实验室消毒灭菌资料教程
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HEPA滤膜
•可抛型固体薄层滤膜 •成褶皱状以增加表面积 •按吸附0.3UM颗粒的效率划分 等级，滤膜效率为99.97% •吸附颗粒
4、含氯消毒剂
常用含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯、三氯等 常用剂型：粉剂、片剂、液体 杀菌能力：高水平消毒；1000-5000mg/L浓度。 适用范围：饮用水、餐饮具、果蔬、环境、
消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是 至关重要的。
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消毒和灭菌的基本原则
及时,彻底,有效,预清洁,避免二次污染,减少对人 /物品/环境的损害
清除污染的特殊要求，应根据实验工作类型以 及所操作的感染性物质的特性来决定。
本章所提供的一般性资料，可用于各个病原微 生物实验室建立标准和操作程序，以处理特定 实验室中所涉及的生物危害。
③低臭氧紫外线灯；④高臭氧紫外线消毒灯。 注意事项：安装数量、强度监测、防护措施等。
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3、高效过滤除菌
高效过滤除菌技术，对空气中≤0.3μm颗粒与 微生物的阻留率能达到99.97 %以上。 适用范围：主要用于生物安全柜与生物安全实验 室的空气净化除菌。 注意事项： * 必须定期更换高效过滤器（HEPA）， * 更换前应先用甲醛或过氧乙酸进行熏蒸消毒， * 更换时严格做好工作人员防护； * 换下的过滤装置装入密封袋内由具有资质的 单位焚烧处理。
腐蚀性
+ + +/-
残留物 有害 被有机物 灭活
+
+
-
+
+
-
+
-
-
+
-
+
皮肤、眼 刺激性
+ + + + + +
呼吸道 刺激性
+ + -
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1、压力蒸汽灭菌
是最可靠、首选的消毒灭菌方法。 适用范围：耐湿热物品的消毒或灭菌。 常见类型： - 下 排 气 式 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 ： 121℃ 作 用 20-
物表、污水、污物、排泄物、分泌物 注意事项：密闭干燥保存；消毒后去除残留；
使用液不稳定，加盖，有效期； 对织物漂白，对金属腐蚀用； 操作时应做好个人防护。
21
5、过氧乙酸
酸性透明液体，易挥发易分解，爆炸危险。
杀菌能力：灭菌，高水平消毒
适用范围：餐饮具、果蔬、环境、物表、空气
薰 蒸 消 毒 ： 18-20% 过 氧 乙 酸 5-6 ml （ 1g ） /m3，
亲脂类病毒或中等大小的病毒 （如：HSV,CMV,RSV,HIV,HBV）
蒸汽灭菌
气体灭菌 消毒剂水平
灭菌 （高，延时）
高效
中效 低效
7
消毒和灭菌是保护人员和环境 不被病原微生物感染和污染的重要环节
含有病原微生物的废物必须经过消毒或灭菌才 能作为普通废物处理；
对操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过消 毒达到对病原微生物的杀灭，对操作人员进行 保护,对环境保护。
高效 + +
+
Байду номын сангаас
+ +/-
过氧 0.001 高效 +
+
+
+
+
乙酸 -0.2
戊二醛
2
灭菌/ 高消毒
+
+
+
+
+
甲醛 3 - 8 高效 +
+
+
+ +/-
/中效
酒精 60 - 中效 +
+
-
+
-
95
季胺盐 0.4 ～ 低效 +
+
-
-
-
1.6
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常用化学消毒灭菌剂的安全性
杀菌剂
含氯 过氧乙酸 戊二醛
甲醛 酒精 季胺 盐
放瓷或玻璃容器中，加热密闭薰蒸1-2h。
喷雾消毒：0.1-0.5%，20ml/m3，作用1h。
注意事项：性质不稳，用前配，有盖塑料容器；
病原微生物实验室消毒灭菌
沈伟
1
内容
基本概念 常用消毒和灭菌方法 病原微生物实验室消毒和灭菌制度 病原微生物实验室消毒和灭菌原则 不同设备与物品的消毒方法 消毒灭菌操作与效果监测
2
一、基本概念
消毒（disinfection）
杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其 达到无害化的处理。（不一定杀灭芽孢）
30min - 预真空与脉动真空压力蒸汽灭菌器:
134℃作用4min 注意事项：资质、装载、防护、监测、维护。
16
1、压力蒸汽灭菌
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2、紫外线消毒
可达高水平消毒，使用方便；但由于对人皮肤 黏膜有刺激作用，并产生臭氧，在有人情况下使 用受到限制。 适用范围：室内空气消毒、
能直接照射到的光滑物体表面的消毒。 常见类型：①普通直管型；②高强度紫外线灯；
灭菌（sterilization）
杀灭或清除传播媒介上所有微生物的处理。 （包括芽孢）
3
一、基本概念
消毒剂（disinfectant）
用于杀灭微生物使其达消毒或灭菌要求的化学 制剂，但不一定杀灭孢子。 消毒剂常用于非生命物体或其表面。
灭菌剂（sterilant）
可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其达到灭 菌要求的化学制剂。
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消毒与灭菌的方法
化学消毒灭菌 通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢。 消毒对象：物体表面、空气、污染物品等。 消毒方式：擦洗、熏蒸、浸泡等。
物理消毒灭菌 包括压力蒸汽、紫外线、焚烧、HEPA过滤除菌等。
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清洁的作用
清洁（cleaning）：指去除污垢、有机物和污渍。 方法包括刷、吸、干擦、洗涤或擦洗。
严重污染的物品能影响杀菌作用，许多杀菌剂只 对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。
是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定。 预清洁时必须小心，以避免暴露于感染性物质。
预清洁时必须用与随后使用的杀菌剂相容的物质。 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。
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防止过度使用消毒剂!
正确使用化学消毒剂可以确保实验场所的安全， 减少来自感染性物质的危险。
4
消毒剂的分类
高效（水平）消毒剂：杀灭所有微生物，除了 大量细菌芽孢。
中效：杀灭除了细菌芽孢以外的所有微生物， 包括分支杆菌与亲水病毒。
低效：杀灭多数细菌繁殖体和亲脂性病毒。
6
耐受 敏感
Prions
细菌芽孢
Cryptosporidium parvum
分枝杆菌（如 TB，M.terrae ） 非脂类或小病毒（如脊 髓灰质炎病毒 ,柯萨奇病毒） 真菌（如，念珠菌属，曲霉属） 细菌繁殖体（如：金葡，绿脓）
应考虑经济、库存控制以及限制环境污染等因 素，尽可能减少化学消毒剂的使用量。
化学消毒剂的作用时间因品种和厂商而异，应 按产品说明书配制和使用。
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二、常用消毒和灭菌方法
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常用化学消毒灭菌剂的性能比较
杀菌剂 使用 浓度 （％）
消毒 水平
杀灭
特点
细菌 亲脂病毒 亲水病毒 分枝杆菌 细菌芽孢
含氯
HEPA滤膜
•可抛型固体薄层滤膜 •成褶皱状以增加表面积 •按吸附0.3UM颗粒的效率划分 等级，滤膜效率为99.97% •吸附颗粒
4、含氯消毒剂
常用含氯消毒剂：次氯酸钠、二氯、三氯等 常用剂型：粉剂、片剂、液体 杀菌能力：高水平消毒；1000-5000mg/L浓度。 适用范围：饮用水、餐饮具、果蔬、环境、
消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是 至关重要的。
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消毒和灭菌的基本原则
及时,彻底,有效,预清洁,避免二次污染,减少对人 /物品/环境的损害
清除污染的特殊要求，应根据实验工作类型以 及所操作的感染性物质的特性来决定。
本章所提供的一般性资料，可用于各个病原微 生物实验室建立标准和操作程序，以处理特定 实验室中所涉及的生物危害。
③低臭氧紫外线灯；④高臭氧紫外线消毒灯。 注意事项：安装数量、强度监测、防护措施等。
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3、高效过滤除菌
高效过滤除菌技术，对空气中≤0.3μm颗粒与 微生物的阻留率能达到99.97 %以上。 适用范围：主要用于生物安全柜与生物安全实验 室的空气净化除菌。 注意事项： * 必须定期更换高效过滤器（HEPA）， * 更换前应先用甲醛或过氧乙酸进行熏蒸消毒， * 更换时严格做好工作人员防护； * 换下的过滤装置装入密封袋内由具有资质的 单位焚烧处理。
腐蚀性
+ + +/-
残留物 有害 被有机物 灭活
+
+
-
+
+
-
+
-
-
+
-
+
皮肤、眼 刺激性
+ + + + + +
呼吸道 刺激性
+ + -
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1、压力蒸汽灭菌
是最可靠、首选的消毒灭菌方法。 适用范围：耐湿热物品的消毒或灭菌。 常见类型： - 下 排 气 式 压 力 蒸 汽 灭 菌 器 ： 121℃ 作 用 20-
物表、污水、污物、排泄物、分泌物 注意事项：密闭干燥保存；消毒后去除残留；
使用液不稳定，加盖，有效期； 对织物漂白，对金属腐蚀用； 操作时应做好个人防护。
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5、过氧乙酸
酸性透明液体，易挥发易分解，爆炸危险。
杀菌能力：灭菌，高水平消毒
适用范围：餐饮具、果蔬、环境、物表、空气
薰 蒸 消 毒 ： 18-20% 过 氧 乙 酸 5-6 ml （ 1g ） /m3，
亲脂类病毒或中等大小的病毒 （如：HSV,CMV,RSV,HIV,HBV）
蒸汽灭菌
气体灭菌 消毒剂水平
灭菌 （高，延时）
高效
中效 低效
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消毒和灭菌是保护人员和环境 不被病原微生物感染和污染的重要环节
含有病原微生物的废物必须经过消毒或灭菌才 能作为普通废物处理；
对操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过消 毒达到对病原微生物的杀灭，对操作人员进行 保护,对环境保护。
高效 + +
+
Байду номын сангаас
+ +/-
过氧 0.001 高效 +
+
+
+
+
乙酸 -0.2
戊二醛
2
灭菌/ 高消毒
+
+
+
+
+
甲醛 3 - 8 高效 +
+
+
+ +/-
/中效
酒精 60 - 中效 +
+
-
+
-
95
季胺盐 0.4 ～ 低效 +
+
-
-
-
1.6
14
常用化学消毒灭菌剂的安全性
杀菌剂
含氯 过氧乙酸 戊二醛
甲醛 酒精 季胺 盐
放瓷或玻璃容器中，加热密闭薰蒸1-2h。
喷雾消毒：0.1-0.5%，20ml/m3，作用1h。
注意事项：性质不稳，用前配，有盖塑料容器；
病原微生物实验室消毒灭菌
沈伟
1
内容
基本概念 常用消毒和灭菌方法 病原微生物实验室消毒和灭菌制度 病原微生物实验室消毒和灭菌原则 不同设备与物品的消毒方法 消毒灭菌操作与效果监测
2
一、基本概念
消毒（disinfection）
杀灭或清除传播媒介上病原微生物，使其 达到无害化的处理。（不一定杀灭芽孢）
30min - 预真空与脉动真空压力蒸汽灭菌器:
134℃作用4min 注意事项：资质、装载、防护、监测、维护。
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1、压力蒸汽灭菌
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2、紫外线消毒
可达高水平消毒，使用方便；但由于对人皮肤 黏膜有刺激作用，并产生臭氧，在有人情况下使 用受到限制。 适用范围：室内空气消毒、
能直接照射到的光滑物体表面的消毒。 常见类型：①普通直管型；②高强度紫外线灯；
灭菌（sterilization）
杀灭或清除传播媒介上所有微生物的处理。 （包括芽孢）
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一、基本概念
消毒剂（disinfectant）
用于杀灭微生物使其达消毒或灭菌要求的化学 制剂，但不一定杀灭孢子。 消毒剂常用于非生命物体或其表面。
灭菌剂（sterilant）
可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其达到灭 菌要求的化学制剂。
9
消毒与灭菌的方法
化学消毒灭菌 通过液体化学试剂杀灭微生物繁殖体或芽孢。 消毒对象：物体表面、空气、污染物品等。 消毒方式：擦洗、熏蒸、浸泡等。
物理消毒灭菌 包括压力蒸汽、紫外线、焚烧、HEPA过滤除菌等。
10
清洁的作用
清洁（cleaning）：指去除污垢、有机物和污渍。 方法包括刷、吸、干擦、洗涤或擦洗。
严重污染的物品能影响杀菌作用，许多杀菌剂只 对经过预清洁的物品才具有杀菌活性。
是否进行预清洁应根据工作性质和需要来决定。 预清洁时必须小心，以避免暴露于感染性物质。
预清洁时必须用与随后使用的杀菌剂相容的物质。 通常采用相同的化学杀菌剂进行预清洁和消毒。
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防止过度使用消毒剂!
正确使用化学消毒剂可以确保实验场所的安全， 减少来自感染性物质的危险。
4
消毒剂的分类
高效（水平）消毒剂：杀灭所有微生物，除了 大量细菌芽孢。
中效：杀灭除了细菌芽孢以外的所有微生物， 包括分支杆菌与亲水病毒。
低效：杀灭多数细菌繁殖体和亲脂性病毒。
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耐受 敏感
Prions
细菌芽孢
Cryptosporidium parvum
分枝杆菌（如 TB，M.terrae ） 非脂类或小病毒（如脊 髓灰质炎病毒 ,柯萨奇病毒） 真菌（如，念珠菌属，曲霉属） 细菌繁殖体（如：金葡，绿脓）
应考虑经济、库存控制以及限制环境污染等因 素，尽可能减少化学消毒剂的使用量。
化学消毒剂的作用时间因品种和厂商而异，应 按产品说明书配制和使用。
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二、常用消毒和灭菌方法
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常用化学消毒灭菌剂的性能比较
杀菌剂 使用 浓度 （％）
消毒 水平
杀灭
特点
细菌 亲脂病毒 亲水病毒 分枝杆菌 细菌芽孢
含氯