培养基配制标准操作规程
配制固体培养基操作规程
操作顺序
操作内容
操作要求
1
填写培养基成分单
按所用培养基配方及其配制量，准确计算出各种成分母液及琼脂、蔗糖的用量，并按大、微、铁、有、调、琼、糖、pH的顺序，填写在“配制培养基成分单”上。
2
水锅加热
在做培养基专用的不锈钢锅内，加进约为欲配培养基量的70-80%的蒸馏水或软化水（澄清后的凉开水），放在电炉上加热。
19
高压锅排水
打开排水阀，放尽锅内存水，以减少积垢。
说明
一、制定本操作规程的目的是：（1）防止发生差错，提高培养基质量；（2）使配制过程井然有序，省时、省力、节省能源，提高工作效率。
二、制定本操作规程所依据的条件是：（1）一人操作，一次配制8升培养基；（2）用2000W的电炉为水锅加热；（3）所用高压锅是“立式电热压力消毒器”（工作压力：137Kpa），并配有3-6KV的稳压电源控制器，因此，当上述条件有变化时，就应对相关操作顺序和操作要求作必要的调整或变动。
3
高压锅加水
关闭高压锅排水阀，加软化水至安全水位线。
4
称取琼脂、蔗糖
称取前，剪碎干胶条状琼脂，破碎蔗糖结块，须按1%以上的精度准确称量。
5
摆放培养瓶
按预定分装瓶数，将洗净、晾（烘）干的培养瓶，在桌上摆放整齐。
6
量取和混溶母液
把贮存各种所需母液的试剂瓶，按培养基成分单所列顺序摆放整齐，再按配方用量顺序量取各成分母液，并混溶于烧杯中。
12
分装培养基
按不同组培目的所需的每瓶培养基用量，将培养基均匀分装于摆好的培养瓶内。然后在瓶口盖上消毒好的棉塞或封口膜。
13
高压锅加热
关闭进水口及放气阀，打开排气阀，通电加热。
菌检培养基配制、使用和检验标准操作规程
目的：建立菌检培养基配制、使用和检验的方法，以保证检验结果客观准确。
应用范围：适用于微生物检查、生物测定检查用培养基的配制及使用。
责任人：菌检检验员、QA、质量部经理。
内容：1 概述培养基是人工配制的生物营养物质，目前，多数微生物应使用商品化的干粉培养基，这些培养基性能一般比较稳定，只需按照产品说明书的规定贮存条件，配制，在有效期内使用即可获得满意的效果，而自制培养基则应进行较严格的质量控制。
2 培养基的制备通则2.1 常用玻璃仪器的制备2.1.1 概述制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。
2.1.2 细则2.1.2.1 平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。
2.1.2.2 试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，用布或报纸包好，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。
2.1.2.3 吸管与滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出或橡皮帽内的气体污染）然后用纸包好或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。
其他玻璃器皿均可按上法进行处理，也可装金属筒内于160～180℃干热灭菌2h后，备用。
2.2.培养基的制备及储存2.2.1 配制2.2.1.1配制干粉培养基时，先将蒸馏水按足量加入容器中，然后称取一定量培养基干粉放入水中，静置10～15 min，搅拌，振荡，或延长时间以促进溶解，一般不要加热，必要时加热，但时间不宜过长，温度不宜过高，避免某些营养成分被破坏。
2.2.1.2 溶化一般应放在玻璃器皿或搪瓷器内。
加入蒸馏水，隔水加热以促其溶解，加热时应经常搅拌，防止焦化，待其溶解后加足水分。
2.2.2 校正酸碱度2.2.2.1 培养基必须有适当的pH。
测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一，干粉培养基一般已校正过pH，用时也必须再验证。
2.2.2.2 pH测定时，一般用指示剂滴入培养基中观察，其颜色的变化，或用pH计校正，测定标准温度应为（25±2℃），如与所需pH不符，可用酸或碱液加以校正。
培养基配制标准操作规程
范围：培养基职责：检验室对本规程的实施负责正文：1.培养基的制备1.1需气菌、厌气菌培养基（硫乙醇酸盐液体培养基）酪胨（胰酶水解） 15g 氯化钠 2.5g葡萄糖 5g 新鲜配制的0.1%刃天青溶液 1.0mlL—胱氨酸 0.5g (或新鲜配制的0.2%亚甲蓝溶液 0.5ml)硫乙醇酸钠 0.5g 琼脂 0.5～0.7g(或硫乙醇酸 0.3ml) 水 1000ml酵母浸出粉 5g——除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，按量加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节pH值使灭菌后为7.1±0.2，分装，115℃灭菌30分钟。
——在无菌检查接种前，培养基指示剂氧化层的颜色不得超过培养基深度约1/5。
否则，须经水浴煮沸加热，只限加热一次。
1.2霉菌培养基胨 5g 磷酸氢二钾（K2HPO4） 1g酵母浸出粉 2g 硫酸镁（MgSO4·7H2O） 0.5g葡萄糖 20g 蒸馏水 1000ml——除葡萄糖外，取上述成分加入水内，微温溶解后，调节pH值约为6.8,煮沸，加葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH值使灭菌后为6.4±0.2，分装，115℃灭菌20分钟。
1.3选择性培养基1.3.1对氨基苯甲酸培养基(用于磺胺类药物的无菌检查) 照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方制法，各加对氨基苯甲酸0.125g，溶解后摇匀，分装，115o C灭菌30分钟。
1.3.2吐温培养基（用于油剂药品的无菌检查）照上述需气菌、厌气菌培养基及霉菌培养基的处方及制法，各加10ml的吐温80，摇匀后，分装，115℃灭菌30分钟。
1.4营养肉汤培养基1.4.2处方胨 10g 肉浸液 1000ml氯化钠 5g——取胨与氯化钠，加入肉浸液内，微温溶解后，调节pH为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH值使灭菌后为7.2±0.2，分装，115℃灭菌30分钟。
1.4.2肉浸液制备法——取新鲜牛肉，除去肌腱及脂肪，切细，绞碎后，每1000g加水3000ml,充分拌匀，在2～10℃浸泡20～24小时，煮沸1小时，滤过，压干肉渣，补足液量，分装，121℃灭菌30分钟,置冷暗处备用。
培养基配制及适用性检查标准操作规程【范本模板】
目的：建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作流程.范围：适用于微生物检验人员对培养基的规范管理.依据:《药品生产质量管理规范(2010年修订)》、《中华人民共和国药典》2015年版第四部职责：1.微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作,使日常检验可以顺利进行.2。
微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督.内容1 培养基的申购根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。
申购时需指定培养基供应商,必要时进行供应商审计。
2 培养基的验收2.1 培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。
验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。
2.2 验收合格后，登记于《培养基领用台账》（附记录文件编号：SMP—10—QC—009—02（00））。
3 培养基的贮藏3。
1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室,使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。
已开封的脱水培养基应盖紧，贮存于阴凉库.3.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后，置4～8℃冷藏保存待用。
灭菌后培养基储存期为7天。
4 培养基的配制4。
1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》（附记录文件编号：SMP-10—QC-009-02（00)）.4。
2培养基配制批号原则：原材料批号—配制日期:比如2011年1月1日配制的培养基，培养基干粉批号000000,配制批号为：000000—110101。
配制好的培养基贴《培养基标签》（附记录文件编号：R-SMP—10—QC-009-03).（注:同一天同一培养基配置多次的,在原批号后加“-”加“数字”表示，如000000—110101-01）4。
3培养基配制方法4。
3。
1 使用商品化脱水合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制，如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。
实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息如：培养基名称和类型及试剂级别，每个成分物质含量、制造商、批号，pH值，培养基体积/分装体积，灭菌条件（灭菌方式、温度及时间)，配制日期、人员等，以便溯源.4.3.2 水、容器具要求：培养基配制均采用纯化水，特殊说明时采用去离子水和蒸馏水。
TSB培养基的配制操作规程
目的Purpose建立TSB培养基配制操作规程，使操作规范化、科学化。
适用范围与通则Scope and general rule在1#生产车间进行TSB培养基配制操作。
责任人Responsibility在1#生产车间进行TSB培养基配制操作的所有人员要遵循本规程。
本文件起草人、班组负责人与生产主管负责本规程的适用性。
程序Procedure目录Contents1.按十万级更衣程序进入配液室,洗手、消毒手臂。
2.配液前物料准备。
2.1根据所配制的体积量，准备需要的容器（洁净的Carboy瓶）、玻璃棒、天平等。
2.2 检查注射用水的电导率是否符合要求。
3.配制：3.1根据所配制的体积量，按照使用说明称取胰蛋白胨大豆肉汤干粉。
以1L为例：量取1L注射水，加入30g胰蛋白胨大豆肉汤，进行加热煮沸溶解，待其充分煮沸溶解后，进行分装，待高压或过滤除菌。
3.2过滤除菌：配制结束后通知万级洁净区班组人员进行过滤除菌。
发文号issued No:____________________复印号Controlled Copy No:______________________3.3高压灭菌：按照高压灭菌柜的操作规程进行溶液121℃，15分钟高压灭菌。
4.清场:将用过的Carboy瓶转出配液间，用洁净消毒抹布、拖布对配液间台面、地面、仪器设备进行清洁消毒，确保无污迹。
垃圾分类后由专用通道转出洁净区。
清洁用具清洗后放指定位置备用。
班组负责人检查合格后挂“已清场”。
5.填写记录。
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微生物培养基配制操作规程
微生物培养基配制操作规程1. 引言微生物培养基的配制是微生物学研究中重要的实验操作之一。
培养基的配制质量直接影响微生物培养实验的结果，因此，需要严格按照操作规程进行培养基的配制。
本文档介绍了微生物培养基的配制操作规程，以确保培养基的质量和稳定性。
2. 材料和仪器•试剂：包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂、酵母粉、磷酸二氢钾等。
•仪器：包括天平、电热板、烧杯、移液器等。
3. 培养基配制操作步骤3.1 准备工作•清洗容器：将烧杯、烧瓶等容器用肥皂水彻底洗净，再用去离子水冲洗干净，确保容器干净无杂质。
•消毒操作：将容器用高温高压自动消毒器进行消毒处理。
充分消毒后，放置在无菌条件下待用。
3.2 培养基成分配制1.清量试剂：根据配方，使用天平准确称取所需的试剂。
注意避免交叉污染，每次称取完一个试剂后，清洁秤盘。
2.溶解试剂：按照配方所需的顺序，将试剂加入适量的去离子水中，并使用电热板加热搅拌溶解。
3.pH调节：根据培养基的需求，使用磷酸二氢钾或氢氧化钠溶液进行pH调节。
使用pH计检测pH值，调节至所需范围内。
3.3 琼脂平板制备1.蒸汽消毒：将琼脂平板瓶放入高温高压自动消毒器中，进行蒸汽消毒处理。
注意避免瓶内产生真空现象，以免使琼脂变质。
2.冷却倒填：倒出适量的琼脂溶液，均匀铺平于无菌工作台上，并迅速冷却至约40℃左右。
3.加药：将需要添加的抗生素等药物加入琼脂中，并充分混匀。
4.转移菌液：待琼脂冷却凝固后，使用无菌技术将待测微生物菌液转移到琼脂平板上。
3.4 培养基灭菌1.灭菌器验证：使用化学指示剂验证培养基灭菌器的灭菌能力，确保达到灭菌要求。
2.灭菌操作：将配制好的培养基装入无菌烧瓶或试管中，使用高压灭菌器进行灭菌处理，温度和时间根据不同培养基的需求进行设置。
3.冷却保存：灭菌完成后，将烧瓶或试管放置在无菌条件下，待其冷却至室温后，即可进行保存。
4. 注意事项1.操作无菌技术：操作过程中，需要严格采用无菌技术，防止外源菌的污染。
培养基配制及适用性检查操作规程
XXXXXXXX有限公司质量控制管理制度1 目的：建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作流程。
2 范围：适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。
3 依据：《药品生产质量管理规范（2010年修订）》、《中华人民共和国药典》2015年版第四部。
4 职责：4.1 微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作，使日常检验可以顺利进行。
4.2微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。
5 内容5.1 培养基的申购：根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。
申购时需指定培养基供应商，必要时进行供应商审计。
5.2 培养基的验收5.2.1 培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。
验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。
5.2.2 验收合格后，登记于《培养基领用台账》（附记录文件编号：ZL-041）5.3 培养基的贮藏5.3.1 未开封的培养基贮存低温、干燥、和避光条件下。
已开封的培养基应盖紧，贮存于阴凉处。
5.3.2灭菌后培养基储存期为7天。
5.4 培养基的配制5.4.1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》（附记录文件编号：ZL-025）。
5.4.2培养基配制方法5.4.2.1 使用商品化合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制，如重量/体积、灭菌条件和操作步骤等。
5.4.2.2 水、容器具要求：培养基配制均采用纯化水，培养基配制所用容器和配套器具应洁净。
5.4.2.3 称量与分装：快速称量所需量的合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末）。
以免吸潮。
先加入适量的水，充分混合。
注意避免培养基结块，然后加水至所需的量。
根据说明书要求选择是否加热。
分装体积不超过容器体积的2/3。
配制斜面等含琼脂的培养基也需加热煮沸至完全溶解后分装。
MH培养基配制标准操作规程
MH培养基配制标准操作规程1．目的规范M-H培养基配制标准操作规程，保证培养基质量。
2．原理M-H培养基用Mueller-Hinton琼脂（水解酪蛋白琼脂）配制，淀粉为保护性胶体，能对抗细菌中的毒性物质，水解酪蛋白含多种氨基酸，牛肉浸膏能提供细菌氮源的主要营养物质。
药敏试验中，为保证结果重复性及抑菌环的大小、清晰，因此培养基不含对抗生素及磺胺药物的拮抗剂。
3．用途用于普通细菌的抗菌药物敏感试验。
4．配方成品OXOID M-H干粉38g、蒸馏水1000ml，pH7.1～7.5。
5.操作步骤将上述成分混合，校正pH。
121℃高压灭菌15分钟。
冷至50℃左右，无菌定量吸取25ml于直径9cm的无菌平板内，凝固后冷藏备用。
琼脂层厚4mm.6.储存条件2～8℃冰箱。
7.有效期实验室自行规定，确保培养基质量。
8. 质量控制8.1 质控频度每次新配制时做质控8.2 质控方法及结果见表5-20.表5-18 配制M-H培养基质量控制方法及结果试验方法结果无菌试验质量检测平行试验<100块抽检5%，>100块随机取10块，35℃，CO2培养24小时在M-H培养基上涂布粪肠球菌ATCC29212，用甲氧苄啶∕磺胺甲噁纸片进行药敏试验，35℃培养24小无细菌生长出现一个边缘清楚的抑菌圈，直径应≧20mm时做质控时，取新旧批号的培养基同时做9.注意事项9.1 倾注琼脂量为25ml，平板深度4mm。
若太薄，易产生假敏感。
若太厚，平皿中的抗生素往下扩散而使抑菌环变狭窄，产生假耐药性。
9.2 pH会影响某些抗生素的活性。
实验时不可将平板培养在CO2培养箱中，否则会在琼脂的潮湿表面产生碳酸而降低pH值，将影响各种抗生素的扩散速度、抑菌环大小。
参考文献[1] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海：上海科学技术出版社，2007[2] 王钦升，周正明，高屹主编.实用医学培养基手册.北京：人民军医出版社，1999（周庭银）编写人：AAA、BBB 操作人：本室操作人员批准人：。
培养基配制标准操作规程
培养基配制标准操作规程一、目的：规范培养基配制操作流程，确保培养基的质量符合要求。
二、适用范围：本规程适用于实验室培养基配制操作。
三、岗位责任（1）实验员：根据实验需要，按照配方准确称量试剂，按照标准操作流程进行配制，保证培养基的质量。
（2）实验室主任：对实验员所配制的培养基进行审核，对质量不符合要求的培养基要求实验员进行整改，并记录在实验室日志中。
四、基础设施和基本设备实验室应配备足够的天平、电子计时器、玻璃棒、玻璃瓶、蒸馏水机、高压灭菌器等基础设备及设施。
五、培养基配制操作流程（1）准备试剂应先仔细阅读所选培养基的配方，根据试剂名称和精确剂量，准备称量瓶、试剂架、天平等计量仪器。
配制时应避免手触、相沾等操作，避免交叉污染。
（2）称量试剂初次粗择试剂后，建议先将试剂转移到称量室中，配合现代科技的天平，便可精确计算配比比例。
所有试剂称重时必须使用内配计量，不能使用外配以避免误差增大影响试剂配比。
（3）配制溶液将所需试剂依照标准配比和数量先加入容器，再用分度水小心勾兑均匀，用方法如下：先将容器中整量标容量的水加入到标记线以下。
然后倒入试剂，如对称量试剂的总质量要求是1000 ml，而已注入200 ml水时，即将剩余的实验试剂灌入到950毫升，再次将液面加到1000毫升，如此反复操作完整。
（4）用自来水采样，并抽真空去泡水样的采集，我们应该在步入实验室后在首先采用自来水进行放置，保留水样大概20分钟后，用玻璃棒试管器分别进行抽取。
培养基液体所产生的泡沫和气泡需要用抽真空的方式去除，以确保培养基的质量。
（5）实验室水龙头口淋洗容器本次所述的辛勤劳累的操作一旦完成，容器内部的物质已经被彻底摧毁，真正变成了医学科学上可行的培养基，此时我们应该用干净的管子将洗涤水彻底排完，真正保障实验室完全无菌的标准。
（6）高压灭菌用高压灭菌锅进行消毒，根据不同的材质和设备使用说明，对耐高温不锈钢的容器用121度高压灭菌20分钟，可以保证彻底去除培养基中的细菌。
培养基配制及适用性检查标准操作规程
培养基配制及适用性检查标准操作规程目的：建立培养基配制及适用性检查的标准操作规程，规范实验人员的操作流程。
范围：适用于微生物检验人员对培养基的规范管理。
依据：《药品生产质量管理规范（修订）》、《中华人民共和国药典》第四部职责：1.微生物检验员：负责实验室所需求的培养基管理工作，使日常检验能够顺利进行。
2.微生物检验主管：负责对日常配制培养基的规范操作进行监督。
内容1 培养基的申购根据检验项目、工作量和工作进度的需求，提前一个月进行所需的培养基申购。
申购时需指定培养基供应商，必要时进行供应商审计。
2 培养基的验收2.1 培养基到货后，微生物室检验员应进行验收。
验收内容包括核对品名、数量、规格、生产厂商，应与申购单一致；检查培养基包装有无破损、包装是否完整、产品是否在有效期内。
2.2 验收合格后，登记于《培养基领用台账》（附记录文件编号：SMP-10-QC-009-02（00））。
3 培养基的贮藏3.1未开封的脱水培养基贮存于阴凉室，使培养基处于低温、干燥、和避光条件下。
已开封的脱水培养基应盖紧，贮存于阴凉库。
3.2灭菌好的培养基应进行预培养72h检查无菌后，置4～8℃冷藏保存待用。
灭菌后培养基储存期为7天。
4 培养基的配制4.1培养基的配制和使用应填写《培养基配制及使用记录》（附记录文件编号：SMP-10-QC-009-02（00））。
4.2培养基配制批号原则：原材料批号-配制日期：比如 1月1日配制的培养基，培养基干粉批号000000，配制批号为:00。
配制好的培养基贴《培养基标签》（附记录文件编号：R-SMP-10-QC-009-03）。
（注：同一天同一培养基配置多次的，在原批号后加“-”加“数字”表示，如00-01）4.3培养基配制方法4.3.1 使用商品化脱水合成培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配制，如重量/体积、pH、灭菌条件和操作步骤等。
实验室使用各种基础成分制备培养基时，应按照配方准确配制，并记录相关信息如：培养基名称和类型及试剂级别，每个成分物质含量、制造商、批号，pH 值，培养基体积/分装体积，灭菌条件（灭菌方式、温度及时间），配制日期、人员等，以便溯源。
营养琼脂培养基配置使用操作规程
江门大诚医疗器械有限公司
标准操作规程文件编号版本号
标题：营养琼脂培养基配制使用操作规程页码1/1
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围：本操作规程适用于营养琼脂培养基的配制使用。
职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
内容：：
1．仪器与试剂：
1.1 JY2002电子天平、85_2数显恒温磁力搅拌器、LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器、电冰箱、250ml三角瓶、500ml量筒、线绳、培养皿。
1.2. 纯化水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1. 使用JY2002电子天平称取营养琼脂8克，于250ml三角瓶内，加入250ml纯化水，加热溶解，充分搅拌均匀后，包好扎紧瓶口。
2.2. 置LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器内，于121℃高压灭菌15分钟，取出放置至室温后，放入冰箱，备用（冰箱温度控制在1－4℃）。
2.3. 使用时从冰箱取出，放置室温后，置85_2数显恒温磁力搅拌器中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。
2.4. 使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开包扎外壳，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约15ml完毕后，立即包好瓶口，用线绳扎好，留下次使用。
（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。
3.参考文件：85_2数显恒温磁力搅拌器操作规程
LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器操作规程
JY2002电子天平校准规程。
D-SMP-001-01培养基配制标准操作规程
北京博康健基因科技有限公司培养基管理标准操作规程一、目的：本规程规范了微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。
二、范围：本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基。
三、责任：QC部质检员对本规程实施负责。
四、内容：1．操作依据：《中国药典》2010年版二部五、正文1.培养基（Media）是指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基（Dehydrated Medium）和配制好的琼脂（Agar）、肉汤（Broths）、稀释液（Diluents）等等。
2.程序2.1.购买2.1.1.质量控制部提出采购计划，并填写《采购计划》，注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等，由相关人员审核，交采购部采购。
2.1.2.培养基买回后，由使用部门填写领料单，由物流部发出。
2.1.3.领回后的干粉培养基，开瓶后应贴上《开启标签》，注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件，并且不得把原标签覆盖。
使用时填写《干粉培养基使用记录》。
2.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制使用记录》，配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
批号定义为：同一批灭菌的培养基为一批，批号编号方式为年XX，月XX，日XX，流水号XX，例如：2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为：10050101。
2.1.5.配制好的培养基应在一定时间内，按说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。
2.1.6.必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。
2.2.培养基质量控制2.2.1.为了保证微生物检验的质量，在使用前，每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。
149培养基配制及适用性检查操作规程
4定义培养基：供微生物生长的人工配制养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及生长素和水等。
应进行培养基的适用性检查。
5程序5.1培养基的制备按处方生产的符合规定的脱水培养基加纯化水进行配制。
5.2 常用培养基的配制5.2.1 营养琼脂培养基5.2.1.1制法：称取脱水培养基粉末32g,加纯化水至1000ml,煮沸，分装于250ml的锥形瓶中，每瓶200ml,用棉塞塞好，用两层牛皮纸包好，121℃灭菌15min，备用。
5.2.1.2用途：供细菌计数微生物限度检查中的细菌数测定。
5.2.2玫瑰红钠琼脂培养基5.2.2.1制法：称取脱水培养基粉末30.5g,加纯化水至1000ml, 煮沸，分装于250ml的锥形瓶中，每瓶200ml,用棉塞塞好，用两层牛皮纸包好，121℃灭菌15min，备用。
5.2.2.2用途：供霉菌、酵母菌检验。
5.2.3 胆盐乳糖培养基5.2.3.1制法：称取脱水培养基粉末35.8g,加纯化水至1000ml, 煮沸，分装于100ml的锥形瓶中，每瓶100ml,用棉塞塞好，用两层牛皮纸包好，121℃灭菌15min，备用。
5.2.3.2用途：供大肠埃希菌检验。
5.2.4 4-甲基伞型酮葡萄糖苷酸（MUG）培养基5.2.4.1制法：称取脱水培养基粉末2.33g,加纯化水至100ml, 煮沸，分装于20ml的试管中，每支5ml,用棉塞塞好，用两层牛皮纸包好，121℃灭菌15min，备用。
5.2.4.2用途：供大肠埃希菌检验5.2.5 乳糖胆盐发酵培养基5.2.5.1制法：称取脱水培养基粉末3.5g,加纯化水至100ml, 煮沸，分装于25ml的试管中，每管10ml，用棉塞塞好，用两层牛皮纸包好，121℃灭菌15min，备用。
5.2.5.2用途：大肠菌群检验5.2.6硫乙醇盐流体培养基5.2.6.1制法：称取脱水培养基粉末29.25g,加纯化水至1000ml, 煮沸，分装于500ml的玻璃瓶中，每瓶300ml,用胶塞塞好，密封压盖。
大肠杆菌培养操作规程
大肠杆菌培养操作规程大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性细菌，广泛存在于土壤、水体、动植物体内等环境中，是一种重要的实验菌株。
在分子生物学和遗传工程的研究中，常用大肠杆菌作为宿主进行DNA重组、蛋白表达等操作。
下面是大肠杆菌培养操作规程，详细介绍了培养基配制、无菌操作和培养条件的要点。
一、培养基配制1.LB培养基配制：-将10g/L的蛋白胨和5g/L的酵母粉加入1000mL的蒸馏水中，搅拌溶解。
-加入5g/L的氯化钠和15g/L的琼脂糖，搅拌均匀。
-调节pH值为7.0，并用蒸馏水补足到1L。
-装入适量培养瓶中，用自吸过滤器过滤杂质后，压紧玻璃瓶盖。
-在121°C高压蒸汽灭菌器中高压下蒸煮30分钟。
-冷至50°C左右后，即可使用。
2.青霉素抗生素的添加：- 使用10mL 的β-内酰胺抗生素青霉素钾盐（100mg/mL）。
-在室温下将药物滴入培养基中。
-搅拌使药物均匀分布于培养基中。
二、无菌操作1.无菌操作区域：-使用无菌柜进行操作，以保证培养物中不受到外界的细菌污染。
-操作前将无菌柜的工作区域用75%酒精喷雾消毒。
2.培养物接种操作：-取一支培养物的试管，用无菌匙蘸取培养物碰触到无菌培养基，轻轻搅拌均匀。
-取一支无菌的移液管，将含有培养物的液体尽量缓慢地加入到培养基中。
-在接种完成后，用无菌铝箔封好培养基表面，以防止进一步的细菌污染。
三、培养条件1.温度与时间：-大肠杆菌在常规情况下在37°C下生长最好。
而对于一些特殊要求的实验，也可在30°C或42°C下培养。
-培养时间根据实验不同而定，通常在12-16小时为一个周期。
2.培养环境：-培养过程中应控制氧气的供应量，通常可以使用摇床培养。
-pH值控制在6.8-7.2之间，以便细菌生长繁殖。
3.培养密度：-通常使用100-1000mL培养基装入培养瓶中，以便细菌有足够的空间进行生长。
-在培养过程中需要适时摇晃培养瓶，以帮助培养物进行氧气和营养物的均匀供应。
62-培养基配制标准操作规程文档
废弃处理等。
范围：本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基职责：QC检验员对本标准的实施负责。
内容:1．操作依据：《中国药典》2010年版二部2、培养基（Media）是指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基（Dehydrated Medium）和配制好的琼脂（Agar）、肉汤（Broths）、稀释液（Diluents）等等。
3.程序3.1.购买3.1.1.质量控制部提出采购计划，并填写《采购计划》，注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等，由相关人员审核，交采购部采购。
3.1.2.培养基买回后，由使用部门填写领料单，由物流部发出。
3.1.3.领回后的干粉培养基，开瓶后应贴上《开启标签》，注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件，并且不得把原标签覆盖。
使用时填写《干粉培养基使用记录》。
3.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制使用记录》，配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
批号定义为：同一批灭菌的培养基为一批，批号编号方式为年XX，月XX，日XX，流水号XX，例如：2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为：10050101。
3.1.5.配制好的培养基应在一定时间内，按说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。
3.1.6.必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。
3.2.培养基质量控制3.2.1.为了保证微生物检验的质量，在使用前，每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。
3.2.2.无菌检查用培养基的适用性检查，包括无菌性检查和灵敏度检查；微生物限度检查用培养基的适用性检查指计数培养基适用性检查；控制菌检查用培养基的适用性检查包括促生长能力检查、抑制能力检查和指示能力检查。
培养基的配制标准操作规程
培养基的配制标准操作规程1.目的选取天然或纯化的营养物质及其相应的渗透压、酸碱度等理化条件，经过加工，制成不同的营养基质，藉以在人工条件下培养供检验用的微生物。
2.适用范围适用于培养基的配制操作。
3.责任者操作员。
4.仪器硅胶塞、试管、平皿、吸管、漏斗、高压锅、三角瓶、天平。
5. 内容5.1 准备5.1.1 玻璃器皿洗涤5.1.1.1 制备培养基所用吸管、试管，三角瓶和平皿等新玻璃器皿，因有灰尘和游离碱性物质，先用水冲洗干净。
然后置3％的盐酸中浸泡约12H。
取出后，用清水冲洗干净，再用纯化水冲洗1～2次，晾干后备用。
5.1.1.2 凡各种装量大而又不宜高压的含糖培养基，所用的玻璃器皿应事先灭菌，以免因一次性低压灭菌不彻底而染菌。
5.1.2 用具包装与灭菌5.1.2.1 硅胶塞：应用水冲洗干净，再以纯化水冲洗1～2次，烘干备用。
5.1.2.2 试管：各种试管最好先配上合适的硅胶塞，待高压灭菌后再分装培养基，可防止污染。
5.1.2.3 平皿：取洗净晾干的平皿，每7 套作一个包装，121℃ 30分钟灭菌后烘干备用；也可用160℃ 2小时干热灭菌后备用。
5.1.2.4 吸管：供染菌限度检验用的吸管，应防止堵塞，故选用红刻度粗下口的。
用前洗净烘干，上口塞进少许普通棉花，松紧适度，以防污染。
然后按其容量大小，分别放在用双层牛皮纸做成的纸袋或者金属盒内，包严经121℃ 30分钟灭菌后烘干备用。
5.2 操作5.2.1 根据用途选择培养基，按其用法进行准确称量和加纯化水，并填写配制记录如名称、配制量、配比、配制日期、配制者。
5.2.2 培养基完全溶解后，进行过滤和分装，液体培养基一般应澄清无沉淀，否则影响观察细菌生长结果。
过滤时可用滤纸或脱脂棉。
5.3 分装5.3.1 各种液体培养基分装试管时，每支应按试管大小及用途不同定量分装，可用吸管或注射器分装，也可用漏斗分装。
一般漏斗下口连接一段橡胶管，管口插一小段玻璃管，再加上一个弹簧夹控制流量，分装时将漏斗放在支架上，内装培养基，然后将下口插入试管中即可按量将培养基逐管分装，注意，不同品种的培养基用过漏斗，应充分洗净后再用，以防两种培养基互相混淆，影响使用效果。
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1.0目的
本规程规范了微生物实验室培养基的配制操作规程。
2.0范围
本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基
3.0职责
微生物检验员对本标准的实施负责，品管部经理负责监督。
4.0内容
4.1培养基定义
指人工配制的生物营养物质，即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基和配制好的琼脂、肉汤、稀释液等等。
4.2培养基制备前准备工作
制备培养基所用的玻璃器皿，如吸管、试管、三角瓶和平皿等，新的玻璃器皿（首次使用）和再次使用的玻璃器皿分别按各自批准的规程洗涤、干燥。
4.3培养基的制备
4.3.1检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制，并填写《培养基配制记录》，
配制记录上注明所用培养基的批号；盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标
签》，标签应注明：名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
4.3.2配制好的培养基依据说明书规定时间进行灭菌，避免微生物滋生。
4.3.3 必要时，灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂
家的规定。
4.3.4倒平板用培养基温度应控制在50度。
4.3.
5.培养基的制备和使用应由专人进行。
4.3.6.培养基的使用尽量做到现配现用，剩余的培养基应放在冰箱中保存。
4.4培养基的保存
4.4.1环境条件：应在洁净的普通冰箱内冷藏保存，温度控制在2-25度。
否则，融化后常
因理化条件改变而不能再用。
4.4.2按时检查培养基的外观，如失水、沉淀、过期等异常情况应及时处理。
4.5培养基配制清单
5.0附件
《培养基配制记录》
《灭菌记录》
6.0修改历史。