《分子生物学》作业及答案

分子生物学作业

一、填空

1. DNA双螺旋直径为（1） nm，每隔（2） nm螺旋上升一圈。

2. 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的（3）活性使之具有（4）功能，极大地提高了DNA复制的保真度。

3. 两条互补的DNA链中，用作指导RNA合成的链被称为（5），另一条链叫做（6）。

4. DNA变性后，紫外吸收（7），粘度（8）。

5. 细菌的DNA连接酶以（9）为能量来源，而动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶则是以（10）为能源。

6. 真核RNA聚合酶Ⅲ位于（11）中，负责（12）的合成。

7. 在原核细胞翻译起始时，小亚基16S rRNA的3′-端与mRNA5′-端的（13）之间互补配对，确定读码框架，fMet- tRNA f占据核糖体的（14）位点。

8. DNA变性后，浮力密度（15），生物活性（16）。

9. DNA复制时，连续合成的链称为（17） _链；不连续合成的链称为（18）链。

10. 真核RNA聚合酶Ⅱ位于（19）中，负责（20）的合成。

11. 糖环上的1′C与碱基嘧啶上的（21）相连，与嘌呤上的（22）相连。

12. DNA复制时，一条链是连续的，另一条链是不连续的，称为（23）复制；复制得到的子代分子，一条连来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种方式叫（24）复制。

13. 原核生物RNA聚合酶核心酶的亚基组成为（25）中，（26）负责识别转录起点。

二、判断

1. 地衣酚试剂可以使DNA变成蓝色，二苯胺试剂能使RNA变成绿色。

2. DNA片断越大，复性速度越慢。

3. DNA复制时，前导链和后随链是由同一个DNA聚合酶的两个活性中心催化合成的，合成方向均为5′→3′。

4. 所有生物的嘧啶二聚体均可用光复活系统修复。

5. 基因转录的终止信号应位于被转录的序列以外的下游区。

6. 大肠杆菌染色体DNA由两条链组成，其中一条链为模板链，另外一条链为编码链。

7. 生物体内，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。

8. 水分子可以插入天然DNA分子双螺旋的空隙中。

9. 原核生物的DNA聚合酶Ⅰ主要负责切除冈崎片段的RNA引物，并用DNA链填补缺口。

10. DNA损伤的错配修复系统一旦发现错配碱基，就会切除甲基化的链，并以未甲基化的链为模板进行修复合成。

11. 大肠杆菌的所有基因转录都由同一种RNA聚合酶催化。

12. 真核生物基因表达的效率比原核生物高，其转录产物不需要加工，即可作为模板用于指导蛋白质的合成。

13. B-DNA是细胞内DNA的基本构象，在某些情况下还会有A型、Z型和三股螺旋的局部构象。

14. 将凝胶上的RNA转移到硝基纤维薄膜上的技术叫Southern印迹法。

15. DNA的两条链反向平行，复制时，两条新合成的链也按相反的方向延伸。

16. 嘧啶二聚体可以通过重组修复被彻底去除。

17. 真核生物的RNA聚合酶需要多种蛋白质因子协助，才能与转录起点结合。

18. 原核生物转录生成的mRNA多数不需要加工，但rRNA是由初级转录产物加工而成的。

19. 解开DNA的负超螺旋，会使双螺旋局部解开形成单链区。

20. 将凝胶上的DNA转移到硝基纤维薄膜上的技术叫Southern印迹法。

21. DNA聚合酶可以从头合成单链模板的互补链。

22. 嘧啶二聚体指DNA两条链上的嘧啶共价连接而成的二聚体。

23. 原核生物和真核生物的RNA聚合酶亚基组成差别很大，空间结构却很相似。

24. 负责hnRNA剪接的剪接体是由多种蛋白质和多种snRNR构成的。

三、名词解释

1. Southern印迹杂交

2. 聚合酶链式反应

3.移框突变（移码突变）

4. Tm

5. 内含子与外显子

6. Klenow片段

7. 增色效应 8 分子杂交 9. 复制体1. 拓扑异构酶 10. Cot1/2 11. 单链结合蛋白

四、简答题和计算题

1. 何谓核酸的变性？哪些因素可以影响Tm的大小。

2. DNA复制的精确性、持续性和协同性是通过怎样的机制实现的？

3. 某哺乳动物的细胞中，每个细胞的DNA长1.2 m，细胞生长周期中的S期约为5小时，如果这种细胞DNA 延长的速度与E.coli相同，即16 μm/min，那么染色体复制时需要有多少复制叉同时运转？

4. 如果下面的DNA双链从右向左进行转录。（1）哪条是有意义链？（2）产生什么样的mRNA顺序？（3）mRNA顺序和DNA的反意义链顺序之间的关系是怎样的？

5′A-T-T-C-G-C-A-G-G-C-T 3′链1

3′T-A-A-G-C-G-T-C-C-G-A 5′链2

5. 如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA含量为

6.4 × 109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少？是太阳-地球之间距离（2.2 × 109 km）的多少倍？已知双链DNA每1000个核苷酸重1 × 10-18 g，求人体的DNA的总质量。

6. 若使15N标记的大肠杆菌在14N培养基中生长三代，提取DNA，并用平衡沉降法测定DNA密度，其14N-DNA 分子与14N-15N杂合DNA分子之比应为多少？

7. 那些因素能引起DNA损伤？生物体有哪些修复机制？

8. 一个基因如何产生多种不同类型的mRNA分子？

9. 概述影响变性DNA复性速度的因素。

10. 真核生物DNA聚合酶有哪几种？它们的主要功能是什么？

11. 概述PCR的基本过程？

12. 原核生物的启动子和真核生物的三类启动子各有何结构特点？

13. 肽链合成后的加工修饰有哪些途径？

14. 概述分子杂交的概念和应用领域。

15. 已知DNA的序列为：

W: 5′-AGCTGGTCAATGAACTGGCGTTAACGTTAAACGTTTCCCAG-3′

C: 3′-TCGACCAGTTACTTGACCGCAATTGCAATTTGCAAAGGGTC-5′→

上链和下链分别用W和C表示，箭头表明DNA复制时复制叉移动的方向。试问：（1）哪条链是合成滞后链的模板?（2）试管中存在单链W，要合成新的C链，需要加入哪些成分?（3）如果需要合成的C链被32P标记，核