色谱分析总复习

1. 色谱法按分离原理分类, 可分为吸附色谱，分配色谱，排阻色谱和离子交换色谱。

2. 所采用流动相的密度与液体接近, 粘度又与气体接近的色谱方法称超临界流体色谱法。

3. 1956年范德姆特提出色谱速率理论方程。其方程简式表示为H＝A＋B／u＋Cu

4.分离非极性组分, 可选择非极性固定液, 组分分子与固定液分子之间的作用力主要为色散力

5.目前常用的色谱柱有填充柱和空心毛细管柱两种。

6.根据范氏方程，试简要分析要实现色谱快速分析应注意哪些操作条件？

答:要兼顾到提高柱效和加快分析速度两个方面。提高载气流速可加快分析速度，抑

制分子扩散(B/u)，但将使传质阻力增加( Cg+ Cs) 为此，可采用降低固定液用量，减少液层厚度df，同时应用轻质载气提高Dg来减少气相传质阻力等措施。因此，结论是：选用轻质载气，减少固定液用量，提高载气流速。

7.试预测下列操作对色谱峰形的影响, 并简要说明原因。

(1) 进样时间超过10 s (2) 气化温度太低，以致试样不能瞬间气化

(3) 加大载气流速很多(4) 柱长增加一倍

答: 1. 谱峰变宽,柱外分子扩散加剧。 2. 谱峰变宽，柱外分子扩散加剧。

3. 峰形变窄，保留时间缩短。

4. 峰形变宽,增加0.4倍，保留时间增加。

8.试预测下列实验条件对色谱峰宽的影响, 并简要说明原因.

(1) 柱温增加(2) 相比减小(3) 分配比增加(4) 试样量减小很多

答: (1) 峰宽减小，因为分配系数减小。(2) 峰宽增加，传质阻力增加。

(3) 峰宽增加，传质阻力增加。(4) 峰宽减小，柱外初始带宽减小。

第一章1.由俄国植物学家茨维特创立的色谱法, 应该是属于(4)液-固色谱

2.什么叫气-固色谱法? 气-固色谱法是流动相为气体, 固定相为固体吸附剂。分离原理是利用组分与固体吸剂的吸附与脱附能力不同进行分离。可适用于气体及低沸点烃类

3.什么叫气-液色谱法? 气-液色谱法是流动相为气体, 固定相为液体。分离原理是利用组分与固定液的溶解挥发能力不同进行分离。可适用于在固定液中有一定溶解度的试样。

4.试比较气相色谱法与高效液相色谱法的优缺点。

H PLC法不受试样挥发度和热稳定性的限制, 更适合于分析生物大分子、离子型化合物、热不稳定的天然产物和其它高分子化合物。另外H PLC的流动相不仅有使试样沿柱向前移动的作用, 且可与被测组分分子发生相互作用, 使选择条件增加一个。但相对而言, GC法分析速度较快, 方法灵敏度较高、方便且耗资较低。

第二章1.色谱图上的色谱峰流出曲线可说明什么问题？

解：可说明（1）根据色谱峰的数目，可判断样品中所含组分的最少个数。（2）根据峰的保留值进行定性分析。（3）根据峰的面积或高度进行定量分析。（4）根据峰的保留值和区域宽度，判断色谱柱的分离效能。（5）根据两峰间的距离，可评价固定相及流动相选择是否合适。

2.反映色谱柱柱型特性的参数是：C.相比

3.什么叫死时间？用什么样的样品测定？

解：不被固定相吸附或溶解的组分，从进样开始到柱后出现最大值所需要的时间。通常对于热导池检测器用空气作为测试样品，对于氢火焰离子化检测器，常用甲烷（CH4）作为测试样

4.对某一组分来说，一定柱长下，色谱峰的宽或窄主要决定于组分在色谱柱中的B. 扩散速度

5.指出下列哪些参数改变会引起相对保留值增加？为什么？C.降低柱温

6.色谱法按固定相的固定方式分类, 除柱色谱法以外, 还有纸色谱和薄层色谱。

7.某一色谱柱从理论上计算得到的理论塔板数n 很大，塔板高度H很小，但实际上分离效果却很差，试分析原因。

解：n是通过保留值来计算的，没有考虑到死时间的影响，实际上t m对峰的影响很大，特别是K′≤3时，扣除死时间算出的n eff，有效塔板高度H eff很大，因而实际分离效能很差。

第三章1.为什么要测定定量校正因子？

解：由于组分的峰面积不等于其重量或百分含量，也就是说，在同一类型的检测器上，重量或浓度相同的不同种物质产生的信号是不一样的；在不同类型的检测器上，同一种物质产生的信号也是不一样的，因此，为了使产生的响应信号能定量代表物质的含量，就要测定校正因子。

2.测苯二甲酸混合物中间苯二甲酸含量，称取样品0.3578g,内标物癸二酸0.1029g ，将样品及内标物甲酯化后进行气相色谱分析，测得间苯二甲酸二甲酯的峰面积为2

3.7单位，癸二酸二甲酯的峰面积为2

4.5单位，已知这两种酯的重量校正因子分别为0.77和1.00，求间苯二甲酸的含量 解：查出癸二酸分子量为202，癸二酸二甲酯为230，间苯二甲酸分子量为166，间苯二甲酸甲酯分子量为194。

先计算间苯二甲酸二甲酯的量（m 1）：

第四章1.在气相色谱分析中为了测定下面组分，宜选用哪种检测器？为什么？（1）蔬菜中含氯农药残留量；（2）测定有机溶剂中微量水；（3）痕量苯和二甲苯的异构体；（4）碑酒中微量硫化物 解（1）蔬菜中含氯农药残留量选用电子捕获检测器，因为根据检测机理电子捕获检测器对含有电负性化合物有高的灵敏度。残留农药是含有电负性化合物，选用电子捕获检测器检测。（2）有机溶剂中的微量水选用热导池检测器检测，因为热导池检测器是通用型检测器，只要有导热能力的组分均可测定，故可测定微量水。而气相色谱其它几种检测器如氢焰、电子捕获、火焰光度检测器根据检测机理均不能测定水。（3）痕量苯和二甲苯的异构体可用氢火焰离子化检测器，因为氢火焰离子化检测器对含C 、H 元素的有机化物有高的响应信号，特别适合。（4）啤酒中微量硫化物选用火焰光度检测器，因为火焰光度检测器是只对硫、磷有响应信号，且灵敏度特高，故为首选。 2.相对保留值和保留指数都是表示某组分的相对保留能力的大小，二者不同的是什么？

解：相对保留值和保留指数二者不同的是，相对保留值以任意选定的单个化合物作为参比标准，而保留指数则以正构烷烃系列作为参比标准，把物质的保留行为用两个紧靠近它的两个正构烷烃来标定。

3.已知苯的沸点为80.1℃，环已烷的沸点为80.8℃，采用非极性固定液能分离开吗？采用中等极性或更强极性的固定液能分离开吗？为什么？ 解：苯和环已烷的沸点很相近，若采用非极性固定液（SE －30，液体石腊）是很难将它们分离的。但苯比环已烷容易极化，如果用中等极性的邻苯二甲酸二壬酯固定液（DNP ），使苯产生诱导偶极，此时苯的保留时间是环已烷的1.5倍，能将苯与环已烷很好分离。苯后出峰，若选用强极性的β，β′－氧二丙腈固定液，则苯的保留时间是环已烷的6.3倍，很容易分离。

4.对于永久性气体的分离为什么常采用气固色谱？

答：尽管气液色谱应用面广，但是H 2、O 2、N 2、Ar 2等永久性气体在气液色谱柱上，不能得到分离，由于它们在固定液上的溶解度都极小，使分配系数几乎一样，没有差别，即固定液对永久性气体无选择性，而固体吸附剂对永久性气体有好的吸附能力，使得永久性气体组分在气固色谱中有较大的分配系数，彼此可分离

5.推荐两种分离脂肪酸甲酯的固定相，丁二酸二乙二醇聚酯（DEGS ）和丁二酸新戊二醇聚酯（NGPS ），对于分离饱和与不饱和脂肪酸甲酯，哪一种固定液更好呢？

固定液 x ´ y ´ z ´ u ´ s ´

DEGS 496 746 590 837 835

NPGS 272 469 366 559 472 087.000.15.24)202/230(1092.077.07.23)202/230(1=⨯⨯⨯⨯=⨯=s s s i i f A m f A m 9.201003578

.0)194/166(0837.0100)194/166(%1

=⨯⨯=⨯⨯=m m p i