微生物菌种的保藏_PPT幻灯片
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菌种菌种保藏Hale Waihona Puke Baidu
1.低温是保藏原理:
在作低温保藏时,注意尽量不损伤细胞。 在缓慢冷冻时,胞外基质一般较快结冰而 形成冰晶使基质浓度增高,造成细胞水分 外渗而大量脱水,可能使细胞死亡。如快 速降温,胞内也很快形成冰晶,胞内外渗 透压基本平衡,同时胞内冰晶较小,对细 胞及原生质膜的损伤也较小,菌株不易死 亡,影响也较小。
低温定期移植法:
• 把培养好的斜面菌种放在低温干燥处保存, 定期移植,一般3~6个月移植一次(视菌种 特征而定)。也可以用穿刺培养,定期移植 法保藏细菌,其效果也较好。
• 穿刺培养是将含0.6%~0.8%的琼脂培养 基装试管灭菌后直立冷凝后,用接种针尖 挑取少量菌体,垂直刺入琼脂培养基中心, 放在适当温度下培养,待菌长好后即可放 低温保存,此法较斜面保存有利,大肠杆 菌可保藏2年以上不发生明显变异。
• 菌种是从事微生物学及生命科学研究的 基本材料.
• 微生物具有生命活力,在传代过程中易 发生变异甚至死亡,因此菌种保藏是一 项重要的基础工作,是微生物学基础工 作的一项重要内容,也是药品微生物工 作中的一项常用技术。
• 工业微生物菌种保藏,是要使菌 种生产能力和与生产工艺相适应 的优良性状保持稳定,当然做不 到绝对不变,只是力求把这种衰 退现象推迟减缓到最低限度。
• 甘油管保藏法:是利用微生物在甘油中 生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目 的。其方法是,将40%的甘油高压蒸汽灭 菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌种 用 无 菌 水 制 成 高 浓 度 的 菌 悬 液 (108 ~ 1010/ml)。取1ml灭菌甘油放入与甘油充 分混匀,使甘油浓度约为20%,于-20℃ 下冻存。