新生儿溶血病的实验室检查
新生儿溶血病实验室诊断及换血治疗
疑问
• 母亲D？ • 患儿母亲为弱D， • 误检为D阳性
• 治疗
D抗原分类
• D：常见的D抗原，普通抗-D血清、盐水法即可检出
• 弱D：D抗原数量减少或D抗原部分抗原表位缺失， 需用不同厂家的抗D血清，用盐水法和抗人球蛋白 法确认
• Ddel:需用吸收放散的方法确认
• 增强D
弱D检测
• 人类红细胞血型系统：30种不同的血型抗原 系统，240个以上的血型抗原
•
效价上升且>1:32
• 羊水胆红素测定：
•
妊娠28-30周抽羊水测定胆红素，在450nm处OD >0.15
• B超：胎儿及胎盘有无水肿
新生儿期诊断
• 临床表现：贫血、黄疸、水肿、肝脾肿大、
•
胆红素脑病等
• 外周血检测： • Hb、Ret、Hct、TBIL\DBIL、血型、Rh因子
• 脐血/新生儿血型抗体检测
谢谢 聆听
AB型(Rh+/-)血浆
ABO+Rh溶血 Rh血型同母亲的O型洗涤RBC
AB型(Rh+/-)血浆
* 情况紧急或血源困难时，也可采用ABO血型同患儿的Rh阳性血
HDN换血者用血质量要求
• 供血者两年内所有病原微生物检查阴性 • 要求用CMV（-）血
• 除粒细胞制剂外，所有成分血都应去除白细 胞
病例
Hb(g/L)
119
108
195
TB(mmol/L)
372
314
238
DB(mmol/L)
354
289
232
治疗
• 光疗、白蛋白、丙种球蛋白
• 换血： • O型RhD阴性洗涤红细胞 4U • +AB型RhD阴性冰冻血浆 250ml
[医学]新生儿溶血病及临床用血的选择
![[医学]新生儿溶血病及临床用血的选择](https://img.taocdn.com/s3/m/a5a1fe63a32d7375a41780d0.png)
影响ABO新生儿溶血病发病的因素
IgG抗A（B）抗体量与溶血程度有一定的相关性， 但并非绝对，影响ABO新生儿溶血程度的其他因 素有：
新生儿A、B抗原强弱 血型物质的含量 胎盘的屏障作用 IgG抗体亚型的不同： IgG1， IgG3强
IgG2， IgG4弱
Rh新生儿溶血病
Rh系HDN是由于母婴Rh血型不合所致的Rh免疫 抗体作用于胎儿红细胞造成的高胆红素血症。 此病一般影响第二胎以后的胎儿，而第一胎常常 不受影响
ABO系的HDN比Rh系HDN黄疸轻， 出现也较晚，在出生后第2~5天出现，易 被误诊为生理黄疸。 Rh系HDN黄疸出现 较早，出生后数小时即出现，且逐渐加深
HDN实验室检查
通过血清学检查可了解： 1 母婴血型是否不合。 2 母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应的IgG性质的抗体。 3 患儿红细胞是否被来自母亲的IgG抗体所致血清学检查对新生儿溶血病的诊断有重要意义。
HDN实验室检查
一．对标本的要求：
1．标本采集时机：出生后5天内采集静脉血。 （脐血标本不宜作为检测标本，尤其对ABO新生儿HDN，容
易出现无临床意义的阳性结果。新生儿出生5天以后采集的 血样，检出阳性结果机会减少。） 2. 标本血量的要求：静脉血3ml→干燥管→ 送检。 3. 当怀疑存在ABO以外溶血时（如Rh不合HDN），还应同 时采集母亲血液4~5ml→干燥管。
• 抗I、抗H、抗Lea、Leb、P1等属IgM性质抗体， 不能通过胎盘，故不会产生HDN。
ABO新生儿溶血病
ABO系HDN是由于母婴ABO血型不合，母体的 IgG抗A或抗B经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红 细胞所引起。
此病多见于O型母亲所生的A型或B型婴儿，与O 型母亲含有IgG抗A（B）抗体有关。A（B）型母亲 所生的B、A、（AB）型婴儿仅少数发生溶血病
新生儿溶血病(HDN)的免疫血液学实验
3.与产前HDN检查有关的几个临床问题
妊期抗体突然猛升、猛降 ABO,Rh不合同时存在, ABO不合有”保护”作用, “外祖母” 效应, Rh HDN 可第一胎发病
二.产后检查
#2022
放散试验 热放散
注意:
对临床,三项试验(直抗,游离,放散)只报告结果(阴/阳性),但要按上面格式记录存底 三项试验(直抗,游离,放散)均可用 卡 操做,
中和血清100ul, 加夫红细胞悬液50ul: 作聚凝胺 如果有凝集, 妻中和血清倍比稀释, 加夫红细胞悬液, 作聚凝胺或AHG试验,测IgG ABO 抗体效价
(四) 注意:
夫未来检查, 或夫为AB型, 怎么办? 可用试管法, 也可用 HDN 卡 试验
01
第一章
3.HDN 产前检查不属急诊 4.IgG ABO 抗体太高者,慎报!:
1.ABO HDN
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。您的内容已经简明扼要，字字珠玑，但信息却千丝万缕、错综复杂，需要用更多的文字来表述；但请您尽可能提炼思想的精髓，否则容易造成观者的阅读压力，适得其反。正如我们都希望改变世界，希望给别人带去光明，但更多时候我们只需要播下一颗种子，自然有微风吹拂，雨露滋养。恰如其分地表达观点，往往事半功倍。当您的内容到达这个限度时，或许已经不纯粹作用于演示，极大可能运用于阅读领域；无论是传播观点、知识分享还是汇报工作，内容的详尽固然重要，但请一定注意信息框架的清晰，这样才能使内容层次分明，页面简洁易读。如果您的内容确实非常重要又难以精简，也请使用分段处理，对内容进行简单的梳理和提炼，这样会使逻辑框架相对清晰。
五.临床特点
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新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程
HDN换血治疗中血液及血型选择标准
❖ 二、ABO、Rh（D）血型鉴定
❖⒈ 选用经国家批准且批批检测合格的 单克隆抗-A、抗-B、抗-D(IgM)和A、B 型标准试剂红细胞。
❖⒉ ABO血型鉴定：母亲血样做正反定型； 患儿血样只做正定型。推荐使用试管法 和微柱凝胶血型卡，不推荐使用纸片或 玻片法。
HDN换血治疗中血液及血型选择标准
HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ （1）第一次检测，一般可在妊娠第1216周进行，以此作为抗体基础水平。如 果检测到ABO以外抗体，或高效价的IgG 抗A（B）抗体，建议每月复查一次。
❖ （2）第二次检测在妊娠28-30周做，以 后每隔2-4周重复测定一次，了解抗体 增加速度。抗体效价上升快，提示HDN 的可能性大。
❖ 二、证实患儿血清中是否有来自于 母亲的抗体；
❖ 三、患儿红细胞是否被来自母亲的 免疫性抗体所致敏。
HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ 一、标本要求 ❖ ⒈ 采样时间建议： ❖ （1）可疑ABO不合HDN患儿血清学
检查最好在出生后1-7天之内； ❖ （2）可疑Rh等其他血型系统血型
不合应在出生后尽早为好。
❖ 二、试剂与设备（查看Word文件） ❖ 三、检测方法 ❖ ⒈ 产妇血样检测： ❖ 同《HDN产前免疫血液学试验》孕妇血
样检测条目。 ❖ ⒉ 患儿血样检测： ❖ （1）红细胞：ABO正定型、RhD血型
HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖ 说明：新生儿ABO定型，多数专家 认为反定型没有意义。
❖ （2）红细胞直接抗人球蛋白试验 （DAT）：
国内外进展 ❖⒉ 研讨：
（1）研讨内容： ① 样本采集 ② 实验项目及操作 ③ 结果判定或解释
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程1、目的：规范血液免疫学产前检查操作，确保试验过程及结果的准确性与可靠性。
2、范围：本规程适用于实验室血液免疫学产前检查试验操作。
3、职责：经授权的血型实验室试验人员负责血液免疫学产前检查试验过程及报告的发出。
4、原理孕妇和丈夫ABO血型不合（O/A、O/B、O/AB、A/B、A/AB、B/A、B/AB）时，孕妇体内的IgG抗A（B）可能会引起新生儿溶血病的发生。
本试验通过检测孕妇血清中有无IgG性质的抗A（B）抗体及其效价（应用巯基试剂破坏IgM抗体，检测IgG抗体效价）即可预测ABO系HDN发生的可能性。
应用筛选红细胞可检测孕妇血清中是否存在不规则抗体，如果存在，应用谱细胞进行抗体鉴定，确定抗体的特异性，进一步检测非ABO系新生儿溶血病。
5、所需设备、材料或试剂：37℃恒温水浴箱、细胞洗涤离心机、抗-A抗-B血型定型试剂（单克隆抗体）、抗-D RH血型定型试剂（单克隆抗体）、凝聚胺介质试剂、抗人球蛋白试剂（抗-IgG、C3d）、（A、B、O）型标准红细胞悬液（2—5%）、商品化筛选细胞、谱细胞、2—ME试剂、12×75mm试管、塑料滴管。
6、检测环境条件：温度：18—25℃；湿度：30—70%7、标本要求7.1标本接收在接收标本时，应尽可能的了解、核对、记录患者的相关资料，包括受血者姓名、年龄、性别、临床诊断、输血史、用药史、妊娠史、标本编码等；7.2检验人员收到被检者产前检查申请按照申请单内容在试管上做标记(用记号笔在试管上标明被检者姓名、性别)，保留申请记录。
7.3按照要求进行血液采集。
将采好的血液沿试管壁注入已标识的抗凝试管中，反复颠倒混匀，放入2-8℃冰箱待用。
并填写《外来标本交接记录》及相关记录。
7.4标本的种类与数量：产前检查需送夫妇血样，血样均需抗凝（EDTA抗凝），女（母）5ml，男3ml。
7.5标本的保存与处理：完成所有试验内容后，要仔细核对实验结果，发出实验报告后，将实验所用的标本原始送检管存于2-8℃冰箱内至少7天以便进行查找和核对，之后交由单位相关部门统一处理。
新生儿溶血的诊断标准
新生儿溶血的诊断标准新生儿溶血的诊断标准主要包括以下几个方面：1. 症状诊断：如果新生儿出现贫血、黄疸、肝脾肿大等症状，应考虑新生儿溶血的可能性。
特别是当母亲是O型血，父亲是AB型血，或者母亲是Rh阴性血（熊猫血），父亲是Rh阳性血时，更应考虑新生儿ABO溶血或Rh 溶血的可能。
2. 血型检查：如果母子血型不合，可能存在新生儿溶血。
例如，母亲是O型血，父亲是AB型血，新生儿是A型或B型血，就可能发生ABO溶血。
3. 实验室检查：实验室检查包括改良Coombs试验和抗体释放试验等。
如果这些试验中有一项阳性，即可确诊新生儿溶血。
同时，血常规检查也可能发现白细胞偏高或正常，血红蛋白偏低，肝功明显升高，网织红细胞升高，以及抗人球蛋白试验阳性等表现。
4. 产前诊断：对于既往有不明原因死胎、流产、新生儿中毒黄疸史的孕妇及其丈夫，应进行ABO、Rh血型检查，不合者进行孕妇血清中IgG抗A或抗B检测。
如果孕妇血清中IgG抗A或抗B>1:64，提示有可能发生ABO溶血病。
Rh阴性孕妇在妊娠16周时应检测血中Rh血型抗体做为基础值，以后每2-4周检测一次，当抗体效价上升时，提示可能发生Rh溶血病。
5. 其他症状：新生儿溶血病还可能导致胎儿水肿，主要发生在Rh溶血病中。
在胎儿期有大量红细胞破坏，患儿全身水肿、苍白、皮肤瘀斑、胸腔积液、腹水、心音低、心率快、呼吸困难、肝脾肿大。
胎盘也明显水肿，胎盘重量与新生儿体重之比可达1∶(3～4)，严重者可发生死胎。
综上所述，新生儿溶血的诊断需要综合考虑临床症状、血型检查和实验室检查结果。
如有疑虑，请及时就医咨询专业医生。
新生儿溶血病 (2)
2、新生儿ABO及Rh血型鉴定:试管法。
（1）取试管4支，分别注明抗A、抗B、抗 A,B和抗D;
（2）分别加入抗体试剂，1滴;
（3）每支试管加入患儿5%红细胞悬液1滴;
（4）3400rpm离心15s，轻轻摇动试管观 察结果。
3、直接抗球蛋白试验: 阳性对照：IgG抗D致敏的O型红细胞悬液 阴性对照：正常人O型红细胞悬液
50μl
25μl
3
50μl
25μl
37℃孵育15min，以1030rpm离心10min。观 察结果。
ABO-HDN游离试验结果判断
Ac Bc Oc +- - ++++/- +/- + -- -
意义 存在游离的抗A抗体 存在游离的抗B抗体 存在游离的抗A、抗B抗体或抗A,B抗体 存在游离的ABO血型系统以外抗体 没有游离抗体
新生儿溶血病检测的结果判断
直抗试验 游离试验 释放试验
-
-
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+
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+
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+
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+
+
结论 不能证实为由血型抗体引
起的新生儿溶血病 可疑为新生儿溶血病 可疑为新生儿溶血病 证实为ABO新生儿溶血病 证实为ABO新生儿溶血病 证实为ABO新生儿溶血病 证实为ABO新生儿溶血病 证实为ABO新生儿溶血病
4. 释放试验的特点是敏感度高，由于释放试 验制备的抗体比直接抗球蛋白试验参与的 抗体量多2个数量级，因此有较高的敏感度， 是三项试验中敏感度最高的试验，因此该 试验阳性是判断新生儿溶血病最有利的证 据。
336例新生儿溶血三项试验检测结果分析
336例新生儿溶血三项试验检测结果分析摘要】目的：了解高胆红素血症患儿的新生儿溶血病（HDN）发病情况。
分析常备溶血三项试验诊断HDN的临床价值。
方法：对2013年1月～2014年6月我院新生儿科收治的336例疑似HDN患儿的临床资料进行回顾性分析。
结果：抗体释放试验诊断HDN百分率为70.08%，直接抗人球蛋白试验为23.51%，游离抗体试验为47.92%。
直接抗人球蛋白试验和游离抗体试验诊断HDN敏感性仅为29.73%和61.39%，易漏诊。
0～2dHDN检出率为79.54%，3～5d为16.22%。
A型血患儿发生HDN百分率为82.86%，B型血患儿为70.81%，二者差异显著（P<0.05）。
结论：与抗体释放试验诊断HDN相比，直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验有漏诊风险。
抗体释放试验是诊断HDN主要依据。
临床对有症状或怀疑HDN患儿应在出生48h内进行检测。
【关键词】新生儿溶血病；溶血三项试验【中图分类号】R72 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）04-0117-01新生儿溶血病（HDN）并发黄疸较轻时与生理性黄疸相似。
实验室溶血三项试验（直接抗人球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验）检测是区分HDN与生理性黄疸的重要手段，其中抗体释放试验可用于HDN的确诊[1]。
为进一步了解我院高胆红素患儿HDN发病率及溶血三项试验诊断HDN的临床价值，本研究回顾性分析了336例疑似患HDN的高胆红素患儿的溶血三项试验结果并对其进行分析，现报道如下。
1.资料与方法1.1 一般资料2013年1月～2014年6月我院新生儿科母婴血型不同且患高胆红素血症、疑似HDN患儿336例，年龄1～29d，男 158例，女 178例，其母亲血型均为O 型。
患儿出生天数0～2d、3～5d、6～9d、>10d的人数分别为248例（73.81%）、73例（21.72%）、5例（1.49%）和10例（2.98%）。
新生儿溶血
可以证实为 ABO 新生儿溶血病 可以证实为 ABO 新生儿溶血病 可以证实为 ABO 新生儿溶血病 可以证实为 ABO 新生儿溶血病
检测母亲体内的抗体，进一步确定新生儿溶 血的原因。
检测患儿体内的抗体，是为了判断新生儿溶 血的程度，为临床治疗提供依据。
同时，也可能存在ABO合并其他不规则 抗体而导致的新生儿溶血病。
光照疗法：蓝光能加速非结合胆红素分解为无毒无 色的水溶性双吡咯物质，经胆汁和尿很快排出。蓝 光照射是降黄的有力措施，能减少换血的次数，但 不能替代换血，应定时检查胆红素。
药物治疗：主要药物为苯巴比妥。可诱导肝细胞的 酶系统活性，增加结合以及摄取和排泄胆红素的能 力，也可用尼可刹米或二者联用。
2.按标记各管分别加入2%～5%（A、B、O）指示 红细胞1滴，混匀，置于37℃水浴箱中孵育（致敏） 1h后，肉眼观察各管有否凝集，如某管出现凝集， 说明该管有相应盐水抗体，不必继续下面试验；
3.取上述不凝集管，各管用生理盐水洗涤3次（洗涤 方法同婴儿标本处理），吸尽盐水，各管加多特异 性抗球蛋白试剂2滴，混匀，以1000×g离心15s， 肉眼观察结果。
婴儿红细胞抗体释放试验（乙醚放散）：
1.取洗涤后婴儿压积红细胞12ml于试管中，加等量生理盐水和双 份乙醚，用玻璃纸封口，颠倒混合10min因乙醚沸点低，其间注 意放气动作轻柔。
2.待红细胞全部破坏后，打开封口； 3.以2000×g离心5min，离心后分为三层，取下层深红色层液体
放散液转移入另一试管中； 4.将其置于37℃水浴箱孵育30min，让乙醚充分挥发； 5.取12支试管，编号同谱红细胞，第12管编为自身。均匀加入放
3.各管加入多特异性抗球蛋白试剂2滴，混匀， 1000×g离心15s;
新生儿溶血病设计
新生儿溶血病(HDN)实验室检查一、父母及新生儿血型鉴定目的：研究父母、新生儿血型与新生儿溶血病的关系原理：用已知的IgM类特异抗体与受检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，根据红细胞是否出现凝集来测定受检者细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定受检者的血型。
器材：小试管、记号笔、试管架、离心机、玻片、显微镜试剂：标准抗A、抗B血清、单克隆IgM型RhD抗血清（商品试剂）生理盐水标本：抗凝静脉血或末梢血实验步骤：制备受检者5%红细胞生理盐水悬液：抗凝血离心或红细胞自然沉降后取管底下层的红细胞大约10滴于小试管中，加入生理盐水2ml，充分混匀红细胞与生理盐水。
2500r/min离心3min后弃上清液，重复洗涤3次。
自管底吸取1滴压积红细胞加入19滴生理盐水混匀，此即为5%的红细胞生理盐水悬液。
1、玻片法（1）取洁净的玻片1块，用记号笔画出小格，标明A、B、D（2）在玻片已标记的区域内滴加抗A、抗B血清、RhD抗血清各1滴（3）在滴加抗血清的小格中分别加入受检者5%红细胞生理盐水各1滴；不断轻轻转动玻片，使抗血清与红细胞充分混匀，持续约1~5min（4）观察并判断结果肉眼观察有无凝集或溶血反应，再用低倍镜观察，判断阴性、阳性和阳性强度。
2、试管法（1）取小试管3支，分别标记A、B、D（2）分别滴加抗A、抗B血清、RhD抗血清于相应标记的试管中（3）分别滴加受检者5%红细胞生理盐水悬液1滴于试管中，混匀（4）以1000r/min离心1min（5）观察并判断结果取出试管，先观察上层清液有无溶血现象，再将试管轻轻摇动使沉于管底的红细胞浮起，肉眼观察有无凝集及凝集强度。
注意事项：1、器材：所用器材必须干燥洁净、防止溶血；为避免交叉污染，试管、尖滴管均一次性使用。
2、试剂：分型血清质量性能应符合合格实际要求。
3、标本：受检红细胞标本新鲜，无细菌污染。
4、标准抗血清从冰箱取出待其平衡致室温后在使用，用毕后应尽快放回冰箱保存，减少细菌污染。
【2018最新】溶血反应实验报告word版本 (7页)
本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==溶血反应实验报告篇一：溶血实验溶血性实验实验目的：通过本实验认识溶血现象，并掌握溶血性实验常规的体外试管法的基本操作实验原理：溶血是指红细胞破裂、溶解的一种现象。
药物制剂引起的溶血反应包括免疫性溶血与非免疫性溶血。
免疫性溶血是药物通过免疫反应产生抗体而引起的溶血，为II型和III型变态反应；非免疫性溶血包括药物为诱发因素导致的氧化性溶血和药物制剂引起的血液稳定性改变而出现的溶血和红细胞凝聚等。
溶血实验室观察受试物是否会引起溶血和红细胞聚集等反应。
有些药物由于含有溶血性成分或物理、化学、生物等方面的原因，在直接注射入血管后可产生溶血现象；有些药物注入血管后可产生血细胞凝聚，引起血液循环功能的障碍等。
有些中草药含有皂苷等成分，具有溶血作用。
凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血的药物制剂，均应进行溶血性实验。
实验方法1. 2%红细胞悬液的制备取新鲜鼠血10 ~ 20ml，放入盛有玻璃珠的三角烧瓶中振摇10分钟，或用玻璃棒搅动血液，除去纤维蛋白质，使成脱纤血液。
加入生理盐水100ml，摇匀，1000~1500r/min离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水按上述方法洗涤2~3次，至上清液不显红色为止。
将所得红细胞用生理盐水配成2%的混悬液(红细胞2ml，加生理盐水至100ml)，供试验用。
2. 取10ml干净玻璃试管7支，编号，1至5号管为供试品，6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管(完全溶血对照)。
按表1所示，依次加入2%红细胞悬液。
0。
9%氯化钠溶液或蒸馏水，混匀后，立即置(37±0。
5)℃的恒温水浴中进行温育，观察并记录各管的溶血情况。
开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，一般观察3小时。
表1 溶血实验设计表表2 溶血试验结果判断标准全溶血溶液澄明，红色，管底无红细胞残留部分溶血溶液澄明，，红色或棕色，底部有少量红细胞残留;镜检红细胞稀少或变形不溶血红细胞全部下沉，上清液体无色澄明;镜检红细胞不凝聚红细胞凝聚溶液中有棕红色或红棕色絮状沉淀，振摇后不分散当阴性对照管无溶血和凝聚发生，阳性对照管有溶血发生时，若受试物管中的溶液在3小时内不发生溶血和凝聚，则受试物可以注射使用，若受试物中的溶液在3小时内发生溶血或聚集，则受试物不能注射使用。
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程1、目的为规范输血科HDN血型血清实验诊断的技术操作，确保检测结果准确，明确HDN诊断及其原因，依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科对HDN进行血型血清学实验诊断及其实验操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理4.1试验方法：微柱凝胶卡式法4.2原理：本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。
当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集。
离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应，未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。
5、样本采集和处理取患儿不抗凝血1-2ml及EDTA-K2抗凝血3〜4ml,24小时内送检。
将不抗凝血离心分离出血清备用。
6、试剂：5.10.9%的生理盐水；5.2戴安娜合血卡；5.3血清抗A（市售）、抗B（市售）、抗A+B（健康O型人血清）、抗D标准血清；5.45%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液；5.5长春博迅公司的血型定型试剂卡；7、仪器：1）XTL-4.7细胞洗涤离心机；2）DiaMed-IDIncubator37SI温育器；3）DiaMed-IDCentrifuge12SII7.5操作程序：7.5.1婴儿及母亲ABO血型鉴定是检查第一步，以便考虑以后进一步检查程序。
7.5.2如母子ABO不合（母。
子A、B,母A子B、AB,母B子A、AB）则按下列步骤进行患儿血液三项试验：⑴直接抗人球蛋白试验（DAT）（微柱凝胶卡式法）1）取患儿不抗凝血离心后，用0.9%的生理盐水配成0.8%的红细胞悬液。
2）在戴安娜LISS/Coombs卡上标明患儿的姓名或编号，撕开卡上的铝箔，加入配好的患儿红细胞悬液50口1。
3）将卡放入戴安娜离心机离心10分钟后判读结果。
4）结果观察：5）阳性：红细胞凝集，在凝胶柱中或表面形成红线。
新生儿溶血三项试验检查及相关临床分析
新生儿溶血三项试验检查及相关临床分析摘要】目的：了解新生儿溶血病(HDN)发病情况、分析溶血三项检测试验的重要性。
方法：对2012年4月~2013年8月广西区妇幼保健院448例母婴血型不合、高疸血症病例的临床资料进行回顾性分析。
结果： 448例患儿中排除HDN6例，确诊ABO-HDN392例，可疑56例，总阳性率875%，不同试验阳性率比较有显著差异(P<o．05),不同日龄患儿组间阳性率有显著差异(P<001)。
结论：溶血三项试验是新生儿溶血病的可靠诊断依据。
ABO-HDN在出生后0一2 d组高发于其他组别，且随着时间的延长其检出率逐渐降低。
【关键词】ABO 血型不合；新生儿溶血病；溶血三项试验【中图分类号】［R5566+3］【文献标识码】B【文章编号】1674-8999(2013)08-0258-01新生儿溶血病（HDN）［1］是由于母婴血型不合，母亲体内产生的 IgG 血型免疫抗体通过胎盘进入胎儿体内，使胎儿红细胞破坏。
临床上以ABO-HDN较为多见，血型血清学检查能为新生儿溶血病患儿的换血和治疗提供依据，现就对本院448 例新生儿黄疸患儿进行了溶血三项检测现报告如下。
1资料与方法11一般资料：2012年4月~2013年8月本院新生儿母婴血型不合、高胆血症患儿448 例，日龄0~41d，男 226 例，女222例；O-A型194例，O-B型228例，O-O型6例。
1 2 试剂与仪器：抗－A、抗-B、抗－D血清试剂、ABO标准红细胞由上海血液生物医药有限公司提供；微柱凝胶卡、DiaCidel 放散试剂、37℃孵育器、卡式离心机均为DiaMed公司生产。
13方法：标本进行ABO和Rh血型鉴定及溶血三项试验，具体操作参照文献［2］。
HDN的检验诊断标准：母婴血型不合，新生儿血浆和(或)红细胞放散液中检出了可致敏新生儿红细胞的血型抗体者可诊断为HDN，以抗体放散试验为最终诊断标准。
14统计学分析： PEMS31软件进行分析，P＜001有统计学意义。
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程(一)检验目的检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。
(二)检验原理新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。
新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。
(三)适用范围适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。
(四)设备性能参数参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书。
(五)器材与试剂1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。
2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。
(六)标本要求1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。
2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。
新生儿abo溶血症
新生儿ABO溶血症ABO溶血病的*些轻型病例，可能早期病症不重，但到生后2～6周发生晚期贫血，或到生后8～12周"生理性贫血〞时期贫血表现得特别严重，这是因为抗体持续存在，发生慢性溶血所致。
血型抗体可使红细胞寿命缩短。
据报道，这类小儿红细胞的寿命仅35天左右，每天血红蛋白下降值约为同期正常小儿的4倍，红细胞破坏增加，而这时骨髓造血功能生理性低下，不能有效地代偿，终致发生新生儿晚期贫血(neonatal late anemia)。
2.生后诊断(1)临床表现：观察新生儿有无贫血、水肿、黄疸和肝脾大等溶血病症，假设有应考虑新生儿溶血病。
(2)实验室检查：对于出生时有水肿、贫血、出生后24h内出现黄疸及母亲为Rh阴性的新生儿应考虑新生儿溶血病，需做血常规、母婴血型、血清胆红素和Coombs试验。
新生儿ABO溶血病应该做哪些检查？1.血液学检查红细胞及血红蛋白多数在正常范围，血红蛋白在100g/L 以下者仅占5%左右，网织红细胞常增多，重型病例有核红细胞可达10%以上。
红细胞形态特点是出现球形红细胞，而且红细胞盐水渗透脆性和自溶性都增加。
2.血清学检查(1)胆红素测定：由于ABO溶血病的程度差异较大，故血清胆红素增高的程度也不一致，血清总胆红素超过342"mol/L(20mg/dl)以上约占1/4。
总之，ABO溶血病的黄疸程度较轻。
有人统计86例AO溶血病新生儿胆红素值，其平均值为(131.7±83.8)"mol/L[(7.7±4.9)mg/dl];BO溶血病新生儿66例，其平均胆红素值为(126.5±71.8)"mol/L[(7.4±4.2)mg/dl]。
在血清胆红素中，以未结合胆红素增高为主。
(2)抗体测定：在新生儿红细胞或血清中查出对抗其自身红细胞的血型抗体，是诊断ABO溶血病的主要实验根据。
一般进展3种试验：第一是改良Coombs试验，这是用"最适稀释度〞的抗人球蛋白的血清查出附着在患儿红细胞上的抗体;第二是抗体释放试验，这是用加热的方法，使患儿红细胞上的抗体释放出来，再检查释放液中的抗体。
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精品文档在我国诊断新生儿溶血病的实验室检查主要是三项试验（直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、放散试验），
直接抗球蛋白试验主要检测新生儿红细胞是否被来自母亲IgG抗A（B）所致敏；游离抗体试验是患儿血清的IgG抗A（B）来自母亲，如果新生儿血清中发现与其红细胞不配合的IgG抗A(B)时，表明婴儿体内有抗体，可能受害；
放散试验采用的是试管抗球蛋白技术和微柱凝胶技术，
用放散液与标准ABO型红细胞反应，（与O型红细胞反应视做阴性对照）均无凝集者，表明未查出抗体，
A型新生儿红细胞放散液只与标准A型红细胞凝集，表明放散液检出抗-A，而B 型新生儿红细胞放散液只与标准B型红细胞凝集，表明放散液检出抗-B，
而A型新生儿红细胞放散液与标准B型红细胞凝集或B型新生儿红细胞放散液与标准A型红细胞凝集,表明放散液中检出抗-A，B。
我们采用微柱凝胶技术对我院541例母婴血型不合且有严重的新生儿黄疸或高胆红素血症患儿的血标本进行了三项试验，结果表明：ABO母婴血型不合新生儿溶血病（HDN）171例，其中OA115例，OB56例。
ABO溶血病因红细胞的抗体结合较少，直接抗球蛋白试验常为阴性或弱阳性，血清游离抗体阳性，抗体释放试验阳性。
Rh溶血病直接抗球蛋白试验强阳性，游离抗体强阳性，抗体释放试验强阳性。
我院新生儿科对溶血严重的患儿及时进行了换血治疗（ABO溶血采用O型洗涤红细胞+AB 血浆的血液，Rh溶血采用ABO血型同患儿，Rh血型同母亲的血液）微柱凝胶技术用于新生儿溶血病的检测，方法简便、快速、判断结果标准，可成为医院实验室常规检测方法。
实验室能为临床快速准确提供试验报告，有利于患儿的早期诊断、早期治疗，对提高新生儿健康水平有很重要的意义。
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