单克隆抗体的制备及特点

单克隆抗体

一、单克性抗体的制备

1、免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生效应B淋巴细胞的过程。

2、将准备好的骨髓瘤细胞与效应B淋巴细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇或灭活的病毒。在聚乙二醇或灭活的病毒作用下，各种效应B淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。

3、选择性培养选择性培养的目的是筛杂交瘤细胞。在选择性培养基上未融合的骨髓瘤细胞、未融合的淋巴细胞，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。只有融合的杂交瘤细胞才能在选择性培养基存活，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌特异性抗体

4、杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体阳性检测。选择性培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞。

5、单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内培养法和体外培养法。

(1)体内培养法；用注射器抽取腹水，从中可获得大量单克隆抗体。

(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。从培养液中获取所需要的单克隆抗体。

二、单克性抗体的特点

特异性强、灵敏度高、能大量制备

三、杂交瘤细胞的特点

杂交瘤细胞既能无限增殖，又能分泌特异性抗体

四、单克隆抗体制备过程中有三个筛选过程

1、从脾脏中筛选出多种效应B细胞。

2、在特定的培养基中筛选杂交瘤细胞

3、进行克隆化培养和抗体阳性检测，筛选出能产生特定抗体并能无限增殖的杂交瘤细胞。

五、单克隆抗体应用的基本原理是：抗原——抗体的的特异性结合。

六、单克隆抗体的主要应用

1、作为诊断试剂：单克隆抗体最广泛的应用就是作为诊断试剂。由于单克隆抗体纯度高、特异强，能准确地识别抗原物质的细微差别，并能与一定抗原特异性结合。

2、用于治疗疾病和运载药物。把抗癌细胞的单克隆抗体放射性同位素、化学药物或细胞毒素结合制成生物导弹。利用抗原——抗体的的特异性结合，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在部位，在原位杀死癌细胞，不损伤正常细胞、药剂量少、疗效高、毒副作用小。