抗链球菌溶血素O(ASO)测试：原理,步骤,解释和临床意义

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什么是抗链球菌溶血素O（ASO）？
抗链球菌溶血素O（ASO或ASLO）是针对链球菌溶血素O产生的抗体，链球菌溶血素O 是由A组的大多数菌株以及C和G 组的许多菌株产生的一种免疫原性，氧不稳定的溶血毒素。

在链球菌感染的过程中，细菌的细胞外产物充当抗原，机体通过产生特异性抗体对抗原作出反应。

链球菌溶血素O（SLO）是几乎所有化脓性链球菌菌株产生的两种溶血素之一（另一种是链球菌溶血素 S）。

字母“ O”表示该毒素对氧气不稳定。

SLO毒素对心脏组织有直接的毒性作用。

在链球菌感染的过程中，SLO刺激特异性抗链球菌溶血素（ASO）抗体的产生，该抗体可在体外中和抗原的溶血特性。

ASO检测的临床意义
大于166 Todd单位（或> 200 IU）的抗链球菌溶血素滴度在成人中被认为是阳性测试，而成人的正常值小于166 Todd单位，这表明是阴性测试。

在研究链球菌后疾病，特别是急性链球菌后肾小球肾炎和风湿热中，ASO抗体滴度的测量很重要。

•超过80％的急性风湿热患者和95％的急性肾小球肾炎患者的ASO滴度升高。

•抗体水平在链球菌感染后的1-3周开始上升，在3-5周达到峰值，然后在6-12个月后又回落到微不足道的水平，因此阳性试验可以表明目前的，但最近的A，C，和G链球菌感染。

ASO测试
ASO测试通过血清学方法如乳胶凝集或载玻片凝集进行。

可以进行ELISA以检测确切的滴度值。

此处介绍的测试原理，步骤和解释均基于乳胶抗链球菌溶血素O（ASO）测试。

测试原理
ASO乳胶凝集是一种快速，简单的测试，用于定性和半定量测量人血清中抗链球菌溶血素-O抗体。

该方法基于与生物学惰性乳胶颗粒结合的链球菌外切酶与测试样品中的链球菌抗体之间的免疫反应。

已对试剂进行了调整，以使血清中存在200 IU / mL或更高的ASO滴度可以使胶乳颗粒明显凝集。

定性测试（筛选）
程序：
1.将所有试剂和标本置于室温。

2.将一滴（50微升）阳性对照和50微升患者血清放入载玻片上的不同圆圈中。

3.轻轻摇动ASO乳胶试剂，并在要测试和控制的样品旁边的每个圆圈上加一滴（45
µl）。

4.使用一次性搅拌器充分混合，将混合物铺展在整个测试区域，并轻轻倾斜载玻片。

用旋转器或用手搅拌约2分钟，并观察是否存在凝集。

结果与解释：
•阴性结果：
乳胶颗粒悬浮液在两分钟内没有凝集。

•阳性结果：
乳胶颗粒悬浮液会在两分钟内发生凝集，表明ASO含量超过200 IU / ml。

半定量检验
程序：
1.将待滴定的血清在0.9 g / L盐溶液中依次稀释（1：2、1：4、1：8等）。

2.在幻灯片上放一滴阳性对照。

出于比较或其他目的，请勿尝试稀释ASO阳性对照血
清，因为对照的实际滴度与未知血清的滴度之间不存在相关性。

3.将50 ml每种血清稀释液分别放在幻灯片上的连续圆圈中，并按照筛选方法进行。

结果与解释：
血清ASO滴度可以定义为显示阳性结果的最高稀释度。

样品中存在的大约ASO水平（IU / ml）可通过以下公式获得：
•ASO滴定度（IU / ml）=阳性反应最高稀释度x试剂灵敏度（200 IU / ml）
例如，如果凝集度达到滴度为1：4，则血清ASO的近似水平为4 x 200 = 800 IU / ml
测试的局限性
1.高度溶血和脂血的血清以及血浆会干扰测试。

2.在ASO抗体测试中偶尔会引起阳性反应（通常小于500 IU / ml）的非链球菌病包括
类风湿性关节炎，肺结核，肺炎球菌性肺炎，淋病和肝炎。

3.由于链球菌溶血素只是几种链球菌A型外切酶中的一种，因此ASO测试不会检测
到其他针对链球菌A型外切酶的抗体。