Western blot检测法.结果: 去甲斑蝥素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡,caspase-家族、caspase-3、-8、-10抑制剂可以部分地抑制NCTD诱导的细胞死亡.细胞凋亡时caspase-3、-8、-9酶活力升高,而且caspase-3的作用底物-caspase-3 激活的DNA酶抑制物(ICAD)蛋白表达下降.结论: 去甲斑蝥素通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡.【总页数】5页(P417-421)【作者】安巍巍;王敏伟;龚显峰;田代真一;小野寺敏;池岛乔【作者单位】沈阳药科大学,中日医药研究所,辽宁,沈阳,110016;沈阳药科大学,GLP 中心,辽宁,沈阳,110016;沈阳药科大学,中日医药研究所,辽宁,沈阳,110016;昭和药科大学病态科学教研室,东京,194-8543,日本;昭和药科大学病态科学教研室,东京,194-8543,日本;沈阳药科大学,中日医药研究所,辽宁,沈阳,110016【正文语种】中文【中图分类】R739.5【相关文献】1.半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3,9在心肌缺血再灌注诱导细胞凋亡中的研究进展 [J], 顾峥嵘;刘俊明2.小鼠囊胚细胞凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达与维甲酸的诱导作用 [J], 熊彦娥;张端莲3.高分子聚乙烯和氧化铝陶瓷磨损颗粒诱导细胞凋亡及与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3信号传导的相关性 [J], 程涛;戴闽;帅浪;郝亮;范红先4.同型半胱氨酸硫内酯诱导半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12途径对内皮细胞凋亡的影响 [J], 孟天娇; 韩磊; 姚尚争; 刘影; 孙文萍5.尖吻蝮蛇毒抑瘤组分I通过增强子结合蛋白同源蛋白/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12途径诱导人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡的研究 [J], 柴琳;王振杰;徐冉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肝细胞黏附分子对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响
肝细胞黏附分子对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响王秋菊;吕长坤;陶佳;杜红飞;范砚茹;宋学东;罗春丽【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2013(035)002【摘要】目的利用Affymetrix基因表达谱芯片探讨肝细胞黏附分子(hepaCAM)对膀胱移行癌细胞基因表达谱的影响及作用的分子机制.方法运用Affymetrix Human plus 2.0全基因组芯片检测膀胱移行癌细胞株EJ细胞腺病毒-绿色荧光蛋白-hepaCAM感染组与腺病毒-绿色荧光蛋白感染组的基因表达谱,用SAM法进行差异基因分析、DAVID软件进行基因本体论分析及wikiPathway分析,并用RT-PCR和Western blot验证芯片结果.结果 hepaCAM能引起EJ细胞系基因表达谱的广泛变化,表达差异超过2倍以上的基因共2469个,其中上调基因1602个、下调基因867个.这些差异表达的基因功能主要涉及细胞周期、细胞增殖调节等方面.用RT-PCR对差异基因DNA修复蛋白,肝脏激酶B1和细胞周期蛋白D1进行验证,结果与基因芯片相符;进一步在3细胞株中用Western blot佐证DNA修复蛋白、肝脏激酶B1变化与芯片结果一致.结论 hepaCAM能够诱导EJ细胞基因表达谱的广泛变化,在基因水平通过多条通路作用于膀胱癌细胞.%Objective To investigate the changes of gene expression file in transitional cell carcinoma of bladder after hepatocyte cell adhesion molecule ( hepaCAM) overexpression. Methods Affymetrix Human Genome U133 Plus 2. 0 Array was used to investigate the changes of gene expression profile between adenovirus-green fluorescent protein (GFP) -hepaCAM group and GFP group in transitional cell carcinoma of bladder EJ cells. Significant Analysisof Microarray (SAM) was used to screen the differentially expressed genes, DAVID software was used to conduct gene ontology analysis and wikiPathway analysis based on the differentially expressed genes. Reverse transcription-polymerase chain reaction and Western blot were applied to verify microarray data. Results Compared with the GFP group, a total of 2469 genes were up-regulated or down-regulated by more than 2 times in the GFP-hepaCAM group. Among these genes, 1602 genes were up-regulated and 867 were down-regulated. Most of the differentially expressed genes were involved in the function of cell proliferation and cell cycle regulation. The mRNA expressions of nibrin, liver kinase B1, and cyclin D1 detected by reverse transcription-polymerase chain reaction in three different bladder cancer cell lines were consistent with the microarray data. The protein expressions of nibrin and liver kinase B1 in these three cell lines measured by Western blot were consistent with the mRNA expression. Conclusions HepaCAM can alter the gene expression profile of bladder cancer EJ cells. The well-known anti-tumor effect of hepaCAM may be mediated by regulating the gene expression via multiple pathways.【总页数】9页(P190-198)【作者】王秋菊;吕长坤;陶佳;杜红飞;范砚茹;宋学东;罗春丽【作者单位】重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学,检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】R737.1【相关文献】1.人膀胱癌细胞NRP-1基因表达降低后基因表达谱芯片数据分析 [J], 张小颖;李睿;刘颖;王洁;董洋;张培影;韩从辉;藏光辉;朱广远;王轩;沈克;朱向莹;吕茜2.模拟CO2气腹对膀胱癌细胞表面黏附分子影响的研究 [J], 邓长柳;黄江波;汤华章3.4HPR对人膀胱移行上皮癌细胞T24表面分子E-Cad表达的影响 [J], 严璞;吕强4.肝细胞黏附分子基因在膀胱移行细胞癌中的表达 [J], 王磊;常伟;乔庆东;吴小候;罗春丽5.藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响 [J], 吕纯芳;罗春丽;冀慧莹;赵培因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
HIPK3和Caspase-8在膀胱肿瘤细胞中的表达及其意义的开题报告
HIPK3和Caspase-8在膀胱肿瘤细胞中的表达及其意义的开题报告一、研究背景膀胱肿瘤是一种常见的泌尿系统肿瘤，危害人类健康。
目前的治疗方法主要包括手术切除、化疗和放疗等，但存在诸多问题，如治疗效果差、复发率高、耐药性等。
因此，研究膀胱癌的发病机制及分子治疗靶点成为重要的研究方向。
HIPK3是一种核磷酸化酶，参与多种细胞信号传导和转录调控，进而调控细胞的增殖、分化和凋亡等生命活动。
HIPK3在多种肿瘤中的表达水平异常，与肿瘤的生长和转移相关。
Caspase-8是一种重要的凋亡启动因子，在体内可以通过介导有丝分裂期细胞死亡和线粒体依赖性凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡。
然而，在膀胱肿瘤中HIPK3和Caspase-8的表达及其相互作用的研究还比较有限。
因此，研究HIPK3和Caspase-8在膀胱癌中的表达及其意义，可以为深入探究膀胱癌的发生机制，寻找新的治疗靶点提供有效帮助和开展更有前景的治疗研究。
二、研究目的本研究的目的是探究HIPK3和Caspase-8在膀胱癌中的表达及其相互作用，以分析它们对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响，并探讨其在膀胱癌治疗中的临床意义。
三、研究内容和方法1.研究内容（1）检测膀胱癌患者和正常人膀胱组织中HIPK3和Caspase-8的表达水平；（2）利用RNA干扰技术下调HIPK3的表达，观察Caspase-8表达的变化；（3）采用流式细胞术检测下调HIPK3表达对膀胱癌细胞凋亡的影响；（4）探讨HIPK3和Caspase-8的相互作用及其对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响；（5）分析HIPK3和Caspase-8在膀胱癌治疗中的临床意义。
2.研究方法（1）采用RT-PCR和Western blot技术检测HIPK3和Caspase-8的表达水平；（2）利用siRNA对HIPK3进行下调，Western blot检测Caspase-8的表达；（3）采用Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡；（4）利用共免疫沉淀技术探测HIPK3和Caspase-8的相互作用；（5）收集膀胱肿瘤患者的样本，分析其HIPK3和Caspase-8表达水平与患者的临床病理特征的关系；（6）利用统计学方法分析研究结果。
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目录英汉缩略语名词对照 (1)中文摘要 (2)英文摘要 (4)正文：HepaCAM通过SMAD2/3/caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡 (7)前言 (7)第一部分膀胱癌中hepaCAM与p-SMAD2/3表达的相关性 (11)1材料与方法 (11)2 结果 (14)3讨论 (16)第二部分HepaCAM通过SMAD2/3/caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡 (17)1材料与方法 (17)2结果 (26)3讨论 (36)全文总结 (38)参考文献 (39)彩图 (43)文献综述 (46)致谢 (54)攻读硕士学位期间的研究成果及发表的学术论文目录 (55)英汉缩略语名词对照英文缩写英文全称中文全称AP ammonium persulfate 过硫酸铵BCA bicinchonininc acid 二喹啉甲酸Caspase Cysteinyl aspartate specific proteinase 天冬氨酸蛋白水解酶DMSO dimethyl Sulphoxide 二甲基亚砜FCM flow cytometry 流式细胞术HE hematoxylin and eosin stain 苏木精伊红染色法hepaCAM hepatocyte celladhesion molecule 肝细胞粘附分子h hour 小时HRP horsradish peroxidase 辣根过氧化物酶IF immunofluorescence 免疫荧光IHC immunohistochemistry 免疫组织化学min minute 分钟PAGE polyacrylamideelectrophoresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳PARP poly ADP-ribose polymerase DNA修复酶PBS phosphated buffered saline 磷酸盐缓冲液PMSF phenylmethyl sulfonylfluoride 苯甲基磺酰氟化物PVDF polyvinylidene Fluoride 聚偏氟乙稀QRT-PCR Quantitative real-time polymerase chainreaction 实时荧光定量聚合酶链反应RIPA radio-Immunoprecipitation Assay RIPA裂解缓冲液rpm rounds per minute 每分钟转数RPMI 1640 roosevelt park memorial institute RPMI 1640培养基SDS sodium dodecylsulfate 十二烷基硫酸钠SMAD drosophila mothers againstdecapentaplegic proteinSMAD蛋白HepaCAM通过SMAD2/3/caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡摘要第一部分膀胱癌中hepaCAM与p-SMAD2/3表达的相关性目的：研究膀胱癌中肝细胞粘附分子（hepaCAM）与磷酸化SMAD 家族蛋白2/3（p-SMAD2/3）表达的相关性。
方法：通过免疫组织化学染色（IHC），检测51例膀胱癌和22例癌旁组织中hepaCAM与p-SMAD2/3的表达。
癌组织的病理参数为：T a-T1期13例，T2-T4期38例；G1-G2期40例，G3-G4期11例；初发41例，复发10例。
结果：IHC显示：膀胱癌组织中hepaCAM表达明显低于癌旁组织（P<0.05），而p-SMAD2/3明显高于癌旁组织（P<0.05）。
Spearman相关分析显示hepaCAM与p-SMAD2/3表达呈负相关（r=-0.712/-0.724, P=0.008/0.011），而hepaCAM和p-SMAD2/3的表达与膀胱癌临床病理参数无相关性。
结论：膀胱癌中hepaCAM低表达及p-SMAD2/3高表达与膀胱癌的发生、发展密切相关，为探究hepaCAM诱导膀胱癌细胞凋亡的机制提供一定前期基础。
关键词：HepaCAM，p-SMAD2/3，膀胱癌第二部分HepaCAM通过SMAD2/3/caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡目的：体外研究膀胱癌细胞中hepaCAM对凋亡的影响及分子机制。
方法：通过流式细胞术（FCM）和Hoechst 33258试剂盒检测hepaCAM对膀胱癌细胞株BIU-87和T24凋亡的影响。
应用western blot 检测hepaCAM过表达腺病毒、caspase抑制剂（V-ZAD-FMK）和SMAD2/3激活剂（TGFβ1）处理前后各组hepaCAM和SMAD2/3/caspase 通路相关分子的表达。
细胞免疫荧光和western blot检测体外过表达hepaCAM后膀胱癌细胞株BIU-87和T24中p-SMAD2/3在胞质和胞核中的表达。
结果：HepaCAM可加速膀胱癌细胞BIU-87和T24凋亡。
体外过表达hepaCAM可加速caspase3/8/9的活化，下调PARP和p-SMAD2/3的表达。
Caspase抑制剂Z-VAD-FMK处理后，与单独Z-V AD-FMK处理组相比，hepaCAM+Z-V AD-FMK组可下调caspase3/8/9前体和PARP 的表达。
SMAD2/3激活剂TGFβ1处理后，与单独TGFβ1组相比，hepaCAM+TGFβ1组可抑制p-SMAD2/3的表达，下调caspase3/8/9前体和PARP的表达。
细胞免疫荧光和western blot显示：过表达hepaCAM 可阻止BIU-87和T24中p-SMAD2/3的核转移。
结论：HepaCAM可通过SMAD2/3/caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡。
关键词：膀胱癌细胞，hepaCAM，p-SMAD2/3，caspase通路，细胞凋亡HEPACAM CAN INDUCE THE APOPTOSIS OF BLADDER CANCER CELLS VIA SMAD2/3/CASPASE PATHWAYABSTRACTPART ONECORRELATION OF THE PROTEIN EXPRESSION OF HEPACAM AND P-SMAD2/3 IN BLADDER CANCERObjective: To explore the correlation of protein expression of hepaCAM and p-SMAD2/3 in bladder cancer and the relationship between hepaCAM or p-mTOR and various clinicopathological parameters.Methods: Immunohistochemistry staining (IHC) was used to measure the protein level of hepaCAM and p-SMAD2/3 in 51 bladder cancer tissues and 22 adjacent tissues. Disease was Ta-T1 in 13 patients, T2-T4 in 38, G1-G2 in 40, G3-G4 in 11, primary in 41 and recurrent in 10.Results: HepaCAM protein was significantly lower, and p-SMAD2/3 protein was remarkably higher in bladder cancer compared to adjacent tissues(P<0.05). Spearman correlation analysis showed the decrease of hepaCAM level was associated with the increase of p-SMAD2/3 level(r=-0.712/-0.724, P=0.008/0.011). Neither hepaCAM or p-SMAD2/3 was correlated with any of the clinicopathological parameters.Conclusion: The low expression of hepaCAM and high expression of p-SMAD2/3 are closely correlated with occurrence and development of bladder cancer, which laid a foundation for further study the mechanism of hepaCAM involving in inducing apoptosis of bladder carcinoma.Key words: HepaCAM, p-SMAD2/3, bladder cancerPART TWOHEPACAM CAN INDUCE THE APOPTOSIS OF BLADDER CANCER CELLS VIA SMAD2/3/CASPASE PATHWAY Objective: To study the effects and molecular mechanisms of hepaCAM in inducing the apoptosis of bladder cancer cells in vitro.Methods: The flow cytometry (FCM) and Hoechst 33258 kit were used to observe the effect of hepaCAM on apoptosis of bladder cancer cells. The expression of hepaCAM and SMAD2/3/caspase pathway molecules were determined by western blot by using of hepaCAM overexpression adenovirus, caspase inhibitor (V-ZAD-FMK) and SMAD2/3 activator (TGFβ1).We detected the protein expression levels of p-SMAD2/3 between nuclear and cytosol protein in bladder cancer cells BIU-87 andT24 by immunofluorescence staining and Western blot after overexpression of hepaCAM.Results: Overexpression of hepaCAM in bladder cancer cells accelerated the cell apoptosis by using of FCM and Hoechst 33258 kit. Over-expression of hepaCAM activated caspase-3/8/9, down-regulated PARP and p-SMAD2/3. Treatment with caspase pathway inhibitor (Z-V AD-FMK), compared with Z-V AD-FMK group, hepaCAM+Z-V AD-FMK group down-regulated procaspase-3/8/9 and PARP. Treatment with p-SMAD2/3 activator (TGF-β1), compared with TGF-β1 group, hepaCAM+TGF-β1 group down-regulated p-SMAD2/3, procaspase-3/8/9 and PARP. Overexpression of hepaCAM prevented the p-SMAD2/3 translocation from the cytoplasm to the nucleus in bladder cancer cell BIU-87 and T24.Conclusion: HepaCAM can induce the apoptosis of bladder cancer cells via SMAD2/3/caspase pathway.Key words:Bladder cancer cells, hepaCAM, p-SMAD2/3, caspase pathway, cell apoptosisHepaCAM通过SMAD2/3/caspase信号通路诱导膀胱癌细胞的凋亡前言膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，在美国每年有73000新发病例和15210死亡病例[1]。