方法验证原理和实验操作数据结果

1.专属性

是指在其他成分可能存在的情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映分析方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力;是方法用于复杂样品分析时相互干扰程度的度量。比如：

（气相色谱法测定杆菌肽原料药中的正丁醇含量）在本测试方法条件下将一个空白稀释液（甲醇）进样进行测试。所得图谱应当基线平整，不存在有影响正丁醇峰积分的干扰。证明稀释液（甲醇）不影响本方法对正丁醇的测试。

2.系统适应性

应该要按药典的规定做,还是做6针。系统适用性还是要做的，包括理论塔板数、拖尾因子，分离度和仪器仪器精密度（重复性）。

Inj#

正丁醇保留时间

Retention time of n-Butyl

alcohol

正丁醇峰面积

n-Butyl alcohol Peak Area

1 6.93

2 140.1

2 6.93

3 139.3

3 6.930 139.7

4 6.933 138.3

5 6.935 138.0

6 6.934 138.0

平均值Average 6.933 138.9

标准偏差SD 0.002 0.919 相对标准偏差/%RSD 0.025% 0.661%

可接受标准

Acceptance Criteria

≤ 2.0 % ≤ 5.0 %

3.检测限

指某一分析方法在给定的可靠程度内可以从样品中检测待测物质的最小浓度或最小量。所谓检测是指定性检测，即断定样品中确定存在有浓度高于空白的待定物质。信噪比法：把低浓度的试样测出的信号与空白样品尽心比较，计算出较能被可靠检测出的最低浓度或量。

基线噪声看的是高度，而你的积分的是峰面积，之间无法换算。工作站里有个积分方式，你给转换成峰高，就可以顺利算出检出限了，对应浓度从而算出S/N=3的浓度。

溶液配制/Test Solution Prep: 精密称定26.4mg正丁醇，置25mL容量瓶中, 加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密移取该溶液5mL至50mL容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀。精密移取该溶液2mL至50mL 容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀。

Accurately weigh 26.4mg n-Butyl alcohol, dilute with methanol to 25 mL, mix well. Then accurately pipet 5 mL of this solution and transfer into a 50 mL volumetric flask, dilute with methanol to the volume, and mix well. Then accurately pipet 2 mL of this solution and transfer into a 50

mL volumetric flask, dilute with methanol to the volume, and

mix well.

检测限浓度Concentration

(mg/mL)

0.004224 mg/mL

测试/Test #

保留时间

Retention Time

正丁醇峰面积

Area

信噪比

S/N

Test-1 7.287 4.34 3.1

Test-2 7.290 4.02 3.1

Test-3 7.289 3.92 3.1

Average 7.289 4.09 3.1

SD 0.002 0.219 -

STD% 0.03% 5.36% - 结论/Conclusion:

该方法检测限为：

The LOD is: 0.004224 mg/mL

4.定量限

是指样品中被测物（正丁醇）能被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。

溶液配制/Test Solution Prep: 精密称定26.4mg正丁醇，置25mL容量瓶中, 加甲醇稀释至刻度，摇匀。精密移取该溶液5mL至50mL 容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀。精密移取该溶液6mL至50mL容量瓶中，加甲醇稀释到刻度，混匀。

Accurately weigh 26.4mg n-Butyl alcohol, dilute with methanol to 25 mL, mix well. Then accurately pipet 5 mL of this solution and transfer into a 50 mL volumetric flask, dilute with methanol to the volume, and mix well. Then accurately pipet 6 mL of this solution and transfer into a 50 mL volumetric flask, dilute with methanol to the volume, and mix well.

定量限浓度Concentration

(mg/mL)

0.012672 mg/ml

测试/Test # 保留时间

Retention

Time

正丁醇峰面积

Area

信噪比

S/N

Inj-1 7.287 11.64 9.3

Inj-2 7.285 10.87 9.5

Inj-3 7.289 9.83 8.6

Average 7.287 10.78 9.1

SD 0.002 0.908 -

%RSD 0.03% 8.43% -结论/Conclusion:

该方法定量限为：

The LOQ is: 0.012672 mg/mL