基因工程专题PPT课件
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高中生物基因工程课件

毒性和提高免疫原性。
基因工程疫苗的应用
03
预防传染病,如乙型肝炎疫苗、人乳头瘤病毒疫苗等,降低人
群发病率。
基因工程抗体
基因工程抗体的种类
包括单克隆抗体、双特异性抗体、人源化抗体等。
基因工程抗体的制备
通过基因工程技术克隆和表达抗体的重链和轻链可变区基因,与适 当的恒定区基因融合,在哺乳动物细胞中表达。
公众参与与透明度
加强公众参与和透明度,促进利益相关方的对话 和协商,共同制定符合各方利益的决策。
3
国际合作与协调
加强国际合作与协调,共同制定国际性的伦理准 则和法律法规,促进全球范围内的公平和平等。
谢谢
THANKS
生物固氮
通过基因工程技术将固氮基因转入植物,提高植 物的固氮能力,减少化肥使用。
生物农药
通过基因工程技术生产具有杀虫、杀菌作用的生 物农药,减少化学农药的使用。
基因编辑技术
利用基因编辑技术如CRISPR-Cas9等对作物进行 精确的基因改造,提高作物的抗逆性和产量。
05 基因工程与环境保护
CHAPTER
生物的遗传性状。
基因工程原理
基因工程基于分子生物学和遗传学 原理,通过改变生物体的基因组, 实现对生物性状的遗传改良。
基因工程操作步骤
基因工程的操作步骤包括基因克隆 、载体构建、受体细胞转化、基因 表达和产物分离纯化等。
基因工程的历史与发展
基因工程的起源
基因工程的未来发展
基因工程起源于20世纪70年代,当时 科学家发现了限制性内切酶和DNA连 接酶,为基因操作提供了工具。
基因工程在土壤修复中的应用
土壤修复是指通过各种手段改善土壤质量,降低土壤污染 对环境和人体健康的影响。基因工程技术可以帮助我们培 育出具有特定功能的植物,用于土壤修复。
基因工程专题1-1ppt课件

5.重组DNA体外表达实验 的成功(转基因细菌)----- 1973年,博耶和科恩用 含单一EcoRⅠ酶切位点的 载体质粒pSC101,使之与 非洲爪蟾核糖体蛋白基因 (外源基因)的DNA片段 重组,重组的DNA导入大 肠杆菌(受体细胞)中, 成功表达出mRNA(外源 基因导入、复制、表达, 实现物种间基因交流), 基因工程正式问世。
P·伯格 ,美国生物化学家、 现代基因工程的创始人。1972 年,伯格把两种病毒的DNA用 同一种限制性内切酶切割后, 再用DNA连接酶把这两种 DNA分子连接起来,于是产生 了一种新的重组DNA分子,首 次实现两种不同生物的DNA体 外连接,获得了第一批重组 DNA分子,这标志着基因工程 技术的诞生。伯格因此获得了 1980年诺贝尔化学奖。
基因工程------梦想与理论、实验与技术、生产与专利、 伦理与安全
2000年超级杂交稻第一个阶段达到亩产700公斤。 第二个阶段亩产800公斤,在2004年实现了。我们 现在向第三期亩产900公斤攻关,计划2015年实现, 争取提前两到三年。
转基因抗虫稻(螟虫)
用除草剂Barstar处理的抗除草剂转基因水稻(中) 和非转基因水稻对照(两侧)
科恩和博耶
6.1980年 显微注射法获得第一个转基因小鼠(动物) 1983年农杆菌转化法第一例转基因烟草(植物) 基因 工程迅速发展。
7.1988年 穆里斯发明PCR仪,快速扩增所需基因
科学与技术的关系?
完
科恩和博 耶
1973年,美国斯坦福大学教授S·科 恩和加利福尼亚大学旧金山分校教 授H·W·博耶将两个不同的质粒(一 个是抗四环素质粒,另一个是抗链 霉素质粒)拼接在一起,组成嵌合 质粒,并将其导入大肠杆菌,当该 重组质粒进入大肠杆菌体内后,这 些大肠杆菌能抵抗两种药物,而且 这种大肠杆菌的后代都具有双重抗
大学生物化学课件基因工程ppt

定义 识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围 切割双链DNA的一类内切酶。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Bam HⅠ
GGATCC CCTAGG
GCCTAG+
GATCC G
切割DNA后产生含5’磷酸和3’羟基的末端
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
连接酶
重组体
转化 体外包装,转染
带重组体的宿主
筛选
表型筛选
酶切电泳鉴定
菌落原位杂交
以 质 粒 为 载 体 的
DNA 克 隆 过 程
扩增或表达
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
(六)克隆基因的表达
Ⅱ类酶识别序列特点—— 回文结构(palindrome)
GGATCC CCTAGG
切口 :平端切口、粘端切口
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
平端切口
HindⅡ
GTCGAC CAGCTG
GTC CAG
蛋白质而特意设计的载体称为表达载体。
载体的选择标准:
能在宿主细胞中自主复制; 具有两个以上的遗传标记物,便于重组体
的筛选和鉴定; 有克隆位点(外源DNA插入点),常具有
多个单一酶切位点,称为多克隆位点; 分子量小,以容纳较大的外源DNA。 作为表达载体,具有与宿主细胞相适应的
调控元件:启动子,增强子等。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Bam HⅠ
GGATCC CCTAGG
GCCTAG+
GATCC G
切割DNA后产生含5’磷酸和3’羟基的末端
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
连接酶
重组体
转化 体外包装,转染
带重组体的宿主
筛选
表型筛选
酶切电泳鉴定
菌落原位杂交
以 质 粒 为 载 体 的
DNA 克 隆 过 程
扩增或表达
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
(六)克隆基因的表达
Ⅱ类酶识别序列特点—— 回文结构(palindrome)
GGATCC CCTAGG
切口 :平端切口、粘端切口
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
平端切口
HindⅡ
GTCGAC CAGCTG
GTC CAG
蛋白质而特意设计的载体称为表达载体。
载体的选择标准:
能在宿主细胞中自主复制; 具有两个以上的遗传标记物,便于重组体
的筛选和鉴定; 有克隆位点(外源DNA插入点),常具有
多个单一酶切位点,称为多克隆位点; 分子量小,以容纳较大的外源DNA。 作为表达载体,具有与宿主细胞相适应的
调控元件:启动子,增强子等。
为深入学习习近平新时代中国特色社 会主义 思想和 党的十 九大精 神,贯彻 全国教 育大会 精神,充 分发挥 中小学 图书室 育人功 能
基因工程-课件ppt

(7)用于载体的质粒 DNA 分子上至少含一个限制酶识别位点(√ )
(8)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在
并表达
(√)
在日常生 活中, 随处都 可以看 到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费,也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
2.载体需具备的条件及其作用(连线)
对点落实
返回
1.(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个 DNA 片段上依次表示出了
EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ和 Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列
与 切 割 位 点 , 图 (b) 为 某 种 表 达 载 体 的 示 意 图 ( 载 体 上 的
EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。
↓
↓
↓
——GAATTC—— ——GGATCC—— ——GATC——
返回
(2)写出产生的末端的种类:①产生的是黏性末端;②产生的 是 平末端 。 (3)EcoRⅠ限制酶和 SmaⅠ限制酶识别的碱基序列 不同,切割 位点不同 (填“相同”或“不同”),说明限制酶具有专一性 。
在日常生 活中, 随处都 可以看 到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费,也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
图(b)
图(c)
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶,常见的
有__E_·_c_o_l_i__D_NA_连__接__酶_和____T_4D_N_A_连___接__酶___,其中既能连接黏 性末端又能连接平末端的是__T_4D_N_A__连__接__酶___。
解析
在日常生 活中, 随处都 可以看 到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费,也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
《基因工程专题》课件

通过基因工程改造细胞和微生物,可 以用于药物生产、疾病治疗和疫苗研 发,提高治疗效果和降低成本。
人类社会面临的挑战和机遇
伦理和安全问题
基因工程技术的发展和应用涉及到伦理和安全问题,如基因编辑 技术的滥用、基因歧视和生态风险等。
法律和监管问题
随着基因工程技术的广泛应用,相关的法律和监管体系需要进行调 整和完善,以确保技术的合理应用和发展。
04
基因工程的伦理和社会问题
基因工程的伦理问题
基因工程的道德地位
基因工程涉及到对生命本质的干预,因此引发了关于其道 德地位的讨论。一些人认为这是对自然的一种干预,而另 一些人则认为这是科技进步的必然结果。
基因歧视
由于基因信息可能揭示个人健康、行为等方面的信息,因 此存在基因歧视的风险。这可能导致保险、就业等方面的 歧视。
03
基因工程的应用实例
农业基因工程
抗虫作物
通过基因工程技术,将抗虫基 因导入作物,使其具有抗虫能
力,减少农药使用。
抗病作物
通过基因工程技术,增强作物 的抗病能力,降低作物病害的 发生率。
高产作物
通过基因工程技术,提高作物 的产量和品质,满足不断增长 的食物需求。
转基因动物
通过基因工程技术,培育出具 有优良性状的转基因动物,如
基因工程专
contents
目录
• 基因工程概述 • 基因工程的基本技术 • 基因工程的应用实例 • 基因工程的伦理和社会问题 • 未来展望
01
基因工程概述
基因工程概述
基因工程是指通过人工操作对 生物体的基因进行修饰、改造 和重组的技术。
它利用现代分子生物学技术, 在分子水平上对基因进行操作 ,从而实现对生物性状的改变 。
基因工程技术ppt课件

是指目的基因在受体细胞内表达,研究功能。
3
病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程
应用:
• 克隆感兴趣基因进行序列分析,研究其组织结构。 • 转入原核表达载体,进行大规模蛋白质合成,生产多肽
产品。 • 转入真核表达载体,导入细胞,研究其功能,表达调
载体:
• 载体(Vector)是目的基因的运载工具,其作用是将目 的基因带入受体细胞中,并使目的基因扩增和表达。
• 种类: 按来源分: 质粒载体(plasmid vector)、噬菌体载体(phage vector)、 柯氏质粒载体(cosmid vector)、病毒载体(virus vector ). 按作用分: 克隆载体(cloning vector )、表达载体(expression vector)、 穿梭载体(shuttle vector)
四环素选择标记上,4种位于Amp抗性基因上。外源基因的插入将破坏 抗性基因的完整性,导致抗性基因插入失活,这种特性可用于区分重组 和非重组分子。 • 松弛性质粒,在大肠杆菌细胞内有较高的拷贝数,当细菌蛋白质合成停 止时,它仍能继续复制。
16
病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程
17
病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程
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病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程TA 源自隆AA19
3
病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程
应用:
• 克隆感兴趣基因进行序列分析,研究其组织结构。 • 转入原核表达载体,进行大规模蛋白质合成,生产多肽
产品。 • 转入真核表达载体,导入细胞,研究其功能,表达调
载体:
• 载体(Vector)是目的基因的运载工具,其作用是将目 的基因带入受体细胞中,并使目的基因扩增和表达。
• 种类: 按来源分: 质粒载体(plasmid vector)、噬菌体载体(phage vector)、 柯氏质粒载体(cosmid vector)、病毒载体(virus vector ). 按作用分: 克隆载体(cloning vector )、表达载体(expression vector)、 穿梭载体(shuttle vector)
四环素选择标记上,4种位于Amp抗性基因上。外源基因的插入将破坏 抗性基因的完整性,导致抗性基因插入失活,这种特性可用于区分重组 和非重组分子。 • 松弛性质粒,在大肠杆菌细胞内有较高的拷贝数,当细菌蛋白质合成停 止时,它仍能继续复制。
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病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程
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病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程
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病原体侵入机体,消弱机体防御机能 ,破坏 机体内 环境的 相对稳 定性, 且在一 定部位 生长繁 殖,引 起不同 程度的 病理生 理过程TA 源自隆AA19
基因工程研究PPT课件

基因工程研究
体外 操作 与细 胞内 表达
(基因工程技术包括下列过程)
分─获取目的基因和载体 接─目的基因与载体的连接 转─重组DNA导入宿主细胞 筛─重组DNA的筛选 鉴─重组DNA的鉴定
可用以上五个字表示
(一)目的基因的分离(分)
目的基因:是指所要研究或应用的基因,也是需要克隆或表达 的基因。 (一) 目的基因的分离 1、基因分离的策略
同 源 多 聚 尾 连 接 法
三、将重组体导入受体细胞 (转)
根据受体生物,可将重组体导入受体细胞的方法主要分为大肠杆 菌转化法、酵母转化法、植物细胞转化法及动物细胞转化法
(一) 大肠杆菌转化法 1、氯化钙转化法(狭义的转化)或转染 感受态细胞(Competent Cell)的制备:用特殊方法处理,使细胞膜通透 性增加,从而具有摄取外源DNA的能力。 转化流程:感受态细胞和重组DNA混合,使DNA与钙离子形成复合物, 吸附于细胞表面,经42℃短暂(90s)的热处理,促进外源DNA进入感受态 细胞。
(三) 植物细胞转化法
1、农杆菌质粒介导法 农杆菌介导法是目前双子叶植物基因转移的常用方法。
它是利用根癌农杆菌的Ti (Tumor induce)质粒和发根农杆 菌的Ri (Root induce)质粒上的一段T-DNA区在农杆菌侵染 植物形成肿瘤的过程中,T-DNA可以被转移到植物细胞并插 入到染色体基因中。利用Ti质粒的这一天然的遗传转化特性, 可将外源基因置换T-DNA中的非必需序列即可使外源基因整 合到受体染色体而获得稳定的表达。
4、同源多聚尾连接法
也称作人工接尾连接法 当载体和目的基因无法采用同一种限制酶进行切断,无 法得到相同得粘性末端时,可采用此方法。 此法首先使用单链核酸酶将粘性末端切平,再在末端核 苷酸转移酶的催化下,将脱氧核糖核苷酸添加于载体或目的 基因的3'-端,如载体上添加一段polyG,则可在目的基因上添 加一段polyC,故二者即可通过碱基互补进行粘合,再由DNA连 接酶连接。
体外 操作 与细 胞内 表达
(基因工程技术包括下列过程)
分─获取目的基因和载体 接─目的基因与载体的连接 转─重组DNA导入宿主细胞 筛─重组DNA的筛选 鉴─重组DNA的鉴定
可用以上五个字表示
(一)目的基因的分离(分)
目的基因:是指所要研究或应用的基因,也是需要克隆或表达 的基因。 (一) 目的基因的分离 1、基因分离的策略
同 源 多 聚 尾 连 接 法
三、将重组体导入受体细胞 (转)
根据受体生物,可将重组体导入受体细胞的方法主要分为大肠杆 菌转化法、酵母转化法、植物细胞转化法及动物细胞转化法
(一) 大肠杆菌转化法 1、氯化钙转化法(狭义的转化)或转染 感受态细胞(Competent Cell)的制备:用特殊方法处理,使细胞膜通透 性增加,从而具有摄取外源DNA的能力。 转化流程:感受态细胞和重组DNA混合,使DNA与钙离子形成复合物, 吸附于细胞表面,经42℃短暂(90s)的热处理,促进外源DNA进入感受态 细胞。
(三) 植物细胞转化法
1、农杆菌质粒介导法 农杆菌介导法是目前双子叶植物基因转移的常用方法。
它是利用根癌农杆菌的Ti (Tumor induce)质粒和发根农杆 菌的Ri (Root induce)质粒上的一段T-DNA区在农杆菌侵染 植物形成肿瘤的过程中,T-DNA可以被转移到植物细胞并插 入到染色体基因中。利用Ti质粒的这一天然的遗传转化特性, 可将外源基因置换T-DNA中的非必需序列即可使外源基因整 合到受体染色体而获得稳定的表达。
4、同源多聚尾连接法
也称作人工接尾连接法 当载体和目的基因无法采用同一种限制酶进行切断,无 法得到相同得粘性末端时,可采用此方法。 此法首先使用单链核酸酶将粘性末端切平,再在末端核 苷酸转移酶的催化下,将脱氧核糖核苷酸添加于载体或目的 基因的3'-端,如载体上添加一段polyG,则可在目的基因上添 加一段polyC,故二者即可通过碱基互补进行粘合,再由DNA连 接酶连接。
动物基因工程及应用PPT课件

政策限制
动物基因工程的应用需要符合相关政策要求。例如,在医学研究中,需要遵循伦 理审查和实验动物管理规定等。
未来发展前景与展望
发展前景
随着技术的不断进步和伦理观念的转变,动物基因工程的应用前景广阔。例如,基因改造动物可用于药物研发、 疾病模型建立等领域。
展望
未来,动物基因工程将更加注重技术突破和伦理问题的解决,以实现更加安全、有效和可持续的应用。同时,国 际合作和政策制定也将在推动动物基因工程的发展中发挥越来越重要的作用。
发展阶段。
2000年代至今
随着CRISPR-Cas9等基因编 辑技术的出现,动物基因工程
取得了突破性进展。
动物基因工程的应用领域
生物医药
利用动物基因工程生产 用于药物研发、疾病治 疗和预防的蛋白质和抗
体。
农业
生物反应器
培育抗病、抗虫、高产、 优质的新品种动物,提 高畜牧业生产效率和经
济效益。
利用转基因动物作为生 物反应器,生产具有重 要价值的蛋白质和药物。
的基因导入到动物基因组中。
打靶后动物的筛选与鉴定
03
通过分子生物学技术,对打靶后动物进行筛选和鉴定,确保获
得所需打靶动物。
03
CHAPTER
动物基因程的应用实例
转基因动物的生产与应用
转基因动物
通过基因工程技术将外源基因 导入动物细胞,使动物获得新
的性状或功能。
应用领域
生物制药、疾病模型、生物反 应器等。
对人类和动物的潜在影响
食品安全与健康
基因工程动物可能携带新 的基因,对人类健康存在 潜在风险,需要加强食品 安全监管。
伦理与道德问题
基因工程动物的出现引发 了关于动物权益、人道对 待和伦理准则的讨论。
动物基因工程的应用需要符合相关政策要求。例如,在医学研究中,需要遵循伦 理审查和实验动物管理规定等。
未来发展前景与展望
发展前景
随着技术的不断进步和伦理观念的转变,动物基因工程的应用前景广阔。例如,基因改造动物可用于药物研发、 疾病模型建立等领域。
展望
未来,动物基因工程将更加注重技术突破和伦理问题的解决,以实现更加安全、有效和可持续的应用。同时,国 际合作和政策制定也将在推动动物基因工程的发展中发挥越来越重要的作用。
发展阶段。
2000年代至今
随着CRISPR-Cas9等基因编 辑技术的出现,动物基因工程
取得了突破性进展。
动物基因工程的应用领域
生物医药
利用动物基因工程生产 用于药物研发、疾病治 疗和预防的蛋白质和抗
体。
农业
生物反应器
培育抗病、抗虫、高产、 优质的新品种动物,提 高畜牧业生产效率和经
济效益。
利用转基因动物作为生 物反应器,生产具有重 要价值的蛋白质和药物。
的基因导入到动物基因组中。
打靶后动物的筛选与鉴定
03
通过分子生物学技术,对打靶后动物进行筛选和鉴定,确保获
得所需打靶动物。
03
CHAPTER
动物基因程的应用实例
转基因动物的生产与应用
转基因动物
通过基因工程技术将外源基因 导入动物细胞,使动物获得新
的性状或功能。
应用领域
生物制药、疾病模型、生物反 应器等。
对人类和动物的潜在影响
食品安全与健康
基因工程动物可能携带新 的基因,对人类健康存在 潜在风险,需要加强食品 安全监管。
伦理与道德问题
基因工程动物的出现引发 了关于动物权益、人道对 待和伦理准则的讨论。
分子生物学原理--基因工程ppt课件

分子生物学原理
整合
• 整合: 噬菌体感染大肠杆菌的第一步
噬菌体粘附于细胞壁上,将自身的 DNA注入菌体中。 此 DNA可与细菌染色 体重组,成为细菌染色体的一部分。
• 溶原菌:整合了噬菌体基因组的细菌。
• 裂解: 噬菌体感染大肠杆菌的第二步
DNA利用菌体的酶系统,复制自身及 外壳蛋白,组装成大量新 噬菌体,并将 细菌涨破。
第十四章 基因重组与基因工程
10/28/2024
分子生物学原理
基因重组:genomic recombination 重组DNA:recombinant DNA
10/28/2024
分子生物学原理
第一节、自然界的基因重组
• 转化:transformation • 整合:integration • 转导:transduction • 转位:transposition
10/28/2024
分子生物学原理
转位
• 转位:一个或一组基因从一处转到基因 组的另一个位置。
• 这些游动的基因称为转位子(transposon)。
10/28/2024
分子生物学原理
转 位
10/28/2024
分子生物学原理
第二节、基因工程
• 基因工程:是用分离纯化或人工合成的 DNA在体外与载体DNA结合,成为重组 DNA,用以转化宿主,筛选出能表达重 组DNA的活细胞,加以纯化、传代、扩 增,成为克隆。也叫基因克隆或重组 DNA技术。
切割后与原来载体比较。
• 利用核酸杂交和放射自显影进行鉴定:用目 的基因作探针监测宿主DNA是否重组体。
10/28/2024
分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
•灭 活法筛 选重组 体。
基因工程的基本内容改版ppt课件

8. 在 基 因 工 程 中 , 科 学 家 所 用 的 “ 剪 刀 ” 、 “针线”和“运载体”分别是指( ) A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶 B.噬菌体、质粒、DNA连接酶 C.DNA限制酶、RNA连接酶、质粒 D.DNA限制酶、DNA连接酶、质粒
9.人们常选用的细菌质粒分子往往带有一个 抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是
转基因的棉花植株( 有抗虫特性)
• 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么?
二基、因基工程因培操育作抗的虫工棉具的关键步骤:
关键关步键骤步一骤的一工:具:
“从分苏子云手金术杆刀菌”细—胞—内限提制取性出核
来抗虫基因
酸内切酶
关键关步键骤步二骤的二工:具: “抗分虫子基缝因合与针运”载—体—DDNNAA拼连接接 酶
关键关步键骤步三骤的三工:具: 抗“虫分基子因运导输入车受”体—(—棉运花载)细体胞 • 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?
1、基因的剪刀─限制性核酸内切酶
(限制酶) (1)、限制酶的作用特点
一种限制酶只能识别一种特定的核 苷酸序列,并在特定的切割点上将 DNA 分子每一条链中特定部位的两个 核苷酸之间的磷酸二酯键断开。目前已 发现的限制酶有4000多种。
DNA被限制酶切断后有两个反向互 补的“黏性末端”。
重播
被同一种限制酶切断的几个DNA具有 相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。
(3)、DNA片段末端的形式
被限制酶切开的DNA两条单链的切口, 带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补 配对,这样的切口叫黏性末端。
参看P5图,回答: DNA片段末端有几种形式?
D、目的基因的检测和表达
6.下列关于质粒的叙述,正确的是 A、质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种
第六讲基因工程48ppt课件

2、构造重组•DNA分子
以质粒作载体为例
• 用与提取目的基因相同 的限制酶切割质粒使之 出现一个切口,将目的 基因插入切口处,让目 的基因的黏性末端与切 口上的黏性末端互补配 对后,在连接酶的作用 下连接形成一个环形的 重组DNA分子。
提取质粒并用 限制酶切割
用连接酶将目的 基因和质粒连接
目的基因与质粒的连接
3、将目的基因导入受体细胞并扩增
基因工程中常用的受体细胞有大肠杆 菌、枯草杆菌、土壤农杆菌和动植物 细胞等。
转化是指外源DNA分子或片段被细菌 细胞吸收,并整合进细胞染色体的遗 传现象,若受体细胞是动/植物细胞, 通常称为转染。
导入受体细胞常用的方法是借鉴细菌 或者病毒侵染细胞的途径。通常还要 对一些受体细胞进行增大通透性的处 理。(氯化钙或高压电脉冲打孔)
先将细胞核内的基因组转录为RNA,以信使RNA(mRNA) 为模板,在逆转录酶的作用下根据碱基互补原则人工合成一段 与之互补的DNA片段,再以此单链DNA为模版,人工合成另 外一条互补的DNA子链,从而获得所需的目的基因。
mRNA→单链DNA→ 双链DNA(cDNA)
DNA合成仪
(3)聚合酶链式反应(PCR) (如目的基因的核酸顺序已知)
在植物转基因中多采用农杆菌作为目的基因受体,再利用 重组农杆菌感染植物细胞进行转化,将目的基因整合到植 物基因中。
(7)转基因动物
转基因动物主要用于生产器官移植的研究,生产对人类有价 值的产品,使动物具有某些可遗传的抗性对付某些疾病与不 良环境,目前出于对安全性考虑,禁止将转基因动物进入食 品。 目前将人的某些基因转入动物,生产某些蛋白类药物已经广 泛实施。一般动物转基因多采用受精卵注射法,将目的基因 直接注射入动物的受精卵中,有一部分生产出的动物细胞内 含有这些目的基因。还有胚胎干细胞法,将目的基因转化胚 胎干细胞,再进行胚发育,一旦成为生殖细胞,可获得稳定 的遗传。
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5.重组DNA体外表达实验 的成功(转基因细菌)----- 1973年,博耶和科恩用 含单一EcoRⅠ酶切位点的 载体质粒pSC101,使之 与非洲爪蟾核糖体蛋白基 因(外源基因)的DNA片 段重组,重组的DNA导入 大肠杆菌(受体细胞)中, 成功表达出mRNA(外源 基因导入、复制、表达, 实现物种间基因交流), 基因工程正式问世。
基因工程的概念:基因工程是指按照人们的意愿,进 行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术, 赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的 生物新类型和新产品。由于基因工程是在DNA分子水 平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。
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一、基础研究的发展催生了基因工程的梦想
基因工程------梦想与理论、实验与技术、生产与专
利、伦理与安全
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2000年超级杂交稻第一个阶段达到亩产700公斤。
第二个阶段亩产800公斤,在2004年实现了。我们
现在向第三期亩产900公斤攻关,计划2015年实现,
争取提前两到三年。
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转基因抗虫稻(螟虫)
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3
用除草剂Barstar处理的抗除草剂转基因水稻(中)
DNA测序仪
DNA合成仪
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4.体外重组DNA的实现 1972年伯格第一个实现体外 重组DNA分子
P·伯格 ,美国生物化学家、 现代基因工程的创始人。1972 年,伯格把两种病毒的DNA 用同一种限制性内切酶切割后, 再用DNA连接酶把这两种 DNA分子连接起来,于是产 生了一种新的重组DNA分子, 首次实现两种不同生物的 DNA体外连接,获得了第一 批重组DNA分子,这标志着 基因工程技术的诞生。伯格因 此.获得了1980年诺贝尔化学1奖8 。
和非转基因水稻对照(两侧.)
4
转基因超级稻(含玉米基因)
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饮食安全?
生态安全?
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生存与 粮食安 全?
国家安 全?
我国正在申请商业化种植及在研的8个转基因水稻品系 共涉及至少28项国外专利技术。即我国的转基因水稻 品系没有任何一种拥有独立的自主知识产权。其中一 些品系还受到国际性条约《材料转移协议》的制约。 其中任何一种通过商业化种植,将意味着我国13亿人 的主粮控制权被完全拱手交给拜耳和孟山都等国外生 物公司。我们将不得不为每一粒米饭付出专利费,中 国的过亿稻农也将不得不为.每一粒种子付出专利费。7
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科恩和博耶
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6.1980年 显微注射法获得第一个转基因小鼠(动物) 1983年农杆菌转化法第一例转基因烟草(植物) 基因 工程迅速发展。
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7.1988年 穆里斯发明PCR仪,快速扩增所需基因
科学与技术的关系?
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完
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科恩和博 耶
1973年,美国斯坦福大学教授S·科 恩和加利福尼亚大学旧金山分校教 授H·W·博耶将两个不同的质粒(一 个是抗四环素质粒,另一个是抗链 霉素质粒)拼接在一起,组成嵌合 质粒,并将其导入大肠杆菌,当该 重组质粒进入大肠杆菌体内后,这 些大肠杆菌能抵抗两种药物,而且 这种大肠杆菌的后代都具有双重抗
药性。这表明“杂合质粒”在大肠杆菌的细胞分裂时也能
自我复制。科恩随后以DNA重组技术发明人的身份向美
国专利局申报了世界上第一个基因工程的技术专利。这
标志着自然界不同物种间在亿万年中形成的天然屏障被
打破了,人类可以根据自己的意愿定向地改造生物的遗
传特性,甚至创造新的生命. 类型。
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个人观点供参考,欢迎讨论!
3.1963年,尼伦伯格和马太破译了遗传密码,1966 年霍拉纳实验证实了遗传密码的存在。--------自然界 的生物共用一套遗传密码。
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二、技术的发明--------基因工程梦想的实现成为可能 1.基因转移载体的发现:1967年,罗思和海林斯基发 现细菌染色体DNA之外,具有自我复制能力,并能够 在细菌细胞之间转移的质粒--------运载工具
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2.工具酶的发明,1970年阿尔伯、 内森斯、史密斯 在细菌中发现了第一个限制性内切酶后,20世纪70 年代相继发现了多种限制酶和连接酶以及逆转录酶, 这些发现为DNA的切割、连接以及功能基因的获得 创造了条件。
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3.DNA合成和测序技术的发明 自1965年,桑格发 明氨基酸序列分析技术,1977年发明DNA氨基酸 序列分析技术,为基因序列图的绘制提供了可能。 之后DNA 合成仪的问世又为引物、探针和小分----基因工程的理论基础)
1.1944年艾弗里证明了DNA是遗传物质,DNA在不 同生物之间是可以转移的!----------DNA是大多数生 物的遗传物质,不同生物之间的DNA能够重组。
2.1953年沃森,克里克建立了DNA的双螺旋结构模 型,1958年梅塞尔松和斯塔尔证明了DNA的半保留 复制,随后中心法则的确立------DNA具有共同的结 构基础,遗传信息具有共同的传递表达规律。