小儿咳喘灵口服液质量标准研究

研究内容
鉴别试验 采用薄层色谱法定性鉴别麻黄、紫菀和细辛
含量测定 采用高效液相色谱法测定口服液中盐酸麻黄 碱、盐酸伪麻黄碱、细心脂素和款冬酮含量
鉴别实验
1. 麻黄TLC法鉴别
薄层板：硅胶G预制板（10 cm×20 cm）； 展开剂：三氯甲烷-甲醇-浓氨试液（20:5:0.5）,氨试液预饱
和层析缸； 点样量：10 μL ； 显色条件：茚三酮试液105℃ 加热。
测得量(mg) 0.133 0.134 0.136 0.148 0.146 0.147 0.161 0.163 0.165
回收率（%） 97.24 98.02 102.78 99.45 96.52 97.86 98.29 99.89 100.39
平均回收率（%） 98.94
盐酸伪麻黄碱平均加样回收率为98.94%。
图3 细辛薄层色谱（1-6依次为：依次为：1-溶剂，2-细 辛对照药材，3-口服液阴性，4，5，6-三批样品）
定量实验
A. 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱
色谱条件： 色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18（4.6×250 mm，5
μm）；乙腈-0.1%磷酸（三乙胺调pH到2.8）=3:97( v/v ) 为流动相；流速为1.0 mL/min；检测波长：207 nm；柱 温为30 ℃；进样量为20 μL。
2258603
4
0.0255
1074791
5
0.0051
255020
以盐酸麻黄碱浓度(mg/mL)（X）为横坐标，峰面积积分值（Y）为纵 坐标，制备标准曲线，得回归方程Y=43124999.84x + 52875.81（r=0.9996） ，表明盐酸麻黄碱浓度在 0.0051~0.204 mg/mL之间与峰面积呈良好的线性 关系。
平均回收率（%） 98.38
盐酸麻黄碱平均加样回收率为98.38%。
定量实验
5. 加样回收率实验
表4 盐酸伪麻黄碱的加样回收率（n=9）（批号140612）
已知量(mg) 0.075
加入量(mg) 0.060 0.060 0.060 0.075 0.075 0.075 0.090 0.090 0.090
定量实验
1 2
1 2
图4 盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱对照品（A）、供试品 （B）、和阴性对照（C）的HPLC图谱（1-盐酸麻黄碱，2-盐酸 伪麻黄碱）
定量实验
1. 线性关系考察 表1 盐酸麻黄碱线性考察结果
序号
浓度（mg/mL）
峰面积
1
0.204
8778319
2
0.102
4612896
3
0.051
定量实验
1. 线性关系考察
表2 盐酸伪麻黄碱线性考察结果
序号
浓度（mg/mL）
峰面积
1
0.128
5491704
2
0.064
2907200
3
0.032
1440578
4
0.016
706733
5
0.0032
145738
以盐酸麻黄碱浓度(mg/mL)（X）为横坐标，峰面积积分值（Y）为纵 坐标，制备标准曲线，得回归方程Y= 42934840.27x +50039.97 (r=0.9995)， 表明盐酸麻黄碱浓度在 0.0032 ~ 0.128 mg/mL之间与峰面积呈良好的线性关 系。
薄层板：硅胶G预制板（10 cm×20 cm）； 展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（20:10:1:1），展开剂
预饱和层析缸； 点样量：20 μL ； 显色条件：365 nm紫外光显荧光。
鉴别实验
结果：供试品色谱中，在 与对照药材相应位置上， 显2个以上相同颜色的斑 点；阴性对照液无此斑点， 见图2。
以德载医 博学创新 小儿咳喘灵口服液质量标准研究
研究内容
小儿咳喘是一种免疫性炎症，它的临床表现为气急、咳嗽、 咯痰、呼吸困难、肺内可听到哮鸣音，尤其是呼气时哮鸣 音更加明显。临床多用平喘药缓解症状，或自行缓解。小 儿咳喘灵口服液在治疗小儿咳喘方面，疗效较好。但目前 尚无严格的质量标准。
本课题采用薄层色谱法对处方中主要的成分进行鉴别分析， 采用高效液相色谱法对主要成分进行含量测定，为其质量 标准提供依据。
加入量(mg) 0.190 0.190 0.190 0.235 0.235 0.235 0.280 0.280 0.280
测得量(mg) 0.424 0.422 0.417 0.466 0.469 0.466 0.511 0.506 0.514
回收率（%） 99.52 98.65 95.86 98.40 99.59 98.28 98.53 96.96 99.65
点样量：10 μL ； 显色条件：365 nm紫外光显荧光。
鉴别实验
结果：供试品色谱中，在 与对照药材相应位置上， 显3个相同颜色的斑点； 阴性对照液无此斑点，见 图2。
图2 紫菀薄层色谱（1-6依次为：1-溶剂，2-紫菀对照药 材，3-口服液阴性，4，5，6-三批样品）
鉴别实验
3. 细辛TLC法鉴别
鉴别实验
结果：供试品色谱中，在 与对照药材相应位置上， 显2个相同颜色的斑点； 阴性对照液无此斑点，见 图1。
图1 麻黄薄层色谱（1-7依次为：1-溶剂， 2-盐酸麻黄碱 对照品，3-麻黄对照药材，4-口服液阴性，5，6，7-样品）
鉴别实验
2. 紫菀TLC法鉴别
薄层板：硅胶G预制板（10 cm×20 cm）； 展开剂：氯仿-甲醇-甲酸(40:4:1)，氨试液预饱和层析缸；
4. 稳定性实验
取同一批样品，分别在0，2，4，6，8，10,12，16，20，24 h 进样。结果显示盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱峰面积的RSD分别为 1.98% 和2.53% ，表明样品在24 实验
表3 盐酸麻黄碱的加样回收率（n=9）（批号140612）
已知量(mg) 0.235
定量实验
2. 精密度实验
精密吸取各对照品液20 μL溶液，在上述色谱条件下重复进样6 次；结果显示盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱峰面积RSD分别为1.66%和 1.77%，表明精密度良好。
3. 重复性实验
取同一批样品5份，连续进样，记录峰面积，按回归方程分别 计算其含量；结果显示盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱浓度RSD分别为 0.91%和2.41%，表明样品重复性良好
定量实验
6. 含量测定