临床微生物学概论PPT课件
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5 5
临床常见的病原微生物
革兰阳性菌： 葡萄球菌、溶血性链球菌、肠球菌
革兰阴性菌： 需氧球菌： 脑膜炎和淋病奈瑟球菌、卡他莫拉菌 需氧杆菌： 不动杆菌、假单胞菌、产碱杆菌、嗜 血杆菌 需氧和兼性厌氧：肠杆菌科细菌如大肠杆菌、肺杆 、伤寒、志贺菌。 厌氧细菌：脆弱拟杆菌、痤疮丙酸杆菌等
#2
•接种血平皿和麦康凯平皿 •如果是吸取物或组织，进行
革兰染色，将重要结果通知
临床医生
#3
中孵育48小时
#5
当检出3种或更多病原菌时，报告“混合菌丛” 并描述性列出假单胞菌，金葡菌，变形杆菌，肠 道革兰阴性杆菌等。
肺炎克雷伯菌
#4
对1或2种 重要病原菌进行鉴定&药 敏试验
β溶血链球菌
金黄色葡萄球菌为主
混合的2种肠道革兰阴性杆菌：2种均报 告；
铜绿假单胞菌
20 20
血培养
主要病原菌：沙门菌、布氏杆菌、其他革兰阴性杆菌、金葡菌出)：
芽孢杆菌属、凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、棒状革兰阳性杆菌
#3
#2
#1 从两个独立的皮肤位点采血，每瓶 采集10ml
拒绝：大量 扁平
上皮细胞
好：很少扁平 上皮细胞
奥普托欣纸片
金黄色葡萄球菌
奥普托欣＋
肺炎克雷伯菌
胆汁溶菌＋
#5
对重要病原菌进行 鉴定&药敏试验
#3
接种巧克力平皿，血 平皿和麦康凯平皿
#4
CO2中孵育48 小时
流感嗜血杆菌
12 12
革兰染色评估呼吸道标本是否合格？
有代表性的好标本 ü中性粒细胞多
•白细胞>25/低倍视野
9 9
主要的临床标本种类
标本类型 呼吸道标本
深部咳出痰、支气管灌洗液 咽拭子、鼻气管吸出液、气管吸出液 尿液 血液 脑脊液 伤口、脓液 其它体液 胸水、心包液、引流液、腹水、滑囊液
10 10
标本的处理
涂片光镜检查
诊断病原最基本和快速的方法：脑脊液 直接形态学检查 革兰染色或特殊染色
35℃ 自动化仪器中孵育5天 每天检查浊度并翻转培养瓶
18小时后传进行次代培养 当培养瓶显示细菌生长时进行 革兰染色和传代培养
革兰阳性球菌接种血 平皿＋奥普托欣试验
例如：肺炎链球菌
#6
对重要病原菌
进行鉴定 和药敏试验
#5
CO2中孵育 72h
革兰阴性杆菌接种血平皿和 麦康凯平皿
将重要的革
#4 兰染色结果 尽快通知临
分离培养和鉴定 动物接种 免疫学检查
11 11
痰标本
主要病原菌：肺炎链球菌，克雷伯菌属，流感嗜血杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿 假单胞菌。
非病原菌：酵母菌，草绿色链球菌，凝固酶阴性葡萄球菌
#1
病人需用水清洁口腔， 深咳肺部痰， 不要唾液
肺炎链球菌
#2
• 进行革兰染色以评价标本是否适于接 种。
• 向临床医生尽快报告重要的革兰染色 结果
6 6
苛养菌
定义：是一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多感 染性疾病有关，其分离培养较为困难。
营养要求高 肺炎链球菌：培养基内要加入血或血清 流感嗜血杆菌：X、V因子
比较娇嫩、对干燥、对寒冷的抵抗力均较弱。 培养条件：5～10％CO2、35℃培养、24～ 48h 呼吸道其他快生长细菌的覆盖使分离率非常低
清洁留取
100 纯 培 养 的 肠 杆 菌 科 菌
清洁留取
1000 潜 在 病 原 菌
所有
从导尿管中直接留取
100 个 所 有 种 类 的 潜 在 病 原 菌
所有
外科或膀胱吸取
任何数量（肉汤增菌，厌氧菌）
所有
有争议
任何酵母菌
GNR
#5
若 2 种菌生长，对 每种菌进行鉴定和药 敏试验； 若>2种菌生长，报 告“混合菌群”
床医生
革兰阴性双球菌或球杆
菌接种巧克力平皿和
50,000 cfu/ml 75,000 cfu/ml
100,000 cfu/ml
#4
菌落计数
19 19
脓，吸取物或组织标本
主要病原菌：金葡菌，化脓链球菌，其他β溶血链球菌，绿脓，其他革兰阴性杆菌。 非病原菌：凝固酶阴性葡萄球菌，少量的棒状革兰阳性杆菌
#1
•用酒精消毒伤口周围皮肤 •最好的标本是吸取物和组织 •最差的标本是拭子
临床微生物学概论
（第一部分）
主要内容
标本采集 细菌的分离培养和鉴定 抗菌药物敏感性试验
2 2
正常菌群
在正常人体体表与外界相通的腔道：口腔、鼻咽腔、肠道 、泌尿生殖道存在的多种微生物。
在机体免疫功能正常时对人体有益无害，属人类正常微生 物群或环境中通常不致病的微生物，因以细菌和真菌为主 ，故称“正常菌群”。
#3
空气孵育24小时
GPC
#6
病人 无症状
有症状但不需 卧床 有症状，性生 活活跃的女性 男性
注意: •革兰阴性杆菌在血平
皿和麦 康凯平皿上均 生长良好 •革兰阳性球菌仅在血 平皿上生长良好
尿培养的评估标准
标本类型 清洁留取或留置管留 取 清洁留取
有意义的病原菌 100,000
CFU/ml
1-2 种 病 原 菌 。 >2 种 视 为 污 染
正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素 反映出在正常情况下，宿主、正常菌群和外界环境相互适
应，保持平衡状态。
3 3
4 4
病原微生物
病原微生物(pathogen)： 引起人类感染性疾病的微生物 称为病原微生物或致病微生物。
细菌：如痢疾志贺菌、肠杆菌科细菌、金黄色葡萄球菌、肠球 菌属等
病毒：如单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、乙型肝炎病毒等 真菌：如念珠菌属、曲霉属、毛霉属以及新型隐球菌等 其他：如支原体、衣原体、螺旋体
7 7
厌氧 菌
是一群专性厌氧，必须在无氧环境下才能生长繁殖的细菌。 根据能否形成芽胞，可将厌氧菌分成两大类。
厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌 厌氧芽胞梭菌属：破伤风梭菌、产气荚膜杆菌、肉毒梭菌、 艰难梭菌 无芽胞厌氧菌：拟杆菌属、梭杆菌属、丙酸杆菌属、消化链 球菌属等
8 8
标本的采集
抗菌药使用前 正确的部位 正确的时间 足够的数量 无菌的容器 特殊要求应在化验单上注明
ü鳞状上皮细胞少 ü＜ 10/低倍视野
13 13
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收
14 14
15
16
17
18
尿培养
主要病原菌：大肠埃希菌，变形杆菌，克雷伯菌，其他 革兰阴性杆菌，肠球菌，腐生葡萄球菌，纯的金葡球菌
b a #1 收集中段尿
a
b
#2 接种血平皿和麦康凯平
皿 0.001ml接种环
临床常见的病原微生物
革兰阳性菌： 葡萄球菌、溶血性链球菌、肠球菌
革兰阴性菌： 需氧球菌： 脑膜炎和淋病奈瑟球菌、卡他莫拉菌 需氧杆菌： 不动杆菌、假单胞菌、产碱杆菌、嗜 血杆菌 需氧和兼性厌氧：肠杆菌科细菌如大肠杆菌、肺杆 、伤寒、志贺菌。 厌氧细菌：脆弱拟杆菌、痤疮丙酸杆菌等
#2
•接种血平皿和麦康凯平皿 •如果是吸取物或组织，进行
革兰染色，将重要结果通知
临床医生
#3
中孵育48小时
#5
当检出3种或更多病原菌时，报告“混合菌丛” 并描述性列出假单胞菌，金葡菌，变形杆菌，肠 道革兰阴性杆菌等。
肺炎克雷伯菌
#4
对1或2种 重要病原菌进行鉴定&药 敏试验
β溶血链球菌
金黄色葡萄球菌为主
混合的2种肠道革兰阴性杆菌：2种均报 告；
铜绿假单胞菌
20 20
血培养
主要病原菌：沙门菌、布氏杆菌、其他革兰阴性杆菌、金葡菌出)：
芽孢杆菌属、凝固酶阴性葡萄球菌、草绿色链球菌、棒状革兰阳性杆菌
#3
#2
#1 从两个独立的皮肤位点采血，每瓶 采集10ml
拒绝：大量 扁平
上皮细胞
好：很少扁平 上皮细胞
奥普托欣纸片
金黄色葡萄球菌
奥普托欣＋
肺炎克雷伯菌
胆汁溶菌＋
#5
对重要病原菌进行 鉴定&药敏试验
#3
接种巧克力平皿，血 平皿和麦康凯平皿
#4
CO2中孵育48 小时
流感嗜血杆菌
12 12
革兰染色评估呼吸道标本是否合格？
有代表性的好标本 ü中性粒细胞多
•白细胞>25/低倍视野
9 9
主要的临床标本种类
标本类型 呼吸道标本
深部咳出痰、支气管灌洗液 咽拭子、鼻气管吸出液、气管吸出液 尿液 血液 脑脊液 伤口、脓液 其它体液 胸水、心包液、引流液、腹水、滑囊液
10 10
标本的处理
涂片光镜检查
诊断病原最基本和快速的方法：脑脊液 直接形态学检查 革兰染色或特殊染色
35℃ 自动化仪器中孵育5天 每天检查浊度并翻转培养瓶
18小时后传进行次代培养 当培养瓶显示细菌生长时进行 革兰染色和传代培养
革兰阳性球菌接种血 平皿＋奥普托欣试验
例如：肺炎链球菌
#6
对重要病原菌
进行鉴定 和药敏试验
#5
CO2中孵育 72h
革兰阴性杆菌接种血平皿和 麦康凯平皿
将重要的革
#4 兰染色结果 尽快通知临
分离培养和鉴定 动物接种 免疫学检查
11 11
痰标本
主要病原菌：肺炎链球菌，克雷伯菌属，流感嗜血杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿 假单胞菌。
非病原菌：酵母菌，草绿色链球菌，凝固酶阴性葡萄球菌
#1
病人需用水清洁口腔， 深咳肺部痰， 不要唾液
肺炎链球菌
#2
• 进行革兰染色以评价标本是否适于接 种。
• 向临床医生尽快报告重要的革兰染色 结果
6 6
苛养菌
定义：是一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多感 染性疾病有关，其分离培养较为困难。
营养要求高 肺炎链球菌：培养基内要加入血或血清 流感嗜血杆菌：X、V因子
比较娇嫩、对干燥、对寒冷的抵抗力均较弱。 培养条件：5～10％CO2、35℃培养、24～ 48h 呼吸道其他快生长细菌的覆盖使分离率非常低
清洁留取
100 纯 培 养 的 肠 杆 菌 科 菌
清洁留取
1000 潜 在 病 原 菌
所有
从导尿管中直接留取
100 个 所 有 种 类 的 潜 在 病 原 菌
所有
外科或膀胱吸取
任何数量（肉汤增菌，厌氧菌）
所有
有争议
任何酵母菌
GNR
#5
若 2 种菌生长，对 每种菌进行鉴定和药 敏试验； 若>2种菌生长，报 告“混合菌群”
床医生
革兰阴性双球菌或球杆
菌接种巧克力平皿和
50,000 cfu/ml 75,000 cfu/ml
100,000 cfu/ml
#4
菌落计数
19 19
脓，吸取物或组织标本
主要病原菌：金葡菌，化脓链球菌，其他β溶血链球菌，绿脓，其他革兰阴性杆菌。 非病原菌：凝固酶阴性葡萄球菌，少量的棒状革兰阳性杆菌
#1
•用酒精消毒伤口周围皮肤 •最好的标本是吸取物和组织 •最差的标本是拭子
临床微生物学概论
（第一部分）
主要内容
标本采集 细菌的分离培养和鉴定 抗菌药物敏感性试验
2 2
正常菌群
在正常人体体表与外界相通的腔道：口腔、鼻咽腔、肠道 、泌尿生殖道存在的多种微生物。
在机体免疫功能正常时对人体有益无害，属人类正常微生 物群或环境中通常不致病的微生物，因以细菌和真菌为主 ，故称“正常菌群”。
#3
空气孵育24小时
GPC
#6
病人 无症状
有症状但不需 卧床 有症状，性生 活活跃的女性 男性
注意: •革兰阴性杆菌在血平
皿和麦 康凯平皿上均 生长良好 •革兰阳性球菌仅在血 平皿上生长良好
尿培养的评估标准
标本类型 清洁留取或留置管留 取 清洁留取
有意义的病原菌 100,000
CFU/ml
1-2 种 病 原 菌 。 >2 种 视 为 污 染
正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素 反映出在正常情况下，宿主、正常菌群和外界环境相互适
应，保持平衡状态。
3 3
4 4
病原微生物
病原微生物(pathogen)： 引起人类感染性疾病的微生物 称为病原微生物或致病微生物。
细菌：如痢疾志贺菌、肠杆菌科细菌、金黄色葡萄球菌、肠球 菌属等
病毒：如单纯疱疹病毒、巨细胞病毒、乙型肝炎病毒等 真菌：如念珠菌属、曲霉属、毛霉属以及新型隐球菌等 其他：如支原体、衣原体、螺旋体
7 7
厌氧 菌
是一群专性厌氧，必须在无氧环境下才能生长繁殖的细菌。 根据能否形成芽胞，可将厌氧菌分成两大类。
厌氧芽胞梭菌属 无芽胞厌氧菌 厌氧芽胞梭菌属：破伤风梭菌、产气荚膜杆菌、肉毒梭菌、 艰难梭菌 无芽胞厌氧菌：拟杆菌属、梭杆菌属、丙酸杆菌属、消化链 球菌属等
8 8
标本的采集
抗菌药使用前 正确的部位 正确的时间 足够的数量 无菌的容器 特殊要求应在化验单上注明
ü鳞状上皮细胞少 ü＜ 10/低倍视野
13 13
痰标本>10鳞状上皮细胞/每低倍视野=拒收
14 14
15
16
17
18
尿培养
主要病原菌：大肠埃希菌，变形杆菌，克雷伯菌，其他 革兰阴性杆菌，肠球菌，腐生葡萄球菌，纯的金葡球菌
b a #1 收集中段尿
a
b
#2 接种血平皿和麦康凯平
皿 0.001ml接种环