比较猪瘟中和抗体与ELISA抗体力价之关系
应用ELISA检测某规模猪场成年种公猪及母猪猪瘟抗体水平及分析
69PIGS TODAYSeptember 2020监测工作的定期开展也需要得到重视。
2.2 净化方法猪疫病净化可具体围绕环境、种猪、药物、免疫、饲料5个方面展开。
（1）环境净化需关注实验室的建设，以此保证环境监测能够得到齐全的仪器设备支持，由此开展生活环境、猪舍、用具消毒，配合针对性的消毒效果检测，可不断提升消毒技术水平。
应慎重选择消毒药，保证操作的规范性，避免猪因消毒受到不良影响。
配合封闭式猪场管理，还应设法进一步加强生物安全措施。
（2）种猪净化需基于科学的选种选育制度开展，以此摸底调查猪伪狂犬病、猪瘟、猪蓝耳病、猪口蹄疫等常见疫病，以此结合猪场实际制定净化措施。
阳性猪需由此逐渐淘汰，保证种猪群的健康，配合针对性的净化维持性监测，可更好保障净化成果。
（3）药物净化需基于科学完善的药物治疗制度展开，异常猪只的立即隔离、采用药物的积极治疗均不容忽视，具体的治疗需配合药敏实验开展，以此选用敏感药物。
为避免病菌产生抗药性，不得出现长期使用同种药物的情况。
（4）免疫净化需结合养猪场实际情况和当地疫病发生规律，以此保证制定和优化免疫程序。
免疫程序需基于猪群抗体检测结果不断微调，相关操作流程的规范也需要同时得到重视。
（5）饲料净化需仔细检测从选购到饲喂的饲料各环节，避免饲喂有毒有害、发霉变质的饲料，有效预防疾病的发生。
以肉骨粉为例，需通过检查确定不存在病原微生物后进行加工；棉籽饼的饲喂则需要保证不存在有毒有害物质，如游离棉酚。
应在通风干燥的仓库里贮存饲料，且不得使用过期饲料。
3 小结综上所述，猪疫病的净化需关注多方面因素影响。
在此基础上，本文涉及的环境、种猪、药物、免疫、饲料等净化内容，直观展示了猪疫病净化要点。
为更好净化猪疫病，最新理论研究成果与实践的积极结合必须得到重视。
（参考文献略）文 ⊙ 王浩先 黑龙江八一农垦大学动物科技学院 黄培鑫 牧原食品股份有限公司猪瘟作为被世界动物卫生组织（OIE）列为法定的16种A类动物传染疫病中的高致病性传染病之一，也是我国法规中的甲类动物传染病之一，其对猪群危害巨大。
猪瘟抗体检测两ELISA方法比较
猪瘟抗体检测两ELISA方法比较一、原理是什么？间接法：①该方法是检测猪瘟抗体的经典ELISA方法，其原理是在酶标板中包被猪瘟病毒或猪瘟病毒的表面抗原蛋白，加入待检血清同包被的抗原孵育后，加入酶标二抗和底物显色，通过OD值来判定猪瘟抗体的效价。
②如待检血清中有特异性抗体，则形成包被抗原-待检抗体-酶标二抗三种物质的结合物，OD值越高、显色越深、待检抗体含量越高，反之，则待检抗体含量越少。
显色深浅与待检抗体量呈正比。
阻断法：①该方法是基于基因工程和单克隆抗体发展起来的ELISA方法，其原理是在酶标板中包被通过基因工程得到的猪瘟病毒保护性抗原蛋白，然后加入待检血清与包被的抗原孵育，洗板后加入针对包被蛋白的酶标单抗再次孵育，后加入底物显色，通过OD值来判定猪瘟抗体的效价。
②如待检血清中有特异性抗体，则会阻断酶标单抗的反应，导致酶标单抗不会或少量地同抗原蛋白结合；若待检血清中没有特异性抗体，酶标单抗会更好地同抗原蛋白结合。
OD值越高，显色越深、待检抗体含量越少，反之，则待检抗体含量越多。
显色深浅与待检抗体量呈反比。
二、哪种方法更好？在农业部颁布的国家动物疫病监测方案中，规定可以采用阻断ELISA或间接ELISA等方法进行猪瘟抗体水平检测。
目前，世界动物卫生组织推荐的猪瘟抗体检测方法是ELISA法和荧光抗体中和试验（FVNT）, 其中FVNT可作为猪瘟抗体检测的“金标准”。
而中和试验对试验条件和操作人员的要求很高，且耗时长，仅适合专业实验室进行少量样本检测，不宜推广应用。
因此，ELISA方法是目前国际上承认的惟一适合大规模应用的血清检测方法。
在进行ELISA检测方法评价时，最重要的两个指标就是敏感性和特异性。
阻断ELISA采用了单克隆抗体，因此检测的特异性更高；而间接ELISA则更侧重于敏感性。
有研究表明，用OIE推荐的FVNT与上述两种ELISA方法进行符合验证实验，结果表明间接法与FVNT的符合率高于阻断法，间接法能更真实地反映疫苗免疫后的中和抗体水平，而阻断法对阳性样本有漏检情况。
应用ELISA检测猪瘟免疫抗体及免疫效果分析
应用ELISA检测猪瘟免疫抗体及免疫效果分析
王兰琳
【期刊名称】《山东畜牧兽医》
【年(卷),期】2009(30)12
【摘要】用ELISA检测了接种猪瘟疫苗后的猪血样697份,检测血清抗体阳性637份,阳性率为91.39%.同时对851份血清进行了自然强毒血清抗体的检测,检出阳性76份,阳性率为8.93%.表明青海省猪瘟疫苗注射密度较高,同时反映出在青海省猪群中存在猪瘟自然强毒感染.
【总页数】2页(P28-29)
【作者】王兰琳
【作者单位】青海省动物疫病预防控制中心,西宁,810001
【正文语种】中文
【中图分类】S851.31+3
【相关文献】
1.应用间接ELISA检测四川某猪场的猪瘟免疫抗体 [J], 王秋菊;杨建省
2.用ELISA对猪瘟免疫抗体效价监测的效果分析 [J], 尹杰;李洁萍
3.应用ELISA试验检测猪瘟免疫抗体 [J], 周秋平;黄绍明;黄章生;王家涛
4.应用PPA—ELISA法检测同一猪群滤纸血样与血清中猪瘟免疫抗体的比较试验[J], 杨恭;史永年
5.应用ELISA检测猪瘟免疫抗体 [J], 李达;吴雅玲
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采用不同ELISA试剂盒对猪瘟抗体水平调查结果的影响
病毒 （ Ｃ ｌ ａ ｓ ｓ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｗ ｉ ｎ ｅ ｆ ｅ ｖ ｅ ｒ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ，Ｃ Ｓ Ｆ Ｖ）引起 的一 类 高度 接 触性 ７ ０ 头份 。 传 染病 ，是世 界 粮 农组 织 和 各 国政 府 密切 关 注 的主 要传 染 病 之一
中国畜牧 兽医文 摘
２ ０ １ ５ 年
３ １ 卷
第ｌ 期
基 础 研 究
采 用 不 同Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试 剂 盒 对 猪 瘟 抗 体 水 平 调 查 结 果 的影 响
蔺 露 董春霞 孙 燕 徐 璐 王 琴
（ １ ． 重庆市动物疫病 预防控 制中心 ，重庆 ４ ０ １ １ ２ ０ ； ２ ． 中国兽医药 监察所 ，北京 １ ０ ０ ０ ８ １ ）
［ 摘 要］ 本文采用猪瘟抗体 间接Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 阻断Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测试剂盒对 ３ ２ Ｏ 份 血清样本进行猪瘟抗体检测 ，符合率 达８ ０ ． ６ ３ ％ ，对 检 测结果不一致 的样品 ，利用抗体 中和试验 （ Ｆ Ｖ Ｎ Ｔ）做 定性检 测 ，结果表 明，间接 Ｅ Ｌ Ｉ ｓ Ａ 试剂 盒的敏 感性和特 异性均 高于阻断 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试剂盒 ，猪瘟 间接Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试剂 盒更适 用于我国猪 瘟抗体检测 。 ［ 关键词］猪瘟 抗体 中和试验 酶联免 疫吸附法
表２两种试剂盒对 不同背 景血 清的检 测结果统计表
作者简介 ：蔺露 （ １ ９ ８ ３ 一 ），女 ，兽 医师，硕士 ，主要从事动物疫病 实验 室诊 断及研 究。 通讯作者： 蔺露
应用IHA与竞争ELISA方法检测猪瘟免疫抗体的比较与分析
抗 体检测 。采 用 Ｉ Ｈ Ａ方 法 ，以抗 体效 价 ≥２ 为合格标 准 时 ，其抗 体合 格率为 ９ ５ ． ３ ％ ；采用 竞争 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ方法 ，以 阻断率 ≤５ ０ Ｚ 为 阳性标准时 ，其抗体 阳性率为 ９ ３ ． ６ ％ ，两种检 测方法总体一致符合 率 ９ ３． Ｏ ％ ，经 Ｘ 检验 ，两者差异不显著 ，说明
１ 材 料 与 方法
１ ． １ 免 疫 疫 苗种 类
猪 瘟 传 代 细 胞 苗 ，哈 药 集 团 生 物 疫 苗 有 限 公 司 生
产 ，批 号 ：２ ０ １ ４ ０ ２～２ ０ １ ４ ０ ５ 。
Ｔ Ｅ ＣＡＮ公 司 酶标 仪 ，型号 为 Ｉ ｎ ｆ ｉ ｎ ｉ ｔ ｅ Ｍ２ ０ ０ Ｐ Ｒ Ｏ。
１ ． ２ 被检血清
样 品来 源 于 福 建 省 漳 州 市 各 县 （ 市 、区 ）抽 检 的
收稿 日期 ：２ ０ １ ５ — ０ ５ — ２ ２
（ 第 ４孔 ） ，呈现 “ ＋ ＋ ”凝 集 为 免疫 合格 ；按 （ （ ２ ０ １ ４年
福建省动物疫病监 测与流行病学调查计划》 的通知文件
两种 检测 方 法 之 间存 在 的 关 系 ，减 少 因检 测 方法 不 同 而
１ ． ３ 诊 断试 剂
猪 瘟 间接 血 凝抗 体 检 测试 剂 盒 （ 配 套 有抗 原 、阳 性 血 清 、 阴性 血清 及 稀释 液 ）购 自 中国农 业 农科 院 兰 州 兽
医 研 究 所 诊 断 中 心 ，批 号 ：２ ０ １ ４ １ １ ２ １ ０ ５ ；猪 瘟 抗 体 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ检 测诊 断试 剂盒 购 自法 国 Ｉ Ｄ ． Ｖ Ｅ Ｔ公 司 ，Ｌ Ｏ Ｔ ：
６ ２６
用ELISA对猪瘟免疫抗体效价监测的效果分析____
疫病防制为切实了解、掌握遂宁市安居区农村生猪散养户猪瘟免疫效果，给以后免疫预防提供科学依据，使猪瘟等动物重大疾病得到更好控制，遂宁市安居区动物预防控制中心于2013年2月在5个乡镇的农村生猪散养户中随机抽取了176份猪血清，用酶联免疫吸附试验（ELISA ）检测免疫抗体，并对有关情况进行了进一步的分析。
结果表明，随机抽取的176份猪血清的猪瘟免疫抗体合格率为71.02%，但部分散养户猪瘟免疫结果不够理想，还需进一步加大力度，采取切实有效措施，提高猪只的有效免疫率，确保养猪业健康发展。
1材料与方法1.1血清样品从5个乡镇的农村生猪散养户中随机抽取了176份猪血清，其中玉丰镇41份，拦江镇38份，分水镇35份，聚贤乡30份，马家乡32份。
1.2诊断试剂与方法猪瘟抗体监测ELISA 试剂：购自深圳市绿诗源生物技术有限公司，诊断试剂在有效期内使用；试验严格按照诊断试剂说明书的要求进行操作。
1.3试验原理利用猪瘟抗原包被ELISA 板，然后加入适当稀释的待检猪血清与之反应形成CSFV-IgG 结合，再通过辣根过氧化物酶标记的抗猪IgG 二抗来检测与包被抗原结合的猪瘟特异抗体，最后加入颜色反应系统显色，显色的深浅与CSFV-IgG 的量成正比，通过酶标仪对待检血清的OD450值测定，当显色超过设定的临界值时结果判为阳性，反之则为阴性。
1.4判定标准本试剂盒的临界值为0.4，在酶标仪上测各孔的OD 值。
试验成立的条件是阳性对照孔的平均OD 值≥0.7，阴性对照孔的平均OD 值必须＜0.1；样品OD 值≥0.4时判为阳性；样品OD 值＜0.35时判为阴性；0.35到0.4之间为可疑。
2结果与分析结果表明：被检测的176份血清中OD 值高于或等于0.4的有125份血清，比例为71.02%；OD 值介于0.35到0.4之间的为9份血清，比例为5.11%；OD 值小于0.35有42份血清，比例为23.86%。
在检测的176份血清样品中，玉丰镇、拦江镇、用ELISA 对猪瘟免疫抗体效价监测的效果分析尹杰1，李洁萍2（1.四川省遂宁市安居区畜牧食品局四川遂宁629000；2.四川省遂宁市船山区畜牧食品局四川遂宁629000）doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2013.04.013B 0.3210.2130.3550.3140.6390.7450.5550.6350.2130.2630.2440.463C 0.5530.6930.4830.560.6720.8990.7630.4630.7770.2110.3220.631D 0.4440.1550.5430.5320.6210.3610.7560.7230.6320.6120.5440.455E 0.4960.5830.3740.4630.5130.5660.7520.3860.4630.5360.2270.156F 0.4360.5630.6330.2660.7530.8230.4660.4750.2990.4960.5260.188镇；D6~D12、E1~E12、F1~F12、G1~G7血清采至拦江镇；G8~G12、H1~H7血清采至分水镇）。
用ELISA对猪瘟免疫抗体效价监测的效果分析
的消毒灭菌工作 ， 严防带菌（ 毒） 操作。同时在预防工
作中要做到每一头换一个针头， 避免交叉感染。 第 四、 按剂量免疫 ， 做好加强免疫工作 ， 预 防接
种 过 程 中应 严 格 按 照 产 品说 明 书规 定 剂量 进 行 免
疫 ，并推行第二次加强免疫的措施 ， 确保达到有效 免疫率。 第五 、 是积极开展猪只抗体监测工作 。充分发
挥区（ 县）综合 防制提供科学依据。在春秋两
疫 的猪 只 实施 强 制 补免 ，确保 猪 瘟 的 有效免疫
密度 。■Ｇ Ｙ
置诱虫灯 ， 用以捕杀金龟子等中间宿主。
（ 二） 及 时 治 疗 病 猪 。流 行 地 区 的猪 应 定 期 驱
虫， 每年春秋各 １ 次， 以减少传染源 。常用药 品有 ：
① 左 旋 咪唑 ， 剂量 为 每千 克体 重 １ ５毫 克 一 ２ ０毫 克 ，
②病理变 化 。剖检 是最 可靠 的诊 断方 法 ， 在 小 肠 壁 可见 叮 附着 的成 虫及 被 虫体 造成 的炎 性 病灶。 ③实验室检查 。由于猪棘头虫卵 比重大 ， 可采 用直接涂片法或水洗沉淀法检查粪便虫卵。猪棘头
中 国 动物 保 健 ２ ０ １ ３年 （ 第 １ ５卷 ） 第 ４期 ３ ５
二、 防治 措施 （ 一） 消灭 中间宿 主 。在 猪 场 以外 的适宜 地点 设
一
、
①临床症状 。ｌ ０ 月龄以上猪受害严重 ， 病猪食
欲减退 ， 发生刨地 、 互相对 咬或匍匐爬行 ， 不断哼哼
等腹痛症状 ， 下痢 ， 粪便带血。 经ｌ ～ ２ 个月后 ， 日 益消
瘦 和 贫血 ， 生 长发育 迟 缓 ， 有 的成为僵 猪 。有 的 因肠 穿 孔 引起 腹膜 炎而 死 亡 。
非洲猪瘟的实验室检测与诊断技术
非洲猪瘟的实验室检测与诊断技术非洲猪瘟是一种高度传染性的猪传染病，对全球猪肉产业造成了严重的威胁。
为了及时发现并控制非洲猪瘟的传播，实验室检测与诊断技术起着重要的作用。
本文将介绍非洲猪瘟的实验室检测方法和诊断技术，并对其应用和发展进行探讨。
一、非洲猪瘟的实验室检测方法非洲猪瘟的实验室检测通常包括两种方法：病毒检测和抗体检测。
病毒检测主要通过PCR技术进行，PCR技术是一种基于核酸的检测方法，可以快速、准确地检测出非洲猪瘟病毒的存在。
通过提取猪体组织或血液样本中的核酸，再通过PCR扩增和检测，可以得到非洲猪瘟病毒的阳性结果。
PCR技术具有灵敏度高、特异性好、快速等优点，是目前非洲猪瘟的首选实验室检测方法之一。
另一种实验室检测方法是抗体检测，主要通过ELISA或ND抗体试验进行。
ELISA是一种基于酶标记的免疫学检测方法，通过检测猪体内的非洲猪瘟抗体来确定是否感染病毒。
ND抗体试验是一种血清学检测方法，通过检测血清样本中的中和抗体来判断是否感染非洲猪瘟。
这些抗体检测方法具有操作简便、经济实惠等优点，广泛应用于实际生产实验室。
二、非洲猪瘟的诊断技术在实验室检测的基础上，非洲猪瘟的诊断技术主要包括病理学检查、临床症状观察和病原学鉴定。
病理学检查是通过对病死猪体进行解剖和组织学检查，来确定非洲猪瘟的病变特征。
病理学检查可以提供病变部位和类型的信息，对于非洲猪瘟的早期诊断和病情判断起到重要的作用。
临床症状观察是通过观察感染猪的表现和症状来判断是否患有非洲猪瘟。
非洲猪瘟的临床症状包括发热、食欲减退、呼吸困难等，对于非洲猪瘟的诊断和控制具有重要意义。
病原学鉴定是通过实验室检测方法来鉴定病原体是否为非洲猪瘟病毒。
除了前面提到的病毒和抗体检测方法外，还可以通过核酸测序、电镜观察等方式来进一步确认非洲猪瘟的病原体。
病原学鉴定可以提供非洲猪瘟的病毒学信息，为病情评估和控制措施的制定提供依据。
三、实验室检测与诊断技术的应用与发展实验室检测与诊断技术在非洲猪瘟的防控和管理中起着重要的作用。
两种检测试剂盒对猪瘟抗体水平检测结果的比较
进 行符合 验证 。具 体操作 方法按 照《 陆生 动物诊 断试 验和疫苗手册》 ｎ 进行 。
２ 结 果
２ ． １ 两 种 试 剂 盒 的检 测 结 果 及 符 合 率
在３ ０ ０ 份
血清中 ， 国产试 剂盒 检 测 出猪 瘟 抗体 阳性 血 清
１ ９ ９ 份， 阴性血清 ７ ８ 份， 可疑 ２ ３ 份； 进 口试 剂 盒 检 测 出猪 瘟 抗 体 阳 性 血 清 １ ８ ４ 份， 阴性血 清 １ ０ ６ 份，
１ ． １ Ｐ Ｋ １ ５ 传代 细胞 系 、 猪 瘟病毒 Ｔ 株、 猪瘟病 毒 荧光 抗体 ： 系 由 中 国兽 医 药 品 监 察 所 鉴 定 、 保 的符 合 率 为 ８ ３ ． ６ ７ ％（ 符合率＝
（ １ ７ ６ ＋ ７ ５ ） ／ ３ ０ ０ ｘ １ ０ ０ ％＝ ８ ３ ． ６ ７ ％） ， 见表 １ 。
阳性 收稿 日期 ： ２ ０ １ ４ — ０ ５ —１ ５ 作 者简 介 ： 李丽 （ １ ９ ８ ５ 一） ， 女， 兽医 师 ， 硕士 ， 从 事动 物疫 病 防 控丁 作 ， Ｅ － ｍａ ｉ ｌ ： ３ ６ ５ ０ ８ ７ ９ ５ ５ ＠ｑ ｑ ． ｃ ｏ ｎ ｒ 通讯 作者 ： 徐璐 ， Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ： ４ ２ １ ２ ０ ３ ９ １ ２ ＠ｑ ｑ ． ｅ ｏ ｍ
１ ． ２ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试 剂 盒
猪瘟病毒 间接 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ抗 体 检
表１ 国产 试 剂 盒 与进 口试剂 盒 符 合 率
进 口试 剂 盒
测试剂 盒 （ 简 称 围产 试 剂 盒 ） ： 由 中 国兽 医 药 品监
察 所 提 供 。批 号 为 ２ ０ １ ２ １ １ １ ０ 。
猪瘟抗体检测试纸条与ELISA试剂盒的检测结果比对试验
猪 瘟抗 体监 测能准 确 掌握猪 群 的免 疫抗 体 水 平， 它对 猪瘟 疫 苗免 疫效 果作 出评价 ， 为猪瘟 免 疫 程 序 的制 定提供 指导 以及对 猪瘟 流 行状 态进 行 评
估 等均 具有重 要意 义［ 。 目前 ， 酶 联免 疫吸 附试 验 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ） 、 斑 点酶联免疫 吸附试验 ①ｏ ｔ — Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ） 以及
－
２ ２ ・ 兽 医临床
东畜牧兽 医科技 ２ ０ １ ５ 年（ 第４ ０ 卷） 第５ 期
猪瘟抗体检测试纸条 与 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ试剂盒 的检测 结果 比对试 验
郗立 新 － ，肖 雪 ｚ ，刘 文福 。 ，颜 其贵 件 （１ ． 四川农业 大 学动物 医学 院 ，四川 成 都 ６ １ １ １ ３ ０ ；２ ． 四川 省遂 宁市 安居 区动物 卫 生监督 所 ， 四 川 遂 宁 ６ ２ ９ ０ ０ ０ ；３ ． 成都 安迪斯 生物 技术 有 限责任 公 司， 四川 成 都 ６ １ ０ ０ ４ １）
Ａｂ ｜ 蛔ｃ ｔ ： Ａ ｉ ｍｍｕ ｎ ｅ ｃ ｏ ｌ ｌ ｏ ｉ ｄ ａ ｌ ｇ ｏ ｌ ｄ ｔ ｅ ｓ ｔ ｓ ｔ ｒ ｉ ｐ ｍｅ ｈｏ ｔ ｄ ｈ ａ ｓ ｂ ｅ ｅ ｎ ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｅ ｄ ｔ Ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｓ ｗｉ ｎ ｅ ｆ ｅ ｖ ｅ ｒ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ， ａ ｎ ｄ
关 键词 ：猪 瘟 ：抗 体 ；Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ；免 疫 胶体 金 中 图分 类 号 ：￥ ８ ５ ２ ． ６ ５ ｉ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ５ — ８ ５ ６ ７ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ５ — ０ ０ ２ ２ — ０ ３
Ｔｈ ｅ Ｃｏ ｍｐ ａ ｒ ｉ ｓ ｏ ｎ Ｔｅ ｓ ｔ ｏ ｆ Ｔ ｍｍｕ ｎ ｅ Ｃｏ ｌ ｌ ｏ ｉ ｄ ａ ｌ Ｇｏ ｌ ｄ Ｓ ｔ ｒ ｉ ｐ ｓ ａ ｎ ｄ ＥＬ Ｉ Ｓ Ａ Ｋｉ ｔ ｓ ｆ ｏ ｒ Ｓ ｗｉ ｎ ｅ Ｆ ｅ ｖ ｅ ｒ Ａｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｙ Ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ
ELISA方法检测猪瘟抗体水平的分析
ELISA方法检测猪瘟抗体水平的分析作者：姜树林，陈欠械来源：《江西畜牧兽医杂志》 2013年第3期姜树林1,陈欠林2（1.江西省畜牧技术推广站，江西南昌 330046；2.宜春市农业良种研究所）2008至2012年期间，对某规模猪场的育肥猪使用ELISA方法进行猪瘟抗体水平检测。
猪场里部分育肥猪发生猪瘟，有的出现典型的临床症状，有的病程较长，死亡率均在15%左右。
当病死猪的解剖症状具有猪瘟病理症状时，将病料送到江西农业大学进行猪瘟抗体检测。
现在将检测分析的相关情况报告如下。
1 试验材料1.1 被检血清猪场育肥猪在接种猪瘟疫苗后30d随机采血，血样经处理后获取血清（血液冷凝，3 000 r/min离心5 min，取上清液），各年份采取血清分别为：2008年86份，2009年112份，2010年126份，2011年236份，2012年221份。
1.2 主要试剂猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒（在有效期内使用），已包被好抗原的微孔板，标准阴、阳性对照血清，抗猪Ig-HRP结合物，10倍浓缩洗涤液，TMP底物四甲基联苯胺液、双氧水（H2O2）液，终止液，样品稀释液。
1.3 主要仪器设备(见表1)2 试验方法2.1 在血清稀释板中按1：40的体积稀释待检血清（195 μL样品稀释液中加5μL待检血清）。
此外，阳性对照和阴性对照也按1：40稀释，即234 μL样品稀释液中加6μL对照血清。
2.2 取预包被的检测板（根据样品多少，可拆开分次使用），将稀释好的待检血清取100 μL加入到检测板孔中。
阴性对照和阳性对照各设2孔，每孔100μL。
轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃温育30min。
2.3 甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板5次，200μL/孔，每次静置3min倒掉，再在干净吸水纸上拍干。
2.4 每孔加羊抗猪酶标二抗100 μL，置37℃温育30min。
2.5 洗涤5次, 方法同上。
每次均在干净吸水纸上拍干。
间接ELISA法检测猪瘟疫苗免疫效果
图1 猪瘟抗体阳性率
图2 各阶段猪只的猪瘟抗体效价均值
注：抗体效价大于1 071判为阳性，即红色标准线以上即为阳性。
2.由图2可知：1～6胎次母猪猪瘟中和抗体S/P 均值在3 561～5 663之间，处于较高水平。
后备母猪猪瘟中和抗体S/P均值1 593，高于阳性值，但水平偏低，应加强免疫提升抗体水平，并查找具体原因。
首免前1 d 均值为1 252，首免后20 d均值2 172，二免后30 d均值2 832，育肥猪均值2 086，说明首免前1 d母源抗体下降至接近阳性临界值，适合免疫，首免后中和抗体快速达到较高水平，且维持到150日龄，满足实际免疫需求。
69。
Herdchek猪瘟抗体ELISA试剂盒在猪瘟控制中的应用
Herdchek猪瘟抗体ELISA试剂盒在猪瘟控制中的应用苗得园(北京爱德士元亨生物科技有限公司,北京顺义101300)中图分类号:S851.66 文献标识码:B 文章编号:0529-6005(2006)11-0050-01 猪瘟的发生有多种多样的原因。
在改善其生物安全管理措施的同时,选择质量良好的疫苗,使用合理的免疫程序以实现有效的免疫,使猪群获得均匀一致的抵抗力无疑是控制猪瘟目前最为可行的措施之一。
为实现有效免疫,必须从两个方面来着手,一是要选择最恰当的免疫时机,二是要确认免疫效果。
如果发现免疫没有达到预期效果,则要检查免疫程序和管理措施,并及时进行补针。
并根据抗体检测的情况,校正本场的免疫程序。
收稿日期:2006-05-08作者简介:苗得园(1973-),男,副研究员,博士,从事动物疫病的诊治工作1 抗体监控抗体监控的主要目的是了解畜群血清抗体的消长情况,及时发现抗体的异常状况并采取应对措施,其重要的功能还在于帮助选择免疫时机和评估免疫效果。
抗体监控公认的标准方法是病毒中和试验,因为中和抗体水平能够直接体现猪只对猪瘟病毒感染的抵抗力,虽然目前有一些报道表明不同的猪瘟分离株耐受中和抗体的能力有所不同,即有些毒株需要更高的中和抗体水平方可奏效,但对一个毒株而言,中和抗体水平与猪只的抵抗力是呈现明显的正相关性。
虽然中和抗体能够体现猪群抵抗力,但临床上用测定中和抗体的方法来监控免疫效果的农场并不多见,其主要原因是病毒中和试验操作起来非常困星及其代谢产物环丙沙星能完全分开,其保留时间依次为8.3min和6.2min。
本试验建立的检测方法具有灵敏度高、选择性良好、线性范围较宽(0.01～2.00 g/m l)、受外界条件影响较少等优点。
恩诺沙星在乳汁中的平均绝对回收率为97.29%,批间和批内的平均变异系数分别为2. 29%、3.35%;环丙沙星在乳汁中的平均绝对回收率为97.27%,批间和批内的平均变异系数分别为2. 62%、4.61%;在牛奶中的检测限为10ng/ml。
间接ELISA与中和试验检测O型FMDV疫苗免疫猪血清抗体的比较研究
间接ELISA与中和试验检测O型FMDV疫苗免疫猪血清抗体的比较研究刘清源;向华;黄元;陈晶;向蓉;郑海学;刘宇【期刊名称】《广东农业科学》【年(卷),期】2015(042)009【摘要】血清中和抗体滴度的高低,体现了血清对病毒感染的中和能力,是评价疫苗免疫效果的重要指标.对国内3个大型猪场共120头猪的血清样品分别进行O型口蹄疫病毒ELISA和病毒中和试验,并分别比较两种方法的符合率和阳性检出率.结果表明,两种方法的阳性符合率和阴性符合率分别为77.3％和72.2％,总符合率为75％,均能有效检测猪血清中的口蹄疫抗体水平,但是采用间接ELISA检测血清抗体,存在一定比例的假阳性或假阴性.病毒中和试验更适合进行口蹄疫血清学的检测.【总页数】5页(P110-114)【作者】刘清源;向华;黄元;陈晶;向蓉;郑海学;刘宇【作者单位】华南农业大学兽医学院,广东广州510642;广东省农科院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州510640;广东省农科院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州510640;广东省农科院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州510640;广东省农科院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室,广东广州510640;中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原微生物国家重点实验室,甘肃兰州730046;华南农业大学兽医学院,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】S852.5+2【相关文献】1.猪FMDV的VP1结构蛋白特异性抗体间接ELISA的建立 [J], 陈磊;付薇;胡晓静;熊毅;潘琼;刘棋2.试纸条检测O型FMDV疫苗免疫猪抗体消长规律 [J], 徐红蕊;张敏3.阻断ELISA与中和试验检测猪瘟疫苗免疫猪血清抗体的比较 [J], 李素;李尚波;王文成;苗玉和;马振宇;马秀玲4.猪口蹄疫O型灭活普通疫苗和猪口蹄疫O型灭活疫苗免疫效果分析与讨论 [J], 张翠花5.猪O型口蹄疫合成肽疫苗及猪O型口蹄疫高效灭活疫苗免疫效果对比试验 [J], 占松鹤;朱良强;刘华;何长生;江定丰;王军;王非;郑举;潘鑫因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
猪瘟PPA-ELISA和Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较及其应用
猪瘟PPA-ELISA和Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较及其应用杨晓梅;林毅;邓小东;张道永;李力;曾惠【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2000(013)0Z1【摘要】@@ 随着论断技术的快速发展,猪瘟的抗体检测方法也不断增多.血清中和试验、免疫琼脂扩散试验、对流免疫电泳、荧光抗体技术、聚合梅链式瓜等方法都已用于猪瘟的抗体检测,这些方法特异性强、敏感性高,但操作烦琐、费时,而且有些方法的技术和设备条件要求较高,在基层难以推广使用.尤其对于模化猪场大批样品的快速检测,更需要快速和操作简便的论断检测方法.酶免疫技术中的酶联免疫吸附试验(ELISA)被认为是目前检测猪瘟抗体较好的一种方法,该法简便、快速、敏感、特异快,并且试剂盒已商品化.因此我们选用了葡萄球菌A蛋白酶联免疫吸附试验(PPA-FLISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)技术在规模化猪场进行了抗体检测的比较试验和实际应用.现将试验情况报告如下.【总页数】3页(P128-130)【作者】杨晓梅;林毅;邓小东;张道永;李力;曾惠【作者单位】四川省畜牧科学研究院,中国,成都,610066;四川省畜牧科学研究院,中国,成都,610066;四川省畜牧科学研究院,中国,成都,610066;四川省畜牧科学研究院,中国,成都,610066;四川省畜牧科学研究院,中国,成都,610066;四川省畜牧科学研究院,中国,成都,610066【正文语种】中文【中图分类】S852.4+3【相关文献】1.猪瘟PPA—ELISA和Dot—ELISA检测猪瘟抗体的比较及其应用 [J], 杨晓梅;林毅2.应用猪瘟抗体免疫金标试纸检测猪瘟抗体的比较试验和改进试验 [J], 周铁忠;张利勃;刘丽影;曹丽;李晓卫;张东野;李永深;赵颖;李晓娥;郝运河;谷波3.PPA-ELISA 检测试剂盒在猪瘟抗体临床监测中的应用 [J], 祖立闯;谢金文;王金良;苗立中;李峰;沈志强4.应用免疫金标检测试纸与其它方法检测猪瘟抗体的比较 [J], 郑则乐;洪英;魏良宇5.PPA-ELISA检测猪瘟抗体方法在江苏省的应用 [J], 李亚敏;王伟峰;郝玉玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
阻断ELISA与中和试验检测猪瘟疫苗免疫猪血清抗体的比较
阻断ELISA与中和试验检测猪瘟疫苗免疫猪血清抗体的比较李素;李尚波;王文成;苗玉和;马振宇;马秀玲【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2007(28)10【摘要】应用阻断ELISA和中和试验2种不同的方法对猪瘟疫苗免疫前后的猪血清抗体进行了检测,在所检测的6头仔猪免疫前和免疫后的12份血清中,2种方法的检测结果相符.应用Western blot对部分血清进行了验证,结果与2种方法检测结果一致,表明阻断ELISA和中和试验结果确实、特异,能真实反映免疫猪群的抗体水平.【总页数】4页(P40-43)【作者】李素;李尚波;王文成;苗玉和;马振宇;马秀玲【作者单位】吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062;辽宁益康生物制品有限公司,辽宁辽阳,111000;辽宁益康生物制品有限公司,辽宁辽阳,111000;辽宁益康生物制品有限公司,辽宁辽阳,111000;辽宁益康生物制品有限公司,辽宁辽阳,111000;辽宁益康生物制品有限公司,辽宁辽阳,111000;辽宁益康生物制品有限公司,辽宁辽阳,111000【正文语种】中文【中图分类】S852.651【相关文献】1.间接ELISA与中和试验检测O型FMDV疫苗免疫猪血清抗体的比较研究 [J], 刘清源;向华;黄元;陈晶;向蓉;郑海学;刘宇2.两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验 [J], 张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政3.应用固相竞争ELISA、液相阻断ELISA和中和试验检测口蹄疫抗体的比较研究[J], 廖德芳;李乐;苗海生;高林;信爱国;朱明旺;李华春4.阻断ELISA与病毒中和试验检测PPR抗体的比较分析 [J], 汪萍;尹传振;柏庆;鲁立柱;曹辉;王延;黄炯5.用改良ELISA试验检测猪瘟血清抗体 [J], 邱昌庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
猪瘟病毒中和性单克隆抗体制备及阻断ELISA方法建立
猪瘟病毒中和性单克隆抗体制备及阻断ELISA方法建立杨利;张浩明;李丁;郑其升;芮荣【期刊名称】《畜牧与兽医》【年(卷),期】2022(54)5【摘要】采用毕赤酵母表达的猪瘟病毒(CSFV)重组E2蛋白免疫BALB/c小鼠,经间接免疫荧光(IFA)筛选,获得了17株特异性单抗。
经病毒中和试验(VNT)验证,上述单抗均具有CSFV中和活性,其中单克隆抗体3H9的病毒中和效价最高,大于1∶10240。
采用HRP标记的CSFV单抗3H9为阻断抗体,配合酵母表达的CSFV E2蛋白作为包被抗原,建立了一种用于检测猪血清中CSFV中和抗体的阻断ELISA 方法。
该方法优化后的抗原包被浓度为0.5μg/mL,阻断抗体稀释度为1∶8000。
通过对100份阴性猪血清的检测,确定该方法的阻断率cut-off值为30%。
该方法敏感性高,对中和抗体效价低至1∶16的血清检测仍呈阳性;特异性强,仅与CSFV抗体阳性猪血清呈阳性反应,与其他猪病病毒及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体阳性猪血清均呈阴性反应;良好的可重复性,批内、批间变异系数分别为0.90%~3.21%、1.89%~6.57%,均小于10%。
对188份现有猪血清检测结果显示,该方法与病毒中和试验和IDEXX猪瘟病毒抗体检测试剂盒的符合率分别为96.3%、94.7%。
用该方法对南京市浦口区某养殖场猪瘟疫苗免疫猪血清进行检测,抗体阳性率为80.8%(189/234),证明了该疫苗免疫效果良好。
此外,该方法为一步法,与现有方法相比,检测过程缩短至40 min。
试验结果表明,利用酵母表达E2蛋白并制备中和抗体,建立了一种更加高效检测猪瘟中和抗体的阻断ELISA方法。
【总页数】7页(P68-74)【作者】杨利;张浩明;李丁;郑其升;芮荣【作者单位】南京农业大学动物医学院;江苏省农业科学院【正文语种】中文【中图分类】S852.53【相关文献】1.应用假病毒和假型病毒制备抗猪瘟病毒E2蛋白中和性单克隆抗体的初步研究2.牛传染性鼻气管炎病毒单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立3.猪圆环病毒2型血清中和抗体阻断ELISA检测方法的建立及应用4.非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA方法的建立5.非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及阻断ELISA检测方法的建立因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
IHA与ELISA检测猪瘟病毒抗的比较
IHA与ELISA检测猪瘟病毒抗的比较沈绍新;戴爱玲;李晓华;杨小燕【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2009(030)009【摘要】应用间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测猪瘟病毒抗体,IHA试验以1∶16为判定孔,抗体效价大于或等于1∶16为抗体阳性;ELISA试验以抗体阻断率40%为判定标准,阻断率大于或等于40%为抗体阳性,同步检测了122份规模化猪场不同阶段免疫猪血清.结果ELISA检测抗体阳性率比IHA检测抗体阳性率低,阴性、阳性相符的血清数为92份,相关性为 75.4%,不同抗体水平分布的血清数也不同,个别血清出现较大差异,卡方检验P值为0.13(＞0.05),两种检测方法统计上无差异,研究结果为选择猪瘟病毒抗体检测方法提供参考.【总页数】4页(P20-23)【作者】沈绍新;戴爱玲;李晓华;杨小燕【作者单位】龙岩学院生命科学学院,福建龙岩,364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩,364000;福建省高等学校预防兽医学与生物技术重点重点实验室,福建龙岩,364000;福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心,福建龙岩,364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩,364000;福建省高等学校预防兽医学与生物技术重点重点实验室,福建龙岩,364000;福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心,福建龙岩,364000;龙岩学院生命科学学院,福建龙岩,364000;福建省高等学校预防兽医学与生物技术重点重点实验室,福建龙岩,364000;福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心,福建龙岩,364000【正文语种】中文【中图分类】S852.651【相关文献】1.应用正向间接血凝(IHA)与阻断ELISA方法检测猪瘟抗体的比较试验 [J], 胡杰;磨龙春;黄夏;刘棋;梁媛;莫胜兰;屈素洁;陈义祥;陆文俊;郑敏;李军;施开创2.液相阻断ELISA法与正向间接血凝(IHA)法检测猪瘟抗体结果比较 [J], 刘胜宇;汪峰;胡元元3.两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验 [J], 张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政4.IHA AGP及Dot—ELISA检测猪瘟抗体的比较试验 [J], 杜玉磐;乐正中5.应用IHA检测猕猴B病毒相关抗体及其与ELISA、NT的比较 [J], 王建飞;王晓明;符明泰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验
两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2016(052)007【摘要】为了比较两种猪瘟病毒抗体检测试剂盒对猪瘟疫苗免疫抗体的检测结果,本试验将27头猪瘟抗体阴性仔猪免疫猪瘟活疫苗后7、10、14、17、20、23、27、30、34 d共9个时间点采血,分别用两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒进行抗体检测,同时采用OIE指定方法-荧光抗体病毒中和试验对检测结果进行验证.结果表明,虽然两种试剂盒均可在免疫后30 d 100％检测到免疫猪体内的猪瘟抗体,但国产试剂盒在疫苗免疫后第10天便可在6/21猪体内检测到猪瘟抗体,20 d时抗体检测全为阳性,而美国IDEXX公司的试剂盒在疫苗免疫后27 d才在11/21猪体内检测到猪瘟抗体,30 d时才全部变为阳性,而两种试剂盒对6头阴性对照猪血清连续跟踪检测34 d均为阴性.由此可以得出结论:国产试剂盒在疫苗免疫后的早期抗体检测中敏感性明显离子IDEXX公司的试剂盒.【总页数】4页(P28-29,32,中插2)【作者】张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政【作者单位】中国兽医药品监察所,北京海淀100081;中国兽医药品监察所,北京海淀100081;中国农业大学动物医学院,北京海淀100193;中国兽医药品监察所,北京海淀100081;中国兽医药品监察所,北京海淀100081;中国兽医药品监察所,北京海淀100081;中国兽医药品监察所,北京海淀100081【正文语种】中文【中图分类】S852.65+1【相关文献】1.猪瘟病毒5种ELISA抗体检测试剂盒的比较 [J], 吴秀娟;李凯航;杨显超;王建2.3种口蹄疫O型抗体检测试剂盒对疫苗免疫牛血清抗体检测的比较试验 [J], 董春娜;马爱荣;张蕾;李静;巴利民;王振豹;齐鹏;汪明;肖进3.猪瘟ELISA抗体检测试剂盒的应用效果比较试验 [J], 李晓薇;李永强;钟小艳4.猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒的比较试验 [J], 蒋卉;李翠;戴志红;王在时5.猪瘟病毒化学发光竞争ELISA抗体检测试剂盒的应用研究 [J], 徐璐;王琴;张乾义;夏应菊;任雪健;李翠;邹兴启;徐嫄;王兆;赵启祖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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豬瘟研究組蕭雅如約聘研究助理
摘要
為加強豬場豬瘟防疫，我國以LPC疫苗免疫來防範豬瘟的發生，而豬瘟抗體的監測是以血清中和試驗為主，但由於血清中和抗體檢測法費時費力，因此本研究之目的，藉由比較市售IDEXX®豬瘟抗體ELISA檢測套組與中和抗體間之相關性，進而評估市售豬瘟抗體ELISA檢測套組應用於血清監控之可行性。利用評估仔豬免疫LPC疫苗後，來比較其血清中和抗體力價與豬瘟抗體ELISA檢測套組之相關性。結果顯示ELISA抗體與中和抗體力價極為相似，檢測之結果相關係數r值為0.827，以上結果顯示豬瘟抗體檢測在ELISA與中和抗體檢測間具有高度相關性。利用ELISA檢測套組分析2006年豬瘟送檢樣品15個豬場中，呈現免疫反應正常豬場(陽性率≧80%)之上市肉豬血清ELISA抗體力價，抗體平均力價為70.68%，可作為正常上市肉豬經免疫後抗體力價之參考。監控潛在豬瘟污染場中高豬瘟抗體力價豬隻之實驗中，結果亦顯示血清經80倍稀釋後再以ELISA套組檢測，可有效區分高ELISA抗體力價≧80%之LPC疫苗正常免疫豬隻(33.97 ±3.18%)及豬瘟病毒感染耐過豬隻之血清(60.23 ±4.77%)，因此血清樣品經80倍釋稀後，若ELISA抗體力價≧47.02%時，則可懷疑曾遭受豬瘟病毒之潛在感染。以上結果顯示豬瘟抗體檢測在ELISA與中和抗體檢測間具有相關性，可應用於豬瘟血清抗體監測、豬場免疫評估及遭受野外病毒污染之豬場監A test in CSF antibody
Hog cholera division Ya Ju Hsiao
Prevention with LPC vaccine and immunosurveillance for classical swine fever (CSF) are the most important issues in control and CSF eradication program inTaiwan. Serum neutralization (SN) test has been thought as the golden standard method for detection CSF, but it is not suitable for large-scale screening due to arduous and time-consuming. The experiment was aimed to compare the correlation between SN and commercial CSF antibody enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits and further evaluate the application of ELISA test on LPC vaccination program and other CSF immuno-surveillance. First, we compared the correlation between different levels of SN titers and IDEXX® CSF antibody ELISA titers. The results show that the correlation (r=0.827) between SN titers and IDEXX® ELISA kits,have a high r value, it is applied in following tests.We used ELISA kits to analysis serum sample from 52 farms in 2006. The result was showed that the mean of titer was 70.68% in 827 samples (collection from the farm whose >85% positive prevalence). This ELISA titer of marking pig vaccinated by LPC vaccine could be a reference data. In the other experiment, the ELISA tests were performed in CSF virus contamination farms. The results indicated that the IDEXX ELISA kit could differentiate the LPC- vaccinated (34.67±3.18%) from CSF virus experimentally infected pigs (58.62±4.77%). According to this result, the ELISA titer was more than 47.5%, it could be suspected CFS infection pig. These data was demonstrated that it was high correction between ELISA and SN test. It could be perform in large scale immunosurveillance, evaluation of LPC vaccination program and efficacy, and monitor the farm whether was persistent infection by CSF virus.It can be applied in large scale of immunosurveillance, evaluation of LPC vaccination program and efficacy, and, perhaps screen of CSF virus persistent infection in pig farms.