实验动物质量控制by sunhui

3．隔离环境(isolation environment)：采用无菌隔离装置以保持 装置内无菌状态或无外来污染物。隔离装置内的空气、饲料、 水、垫料和设备应无菌，动物和物料的动态传递须经特殊的传 递系统，该系统既能保证与环境的绝对隔离，又能满足转运动 物、物品时保持内环境一致。适用于饲育无特定病原体（SPF ）、悉生（gnotobiotic）及无菌(germ free)实验动物。 特点： 隔离装置内的空气、饲料、水、垫料和设备均为无菌， 动物和物料的动态传递须经特殊的传递系统，该系统既能保 证与环境的绝对隔离，又能满足转运动物时保持内环境一致。 工作人员只能通过附于隔离装置上的橡胶手套，对隔离装置 内的实验动物进行饲养和实验操作，而不能直接接触实验动物。 洁净度达5级或无菌。
实验动物环境分类
环境分类
普通环境 正压
使用功能
实验动物生产， 动物实验，检疫 实验动物生产， 动物实验，检疫 动物实验，检疫 实验动物生产， 动物实验，检疫 动物实验，检疫
适用动物等级
普通级实验动物 清洁动物 SPF动物 清洁动物 SPF动物 无菌动物、 SPF动物、 悉生动物 无菌动物、 SPF动物、 悉生动物
P是俄文；BSL是英文，加动物称为ABSL
二、实验动物遗传学质量控制
实验动物遗传学分类
一般近交系
近交系动物 同基因型动物 重组近交系
突变
同源近交系 导入 杂交群动物（F1）--遗传学实验
遗传限定动物
异基因型动物
封闭群动物
1、近交
近交(inbreeding)--指血统或亲缘关系相近的个 体间交配，也就是指基因型相似的个体间交配;是完 全的或不完全的同型交配。
封闭群（远交群）
封闭群（远交群）（Closed colony or outbred stock ）是以非近亲交配方式进行繁殖生产的实验动物 种群，在不从其外部引入新个体的条件下，至少 连续繁殖4代以上。
KM ICR
昆明鼠
Wistar 大鼠
远交群动物的应用
药物筛选
毒理安全试验 教学使用
D：环境影响 E：实验误差
一、 实验动物环境
社会地位
社会环境 动物社会 实 验 动 物 环 境 气候环境 空气环境 异种动物关系 同种动物关系 势力范围 动物情感 敌对 相容
友善
自然环境
声光环境
水和土壤环境 生物环境
居住环境 环境设施
人工环境 环境设备 环境管理
实验动物环境的内容
(1)环境因素对实验动物的影响 研究温热环境、声光环境、空 气环境、水环境、空间环境等因素对实验动物质量和动物实 验的影响，研究制定出有效的控制方法。 (2)实验动物设施建设 根据我国实际情况，合理选址、设计， 建设能有效控制自然环境对实验动物不良影响的设施。 (3)实验动物设施设备 实验动物环境控制的主要设备的类型、 功能和维护。
3．浓缩饲料
以蛋白质饲料为主，混以矿物质和添加剂预混料配比而成，不能直接使用，须按 说明添加能量饲料或粗饲料才能配制成全价饲料加以使用。
4．添加剂预混料
由营养物质添加剂（如各种氨基酸、矿物质、维生素）和非营养物质添加剂（如 促生长剂、粘合剂、稳定剂等）按各种饲料配方需要加上必要的载体配制成各种添加剂 预混料，分别包装，在配料时再按具体需要分别加入。
三、微生物和寄生虫质量控制
重要性：
1.人员的健康和生命的保证：常见的人畜共患 病：流行性出血热、狂犬病、猴B病毒、淋巴 细胞脉络丛脑膜炎病毒、利什曼原虫等 2.动物生产和繁殖的保证：动物一旦染上传染 病，则种群难以净化，一些烈性传染病如鼠痘、 兔病毒性出血症等可致动物全军覆没，造成巨 大经济损失。 3.实验结果准确性、科学性、重复性的保证
屏障环境
负压 正压
隔离环境
负压
实验动物生产间的环境技术指标
指 项 目 小鼠、大鼠 普通 温度，℃ 最大日温差/℃ 相对湿度，% 最小换气次数，次/h 动物笼具处 气流速度,m/s 相通区域的最小 静压差,Pa 空气洁净度，级 沉降菌最大平均浓度， CFU/0.5h· Ø90mm平皿 氨浓度,mg/m³ 噪声,dB 15a 20 8b 15a ≤ 屏障 豚鼠、地鼠 普通 18-29 屏障 隔离 标 犬、猴、猫、兔、小型猪 普通 16-28 4 40-70 20 ≤0.2 10 7 3 50c 5或 7d
实验动物 质量控制
实验动物 标准化
实验动物质量控制
实验动物标准化
实验动物的标准化是由实验动物生产条件的标准化
、实验动物质量的标准化以及动物实验（应用） 条件的标准化三部分组成。只有动物实验条件与生产 条件相适应，才能保证标准化实验动物在整个使用过 程中保持其标准化的价值。
实验动物的标准化对动物实验研究结果的敏感
分为单菌（monoxenie)、双菌(dixenie)、三菌(trixenie)和多
菌(polyxenie)动物。
二、微生物与寄生虫感染的危害性
1．影响实验结果
2．影响动物生产 3．威胁人类健康 4．污染实验材料 5. 实验动物感染寄生虫后：不仅虫体对机体造成一定的损
害，而且动物机体也对虫体产生反应，使动物机体的生理、生化及免 疫学指标发生改变，从而影响实验结果。
无菌动物 （Germ Free animal, GF）无菌动物指动物身上不 可检出一切生命体的动物。进一步说，是指用现有的检测技 术在动物体内外的任何部位均检不出任何微生物和寄生虫的 动物。
悉生动物
悉生动物(gnotobiotic animals，GN)也称已知菌动物 或已知菌丛动物(animal with known bacterial flora)，是指在 无菌动物体内植入已知微生物的动物。 根据植入无菌动物体内菌落数目的不同，悉生动物可
无检出
鸡 屏障 16-28
屏障
隔离
20-26
20-26
20-26
8b
15a
20
—
— — —
10 7 3
50c 5或 7d
无检 出
— — —
10 7 3
50c 5或 7d
无检出
10 5或 7 3
≤14
≤60 200
15-20 12/12或10/14 100-200 度
实
1
实验动物环境质量控制
实验动物遗传学质量控制 微生物和寄生虫质量控制
验 动
物 质
2
3
量
4
实验动物营养与饲料质量控制
一、实验动物环境质量控制
动物对实验处理的反应可用以下公式表示：
R = （A+B+C）× D + E
其中：
R：实验动物的总反应
A：动物种的共同反应 B：品种品系特有的反应
C：个体反应（个体差异）
按微生物控制程度分类
1.普通环境(conventional environment) ：符合动物居住的基本要求，控 制人员和物品、动物出入，不能完全控制传染因子，但能控制野生动 物的进入，适用于饲育普通级实验动物。
特点：
普通环境并非不需进行严格的环境控制和积极的微生物控制，只是变 动范围较大。 采用自然通风或装设排风装置，从而使室内温度、湿度受一定程度的 控制。 应有防野鼠、防昆虫设施， 笼具和垫料要消毒，饲料应确保未经污染， 工作人员进入时应采取一定的防疫措施。
饲养密度
按照体重20 g的小鼠计算，每只小鼠需要饲养笼具面积 0.009～0.063 m2，最好是分为5～10只小笼饲养
小鼠（g） 项 目 <20 单养时，m2 0.006 5 群养时，m2 （母+同窝 仔） 最小高度，m 0.01 0.015 0.025 0.03 0.065 0.01 0.012 >20 <150 >150 <350 >350 <100 >100 大鼠（g） 豚鼠（g） 地鼠（g）
昼夜明暗交替时间，h
1 空气温度 2 空气湿度 3 通风 4 声 噪声 5 光照 光照周期每天光照与黑暗时间交替循环的变动，或
每年长光照与短光照的季节性变化规律。
6 有害气体
7
设施内空气的成分和数量变化较大，有害气体的浓度
也较大。由于动物的呼吸、排泄、生产中有机物分解 NH3 H2S
空气微粒 饲料 垫料 8 水 普通级动物饮用自来水 清洁级以上动物饮用灭菌水 9 空气中的微生物 10 居住环境 笼具 饲养方式 垫料
实验动物的微生物学控制分类
普通级动物 （Conventional animal , CV） 不携带所规定的 人兽共患病病原和动物烈性传染病病原的动物
清洁级动物 (Clean animal, CL) 除普通动物应排除的病原 外，不携带对动物危害大和对科学研究影响大的病原的动物。
无特定病原体动物（Specific Pathogen Free animal，SPF） 除清洁级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件 致病和对科学实验干扰大的病原。
近交系：近交系是经连续20代(或以上)的全同胞兄妹交
配(或亲代与子代交配)培育而成，近交系数大于98.6%，品系内 所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先 ，该品系称为近交系。
C57BL/6J小鼠、BALB/c小鼠
常用近交系的缩写
品系 AKR BALB/c C3H 缩写 AK C C3 品系 C57BR C57L DBA/1 缩写 BR L D1
C57BL CBA
C57BL/6
B CB
B6
DBA/2 HRS/J
C57BL/10
D2 HR
B10
近交系动物的应用
⑴组织移植：由于近交系动物个体间的组织相容性高，因
此便于组织细胞或肿瘤移植研究。 ⑵制作疾病动物模型：近交使隐性基因纯合性状得以暴露 ，可用于复制先天性畸形和先天性疾病的动物模型，如糖 尿病、高血压等。某些近交系自发或诱发肿瘤的发病率较 高。许多肿瘤细胞株尚可在某些近交系活体动物上传代。 因而，这些品系是肿瘤病因学、肿瘤药理学研究的重要模 型。 ⑶比较遗传学研究：同时以多个近交系作对比研究时，可 表明某实验结果具有普遍意义，或显示不同遗传组成对实 验结果的影响。