海水样品中氮磷营养盐的保存技术_郑向荣

［ ］ ７
日益显著， 基于保护环境的目的， 对海洋环境监测的 需求逐渐增多。 为了测得真实可靠的海洋环境数 据， 尤其是存在不稳定的氮磷营养盐浓度， 有必要对 水样的有效保存技术、 以及在适当保存条件下营养 盐随时间的变化规律进行更深入的研究。 参考文献 ：
［ ］ １ Ｃ ａ ｒ ｄ ｏ ｌ ｉ ｎ ｓ ｋ ｉ Ｐ Ｃ Ｆ Ｃ， Ｈ ａ ｎ ｒ ａ ｈ ａ ｎ Ｇ， Ａ ｃ ｈ ｔ ｅ ｒ ｂ Ｅ Ｐ， ｅ ｔ ａ ｌ ． Ｃ ｏ ｍ－ ｇ ｏ ｆ ｓ ａ ｍ ｌ ｅ ｓ ｔ ｏ ｒ ａ ｅ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ａ ｒ ｉ ｓ ｏ ｎ ｒ ｏ ｔ ｏ ｃ ｏ ｌ ｓ ｐ ｇ ｐ ｐ ， ， ： ｎ ｕ ｔ ｒ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｉ ｎ ｎ ａ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ ｗ ａ ｔ ｅ ｒ ｓ Ｗ ａ ｔ ｅ ｒ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ ２ ０ ０ １， ３ ５（ １ ５） ３ ６ ７ ０－３ ６ ７ ８ ［ ］沈勤 ， 单媛媛 ， 谢荣 林， 等． 养殖水体中不同浓度氮盐的保存 ２ ］ （ ） ： 差异研究 ［ 河北渔业 ， Ｊ ． ２ ０ ０ ９ ４ ５－９ ［ ］Ｇ 海洋监测规范 第 ３ 部 分 ： 样品采集、 贮存 ３ Ｂ １ ７ ３ ７ ８． ３－２ ０ ０ ７， ］ 与运输 ［ 北京 ： 中国标准出版社 ， Ｓ ． ２ ０ ０ ７ ［ ］杜虹 ， ］ 黄长江 ． 海水营养盐测定中水样的保存技术［ 海洋 ４ Ｊ ． （ ） ： 技术 ， ２ ０ ０ ２ ９ ４ ５－４ ７ ［ ］ 张洁帆 ， 陶建华 ， 李清雪 ， 等． 渤海湾氮磷营养 盐 年 季 变 化 规 律 ５ ］ （ ） ： 研究 ［ 安徽农业科学 ， Ｊ ． ２ ０ ０ ７ ７ ２ ０ ６ ３－２ ０ ６ ４ ［ ］ ６ Ｋ ａ ｔ ｔ ｎ ｅ ｒ Ｇ． Ｓ ｔ ｏ ｒ ａ ｅ ｏ ｆ ｄ ｉ ｓ ｓ ｏ ｌ ｖ ｅ ｄ ｉ ｎ ｏ ｒ ａ ｎ ｉ ｃ ｎ ｕ ｔ ｒ ｉ ｅ ｎ ｔ ｓ ｉ ｎ ｓ ｅ ａ ｒ ｗ ａ － ｇ ｇ ： ，Ｍ ， ｔ ｅ ｒ ｗ ｉ ｔ ｈ ｍ ｅ ｒ ｃ ｕ ｒ ｉ ｃ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ ａ ｒ ｉ ｎ ｅ Ｃ ｈ ｅ ｍ ｉ ｓ ｔ ｒ ｏ ｉ ｓ ｏ ｎ ｉ ｎ ｙ ｐ ｇ １ ９ ９ ９， ６ ７： ６ １－６ ６ ［ ］ 徐志标 ， 骆其君 ， 徐继林 ， 等． 水样中氮磷营养 盐 含 量 的 稳 定 性 ７ ］ （ ） ： 及保存方法比较研究 ［ 水产科学 ， Ｊ ． ２ ０ ０ ５ ４ １ ０－１ ３ ［ ］ ］ 崔毅 ， 宋 云 利． 渤海海域营养现状研究［ 海 洋 水 产 研 究， ８ Ｊ ． （ ） ： １ ９ ９ ６ ６ ５ ７－６ １ （ ） 收稿日期 ： 修回日期 ： ２ ０ １ ２－０ ６－１ ５； ２ ０ １ ２－０ ６－１ ８
［］ ｌ ｉ ｎ ｓ ｋ ｉ等 １ 报道了用 ４ ℃ 冷藏保存盐度为 ３ ４‰ 的 高盐海水 ， 总氧 化 态 氮 （ 硝酸盐和亚硝酸盐） ２ ８ｄ
以后才 有 显 著 的 减 小 ， 同 样 样 品 在 －２ ０ ℃、 －８ ０ 以及 ４ ℃＋ 少量氯化汞条件下保存效果更好 。 ℃、 ２］ 沈勤等 ［ 的实验 结 果 表 明 ， 低温添加氯仿和甲醛 而氯 的保存方法明显 优 于 纯 粹 低 温 和 冷 冻 保 存 ， 。 仿 ４ ℃ 对 ＮＨ３ －Ｎ 保存的稳定性长达 ５～７ｄ
（ 上接第 ４ ３ 页） 的研究显示， 添加氯化汞保存的样品中， 亚硝酸盐浓 而氨态氮由于其易被水 度在一年之内无很大变化， 体中的细菌氧化或被生物体固定， 始终没有较好的 ） 方法有效保存。 国内徐志标等 （ 为了常规调 ２ ０ ０ ５ 对水样进行了冷藏、 冷冻和添 查与水质监测的目的，
１ 冷藏保存
水样低温保存 （ 一般 在 ０～４ ℃ ） 可大大延缓 微生物繁殖所引起的变化 ， 降低化学反应速度 ， 防 止组分的分解和沉淀产生 ， 减少组分的挥发 、 溶解 和物理吸附 ； 减慢生物化学作用 。２ ０ ０ １年 Ｃ ａ ｒ ｄ ｏ －
３ 添加各种保护剂
目前使用较多的保护剂主要为氯仿 、 甲醛 、 氯
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《 河北渔业 》 总第 ２ ２ ０ １ ２ 年第 ９ 期 （ ２ ５ 期） ○ 专论与综述
［ ］刘立鹤 ， 陈立桥 ， 董爱华 ， 等 ．不 同 蛋 白 水 平 饲 料 对 台 湾 东 风 ６ （ ） ： 水产科学 ， 螺生长性能和体组成的影响 ． ２ ０ ０ ６ １ ２ ６ ０ １－６ ０ ７ ［ ］王冬梅 ， 唐道文 ， 王 维 娜， 等． 方斑东风螺脂肪需求量的研究 ７ ［ ］ （ ） ： 饲料研究 ， Ｊ ． ２ ０ ０ ８ ４ ５ ９－６ １． ２ １－２ ３ ［ ］许贻斌 ．方斑东 风 螺 对 蛋 白 质 和 脂 肪 营 养 需 求 的 研 究 ［ ８ Ｄ］ ． 厦门 ： 厦门大学 ， ２ ０ ０ ６ ［ ］ ，Ｑ ， ９ Ｌ ｉ －Ｌ ｉ Ｚ ｈ ａ ｎ ｉ －Ｃ ｕ ｎ Ｚ ｈ ｏ ｕ Ｙ ｉ －Ｑ ｉ ｕ Ｃ ｈ ｅ ｎ ． Ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ ｄ ｉ － ｇ ｇ ｅ ｔ ａ ｒ ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｈ ｄ ｒ ａ ｔ ｅ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｎ ｒ ｏ ｗ ｔ ｈ ｅ ｒ ｆ ｏ ｒ ｍ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ｕ ｖ ｅ ｎ ｉ ｌ ｅ ｙ ｙ ｇ ｐ ｊ ］ ｓ ｏ ｔ ｔ ｅ ｄ Ｂ ａ ｂ ｌ ｏ ｎ（ Ｂ ａ ｂ ｌ ｏ ｎ ｉ ａ ａ ｒ ｅ ｏ ｌ ａ ｔ ａ Ｌ ｉ ｎ ｋ １ ８ ０ ７）［ Ｊ ．Ａ ｕ ａ － ｙ ｙ ｑ ｐ ， ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ２ ０ ０ ９， ２ ９ ５： ２ ３ ８－２ ４ ２ ［ ］王冬梅 ， 李春强 ， 刘志昕 ， 等． 方斑东风螺营养特征及促长剂 １ ０ ］ （ ） ： 对其的影响 ［ 饲料工业 ， Ｊ ． ２ ０ ０ ８， ２ ９ ４ ５ ９－６ １ ［ ］吴建国 ， 柯才焕 ． 方斑东风螺钙磷营养需求 研 究 ［ 中国动 １ １ Ｃ］ ． 物学会 、 中国海洋护照学会贝类 学 分 会 第 十 四 次 学 会 研 讨 会 论文摘要汇编 ， ２ ０ ０ ９： ５ ４ ［ ］谭燕华 ， 王冬梅 ， 沈文涛 ， 等． 方斑东风螺配合饲料中硒的添 １ ２ ］ （ ） ： 加量研究 ［ 饲料工业 ， Ｊ ． ２ ０ １ １ ２ ２ ８－１ １ ［ ］彭存智 ， 王冬梅 ， 沈文涛 ， 等． 方斑东风螺配合饲料中锌的添 １ ３ ］ （ ） ： 加量研究 ［ 饲料研究 ， Ｊ ． ２ ０ １ ２ ３ ６ １－６ ３ ［ ］王冬梅 ， 方 哲， 王 春 吉， 等． 方 斑 东 风 螺 （Ｂ １ ４ ａ ｂ ｌ ｏ ｎ ｉ ａ ａ ｒ ｅ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｙ ） ］ ： 专用复矿添 加 剂 的 养 殖 效 果 ［ 饲 料 工 业， Ｌ ｉ ｎ ｋ Ｊ ． ２ ０ １ ２（ ４） ２ ４－２ ６ ［ ］吴建国 ， 黄兆斌 ， 王波 ， 等． 不同蛋白源饲料对方斑东风螺生 １ ５ ］ ， ： 长的影响 ［ 厦门大学学报（ 自 然 科 学 版） Ｊ ． ２ ０ ０ ９（ ４） ６ ０ ０ －６ ０ ５ ［ ］张丽丽 ， 周歧 存 ， 程 怡 秋， 等． 不 同 糖 源 对 方 斑 东 风 螺 生 长、 １ ６ ］ 饲料利用和消化酶活性的影 响 ［ 广 东 海 洋 大 学 学 报， Ｊ ． ２ ０ ０ ９ （ ） ： ４ １ ４－１ ８ ［ ］魏永杰 ， 黄斌 ， 柯才焕 ， 等． 方斑东风螺早期发育过程中几种 １ ７ ］ （ ） ： 消化酶的活性 ［ 热带海洋学报 ， Ｊ ． ２ ０ ０ ７， ２ ６ １ ５ ５－５ ９ ［ ］薛明 ， 柯才焕 ， 魏 永 杰． 饥饿对方斑东风螺幼螺生化组成和 １ ８ ］ ： 热 带 海 洋 学 报， 消化 酶 活 力 的 影 响 ［ Ｊ ． ２ ０ １ ０， ２ ９（ ３） １ ２ ０ －１ ２ ５ ［ ］Ｍ １ ９ ａ ｉ Ｋ， ｍ ｅ ｒ ｃ ｅ ｒ Ｊ Ｐ， Ｄ ｏ ｎ ｌ ｏ ｎ Ｊ． Ｃ ｏ ｍ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｔ ｕ ｄ ｉ ｅ ｓ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｐ ，Ｈ ｎ ｕ ｔ ｒ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｗ ｏ ｓ ｅ ｃ ｉ ｅ ｓ ｏ ｆ ａ ｂ ａ ｌ ｏ ｎ ｅ ａ ｌ ｉ ｏ ｔ ｉ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ Ｈ ａ ｌ ｉ ｏ ｔ ｉ ｓ ｄ ｉ ｓ － ｐ ］ ｃ ｕ ｓ Ｉ ｎ ｏ． Ｉ Ｖ． Ｏ ｔ ｉ ｍ ｕ ｍ ｄ ｉ ｅ ｔ ａ ｒ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ｆ ｏ ｒ Ｊ ． ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ｒ ｏ ｗ ｔ ｈ［ ｐ ｙ ｐ ｇ ， Ａ ｕ ａ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ １ ９ ９ ５， １ ３ ６， １ ６ ５－１ ８ ０ ｑ （ ） 收稿日期 ： ２ ０ １ ２－０ ５－０ ９
郑向荣１ ， 吴新民１ ， 郗艳娟１ ， 马胜有２ ， 穆柯馨１ ， 王真真１
（ 河北省海洋与水产科学研究院， 河北省海洋渔业资源与环境重点实验室， 河北 秦皇岛 ０ １． ６ ６ ２ ０ ０； ） 河北省水产养殖病害防治监测总站， 石家庄 ０ ２． ５ ０ ０ １ １
水体中的营养 由于海水所 含 物 质 的 复 杂 性 ， 盐随 时 受 到 各 种 物 理 、 化 学 过 程 的 影 响， 水 解、 吸 沉降 、 微生物利用以及藻类吸收等活动使得采 附、 集的水样中氮 、 磷、 硅的含量随时发生着变化 。 为 了使测得数据尽量真实反映出水体营养盐的本来 最理想的方 法 是 在 采 样 现 场 对 水 样 进 行 快 状况 ， 速测定 ， 但是实际 工 作 中 客 观 条 件 很 难 达 到 现 场 分析 的 要 求 ： 一 方 面， 由于野外实验条件限制， 大 多数情况下不能 携 带 分 析 仪 器 到 现 场 进 行 测 定 ， 必须将水样保存带回实验室分析 ； 另一方面 ， 由于 运 采样地点与实验 室 的 距 离 以 及 交 通 工 具 所 限 ， 送过程需要 时 间 较 长 。 因 此 ， 选择合适的保存方 法和技术 ， 能在较 长 时 间 内 保 持 样 品 中 目 标 成 分 或尽量少变化 ， 成 的浓度和化学形态不发生变化 ， 为环境工作者和海洋化学家关注的焦点 。 多年来 ， 为了不同的研究目的 ， 国内外海洋化 学家尝试了各种保存技术对不同类型水样的稳定 作用 。 虽然保存 方 法 不 尽 相 同 ， 但都着眼于杀死 以停止或减少细菌 或抑制样品中的 微 生 物 活 动 ， 等对营养元素的 利 用 ， 从而达到有效保护样品的 目的 。 主要的方法有 ： 低温冷藏 、 超低温冷冻以及 。本 如 酸、 碱、 氯 仿、 氯 化 汞 等） 添加 各 种 保 护 剂 （ 文概括介绍近年来国内外学者在海水样品保存技 术方面的研究进展 。
２ －２ ０ ℃ 以下冷冻
［ ］ ３ 我国《 海洋监测规范》 中规定了冷冻和酸化后 ］ ４ （ ） 做了将水样添 低温冷藏两种方法。 杜虹等［ ２ ０ ０ ２
加硫酸、 盐酸、 氯仿、 氯化汞等不同保护剂后冷冻储 存的效果试验， 其结果显示， 若以浓度变化不超过 无论用何种方法保 １ ０ ％的保存天数为有效保存期， 。 氨氮的有效保存期都不能超过１ｄ 存， 有人建议测 定 氨 盐 的 水 样 使 用 冷 冻 法 保 存 ， 最好是在液氮中快速冷冻 。 但是对于需要处理大 无论从 批量水样的海洋 调 查 和 水 环 境 监 测 来 说 ， 成本还是从设备条件来说冷冻都不是适宜的保存 可操作性太差 。 而且对于磷硅元素的测定 ， 方法 ， 冷冻和解冻过程 会 使 水 样 中 磷 、 硅元素发生某些 化学反应 ， 形成沉淀或其他聚合物 ， 改变目的物的 浓度 ， 使测定结果发生偏离 ， 因此冷冻不适合于磷 硅水样的保存 。
５］ ， 以及稀硫酸酸化处理 ［ 但是经过酸化处理 化汞 、
的水样在测 定 时 必 须 将 ｐ 否则 Ｈ 值 调 回 至 中 性，
［ ］ ６ （ 影响 Ｎ 下转第５ Ｈ ａ ｔ ｔ ｎ ｅ ｒ ３页） ３－ຫໍສະໝຸດ Baidu 的氧化过程。Ｋ
， 作者简介 ： 郑向荣 （ 女， 河北沧州人 ， 高级工程师 ， 主要研究 领 域 为 近 岸 海 域 海 渔 业 环 境 监 测 、 评 估 与 修 复， 海洋生态灾害 １ ９ ６ ３－ ） ： 监测及防治等 。Ｅ－ｍ ａ ｉ ｌ ｈ ｄ ｚ ｈ ｅ ｎ ｘ ｉ ａ ｎ ｒ ｏ ｈ ｕ． ｃ ｏ ｍ ＠ｓ ｑ ｇ ｇ
《 河北渔业 》 总第 ２ ２ ０ １ ２ 年第 ９ 期 （ ２ ５ 期） ○ 检验与检测
： ／ ｄ ｏ ｉ １ ０． ３ ９ ６ ９ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ４－６ ７ ５ ５． ２ ０ １ ２． ０ ９． ０ １ ６ ｊ
海水样品中氮磷营养盐的保存技术