葡萄糖淀粉酶活力的测定

1.6 葡萄糖淀粉酶活力的测定：DNS法。

1.6.1 标准曲线的制作：分别取1mg/ml 的葡萄糖溶液0，20μl，40μl，60μl，80μl，100μl，120μl，用蒸馏水定容到200μl，加入400μl DNS液，在沸水中加热5min，再加蒸馏水

2.4ml，混匀。在540nm下测OD值。用最小二乘法拟合一元线性方程。

1.6.2 葡萄糖淀粉酶活力的测定

取适当稀释的粗酶液40μl于试管中，加入160μl1％(W/V)的淀粉溶液（pH5.0），50℃的水浴中保温10min，加入DNS液400μl，沸水浴5min。冷却后，加入蒸馏水2.4ml，混匀，在540nm的条件下测OD值，通过标准曲线得出酶活单位。

两种酶活单位，一种是将每分钟释放1μg葡萄糖糖的酶量定义为一个酶活单位(U)，一种是将每分钟释放1μmol葡萄糖糖的酶量定义为一个酶活单位(IU)。其中后一种酶活单位在文献中更加常用，被称为国际单位。

2.1 标准曲线见图2.1。

葡萄糖的质量/μg OD值（540nm）

0 0

0.2 0.11

0.4 0.28

0.6 0.4

0.8 0.55

1.0 0.72

1.2 0.95

根据表2.1作标准曲线，见图2.1。

用最小二乘法拟合的一元线性方程为：y=127.12x+5.08。其中x为OD值，y为木糖的质量，单位为μg。