高效石油降解菌筛选及其应用的研究
石油降解菌的筛选及其降解能力的初步研究
第 ２ 卷 第 ４期 ５ ２０ ０ ７年 ８月
石河子大学 学报 （ 自然 科 学 版 ） Ｊｕ ａ ｏ Ｓ ｉ ｚ Ｕ ｉ ｒ ｔ（ ａｕａ Ｓ ｉ ｃ ） ｏｒ ｌ ｔ ｈ ｅｉ ｎｖ ｓｙ Ｎ ｔ ｌ ｃ ｎｅ ｎ ‘ ｈ ｅｉ ｒ ｅ
新疆 石 油 污染 严 重 ， 油污 染 土壤 生 物 处 理技 石
１２． Ｎ ． ２ Ａ培 养基
牛肉膏 ５０／ ， 白胨 １． ／ ，ａ １ ．ｇＬ 琼月 ． Ｌ蛋 ｇ ０Ｏ ＬＮ Ｃ ０／ ， 旨 ｇ ５
１ ０ ／￣ｐ ７． ７． ８． ａ Ｉ， Ｈ ２～ ４。
１２ ３ 降解 液体 培 养基［ ．． ０ ］
３石河子大学牛命科学学 院 ， 新疆石河子 ８２０ ； ３０３ ４北京理工大学生命科学 与技术学 院 ， 北京 １ ０ １ ０ ８） ０ 摘要 ：为了获得 高效石 油降解 菌株 ， 以原油为唯一碳源 ， 从克拉玛依石油污染土壤 中分离筛选得到 ｌ ４株细菌 ， 利用 紫外分光光度法 、 三苯基四氮唑法和吐温 ８ 氯化 ０法对其仃油 降解能力进 行了研 究。结 果表 明 ： 菌株 中 Ｍ３ Ｍ 、 ９ 、 ７Ｍ 和 Ｍ１ 的石油降解能 力较高 ， Ｉ 降解 牢分别达到 ７ ． ％、６ ２ ８ ．％和 ６ ．％ ， １６ ５ ． ％、８ ２ ０ ３ 且这 些菌株 均有较 高的 Ｔ ℃脱 氢 Ｔ一
术发 展较 晚 ， 本研 究从 新船 克拉 玛依 油 田取样 ， 污 对
过程 中 由于 泄漏 和 溢 出 对周 围土 壤 、 态 环 境 和 人 生 类 健康 造成 了极 大 的危害 ， 日益 受 到人们 的关 注 ＿ 。 ｌ
染 土样 的主要性 质 和残 油 量 进行 分 析 测 定 ， 选 降 筛 解 石油 的菌 株 ， 行石 油降解 效 果实验 ， 优势 菌株 进 对
石油降解菌的研究进展
在石油的开采 、 运输 、 储存 、 加工 和应用 过程 中常 伴随有石油 的泄漏 而造成环境污染。泄漏 的石 油若进
入 土壤 中难 于去除 ， 留时问长 … ， 残 破坏 土壤结 构 ， 从 而影 响土壤 的疏松 程度 和通气 状况 ， 降低 了土壤 生产
葡萄球 菌属 （ ｔ ｈ ｌ ｏｃ ） 微 球 菌属 （ ｃ ｃｃ ｓ 、 Ｓａ ｙ ｃｃｕ 、 ｐ ｏ ｓ Ｍｉｏｏｃ ） ｒ ｕ
展。 ．
目前 ， 一般认 为微 生物细胞 摄 取石 油烃 存在 三种
模式 ： ①微生 物细胞摄取溶 解在水相 中的烃类 ； ②微生
物 细胞与 比其大得 多 的烃 类颗 粒直接 接触摄取 ； ③微 生物 细胞 与比其小得 多 的假溶 、 拟溶 或被包 裹 的烃类 颗粒作用并将其摄取 。烃类在水 中以水包 油乳 浊液 的 形式存在 时 ， 的体 积 小 且 分散 ， 以增 大 了接触 面 油 所 积 ， 同体积下油 的表 面积增 大 ， 即相 促进生物降解 Ｅ 。 ６ Ｊ 微生物可 降解 的石油组分 ， 易程度 为 ： 其难 短链正 构烷烃 ＞长链正构 烷烃 ＞异构 烷烃 ＞环状烷 烃 ＞低分 子量芳烃 ＞ 高分子量芳烃 ＞杂环烃 。同种类 型烃类 中 分子量越大 降解越 慢 。不 同烃类 化合 物 ， 生物代 谢 微 途径 和降解机理不 同。微 生物降解烷烃的关键步骤是
乳杆 菌属（ ａｔｂｃ ｌ ） Ｌｃ ａｉｕ 和诺 卡 氏菌 属 （ ｏ ｒｉ） ｏ ｌ ｓ Ｎ ｃ ｄ 等。 ａ ａ
其中， 最常见的是假单 胞菌类的细菌 ， 细菌对 短链 这类 及 长链 烷 烃 、 烃 均 能 降 解 ， 且 能 使 烷 烃 彻 底 降 芳 而 解 ｊ 。能够降解 石油 烃 的酵母 菌种 类 涉及假 丝 酵母
高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究
高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理研究概述油脂废水是各种生产过程中常见的工业废水，具有高浓度、高粘度和难降解的特点。
传统的处理方法如物理方法和化学方法在处理这类废水时存在着效率低、工艺复杂和对环境污染等问题。
因此，研究高效油脂降解菌的筛选及其对油脂废水的强化处理具有重要意义。
本文将探讨高效油脂降解菌的筛选方法以及其在油脂废水处理中的应用。
一、高效油脂降解菌的筛选方法1. 筛选菌种的来源高效油脂降解菌主要从自然环境中筛选获得，如油田、市区下水道和石油化工厂等。
这些环境中富含大量的油脂，是高效油脂降解菌的潜在来源。
2. 筛选菌种的方法（1）富集培养法：通过连续传代培养，利用油脂为唯一碳源来增加油脂降解菌的数量。
（2）筛选培养基的优化：为了提高油脂降解菌的筛选效率，可以通过优化培养基成分和条件，如pH值、温度和培养时间等。
3. 初步筛选方法通过测定菌株对油脂的降解率、生长速度等指标，初步筛选出具有较高降解能力的菌株。
4. 准确筛选方法（1）酶活测定法：通过测定油脂降解菌体外分泌的酶活性，筛选出具有高降解能力的菌株。
（2）分子生物学方法：利用16S rDNA基因测序技术，鉴定出属于高效油脂降解菌的菌株。
二、油脂废水的强化处理1. 微生物降解方法高效油脂降解菌通过分泌酶类降解废水中的油脂物质，将其分解为小分子物质，使废水中的油脂得以降解。
该方法具有效率高、成本低和对环境友好等优点，是一种较为理想的处理方法。
2. 强化菌株的应用将筛选出的高效油脂降解菌株应用于油脂废水的处理中，可以增加废水处理系统的油脂降解能力。
通过培养优良菌株，可以形成一种稳定的微生物群落，提高废水处理系统的稳定性和连续性。
3. 条件优化在使用高效油脂降解菌处理油脂废水时，需要优化处理条件，如菌株的培养条件、温度和pH值等，以提高处理效果。
4. 协同处理法将高效油脂降解菌与其他废水处理方法结合，如物理方法和化学方法，可以使废水处理效果更好。
石油降解菌株的筛选 鉴定及其石油降解特性的初步研究
（2）pH值对菌株降解效率的影响：在pH值为7.0时，菌株X的降解效率最高， 达到60%以上。当pH值偏离7.0时，其降解效率明显下降。
（3）盐度对菌株降解效率的影响：在低盐度条件下，菌株X的降解效率较高。 随着盐度的增加，其降解效率逐渐降低。当盐度超过5%时，其降解效率显著下降。
（4）产物分析：利用GC-MS等技术，我们对菌株X降解石油烃的产物进行了 分析。结果显示，菌株X能够将石油烃主要降解为脂肪酸、酚类化合物等中间产 物。这些中间产物在进一步降解过程中转化为二氧化碳和水，从而实现石油烃的 生物修复。
2、筛选流程：首先，采集油污土壤和石油废水样品，进行富集培养；其次， 通过初筛和复筛，获得具有较强石油降解能力的菌株；最后，通过形态学和分子 生物学鉴定，确定菌株种类。
3、鉴定步骤：将筛选得到的菌株进行16S rDNA分子鉴定，利用细菌分类学 软件进行比对分析，最终确定菌株的种属。
4、石油降解特性分析：采用液体培养法测定菌株的石油降解能力，通过测 定不同时间点石油烃类物质的含量，计算菌株的降解速率和降解效率。
1、菌株筛选
从石油烃污染地区采集土壤样品，采用富集培养法，经过多步筛选，获得具 同温度、pH值、盐度等条件下，对菌株降解石油烃的能力进行测定。通 过改变环境因素，观察其对菌株降解效率的影响。同时，利用气相色谱-质谱联 用（GC-MS）等技术，对菌株降解的产物进行分析。
参考内容
一、引言
石油烃是石油和天然气的主要成分，它们在自然环境中的存在和降解对全球 碳循环和环境生态有着重要影响。厌氧降解菌在石油烃的降解过程中扮演着关键 角色。本次演示旨在筛选出具有高效石油烃厌氧降解能力的菌株，并对其降解特 性进行研究，以期为石油烃污染的生物修复提供理论依据。
二、材料与方法
降解石油复合微生物菌剂的筛选研究
降解石油复合微生物菌剂的筛选研究摘要：从30个土样中筛选出3株高效原油降解菌株，它们为dch-16，dch-19和dch-20，7天后降油率分别为75.6%，80.3%和73.2%。
经鉴定，分别是脂肪酸芽孢杆菌属alicycolobacillus，芽孢肠状杆菌属sporomaculum和盐芽孢杆菌属halobacillus。
将此3株高效原油降解菌在原油培养基中进行复合实验，结果表明，在相同条件下复合菌降油效果优于单菌；菌株dch-19与dch-20复合的最佳原油降解条件为：接种量比1：1（总接种量为10%），ph值为7.5，底物浓度20mg·ml-1，温度35℃，原油降解时间为7天。
将实验复筛所得部分降油菌用于胜华炼厂废水处理，效果最好的是菌dch-19和dch-20的复合，处理两天后降油率达到80.2%。
表明复合菌株dch-19和dch-20有很强的适应能力。
abstract： we select three strains of high efficient oil degrading strains from 30 soil samples， i.e. the dch-16，dch-19 and dch-20. seven days later， the oil degradation rate turns to 75.6%， 80.3% and 73.2%. the three strains are identified as the fatty acid bacillus alicycolobacillus，bacillus sporomaculum and bacillus halobacillus. thereafter，we use the three strains of high efficient degradation bacteria for the crude oil compound experiments. the result shows that the compound bacteria has much better efficiency than single bacteria， and the optimized condition for dcd-19and dch-20 is that： the inoculation ratio gets 1：1 with total inoculation 10%， the ph value is 7.5， the concentration of substrate is 20mg. ml-1， and the temperature reaches 35℃，then the degradation of crude oil will be 7 days. further more，we introduce part of the microbial inoculants into the refinery wastewater treatment of shenghua refinery. the compound dch-19 and dch-20 shows the best performance of petroleum degradation which is up to 80.2%.关键词：筛选；石油降解；复合生物菌；炼厂废水key words： selection；petroleum degradation；complex microbial inoculants；refinery wastewater中图分类号：[p642.5] 文献标识码：a 文章编号：1006-4311（2013）13-0296-03————————————作者简介：徐宝刚（1979-），男，山东潍坊人，工程师，工学学士，环境工程给排水专业硕士在读。
石油烃污染土壤微生物修复技术、菌剂的筛选研制及案例分析
为混合颗粒状粉剂，具有调理土壤环境，提高土壤渗透性、增加氧气传输 等作用，同时还具有很好的持水能力，有利于微生物生长，提高污染物降 解率。
油泥生物处理调质营养素
为白色粉剂，能有效改善土壤质地，为微生物提供营养物质，促进微生物 快速繁殖，增强降解活性，提高污染物降解速度。
六、微生物菌剂的生产
60
50
40
30
20
10
0 2周 4周 6周 8周 3个月 4个月
示范现场土壤中石油烃含量的变化
修复前 调理剂、菌剂播撒
翻耕
浇水
种植植物
修复后
五、石油污染土壤微生物修复技术
2、异位修复技术---堆体技术
根据多种生物堆体的生物学过程特性, 将其与微生物包埋/脱附增溶（IMT/SER）等强化工艺 相组合，建立了不同类型的生物堆体强化修复系统，并获得了完整的工艺参数。
土壤中主要石油污染物残留量测试 （GC-FID、UV、IR、重量法） 土壤中微生物群落变化 （PCR、DGGE）； 修复植物生物量变化。
CK F-7 FL-7 FH-7 F-24 FL-24 FH-24
FH-24 FL-24 F-24 FH-7 FL-7 F-7
修复后微生物群落谱带条数 增加了3-4倍
溶
（Rhodococcus erythropolis）；25%铜绿假单孢杆菌 （Pseudomonas aeruginosa）；25% acinetobacter）。
构建适宜反应的微环境
促进污染物的脱附传质
企业标准
《石油污染土壤处理用微生物修复菌剂》 (Q/0500DJH001-2015)
五、石油污染土壤微生物修复技术
菌剂添加量对修复效果的影响
含油废水中一株高效油脂降解菌的筛选和鉴定
１１１ 样 品来 源 ．．
采 自中国海洋 大 学鱼 山校 区快餐厅 后下 水道 。 １１ 培养基 ．． ２
富集 培养 液 ： Ｎ Ｃ ． ｇ ａ １ ５ ，蛋 白胨 ５０ｇ ０ ． ，牛 肉 膏 ０５ ， ．ｇ 豆油按 周期 加入 ，Ｈ７０～７５ 蒸馏 水 １ ０ ｐ ． ．， ０ ０
会飘浮于水体表面 ， 影响水体的复氧及其 自然净化过 程 ，危 害水 生生态系统 ，严 重污染周 围环 境【 Ｊ ｌ。 之 目前 ，油脂 废水 的处 理方法 主要 有物 理法 、化 学法 和生 物法 。物理法 和化 学法 由于投资 大 ，占地 广 ，流程复 杂 ，且 容易 产生 二次 污染 ，实 际应 用较 少 。而 生物 法处 理油 脂废 水 ，主要 利用 油脂 废水 Ｊ
１ ． 油 脂 降解 菌的 筛选 ．３ ２
泥法 ，然而传 统 使用 的活性 污泥对 含油 废水 的直 接 处 理能 力较低 、效果差 ｐ。 因此从 自然 环境 中筛 选 】 高 效 油 脂 降解 菌 ，采 用 投 菌 法 对 活 性 污 泥 加 以 改 善 ，对处理 油脂 废水 具有 重要 意义 。
ｍＬ １ １℃灭菌２ ｉ 。 。 ２ ０ｒ ｎ ａ
２ ５ｎ 波长下 的吸光度 值 ， ２ ｍ 同时 以豆油 为溶质 石油 醚为溶剂 ，测定 不 同豆油 浓度 的 吸光度值 ，绘制标
中性红培养基 ： 肉膏蛋白胨培养基加豆油 １ 牛 ０
ｍＬ，０６ ．％中性红 水溶 液 １ 。 １ １℃灭菌２ ｎ ｍＬ ２ ０ｍｉ。
１ 材 料 与 方Байду номын сангаас法
１１ 材料 ．
将纯 化后 的菌 株接种 于 中性红 培养基 上 ，观察 菌落周 围是 否变 红 ，若 变红则 表 明菌株 能够 分解油 脂产 生脂 肪酸 【 。将初筛 入选 的菌 株接 种到 以豆油 １ …
高效原油降解菌的筛选及其在生物活性炭中的应用
１ ２ ３ 降解反 应体 系 ．． 为研究 原 油降解 菌在 Ｂ ＡＣ中降解 原 油 的效果 ，
设 置平 行对 照 实验 ， 实验设 计 见表 ２ 。
表 ２ 平 行 对 照 实验 组
Ｔ ａ ｌ Ｐａ ａ ｌｌｃ ｔ ｏ ｒ ｂｅ２ ｒ ｌｅ ｏｎ ｒ ｌｇ ｏｕｐ
分离 培养 基 ： 机 盐 培 养 基 １０ ０ ｍＩ， 水 原 无 ０ 脱 油 ３ｇ 琼脂 １ 。高 压蒸 汽灭 菌后 ， ， ８ｇ 制成平 板 备用 。 保存 培养 基 ：牛 肉膏 １ｇ 蛋 白胨 １ ， Ｃ ， ０ ｇ Ｎａ １ ５
度为 １ ０ｍｇ ｍＬ的原油 溶液 备用 。 ０ ／ １ １ ２ 原油 降解 菌 的驯化 和分离 ． ．
无 机 盐 培 养 基 ： ａ １１ ， １０ ５ ， Ｎ Ｃ ０ ｇ ＮＨ Ｃ ． ０ ｇ
ＫＨ２ ＰＯ４ ．５ ｇ， Ｈ ＰＯ４ ．０ ０ ０ Ｋ２ １ ｇ， ｇ Ｍ ＳＯ４ ．５ ｇ， ０ ０
法 不能 满 足达标 处 理 的要 求 。而且 随着 水 资源 的短
缺， 对含 油废 水 的排 水标 准不 断提 高 ， 以期 能 达 到 回 用 的 目的 。生物 活性 炭 （ ＡＣ 技 术具 有 活性 炭 吸 附 Ｂ ） 和微生 物 降解 双 重作 用 ， 能有 效 去 除水 中有 毒 有 害 物 质 ， 括一 些其 他 方法难 以去除 的 物质 ， 废 水 回 包 是 用 的一 个重 要方 法 。李伟 光 等［ 和李 安 婕等 ［ 采 用 ８ ３ ｇ Ｂ ＡＣ技术 处 理含 油废 水 ， 理效 果显 著 。 处
染 ， 至还 有 可 能 因为 聚 结 的油 品燃 烧 而产 生 安 全 甚 问题 ［ ］ ５ 。鉴 于含 油 废 水 的 污 染 性 ， 国规 定 含 油 我 废 水 最 高 允许 排 放 质 量 浓 度 为 １ ／ 因此 ， ０ｍｇ Ｌ０ 对 石 油 和石 化 等 行 业 产 生 的 含 油 废 水 进 行 有 效 处 理
PTA高效降解菌的研究及其应用的开题报告
PTA高效降解菌的研究及其应用的开题报告一、研究背景聚对苯二甲酸酯（PTA）是一种高分子化合物，广泛应用于塑料制品、纤维制品等各个领域。
然而，PTA的大量生产和使用也导致了环境问题，因为PTA是一种难以降解的物质。
目前，对于PTA的处理方式主要是通过化学方法，如催化氧化、生物降解等。
其中，生物降解是一种比较环保和经济的处理方式。
因此，开发一种高效降解PTA的菌株，对于环境治理具有重要意义。
二、研究目的本研究旨在筛选出一株高效降解PTA的菌株，并研究其降解机制，为开发高效降解PTA的生物技术提供数据支持。
三、研究内容1. 筛选PTA高效降解菌。
首先从不同环境中收集一些土样和水样，通过实验室培养测定，筛选出多种细菌。
利用UV吸收、荧光光谱等手段对降解的PTA进行检测，选择降解率达到90%以上的菌株进行后续研究。
2. 研究菌株的生长特性。
测试降解菌对不同温度、酸碱度、浓度等生长条件的适应性和产酶能力，以便进一步优化菌株的生长。
3. 研究菌株降解机制。
通过GC-MS分析、生化检测等手段，分析降解产物成分和酶促反应机理。
4. 优化生物处理技术。
结合降解菌菌株的特性和降解机理，优化生物降解处理技术，并进行效果评估。
四、研究意义本研究针对PTA环境污染问题，通过筛选出高效降解PTA的菌株，并研究其降解机制以及生长特性，进一步优化了生物降解技术。
为解决PTA污染问题提供了一种更加环保的处理方式和技术支持。
五、研究方法1. 培养菌株。
通过实验室培养研究，筛选高效降解PTA的菌株。
2. 检测PTA降解率。
利用UV吸收、荧光光谱等手段检测降解产物。
3. 分析菌株生长特性。
测试降解菌对不同温度、酸碱度、浓度等生长条件的适应性。
4. 分析PTA降解产物。
通过GC-MS分析、生化检测等手段分析降解产物成分和酶促反应机理。
5. 优化生物处理技术。
结合菌株特性和降解机理，优化生物降解处理技术，并进行效果评估。
六、时间计划第一年：1. 筛选PTA高效降解菌。
石油污染土中微生物的分离鉴定及降解特性
石油污染土中微生物的分离鉴定及降解特性石油污染是环境污染中的一种常见问题，对自然环境和人类健康造成严重影响。
因此，寻找高效的石油降解菌是解决这一问题的重要途径。
本文从石油污染土壤中分离鉴定了一株降解菌，并探究了其降解特性。
（1）样品的采集及处理从受污染的土壤中取样，再分离出单个菌株。
将样品加入到NaCl0.9%的生理盐水中，摇动15分钟后，离心上清，然后采用1%的蒸馏水进行0.5小时热灭菌。
（2）分离鉴定将上述处理后的样品，分别接种于处理好的LB及玉米精蛋白培养基中，置于30℃恒温振荡培养箱中培养48h。
在此基础上，通过对菌落形态、菌株生长速度、菌落气味、荧光反应、产酶等特征，对细菌进行鉴定。
最终，筛选出一株石油降解菌。
（3）降解特性分析选取某种石油类物质，将其加入到LB培养基中，最终浓度设置在30mg/L左右。
将选出的石油降解菌接种进去，接种数量为OD600=0.1。
进液管任意长度分别设置于接种前及接种后，能够记录pH值及菌量。
取样分析的样品保持30℃培养48小时，过程中定时测量液体的pH值。
分析降解特性时，发现石油降解菌能够将石油类物质中的碳链分解，并分解成细胞利用的有机物质。
在石油降解过程中，菌落数逐渐增加；液态培养基中pH值不断降低，并最终将其稳定在中性状态。
另外，菌落色素通过两次衍生化反应生成焦磷酸一茎丙酮醇酯，之后通过JB-4消失化学反应结晶，能够得到石油降解特性的分析结果。
综上所述，石油降解菌是一种能够有效降解石油类物质的微生物。
因此，在现实中，可以对这类石油降解菌进行大规模培养及应用，以降低环境中的石油污染。
石油降解菌筛选及应用研究
缘乞科枚Journal of Green Science and Technology2021年3月第23卷第6期石油降解菌筛选及应用研究鄢雨朦(辽宁大学环境学院，辽宁沈阳110031)摘要：从石油污染土壤中分离到一株新的石油降解菌，对该石油降解菌进行了鉴定，经16SrDNA测序鉴定并结合生理生化实验结果确定其为阴沟肠杆菌。
该菌可以将石油作为唯一碳源进行生长代谢，实验结果表明：在菌株投加量为1%时降解效果最佳，降解率可达到26.41%。
关键词：石油污染；土壤污染；石油降解菌中图分类号：X53文献标识码：A文章编号：1674-9944(2021)06-0108-021引言在石油生产运输和使用过程中，由于操作不当或意外事故导致石油泄漏，会对环境造成严重污染。
近年来受石油污染的土地面积不断扩大，污染程度也日益严重。
由于石油的主要成分有烷桂、苯、甲苯、二甲苯等多种复杂芳香桂，这些物质毒性大,有的有致癌致突变作用，进入土壤后难以去除，而且会随着径流进入周围的流域、地下水、油田及周围的生态环境中，带来了严重的环境问题有害的石油污染物经食物链富集在人体内，还会对人体造成严重的损伤⑵0石油造成的土壤污染通常采用物理和化学方法去除,前者通过焚烧而破坏大部分有机污染物,这种方法费用高,不利于处理;后者采用化学浸提，效果较好，但因易造成二次污染而受到限制间。
为治理石油污染的土壤，石油降解菌的发现，为石油污染的治理提供了新思路新方法。
石油污染的生物修复技术由于生产费用低、不产生二次污染而被视为一项具有广阔前景的高新技术。
2实验材料(1)石油无机盐培养基：K2HPO46g,KH2PO46g, (NH4)2SO46g.NaCl5g,石油1g,P H值为7. 0,蒸傳水1000mL o固体培养基在此基础上加入琼脂15〜20 g即可。
(2)牛肉膏蛋白腺培养基：牛肉膏3g,蛋白豚10 g,NaCl5g,蒸億水1000mL,pH值为7.0〜7.2,121°C灭菌20min。
高效石油降解菌的筛选、鉴定及其配比优化的研究
42工业安全与环保2013年第39卷第2期I ndust r i al Saf et y a nd Envi r onm e nt alPr o t ect i onFebr uary 2013高效石油降解菌的筛选、鉴定及其配比优化的研究*王旭辉晁群芳徐鑫李磊(新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046)摘要从克拉玛依地区石油污染土壤中分离筛选出4株高效石油降解菌S 1、S 2、S5和s 8，经形态观察、生理生化反应和分子鉴定，确定4株菌分别为蜡样芽孢杆菌(Baci l l us cel ℃us )、恶臭假单胞菌(Ps eudom onaspLni ．da)、枯草芽孢杆菌(B aci ll us s ubf i l is )和地衣芽孢杆菌(B aci l lus l i eheni f oi m i s)。
为了提高对石油的降解效率，对4株菌的添加比例进行了响应面的优化。
结果表明，当石油含量为1．5g 时，菌种s1、S2、s5和s8接种量分别为0．21g,O ．22g ．0．41g 和0．22g 时的石油降解率达到最大值。
在该条件下石油降解率预测值为60．17％，验证值为60．10％。
关键词降解率筛选菌种鉴定响应面法石油污染St udyont he I s ol at i on and I den t i f i cat i on of Pet rol eum —-D egradi ngSt r ai nsandIt s R at i o O pt i m i za t i onW A N G Xuh ui C H A O Q anf 锄培X U X i nLIL e i(Col l egeof 啦Sci enceandTechnology ，Xinjio 曙Unim=豇y 蛳830046)A bs W actFou rst r ai ns (S1，S2，S5，S8)，w i t hgood abi li t y ofde g 丑di ng oil ，aIe i sol at ed f rom oi l —c ont ami nat i on s oil ofK ar a-m a yar eas ．Base do nm or phol ogi c obs er vat i on ，physi o l ogi c al a nd bi oc he mi ca l cha r act e r i st i cs ，m o l ecul ar i dent i f i cat i on ，t hey a_r ei dent i f i edasB aci l l us ce r eus ，B a ci l l u s l i ch eni f onni s ，B aci l l us s ub t i li s a ndPs eudom onas 叫dar espe ct i vel y ．I n or de r t o i m -pr ovet he ef l ％i ency of t he de gr ada t i o n ．t h e r ati o of f our s t l ai as i s opt i m i ze d by us i ng r e s pons e suI f i c e m et hodol ogy ．T he r esul ts how s t hat t he opt i m um con di t i o ns al easfol l ow s ：w hen t he oi lco nt enti s 1．5g a nd t he i nocul a t i on quant i t y of t he f o ur st r ai m(S1，眈，s5，S8)i s0．21g ，0．22g ，0．41g ，0．22g ，r espect i vel y ，t he r at e of oi l de gr a da t i onPA t hr e ac h t hem s ．x 抽um ．U ndert he se cond i t i ons ，t he pr e di ct i ve va l ue of oil de gr ada t i on i s 60．17％，m e a nw hi l e t he ver i f i cat i on va l ue is 60．10％．K eyW or dsde ge ner at i on r at ei sol at i onst rai m i dent i fi cat i onre s pons e sur f ac e met hod ol og y oi l —c ont am i nat i on0引言随着工业的发展，石油及其制品通过开采与运输过程的泄漏、污染水灌溉及大气飘尘的沉降等途径进入了环境，对土壤和水体造成严重的污染。
高效石油降解菌筛选及其应用的研究
高效石油降解菌筛选及其应用的研究王益薇【摘要】在污水处理厂中,从长期被石油污染的土壤和水体中采取样品,以石油烃为唯一碳源,通过富集培养分离进行高效石油烃降解菌的筛选；以革兰氏染色方法对其进行初步鉴定；确定最佳培养条件和环境,最后在温室内,通过研究高效石油烃降解菌对石油烃污染土壤的修复实验来评估高效石油烃降解菌的实际应用效果.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2013(041)004【总页数】2页(P94-95)【关键词】石油烃;高效石油烃降解菌;温度;pH;氮磷比【作者】王益薇【作者单位】浙江海洋学院石油化工学院,浙江舟山316000【正文语种】中文【中图分类】X703.1随着海洋石油的开发，每年都有由于运输船舶的石油泄漏、撞船、沉船以及输油管道的泄漏等造成的石油污染。
目前，由溢油造成的污染引起了全世界的高度重视，需要及时采取切实有效的措施对溢油进行迅速处理，使其对环境的危害降至最小。
国内外有很多学者都致力于这方面的研究，以求得更安全、更经济的方法治理溢油污染。
通常溢油处理技术有物理处理、化学处理和生物处理。
物理方法仅是对石油进行稀释、聚集、迁移，不能彻底清除海洋表面和海水中的溶解油;化学方法是向海水中加入化学药品，容易造成二次污染;生物修复技术是将石油烃进行生物降解后，转化为无毒的水和二氧化碳以及生物自身的生物量，可对石油进行彻底清除［1－2］。
生物修复技术相对于其他处理方法而言，费用也较低，经济效益和环境效益俱佳，将成为一种解决复杂环境污染问题的有效方法。
［2－3］本文研究的主要内容是从被污染土壤中分离出来的能够降解石油烃的微生物，通过驯化，优化其降解条件之后，对土壤中的石油烃进行修复，筛选所得到的菌种降解效率也比较高，修复效果好。
由于利用生物修复石油烃污染具有无可比拟的优越性，而选育高效石油烃降解菌是修复微生物的重要前提，能为石油污染的治理提供微生物基础，为大规模工业污染的处理提供菌种。
降解多环芳烃真菌的筛选及其性能的研究
降解多环芳烃真菌的筛选及其性能的研究降解多环芳烃真菌的筛选及其性能的研究摘要：多环芳烃（PAHs）是一类对环境和人体健康具有潜在危害的化合物。
本研究通过对不同环境样品进行真菌培养和筛选，选取出具有降解多环芳烃能力的真菌菌株，并对其降解性能进行了深入研究。
结果显示，选出的真菌菌株具有显著的多环芳烃降解能力，在生物修复和环境治理方面具有重要应用价值。
一、引言多环芳烃（PAHs）是一类含有两个以上苯核的芳香化合物。
它们广泛存在于石油、煤炭、燃料和工业废弃物中，是许多石油加工、煤炭燃烧和工业生产过程中产生的副产物。
由于其稳定性和不可降解性，PAHs极易积累在环境中，对生物体和生态系统产生潜在危害。
因此，探索有效的降解PAHs的方法具有重要的意义。
二、材料与方法本研究从不同的环境样品中分离和筛选了一批真菌菌株。
首先，采集不同环境样品，包括土壤、沉积物和污水处理厂样品。
然后，将这些样品分别接种到适宜的富集培养基中，利用富集法进行真菌筛选。
接种菌液后，放置于适当的温度和湿度条件下培养一定时间，使菌落适应环境并繁殖。
随后，通过分离纯化的方法，从培养基中分离得到单一的真菌菌株。
三、结果本研究共从不同样品中分离了50个真菌菌株。
经过初步筛选，最终选定了5个具有较高降解PAHs能力的菌株。
此外，通过进一步的降解实验，发现这些菌株在不同PAHs化合物的降解速度上存在差异。
一些菌株对部分PAHs表现出较高的活性，而其他菌株对不同PAHs的降解能力则有所区别。
其中，菌株F1在降解芘和菲表现出较高的降解率，而菌株F3对苊和蒽的降解率较高。
四、讨论本研究通过分离不同环境样品中的真菌，筛选出5个具有降解多环芳烃能力的真菌菌株。
这些菌株对不同PAHs化合物的降解能力各不相同，这可能与其代谢酶的特异性和对底物的亲和性有关。
未来研究可以进一步探索这些特征，并通过基因工程手段，改良这些菌株的降解能力和稳定性。
五、结论本研究筛选出的5个真菌菌株具有显著的降解多环芳烃能力，对生物修复和环境治理具有重要应用价值。
环境污染物降解菌的筛选及其应用研究
环境污染物降解菌的筛选及其应用研究随着现代工业的发展，环境污染成为一个日益严重的问题。
这些污染物对人类的健康和环境的生态稳定造成了极大的威胁。
因此，降解环境污染物成为了一个紧迫的任务，其中环境污染物降解菌的筛选和应用研究就成为了重要的研究内容。
本文将对环境污染物降解菌的筛选及其应用研究进行探讨。
一、环境污染物降解菌的筛选环境污染物降解菌是一类具有特殊代谢功能的微生物，可以通过吸收、转化、分解、利用污染物质来减低或消除环境中的有害物质。
这些菌株广泛存在于自然界中，如土壤、水体和沉积物中等，有些甚至可以从污染源中分离出来。
由于不同的环境污染物的成分和性质有很大的差异，因此不同的菌株对不同的污染物物质有不同的反应。
因此，对于寻找适合的菌株进行分解就成为了一个挑战。
环境污染物降解菌的筛选主要包括两个方面，一是从自然界中筛选具有降解能力的菌株，二是通过基因工程技术筛选出具有特定降解功能的菌株。
从自然界中寻找环境污染物降解菌的方法主要有三种。
一是通过样品分离的方法，即通过从污染土壤、废水或纯化有机物中分离到具有降解能力的微生物。
二是直接从污染源中获取菌株，如从工厂废水中分离、从油窑或石油泄漏现场中分离。
三是通过对自然界中微生物的特性进行鉴定，如首先寻找具有易生长、菌落明显、降解速率快的菌株，再对其进行鉴定，筛选出具有特殊降解能力的菌株。
基因工程技术是一种快速而高效的筛选途径，可以通过获得污染物分解途径中的降解酶基因、浓度可感应表达系统或高效表达系统等，将其转移到其他微生物中，以构建特定降解菌株。
这种筛选方法最大的优点是可以针对特定的污染物进行定制，从而出现对多污染物的同时降解的菌株。
二、环境污染物降解菌的应用研究环境污染物降解菌的应用研究主要包括两个方面，一是菌株应用的基础研究，二是菌株应用的实际情况。
基础研究主要包括对降解菌株的鉴定和评估、降解途径的研究、降解产物的分析及对菌株生长环境的优化等。
这些研究对环境污染物治理及其监测有很大的实际意义。
土壤中高效石油降解菌的筛选及其降解特征的研究
《 福建师 范大学福清分校学报》
Ｊ Ｕ Ｎ ＬＯ Ｕ Ｉ Ｇ Ｂ Ａ Ｃ ＦＦ Ｊ Ｏ ＭＡ Ｎ Ｖ Ｒ ＩＹ Ｏ Ｒ Ａ ＦＦ Ｑ Ｎ Ｒ Ｎ Ｈ Ｏ Ｕ Ｉ Ｎ Ｒ ＬＵ Ｉ Ｅ ＳＴ ＡＮ Ｓ ｍ ．８ ｕ Ｎｏ９
总第 ９ ８期
土壤 中高效石 油降解 菌的筛选及 其 降 解 特征 的研 究
下石油 降解率较 高。环境 ｐ Ｈ为 ７时 ， Ｆ ２ Ｋ 一 Ｋ 一 、 Ｆ ４的石油降解率都 最高。混合茵的试验表 明 ， Ｆ ２ Ｋ － Ｋ 一 、 Ｆ ４混
合 茵的 降解效果 明显好 于各单 菌株接种 降解效果 。
关键词 ： 油降解 ； 石 菌株 筛选 ； 降解特征 ； 混合 茵
中图分类号 ： ９ — Ｑ ３３
石 油降解能力 的测定结果表 明 ， 中 Ｋ ～ 、 Ｆ ４两株 茵均 为微 球菌属 Ｍｉ ｏｏｏｃｓｓ． 石油 降解能 力较 其 Ｆ ２Ｋ 一 ｃ ｒｃｃｕ ） ｒ ｐ ，
强， 其单茵落接 种 ２ ０天后石 油降解率分 别可 以达到 ７ ．１ ７ ．２ ６ ％、 ４８％。在 对这 两株 菌的降解特征的进一 步探 ２ 究中发 现 ： Ｆ ２菌株 在 Ｎ ￣ ， 为氮 源的条件 下石 油降解 率较 高； Ｋ — Ｋ一 ＨＮＯ 作 而 Ｆ ４在 Ｈ４２ｏ 作 为氮源 的条件 ） ４ ｓ
文献标 志码 ： Ａ
文章编号 ：０ ８ ３ ２ （０ ０ ０ － ０ １ ｏ １０ — ４ １２ １ ）２ ０ １． ６
石油作为当今世界的重要能源之一 ， 被称为“ 工业血液”可见其重要性。但随着石油工业 的发 ， 展， 在石油的勘探 、 开采 、 运输 以及储存过程 中造成 的泄露从 而对环境造成的污染 日益严重 ， 中 其 对土壤的污染尤为突出 ， 受石油污染 的土地面积不断扩大。 目前的土壤恢复技术主要分为物理方 法、 化学方法和生物方法【 １ ］ 。上世纪 ８ 年代前 ， Ｏ 有机污染物污染土壤 的治理实质上仅限于一些物理
石油类污染物降解基因工程菌的构建及应用
基因工程菌的构建结构图
石油类污染物降解基因工程菌的构建的发展
人物 方法 优点 缺点
Chakrabayty
能够同时降解脂肪 在同一菌株中植入 烃、芳烃、萜和多 降解乙烷、辛烷和 环芳烃，且降解石 癸烷，降解二甲苯， 油的速度快、效率 降解萘和分解樟脑 高，在几个小时内 的4种假单胞菌的不 能降解完海上溢油 中2/3的烃类，而自 同质粒，由此得到 的工程菌 然菌种则需要用一 年多的时间 用染色体DNA转化 原生质球的方法， 构建了一株处理含 PTA废水的工程菌 LEY3 同时降解PTA、萘、 苯 甲酸、十六兢、 乙二醇和甲醇6种化 合物
研究工物技术工程治理环境污染的安全性怎样； 2. 如何将生物降解修复技术与物理化学处理方法组 成统一的技术体系； 3. 如何确定生物修复技术彻底降解污染物所需要的运 行周期 ； 4. 怎样保证微生物与污染物有良好的接触，使污染 物能被微生物迅速降解 ； 5. 是否可以建立有关生物修复技术应用的、统一的评 价程序和标准。
但受融合子的耐酸 性能改进 不大的 影响，与JD亲本菌 比较接近，只能在 pH为6－10的环境 中产生多糖。
李焕杰等
在实际的柴油脱硫 通过构建血红蛋白 试验中，工程菌的 基因表达质粒并电 生长速率较高且最 脱硫率为69.19%， 击导入德氏假单胞 大脱硫活性提高了 而原 始菌为 菌中，得到基因工 214倍 57.12%，两者相差 程菌 不明显。
但质粒容易丢 失或 转移， 遗传稳定性 差
李尔炀
但供体基因进入细 胞后随机整合到受 体染色体上，导致 各供体基因所获启 动子活性不同，由 此造成各基因之间 表达强度不同
人物
方法
优点
缺点
宋绍富等
融合子进行多次传 代 培养优选， 最 采用原生质体融合 终获得了9株遗传 技术 性状稳定和代谢多 糖性能优异的融合 菌。
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关键词 ：石油烃；高效石油烃降解菌；温度；ｐ Ｈ； 氮磷比
中图分 类号 ：Ｘ ７ ０ ３ ． １
文 献标 识码 ：Ａ
文章编 号 ：１ ０ ０ １ — ９ ６ ７ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ４— ０ ０ ９ ４ — ０ ２
Ｔｈ ｅ Ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｈｉ ｇ ｈ ｌ ｙ Ｅｆ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｔ Ｏｉ ｌ — — ｄ ｅ ｇ ｒ ａ ｄ ｉ ｎ ｇ Ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ
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第４ １ 卷 第 ４期 ２ ０ １ ３ 年 ２月
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州
化
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Ｖ０ １ ． ４１ Ｎｏ ． ４
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效 石 油 降解 菌 筛 选及 其应 用 的研 究
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（ 浙 江海 洋学院石 ｉ ￣４ Ｌ－ Ｙ － 学 院 ，浙江 舟 山 ３ １ ６ ０ ０ ０ ）
摘 要 ：在污水处理厂中， 从长期被石油污染的土壤和水体中采取样品，以石油烃为唯一碳源，通过富集培养分离进行高
效石油烃降解菌 的筛选 ；以革 兰氏染色方法对其进行初步鉴定 ；确定最佳培 养条件和环境 ，最后在 温室内 ，通过研究高效 石油烃 降解菌对石油烃污染土壤的修 复实验来评估高效石油烃降解菌的实际应 用效果 。
Ｎ ：Ｐ ｒ ａ ｔ ｉ
随着海洋石 油 的开发 ，每年 都有 由于运输 船 舶 的石 油 泄 漏 、撞船 、沉船以及输 油 管 道 的泄漏 等 造 成 的石 油 污染 。 目 前 ，由溢油造成的污染引起 了全 世界的高度重视 ，需要及时采 取切实有效 的措施对溢油进行 迅速处理 ，使其对环境 的危害 降