临床病原学检测与标本的正确留取

临床病原学检测与标本的正确留取

痰液标本采集与运送

⏹痰液由气管、支气管和肺泡所分泌

⏹正常情况下分泌物甚少，呼吸道粘膜受刺激时，分泌物增多，但多为清晰、

水样，无临床意义。

⏹病理情况下痰量增多，呈不透明并有性状改变

采集目的

一般可用于普通细菌、分枝杆菌、真菌和军团菌的涂片或培养检测，经气管穿刺吸引物可用于厌氧菌的检测。

一般原则

1采集标本的最佳时机应在使用抗菌药物之前。

2宜采集清晨第二口痰液。

3对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24小时内多次采样送检，除非痰液外观性状出现改变。

4怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检。

采集方法

1、自然咳痰与雾化倒痰法：无痰或痰量极少者可用3%～5%氯化钠溶液5ml雾化吸入约5min后留取痰液。如有可能，应在护理人员直视下留取清晨第二口痰。嘱咐患者留取前摘去牙托，清洁口腔，如刷牙后反复用生理盐水漱口；深吸气后用力自气管深部咳出痰液，置无菌容器内。应尽可能防止唾液及鼻咽部分泌物混入样品，不应用纸巾包裹痰液。

2、支气管镜法：鼻或口腔插入支气管镜。常用采集方法有经支气管镜吸引、支

气管肺泡灌洗、防污染毛刷采样或防污染支气管肺泡灌洗等。

3、经人工气道吸引法：进行手卫生后将一次性吸痰管末端拆开，连接吸引器，

调节吸引器置适宜负压（成人：40.0～53.3kpa;小儿：＜40.0kpa）。将一次性吸痰管外包装取出，戴手套持吸痰管试吸生理盐水，检查管道是否通畅。折叠一次性吸痰管末端，插入口腔或鼻腔或人工气道至适宜深度，放开吸痰管末端，轻柔、灵活、迅速地左右旋转上提吸痰管吸痰。见吸痰管内有痰液吸出，即折叠一次性吸痰管退出，将一次性吸痰管与吸引器分离（使用人工呼吸机者，一次吸痰时间不超过15s，高浓度氧气1～2min）。将痰液注入无菌容器（试管）内，如痰液粘稠可用一次性针筒向吸痰管末端注入少量生理盐水，将痰液冲入无菌容器（试管）内。

标本运送

⏹痰以深咳排出后，应装于有密封瓶盖的无菌塑料容器中，以免感染自己或他

人。

⏹标本应及时送检，室温≤3h。

⏹若不能及时处理，可选择运送培养基运送和保存标本，但不应≥48h。

⏹痰标本要求

白细胞（WBC）≥25/LPF。

⏹鳞状上皮细胞（SEC）＜10/LPF。

⏹如不符合上述指标，通知临床重新采样。

血培养标本采集

血培养指征：

⏹患者出现寒战，体温超过38℃或低体温（≤36℃)

■怀疑血流感染时，尤其存在以下情况时，应抽血做细菌和真菌培养：医院内肺炎；留置中心静脉导管超过72h；感染性心内膜炎；骨髓炎；有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状，临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况。

⏹白细胞过多（≥10000/μl），并有核左移现象。

⏹中性粒细胞过少（≤1000/μl）。

采血时机：

一旦怀疑有血流感染可能，应立即采血做血培养

最好在抗菌药物治疗前或停用抗菌药物24h后，以寒战、发热时采集为宜。

采血流程：

消毒：1培养瓶消毒程序：用酒精消毒培养瓶橡皮塞，待干燥后使用。2皮肤消毒程序：用安尔碘消毒液从穿刺点向外划圈消毒，至消毒区域直达5cm以上，待消毒液挥发干燥后（常须30s以上）穿刺采血。

静脉穿刺和培养瓶接种：采用负压血培养瓶，将患者静脉直接吸入血培养瓶，减少污染环节。先注于厌氧培养瓶，

采血部位

⏹采血部位通常为肘静脉。

⏹对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或髂前（后）上棘处消毒后抽取骨

髓培养。

⏹疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。

采血量：以培养基与血液之比10:1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。采血量过少会明显降低阳性率。成人每次每培养瓶采血8～10ml，婴幼儿每次每培养瓶采血2ml。

需要采集多少份血培养？

每名患者应至少采集2份血培养，最好为3份（CLSI规定采集2～3份血培养）。在一名败血症患者初期诊断时，绝不能只采集1份血培养（CLSI强调了此观点）。注意：1“份”是指一次静脉穿刺。

运送要求

■所有标本采集后都应立即送往实验室，最好在2h内。

■如果不能及时送检，宜置于室温环境。切勿冷藏。

■送检标本应正确粘贴条形码，注明采样时间和送检时间。

■安全防护：放标本的容器必须防漏，禁止将渗漏的标本送往实验室。

报告要求：

■紧急口头（电话）报告：血培养出现阳性警报时，立即进行革兰氏染色、镜检，并在最短时间内将结果向临床主管医生进行紧急口头（电话）报告。

■最终结果（书面）报告

脑脊液采集和运送

⏹穿刺腰椎获得，特殊情况可采用小脑延髓池或脑室穿刺

⏹采集后置无菌管立即送检，不能超过1h，同时应避免凝固和混入血液

⏹培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，应将标本置于25℃条件下保

温送检，不可置冰箱保存

⏹做病毒检查的脑脊液标本应放置冰块，可在4℃保存72小时。

尿液采集和运送

■正常人膀胱中的尿液是无菌→外尿道排出时受外尿道中正常菌群污染→混有细菌。

■采集时机：宜为抗菌药物使用之前的清晨第一次尿液。

采集方法

⏹采集消毒中段尿，在采集尿液前，须以肥皂和清水洗净尿道口，弃去前段尿，

留取中段尿或无菌操作取中段尿于无菌容器中，立即送检，2h接种。

⏹取经尿道排出的中段尿，细菌数不会超过103cfu/ml。

⏹泌尿系感染时，尿中细菌数高于104~5/ml。

因而，以此为界作为诊断泌尿系感染依据

导尿管尿

1直接导尿法：使用安尔碘消毒剂消毒会阴局部，用导尿管直接经尿道插入膀胱，先弃其前段尿液约15ml，再留取中段尿10～20ml于无菌容器内。

2留置导尿管法：医院内尿路感染中，临床最常用此法。采集前先夹住导尿管，采集时则松管弃其前段尿液，使用安尔碘消毒剂消毒导尿管的采样部位，使用无菌注射器斜刺入导尿管（从采样口或靠近尿道的导尿管管壁）抽取10～20ml于无菌容器内。

标本运送

标本采集后应及时送检并接种，室温下保存时间不应超过2h（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存）。如果不能及时运送或接种，应4℃冷藏，但保存时间也不应超过8h.

注意事项