细胞生物学实验手册：电子显微镜生物标本的制备及观察
电子显微镜生物标本的制备及观察【实验目的】了解电子显微镜的基本
电子显微镜生物标本的制备及观察【实验目的】了解电子显微镜的基本原理及电镜生物标本的制备方法和观察。
【实验用品】一、材料和标本家兔一只。
二、器材和仪器 H—600透射电子显微镜、S—450扫描电子显微镜、超薄切片机(AO 型)、解剖镜、震荡器、恒温箱、临界点干燥器、JB一3型离子镀膜机、单面刀片、铜网、解剖器材。
三、试剂乙醚、2.5％戊二醛(0.1mol／L(pH7.4)二甲砷酸钠缓冲液配制)、1％锇酸、30％、50％、70％乙醇溶液、80％、90％、95％、100％丙酮溶液、环氧树脂(Epon812)包埋剂、醋酸铀染液、柠檬酸铅染液、双蒸水、2％单宁酸、乙酸异戊脂、液态CO。
2【实验内容】一、透射电子显微镜的标本制备及观察(一)原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，电子改变前进轨迹，产生偏转、聚焦，因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。
高速运动的电子流其波长远比光波波长短，所以电镜分辨率远比光镜高，可达0.14nm，放大倍率可达80万倍。
由热阴极发射的电子在20～100千伏加速龟压作用下，经聚光镜聚焦成束，投射到很薄的标本上，并与标本中各种原子的核外电子发生碰撞，造成电子散射，在细胞质量和密度较大的部位，电子散射度强，成像较暗。
在质量、密度较小处电子散射弱，成像较亮，结果在荧光屏上形成与细胞结构相应的黑白图像。
(二)主要结构电子显微镜由电子光学系统、真空系统和供电系统三大部分组成(图17一l，图17—2)。
1．电子光学系统是电镜的主体，对成像和像的质量起着决定性作用。
它是由电子枪、聚光镜、样品室、物镜、中间镜、投影镜、观察室和照像室等部分构成。
2．真空系统主要是使镜筒内保持高度真空，一般要求达到10-4托（1托=lmmHg），是通过机械泵和油扩散泵接力排气及真空垫圈的密封作用来实现的。
真空度可由真空表指示。
由于电镜利用高速电子束为照明源，裁要求在电子束的通道上不能有游离气体存在，以免与气体分子碰撞引起电离、放电、电子散射、灯丝氧化、样品被污染等而影响观察效果或发生故障。
扫描电子显微镜生物样品制备和观察细胞生物学实验报告
扫描电子显微镜生物样品制备和观察细胞生物学实验报告实验目的：1.了解和掌握扫描电子显微镜（SEM）的基本原理和操作方法；2.掌握生物样品制备的基本技术；3.观察细胞的形态和结构。
实验器材：1.扫描电子显微镜；2.生物样品（如细胞培养物，植物片段等）；3.组织固定液（如PBS，甲醛等）；4. 缓冲液（如Na-cacodylate缓冲液）；5.高渗透液（如乙基醇）；6.导电性涂层（如金属薄膜）；7.脱水液（如丙酮）；8.SEM样品支架；9.电子显微镜图像分析软件。
实验步骤：1.样品固定和固定液去除a.取少量的细胞培养物或植物片段放入带有组织固定液的离心管中，固定液的浓度和反应时间可以根据实验需要来确定；b.在固定液条件下，将样品固定在一个特定的位置，确保样品在固定过程中不移动；c.将固定液倒掉，用缓冲液（如PBS）冲洗样品，以去除残留的固定液。
2.导电涂层和脱水a.将样品转移到一个干燥器皿中，加入导电涂层溶液，使样品表面均匀覆盖一层导电涂层；b.进行脱水过程，通常使用各种浓度的酒精（如乙醇）或丙酮作为脱水液。
3.样品固定在SEM样品支架上a.将样品放在SEM样品支架上，并用夹子将其固定；b.根据需要，可以在样品上覆盖一层金属薄膜以提高导电性。
4.样品装入扫描电子显微镜a.将SEM样品支架放入扫描电子显微镜的样品舱中；b.根据需要，可以进行微调或者变焦。
5.SEM图像获取和分析a.在扫描电子显微镜中选择适当的电压和电流，并调整对比度和亮度等参数；b.通过扫描电子显微镜图像分析软件，进行图像采集和分析；c.观察细胞的形态和结构，并记录相关的数据和观察结果。
实验结果：根据实验设定的条件和样品制备的方法，可以观察到细胞的形态和结构。
例如，可以观察到细胞的核、细胞质、细胞壁、纤毛等细微结构，通过比较和分析不同样品之间的差异，可以对细胞生物学进行进一步的研究。
实验注意事项：1.在样品制备过程中，要注意操作的干净和无菌，以防止外源性污染；2.在样品固定和处理过程中，要防止样品的移动和破损；3.在样品加入SEM样品支架之前，要确保样品已经完全脱水，并覆盖了足够的导电涂层；4.在SEM图像获取过程中，要注意合适的电压、电流和对比度等参数的设置，以保证图像的质量；5.实验过程中，注意正确使用SEM设备，遵守相关的安全规定。
细胞生物学实验手册：染色体扫描电镜标本制备及观察
实验二十二染色体扫描电镜标本制备及观察【实验目的】了解扫描电镜观察染色体的方法及标本制备过程。
【实验用品】一、材料和标本光镜观察过的染色体标本片。
二、器材和仪器 S一450扫描电镜、IB一3离子镀膜机。
三、试剂 2.5％戊二醛、0.1mol／L(pH7.4)PBS、l％锇酸、2％单宁酸、30％、50％、70％、80％、90％、100％乙醇溶液。
【实验内容】一、原理扫描电镜用于观察标本的表面形态。
用戊二醛和锇酸处理的染色体标本，经单宁酸(或硫卡巴肼)还原可获得较好的导电染色效果。
在扫描电镜下可观察到染色体的三维结构，也可用于常规染色体核型、G带染色体核型、高分辨染色体核型的分析及染色体结构异常识别，以弥补光镜的许多不足。
在扫描电镜下还可清楚地观察到肿瘤细胞癌基因扩增结构—双微体。
因而此方法广泛用于细胞生物学和遗传学的许多研究。
二、染色体标本制备的方法1．常规染色体标本制备，同实验十。
2．取一张在光镜下观察过的染色体标本片选择分散良好的分裂相，并在背面做出标记以便电镜观察时易于寻找。
3．3:1甲醇一冰乙酸脱色，用磷酸缓冲液洗。
4．2.5％戊二醛固定30分钟。
5．0.1mol／L(pH7.4)PBS漂洗3次。
6．1％锇酸固定5分钟。
7．蒸馏水洗3次。
8．2％单宁酸处理5分钟。
9．蒸馏水洗3次。
10．1％锇酸处理lO分钟。
11．水洗3次。
12．30％→100％乙醇逐级脱水，每级5分钟。
13．临界点干燥(也可用空气干燥)。
14．把标本片标记的核型所在处用玻璃切下约5×5mm2，用导电胶固定在标本台上。
15．离子镀膜(也可不镀膜直接观察)。
16．扫描电镜观察、照相。
三、染色体形态观察低倍观察可见染色体的不同分裂相，在分散较好的分裂相中，染色体呈三维立体形态。
高倍观察染色体呈长短不等的园柱状，两条单体由着丝粒相连，其表面凹凸不平，沿纵轴有许多环形沟把染色体分成许多节段。
可见染色体表面由许多细纤维构成。
电子显微镜样品制备与观察电子显微镜样品制备[1]
![电子显微镜样品制备与观察电子显微镜样品制备[1]](https://img.taocdn.com/s3/m/7c56d33a83d049649a665803.png)
PPT文档演模板
电子显微镜样品制备与观察电子显微 镜样品制备[1]
2 支持膜的制备
（1）将玻璃条、250ml烧杯洗净，玻璃条先用纱 布擦干，然后再用绸布用力反复擦净，250ml烧 杯装满蒸馏水；
（2）将玻璃条放入0.2~0.3%聚乙烯醇缩甲醛的氯 仿溶液中2~4cm深，停留3~5s后提出，在空气 中自然干燥；
2 放入样品：按程序放入样品。 3 加高压：有下列几档可选 40KV、60KV、
80KV 、100KV，若需高压应先加低压。选择 加速电压原则：电压越高，分辨率越高，反差 越小；反之，电压越低分辨率越低，反差越大。
PPT文档演模板
电子显微镜样品制备与观察电子显微 镜样品制备[1]
4 加灯丝电源：顺时针旋转至限位处（加灯丝电 源必须有高压存在），此时应看到图象，若不 能看到图象，请与专职人员联系，切勿随意调 整各旋钮。 5 观察:调整放大倍数、亮度、样品 XY平移、焦距进行观察。
（五）实验要求 1 所用器具、工具保持清洁干燥； 2 手上若沾有环氧树脂，用丙酮棉球擦去； 每人包埋2～3个样品块。
PPT文档演模板
电子显微镜样品制备与观察电子显微 镜样品制备[1]
三、修快与支持膜的制备
（一）实验目的 1 掌握超薄切片包埋块修快的方法； 2 掌握支持膜制备的方法。 （二）实验原理 见理论部分 （三）实验材料 上次实验包埋的材料
PPT文档演模板
电子显微镜样品制备与观察电子显微 镜样品制备[1]
3rew
演讲完毕，谢谢听讲!
再见，see you again
PPT文档演模板
2020/11/28
电子显微镜样品制备与观察电子显微 镜样品制备[1]干燥
PPT文档演模板
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构实验报告：利用电子显微镜观察细胞结构简介电子显微镜（Electron Microscope，简称EM）是一种通过电子以及电磁场对物体进行观察的高级显微技术。
它能够提供比传统光学显微镜更高的放大倍数和更好的分辨率，使我们能够更好地观察和理解细胞结构。
本实验旨在利用电子显微镜观察细胞结构，并通过实验数据分析和讨论。
材料与方法1. 细胞样本的准备：a. 选择适当的细胞类型作为实验样本，如细菌、植物细胞或动物细胞。
b. 用适当的方法收集细胞样本，并进行固定处理以保持细胞的形态结构。
2. 电子显微镜的准备：a. 打开电子显微镜，并进行预热和真空泵排气工作。
b. 调整电子显微镜的放大倍数和对焦以获得清晰的图像。
3. 观察细胞结构：a. 将准备好的细胞样本放入电子显微镜的样本室中。
b. 调整电子显微镜的参数（例如电压和电流）以获得合适的成像效果。
c. 使用电子显微镜观察样本，并记录下感兴趣的细胞结构特征。
d. 拍摄细胞结构的高分辨率图像以备后续分析使用。
4. 数据分析与讨论：a. 根据所观察到的细胞结构特征，结合相应的文献和知识，对细胞的组成和功能进行分析和讨论。
b. 比较电子显微镜与光学显微镜的差异，并探讨电子显微镜在细胞研究中的优势和局限性。
结果与讨论通过实验观察，我们成功利用电子显微镜观察到了细胞的微观结构。
在电子显微镜下，我们能够看到细胞膜、细胞质、细胞核以及一些细胞器如线粒体、内质网等结构。
细胞膜是细胞的外层保护层，通过电子显微镜的观察，我们可以看到细胞膜呈现出类似双层状的结构，其中包含许多蛋白质通道。
细胞质是细胞膜与细胞核之间的区域，在电子显微镜下，我们可以看到细胞质内有许多细小而致密的颗粒，这些颗粒可以是蛋白质、核酸或其他细胞组分。
细胞核是细胞的控制中心，通过电子显微镜的观察，我们可以看到细胞核具有核膜、染色质以及核仁等结构。
核膜分为内膜和外膜，并通过核孔与细胞质相连。
大学生物学实验教案：细胞生物学的观察和实验操作
大学生物学实验教案：细胞生物学的观察和实验操作1. 实验简介本实验旨在通过观察和实践，让大学生对细胞生物学有更深入的了解。
实验将通过使用显微镜观察不同类型的细胞样本，并进行一些基本的实验操作，从而探究细胞结构和功能。
2. 实验器材和材料•显微镜及其配件（物镜、载玻片、盖玻片等）•细胞样本（动植物组织片、单细胞等）•高锰酸钾溶液•甘油•生理盐水•紫外线灯3. 实验步骤步骤1：制备样本载玻片1.准备干净的载玻片。
2.使用无菌注射器吸取少量生理盐水，并滴于载玻片中心。
步骤2：观察活细胞1.将采集到的活体细胞放置在准备好的载玻片上。
2.加盖并尽量避免形成气泡。
3.将载玻片放置在显微镜台上，使用低倍物镜进行初步观察。
4.切换至高倍物镜，并对细胞进行详细观察和记录。
步骤3：观察动植物组织片1.准备已染色或未染色的动植物组织片。
2.将组织片放置在载玻片上，并加盖。
3.将载玻片放置在显微镜台上，使用低倍物镜进行初步观察。
4.切换至高倍物镜，并对组织结构进行详细观察和记录。
步骤4：实验操作：渗透压的影响1.制备三个小瓶，分别标注为A、B和C。
2.在瓶A中加入生理盐水。
3.在瓶B中加入高浓度甘油溶液（可根据需要调整浓度）。
4.在瓶C中加入低浓度甘油溶液（可根据需要调整浓度）。
5.将离心后的红血球分别放置于三个瓶子中，记录下红血球的变化情况。
步骤5：实验操作：核酸染色1.准备一份含有DNA的细胞样本。
2.加入适量的缓冲液，混合均匀。
3.滴加一滴染色剂（如乙溴橙），轻轻晃动。
4.等待几分钟后，用载玻片将混合液取出，并使用盖玻片加盖。
5.使用荧光显微镜观察染色后的样本。
4. 实验结果与讨论在实验中，学生应记录观察到的细胞结构、细胞分裂、渗透压对红血球的影响等结果，并对所得数据进行分析和讨论。
他们可以比较不同类型细胞之间的差异，并与理论知识进行关联，从而深入理解细胞生物学的多个方面。
5. 安全注意事项•在实验过程中务必佩戴安全眼镜和实验手套。
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构实验报告：利用电子显微镜观察细胞结构一、实验目的本次实验旨在利用电子显微镜对细胞结构进行详细观察，以深入了解细胞的微观组成和形态特征，为细胞生物学的研究提供直观的证据和准确的信息。
二、实验原理电子显微镜利用电子束代替可见光来成像。
由于电子的波长比可见光短得多，因此电子显微镜具有更高的分辨率，可以清晰地显示细胞内的细微结构。
在电子显微镜中，电子枪发射出电子束，经过一系列电磁透镜的聚焦和偏转，最终照射到样品上。
样品中的原子会散射电子，这些散射的电子被探测器收集并转化为图像信号，从而形成细胞结构的图像。
三、实验材料与设备1、实验材料培养的动物细胞（如肝细胞、神经细胞等）植物细胞（如洋葱表皮细胞、叶肉细胞等）2、实验设备透射电子显微镜（TEM）扫描电子显微镜（SEM）超薄切片机离心机固定液（如戊二醛、锇酸等）脱水剂（如乙醇、丙酮等）包埋剂（如环氧树脂等）四、实验步骤1、样品制备取材：选取生长状态良好的细胞，用胰蛋白酶消化或机械方法将其从培养皿中分离下来。
对于植物细胞，可直接从新鲜组织中取材。
固定：将细胞迅速放入预冷的固定液中（如 25%戊二醛），在 4℃下固定 1 2 小时，以保持细胞结构的完整性。
漂洗：用缓冲液冲洗固定后的细胞，去除多余的固定液。
脱水：依次用浓度递增的乙醇（30%、50%、70%、80%、90%、100%）对细胞进行脱水处理，每次 10 15 分钟。
渗透：将脱水后的细胞放入包埋剂与脱水剂的混合液中进行渗透，逐渐增加包埋剂的比例，最后在纯包埋剂中浸透。
包埋：将浸透的细胞放入模具中，加入包埋剂，在 60℃下聚合固化，形成包埋块。
超薄切片：使用超薄切片机将包埋块切成50 80nm 厚的超薄切片。
2、电子显微镜观察透射电子显微镜观察：将超薄切片放在铜网上，用醋酸铀和柠檬酸铅进行染色，然后放入透射电子显微镜中进行观察。
扫描电子显微镜观察：对未切片的细胞进行干燥、喷金处理后，放入扫描电子显微镜中观察。
培养细胞的电子显微镜观察实验
培养细胞的电子显微镜观察实验一、透射观察法透射观察必须切片，根据培养细胞种类和培养方法不同分原位切片和消化分离切片两种。
1. 在用玻璃瓶培养细胞做透射观察时，做原位切片非常复杂。
只能采用消化法把细胞制成悬液才能进行包埋和切片。
其过程为：消化分离细胞、固定、包埋、切片和观察几项。
进行消化时，应注意，消化液的浓度不宜太大、消化时间也要适度，吹打细胞动作要轻微，以防损害细胞表面的微细结构。
然后低速离心，令细胞沉于离心管底部（用锥形离心管最好），吸除上清液，立即加戊二醛固定。
其余包埋、切片等步骤与一般组织相同，请参阅其它电镜技术，此不赘述。
2. 单层培养细胞通过消化分离细胞包埋法的优点是获细胞数量多，便于进行包埋和切片。
缺点一是通过消化可能损伤细胞表面结构，二是消化改变了细胞单层生长时细胞相互接壤关系。
3. 也可采用原位包埋法，为此应把细胞培养在无菌聚苯乙烯塑料薄膜上，便于进行固定、包埋、切片处理。
聚苯乙烯薄膜是一种由聚苯乙烯制成的厚度类似盖片、无毒、质地柔软、已消毒包装的成品（国内尚未见生产）。
用时可剪切成适宜的小块置入瓶中，然后再向瓶中接种细胞，待细胞附于盖片上并生长后，取出、进行固定、剪切成小块、直接包埋入Epon胶囊中，很易切片，是原位包埋透射电镜观察细胞理想的方法。
如观察的为悬浮细胞，因悬浮细胞不必做消化处理，可直接进行离心、固定、包埋和切片，细胞保存效果好。
二、扫描观察培养细胞扫描观察非常方便，在观察贴壁细胞时也需进行消化，制备成细胞悬液后，用Hanks液漂洗1～2 次，除去细胞碎块和血清蛋白等（以免妨碍观察）。
其余处理与血细胞扫描电镜观察法相同。
进行原位扫描观察培养细胞更为容易，可按以下步骤进行：1. 加支持物小盖片培养法培养细胞，至指数增生期；2. PBS pH7.4漂洗两次，以去除培养液；3. 25 %戊二醛/PBS固定30 分钟；4. PBS漂洗3 次；5. 1 %OsO4固定45 分钟；6. PBS漂洗3 次；7. 脱水丙酮/醋酸异戊酯（1：1）10 分钟→醋酸异戊酯30 分钟；8. 临界点干燥；9. 喷金；10. 扫描电镜观察（Hitachs-450）、照像。
电子显微镜下的细胞结构观察实验报告
电子显微镜下的细胞结构观察实验报告在生物学领域中，细胞是一个极具研究价值和重要性的议题。
通过现代科技的发展，我们可以运用电子显微镜来观察细胞的微观结构。
本实验旨在运用电子显微镜对细胞的结构进行观察，并记录所得到的实验结果。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 细胞样本（动物细胞和植物细胞）- 电子显微镜- 电子显微镜样品制备工具（刀片，离心机，缓冲液等）- 常规显微镜2. 实验方法：1. 样本制备：a. 取一小段动物组织并用缓冲液固定。
b. 用刀片将细胞切成极薄的片段。
c. 使用离心机或其他方法将切好的细胞片离心并固定在载玻片上。
2. 样本染色：a. 使用适当的染色剂（如乙醇）将细胞染色。
b. 将已染色的细胞样本置于干燥器中进行干燥。
3. 使用电子显微镜观察样本：a. 将电子显微镜调整到适当的放大倍数。
b. 载玻片上的样本放置在电子显微镜中。
c. 使用电子显微镜观察细胞的微观结构，并记录所见。
4. 使用常规显微镜观察样本：a. 将样本置于常规显微镜平台上。
b. 使用常规显微镜观察细胞的宏观结构，并记录所见。
实验结果：经过实验观察，我们通过电子显微镜成功地观察到了细胞的微观结构。
动物细胞中，我们观察到了细胞核、细胞质、线粒体、内质网等重要的细胞器。
细胞核是细胞的控制中心，内部含有染色体和核仁。
细胞质是细胞的主要物质基质，包含了各种细胞器和细胞溶液。
线粒体则是细胞中产生能量的地方，它在电子显微镜下呈现出典型的椭圆形状。
内质网是一个复杂的细胞器，参与到细胞合成蛋白质和脂质的过程中。
通过电子显微镜的高分辨率，我们能够更清晰地观察到这些细胞器的细微结构和组织排列。
同时，在植物细胞中，我们也观察到了与动物细胞类似的细胞器。
例如，细胞核、线粒体和内质网在植物细胞中同样起到重要的作用。
此外，我们还观察到了特有的细胞壁和叶绿体。
细胞壁是植物细胞的外部保护层，由纤维素构成。
叶绿体是植物细胞中负责光合作用的重要细胞器。
电子显微镜实验报告
电子显微镜实验报告电子显微镜实验报告引言：电子显微镜（Electron Microscope，简称EM）是一种利用电子束来观察物质微观结构的仪器。
与光学显微镜相比，电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数，能够观察到更小的细微结构。
本实验旨在通过使用电子显微镜，观察和分析不同样本的微观结构，以及了解电子显微镜的工作原理和操作技巧。
实验材料和仪器：本次实验使用的材料包括金属样品、植物细胞样品和昆虫组织样品。
实验所使用的仪器为电子显微镜，包括扫描电子显微镜（Scanning Electron Microscope，简称SEM）和透射电子显微镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）。
实验步骤：1. 样品制备：将金属样品切割成薄片，植物细胞样品进行固定和切片，昆虫组织样品进行化学处理和切片。
2. SEM观察：将样品放置在SEM的样品台上，通过控制电子束的扫描范围和电子束的强度，观察样品表面的微观结构。
3. TEM观察：将样品制备成透明薄片，放置在TEM的样品台上，通过控制电子束的透射范围和电子束的强度，观察样品内部的微观结构。
4. 结果分析：根据观察到的图像，分析样品的微观结构、形态和组成。
实验结果：1. 金属样品观察：通过SEM观察，我们可以清晰地看到金属表面的晶粒结构和纹理。
不同金属的晶粒大小和排列方式也可以通过SEM图像进行比较分析。
2. 植物细胞样品观察：通过TEM观察，我们可以观察到植物细胞的细胞壁、细胞质、细胞核和细胞器等微观结构。
通过比较不同类型的细胞样品，我们可以了解不同细胞的结构和功能差异。
3. 昆虫组织样品观察：通过SEM和TEM观察，我们可以观察到昆虫组织的外部形态和内部结构。
例如，昆虫的触角、翅膀和腿部等结构可以通过SEM观察到其表面形态，而昆虫的神经系统和内脏器官可以通过TEM观察到其内部结构。
讨论与总结：通过本次实验，我们深入了解了电子显微镜的工作原理和操作技巧，并成功观察到不同样品的微观结构。
扫描电子显微镜生物样品制备与观察细胞生物学实验报告
扫描电子显微镜生物样品制备与观察细胞生物学实验报告实验目的：通过使用扫描电子显微镜（SEM），观察并比较不同生物样品的细胞结构和形态特征。
实验材料：-不同种类的生物样品（如植物叶片、昆虫翅膀、细菌培养物）-10%磷酸盐缓冲液（PBS）-2.5%葡萄糖溶液-电镜显微镜台-SEM样品支架-SEM扫描电镜实验步骤：1.收集各种生物样品，并用PBS润湿样品表面，以去除杂质。
2.将样品放置在SEM样品支架上，用细菌镊子小心地将样品固定在支架上。
3.将SEM样品支架放入SEM扫描电镜中，并调节扫描电镜的参数，如电子束的加速电压和信号放大倍数。
4.将SEM样品支架移动到扫描电镜中心位置，并确保样品表面与电子束的垂直距离适当。
5.打开电子束，在视野范围内找到有代表性的细胞区域，并通过调整焦距和扫描速度来获取清晰的图像。
6.在观察过程中，可以尝试不同的电子束参数，以获得最佳的样品成像效果。
7.观察并记录每个样品的细胞结构和形态特征，注意细胞的大小、形状和细胞器的位置等。
实验结果与讨论：通过SEM观察，我们可以清晰地看到植物叶片的气孔细胞和叶绿体的内部结构。
气孔细胞呈现出多边形的形状，并且表面布满微小的细管，这些细管是用于气体交换的通道。
叶绿体则呈现出椭圆形，并且具有叶绿素颗粒的特征，这些颗粒是光合作用中的关键结构。
昆虫翅膀的观察结果显示，翅膀表面有许多微小的鳞片组成，这些鳞片具有复杂的纹理和形状。
昆虫通过这些鳞片可以完成特定的功能，如飞行和保护。
SEM的使用使我们能够更加详细地观察到翅膀表面的微观结构。
细菌样品的观察结果显示，细菌呈现出不规则形状的胞体，表面光滑且有不规则的突起。
通过SEM的高放大倍数，可以看到细菌细胞壁的纹理和孔隙结构，这些结构可能与细菌的生长和代谢有关。
通过SEM观察不同生物样品的细胞结构和形态特征，可以增进我们对细胞生物学的理解。
SEM的高分辨率能力使我们能够观察到细胞的微观结构，从而对细胞的功能和相互作用有更深入的认识。
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构
实验报告利用电子显微镜观察细胞结构实验报告：利用电子显微镜观察细胞结构一、实验目的本实验旨在通过电子显微镜观察细胞的精细结构，深入了解细胞的组成、形态和功能，提高对细胞生物学的认知水平。
二、实验原理电子显微镜利用电子束替代可见光，通过电磁透镜对电子束进行聚焦和成像。
由于电子的波长极短，因此电子显微镜能够提供比光学显微镜更高的分辨率，可以清晰地显示细胞内的细胞器、膜结构等细微结构。
三、实验材料与设备1、实验材料培养的细胞样本（如肝细胞、神经细胞等）固定剂（如戊二醛、锇酸等）脱水剂（如乙醇、丙酮等）包埋剂（如环氧树脂）超薄切片机电子显微镜2、实验设备移液器离心机烤箱镀膜仪四、实验步骤1、细胞固定将培养的细胞用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，去除培养基。
加入适量的戊二醛固定液，室温下固定 1 2 小时。
用 PBS 冲洗，去除多余的固定液。
2、脱水处理依次将细胞样本放入不同浓度的乙醇溶液（30%、50%、70%、90%、100%）中进行脱水，每次 10 15 分钟。
3、包埋将脱水后的细胞样本放入环氧树脂中，在烤箱中聚合包埋。
4、超薄切片制作使用超薄切片机将包埋好的样本切成厚度约 50 70 纳米的超薄切片。
5、切片染色将超薄切片放在铜网上，用铀盐和铅盐进行染色，增强对比度。
6、电子显微镜观察将染色后的切片放入电子显微镜中，调整参数进行观察和拍照。
五、实验结果与分析1、细胞膜电子显微镜下，细胞膜呈现为两层暗线夹着一层亮线的结构，厚度约为 7 10 纳米。
可以清晰地看到细胞膜上的蛋白质分子和糖链。
2、细胞质细胞质中可以观察到线粒体、内质网、高尔基体等细胞器。
线粒体呈现为椭圆形或棒状，具有双层膜结构，内膜向内折叠形成嵴，嵴上分布着大量的酶，是细胞进行有氧呼吸的主要场所。
内质网分为粗面内质网和滑面内质网。
粗面内质网上附着有核糖体，是蛋白质合成的场所；滑面内质网与脂质合成和解毒作用有关。
高尔基体由扁平膜囊、小泡和大泡组成，参与细胞的分泌活动。
扫描电子显微镜生物样品制备与观察细胞生物学实验报告剖析
细胞生物学实验报告扫描电子显微镜生物样品制备与观察姓名：学号：班级：专业：同组成员：【实验目的】1、了解扫描电镜的基本结构与工作原理2、了解扫描电镜的基本使用方法3、了解临界点干燥仪的工作原理了解扫描电镜生物样品制备的基本过程【实验原理】扫描电镜主要用于观察样品表面几何形貌。
一般扫描电镜生物样品制备过程包括取材、固定、脱水、干燥以及导电处理等步骤。
取材时应尽量保护待观察的样品表面（如细胞表面、组织或器官的上皮表面等），并且避免样品表面在清洗过程中的人为损伤。
一般生物样品需经干燥后才能在扫描电镜下观察。
由于表面张力的作用，含水量大的生物样品在自然干燥过程中，其表面形貌将发生严重变形。
为了观察生物样品真实的表面形貌，通常采用临界点干燥法对样品进行干燥处理。
当气液两相处于临界点时，气体、液体密度相等，表面张力为零。
因此，对生物样品进行临界点干燥，可以较好地保护其表面形貌。
水的临界温度和压力分别为374.1℃和218.3大气压，显然，此条件下生物样品将受到严重损坏。
由于CO2的临界温度和压力较低，为31.4℃和72.9大气压，故通常选择CO2作为生物样品临界点干燥的工作介质。
固定、脱水后的样品需经过乙酸异戊酯处理，然后利用临界点干燥仪对样品进行干燥。
由于生物样品导电性低，未经过导电处理的样品在扫描电镜下观察时会产生荷电现象，从而影响观察和照相记录。
为了减少荷电效应，对生物样品表面要进行导电处理，通常使用离子溅射仪在样品表面喷镀金属导电薄层。
喷镀的金属包括：金（Au），铂（Pt）及其合金等，喷镀导电薄层厚度在10nm左右为宜。
对于花粉粒等含水量较少的生物样品，可以经过自然干燥后在扫描电镜下观察。
入射电子术与固体样品原子之间的相互作用1、入射电子术与固体样品原子之间的相互作用。
具有一定的能量的电子入射固体厚样品后收到样品原子的散射，产生二次电子、背散射电子以及特征x射线等。
二次电子是从样品表面约10nm深度范围内被入射电子激发的低能电子，其能量约为0~50eV。
实验三扫描电子显微镜样品制备及观察
实验三扫描电子显微镜样品制备及观察实验三主要涉及扫描电子显微镜样品制备和观察过程。
以下是一个超过1200字的实验报告范例：实验目的：1.学习和掌握扫描电子显微镜样品制备的基本步骤；2.观察不同类型的样品在扫描电子显微镜下的显微结构。
实验仪器和材料：1.扫描电子显微镜2.不同类型的样品，如金属材料、生物组织等3.乙醇、丙酮、石蜡等制片材料4.水平切割机、镊子、显微刀等制备材料实验步骤：1.样品制备将所需观察的不同类型样品准备好，并进行特定处理。
例如，对于金属材料，首先使用水平切割机将样品切成薄片，然后使用显微刀去除杂质，并在样品表面涂上一层金属导电层以提高扫描电子显微镜的信号捕获效果。
对于生物组织样品，通常需要将其固定在石蜡中，并使用微刀将其切成薄片。
2.样品固定根据不同样品的特点，采取相应的方法将其固定在样品台上。
对于金属材料样品，通常使用夹子将其固定在样品台上。
对于生物组织样品，可以将其固定在样品台上，或者使用特殊的制备夹具将其固定在样品台上。
3.干燥处理在进行样品观察之前，必须将样品彻底干燥。
对于金属材料样品，可以使用乙醇或丙酮进行水分去除。
对于生物组织样品，通常需要进行石蜡溶解和再结晶等步骤，并使用有机溶剂将其干燥。
4.扫描电子显微镜观察将已干燥的样品放入扫描电子显微镜中，调整显微镜的参数，如电压、放大倍数和束缚电流等，以获得最佳的观察效果。
通过浏览不同区域，并调整焦距等参数，可以观察样品的微观结构。
5.记录观察结果使用扫描电子显微镜观察所选样品，并记录观察结果，包括样品的表面形貌、微观结构和颗粒分布等。
实验结果与讨论：在本次实验中，我们观察了不同类型的样品，如金属材料和生物组织样品。
通过使用扫描电子显微镜，我们可以清晰地观察到样品的微观结构和表面形貌。
对于金属材料样品，我们通过将样品切割成薄片，并在其表面涂上一层金属导电层，使其具有较好的导电性，以便于电子显微镜的观察。
我们观察到不同金属材料样品的晶体结构和晶界分布。
细胞生物学实验手册：液泡系(Vacuolar system)的活体染色及电镜照片观察
实验三液泡系(Vacuolar system)的活体染色及电镜照片观察【实验目的】掌握一种活体染色方法，了解光学显微镜和电子显微镜下液泡系的基本形态结构。
【实验用品】一、材料和标本蟾蜍一只，软骨细胞电镜照片。
二、器材和仪器光学显微镜一台、手术器材一套、解剖盘一个、载片、盖片、吸水纸。
三、试剂 l／3000中性红染液、Ringer氏液(两栖类用)。
【实验内容】一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察(一)原理在动物细胞内，凡是由膜所包围的小泡和液泡除线粒体外都属于液泡系，包括高尔基器、溶酶体、微体、消化泡、自噬小体、残体、胞饮液泡和吞噬泡，都是由一层单位膜包围而成。
软骨细胞内含有较多的粗面内质网和发达的高尔基复合体，能合成与分泌软骨粘蛋白及胶原纤维等，因而液泡系发达。
中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。
(二)方法取一只蟾蜍，破坏脑和脊髓，剪开胸腔，取胸骨剑突软骨最薄部分的一小片，放在载片上，滴两滴1／3000中性红染液，染色8～lO分钟，用吸水纸吸去染液，加一滴Ringer氏液，盖上盖片，吸去多余Ringer氏液。
(三)结果显微镜下观察，可见软骨细胞为椭圆形，细胞核周围有许多染成玫瑰红色．大小不一的小泡，即软骨细胞液泡系。
二、大白鼠胫骺软骨细胞电镜照片的观察动物细胞液泡很小，即使是活体染色也只能看出是一个小点，为了进一步看清液泡的结构我们有必要观察软骨细胞的电镜照片。
大白鼠胫骺骨细胞电镜照片，细胞核与核仁很清楚，细胞质中有丰富的粗面内质网，液泡系发达，液泡由单层膜包围，细胞周边有液泡释放。
实验三 扫描电子显微镜样品制备及观察
四、实验内容
1．观摩学习扫描电子显微镜的样品的制备制备方 法及基本过程。 法及基本过程。 学习扫描电子显微镜下观察样品。 2．学习扫描电子显微镜下观察样品。 观看扫描电镜照片， 3．观看扫描电镜照片，了解各种不同生物体细胞 的表面空间结构。 的表面空间结构。
五、实验方法与步骤
在老师的指导下学习扫描电子显微镜的样品的制备 制备方法及基本过程， 制备方法及基本过程，并用扫描电子显微镜观察生物 样品。扫描电子显微镜的样品的制备制备的基本过程： 样品。扫描电子显微镜的样品的制备制备的基本过程： 准备样品托：用抛光膏擦净样品托， 1．准备样品托：用抛光膏擦净样品托，然后用 丙酮洗净抛光膏，电吹风吹干备用。 丙酮洗净抛光膏，电吹风吹干备用。 取材：注意保护好被观察表面， 2．取材：注意保护好被观察表面，彻底清洗干 暴露出最佳位置。 净，暴露出最佳位置。样品体积应依据观察要求及样 品托大小等酌情而定。 品托大小等酌情而定。
6．黏贴样品：用少量导电胶涂在样品托上，用镊子轻夹样 黏贴样品：用少量导电胶涂在样品托上， 品侧面，观察面朝上置于样品托上。 品侧面，观察面朝上置于样品托上。 离子溅射镀膜： 7．离子溅射镀膜：把样品托插入离子溅射仪真空实样品 台上，操作溅射仪，可使样品表面覆盖一层10~15nm 10~15nm厚的金 台上，操作溅射仪，可使样品表面覆盖一层10~15nm厚的金 属膜。溅射镀膜的基本原理是，高能粒子轰击金属靶（ 属膜。溅射镀膜的基本原理是，高能粒子轰击金属靶（金、 钯铱和金等）， ），靶金属原子获能后由靶表面逸出而沉 铂、钯铱和金等），靶金属原子获能后由靶表面逸出而沉 积在样品表面，形成连续的导电膜。 积在样品表面，形成连续的导电膜。这种金属膜不仅可以 导电，受激产生较强的二次电子发射， 导电，受激产生较强的二次电子发射，而且使样品表面具 质量—厚度 的一致性。严格地控制膜的厚度， 厚度” 有“质量 厚度”的一致性。严格地控制膜的厚度，是获 得清晰、真实的二次电子表面形貌成像效果的重要条件。 得清晰、真实的二次电子表面形貌成像效果的重要条件。
实验三扫描电子显微镜样品制备及观察
实验三扫描电子显微镜样品制备及观察实验三是关于扫描电子显微镜样品制备及观察的实验。
以下是一个超过1200字的实验报告范例：一、实验目的1.学习扫描电子显微镜（SEM）样品制备的方法。
2.理解SEM观察的原理并学会操作设备。
3.通过SEM观察不同样品的形貌结构，并分析其特点和应用。
二、实验原理扫描电子显微镜是一种通过电子束扫描样品来获得高分辨率图像的仪器。
其工作原理是将样品置于真空室中，利用极细电子束扫描样品表面，通过检测不同位置形成的信号来重建出样品的图像。
具体步骤如下：1.样品制备：常见的SEM样品制备方法有两种，即传统方法和无需真空方法。
传统方法包括金属涂覆、阴影蒸发、离子刻蚀等，而无需真空方法则是通过场发射扫描电子显微镜（FE-SEM）来实现。
根据实验需要和样品性质，选择合适的方法进行样品制备。
2.SEM操作：首先，打开SEM仪器，并进行必要的预热和真空抽气等准备工作。
接下来，将制备好的样品放置在SEM样品台上，调整样品位置和角度。
然后，通过SEM软件来控制电子束的扫描和信号的收集。
最后，进行图像的调整和保存。
3.SEM观察与分析：根据实验目的和要求，选择合适的放大倍数和扫描速度来观察样品的图像。
观察过程中，可以通过调整参数和改变扫描区域来优化图像质量。
观察完毕后，可以通过图像分析软件来进行样品表面形貌特征的定量分析。
三、实验步骤1.样品制备：根据实验要求，选择适当的样品制备方法进行。
在本实验中，我们选择了金属涂覆方法。
首先，将待观察的样品表面清洗干净，以去除附着物。
然后，将样品放置在真空腔内，并进行表面蒸发金属涂覆。
2.SEM操作：打开SEM仪器，并进行必要的预热和真空抽气等准备工作。
等待SEM仪器达到稳定状态后，将制备好的金属涂覆样品放置到SEM样品台上，调整样品的位置和角度。
接下来，通过SEM软件来控制电子束的扫描和信号的收集。
调整参数直至获得清晰的样品图像。
3.SEM观察与分析：根据实验要求，选择适当的放大倍数和扫描速度来获得样品的图像。
细胞生物学实验手册：细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察
实验四细胞中的微丝染色及微丝与细胞形态的实验观察【实验目的】掌握微丝的染色方法，了解光学显微镜和电子显微镜下微丝的基本形态结构。
【实验用品】一、材料和标本盖片培养的成纤维细胞三片。
二、器材和仪器光学显微镜一台、镊子一把、小平皿六个、载片三个、吸水纸、37℃恒温箱。
三、试剂 PBS(pH7.2)、2％Triton X—100液、M—缓冲液、3％戊二醛固定液、0.2％考马斯亮兰染液、100μg／ml的细胞松驰素B、DMEM培养液。
【实验内容】一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应(一)原理微丝普遍存在于多种细胞，对细胞的形状和运动有一定作用。
细胞松驰素B 可与微丝的亚单位肌动蛋白结合，从而破坏微丝，改变细胞的形状。
(二)细胞松驰素B处理成纤维细胞与染色观察1．在平皿中有三张成纤维细胞贴壁生长的盖片，在超净工作台内将一张盖片移入另一皿中继续培养，用作对照。
2．在有两片的平皿内加100μg／ml的细胞松弛素B 4滴继续培养半小时。
3. 将用细胞松弛素B处理过的两张盖片取一张做染色处理，另一张用培养液洗五次（在平皿内换五次培养液，每次都要摇动），继续培养、观察。
两小时后细胞形状恢复，接近正常。
4．对恢复的盖片与第一张没用药的盖片一同做染色处理。
5．染色处理①将需染色的盖片放入盛有PBS的平皿内用吸管轻轻吹洗盖片，换液三次，每次3分钟，洗去培养液。
②将盖片移入2％Triton X一100液，置37℃恒温箱内处理20～30分钟，以提取骨架以外的蛋白质，使骨架图像清晰。
③立刻将盖片移入M一缓冲液，换洗三次，每次3分钟。
M一缓冲液有稳定细胞骨架的作用。
④将盖片移入3％戊二醛固定15分钟。
⑤将盖片移入0.2％考马斯亮兰染液中，染色15分钟。
然后小心地用自来水冲洗，空气干燥。
(三)结果光镜观察，微丝聚集成的张力纤维束被染成蓝色。
在没用药的标本上，成纤维细胞多数有突起，微丝沿突起规则排列；用细胞松驰素B处理的标本，由于微丝被破坏突起缩回，多数细胞形状变圆；用药处理后又洗去药的标本，由于解除了药的作用，肌动蛋白重新聚台形成微丝，细胞形状恢复正常。
使用电子显微镜进行生物细胞结构观察的技术要点
使用电子显微镜进行生物细胞结构观察的技术要点在研究生物学时，对于生物细胞结构的观察是至关重要的。
传统的光学显微镜虽然能够提供高分辨率的影像，但是其分辨率受到物理限制，无法观察到更微小尺度的细胞结构。
为了解决这个问题，电子显微镜应运而生，它能够以更高的分辨率观察到细胞内部的微小结构。
本文将介绍使用电子显微镜进行生物细胞结构观察的技术要点。
首先，为了能够在电子显微镜中观察到细胞结构，我们需要制备样本。
制备样本的过程十分关键，任何错误的操作都可能导致样本失真。
一般来说，常用的制备方法有化学固定、冷冻切片和金属表面涂覆等。
化学固定是最常用的方法，通过使用化学物质将细胞固定在原位并保持其形态稳定。
冷冻切片方法则是将细胞冷冻并切割成极薄的切片，以保持细胞的天然状态。
金属表面涂覆则是将细胞样本表面涂覆一层金属，形成金属薄膜保护样本并增强导电性。
其次，制备好的样本需要进一步处理以增加其对电子束的对比度。
由于细胞结构本身对电子束的吸收能力很弱，为了能够更好地观察细胞结构，我们需要对样本进行染色。
常见的染色方法有贵金属染色和阴影法染色。
贵金属染色是以金属性染料如铂、铂铑等，通过其与细胞结构发生反应使细胞结构呈现出对比较强烈的区域。
阴影法染色则是利用电子束穿过样本引起的亮暗差异来观察细胞结构。
接下来，我们需要将样本放入电子显微镜中进行观察。
在放置样本之前，我们需要对电子显微镜进行适当的校准和设置。
首先，我们需要调整电子束的聚焦和照射强度以获得清晰的影像。
然后，我们需要选择合适的放大倍数，以便观察到所需的细胞结构。
一般来说，较低的放大倍数适用于整体观察，而较高的放大倍数则适用于细节的观察。
此外，我们还需要选择适当的对比度和亮度设置，以获得更好的图像质量。
在观察过程中，我们需要注意一些细节以保证观察的准确性和可靠性。
首先，由于电子束会对样本产生热效应，因此我们需要控制电子束的照射时间，以避免样本的过度损伤。
其次，由于电子显微镜是在真空环境下进行观察的，所以我们需要确保样本的制备和放入过程都在无尘的情况下进行，以避免灰尘等杂质的影响。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
实验十七电子显微镜生物标本的制备及观察
【实验目的】
了解电子显微镜的基本原理及电镜生物标本的制备方法和观察。
【实验用品】
一、材料和标本家兔一只。
二、器材和仪器 H—600透射电子显微镜、S—450扫描电子显微镜、超薄切片机(AO型)、解剖镜、震荡器、恒温箱、临界点干燥器、JB一3型离子镀膜机、单面刀片、铜网、解剖器材。
三、试剂乙醚、2.5％戊二醛(0.1mol／L(pH7.4)二甲砷酸钠缓冲液配制)、1％锇酸、30％、50％、70％乙醇溶液、80％、90％、95％、100％丙酮溶液、环氧树脂(Epon812)包埋剂、醋酸铀染液、柠檬酸铅染液、双蒸水、2％单宁酸、乙酸异戊脂、液态CO。
2
【实验内容】
一、透射电子显微镜的标本制备及观察
(一)原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，电子改变前进轨迹，产生偏转、聚焦，因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。
高速运动的电子流其波长远比光波波长短，所以电镜分辨率远比光镜高，可达0.14nm，放大倍率可达80万倍。
由热阴极发射的电子在20～100千伏加速龟压作用下，经聚光镜聚焦成束，投射到很薄的标本上，并与标本中各种原子的核外电子发生碰撞，造成电子散射，在细胞质量和密度较大的部位，电子散射度强，成像较暗。
在质量、密度较小处电子散射弱，成像较亮，结果在荧光屏上形成与细胞结构相应的黑白图像。
(二)主要结构电子显微镜由电子光学系统、真空系统和供电系统三大部分组成(图17一l，图17—2)。
1．电子光学系统是电镜的主体，对成像和像的质量起着决定性作用。
它是由电子枪、聚光镜、样品室、物镜、中间镜、投影镜、观察室和照像室等部分构成。