色谱分析实验讲义2014.3.12

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色谱分析技术 ppt课件

色谱分析技术  ppt课件
(1)吸附色谱 (2)分配色谱 (3)离子交换色谱 (4)分子排阻色谱(凝胶色谱法)
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填充柱色谱法 GC 毛细管柱色谱法
色谱法
高效液相色谱法 柱色谱 经典液相色谱法
LC 薄层色谱法
平面色谱法 纸色谱
吸附柱色谱 分配柱色谱 离子交换色谱 凝胶色谱
CE 毛细管电泳色谱法
PPT课件
14
三、色谱过程
2、点样
(1)样品溶液的制备: 怎样选择溶剂? 水可以用吗?
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39
2、点样
(2)点样量: 与薄层板的关系 太多太少的影响
点样基线:距底边2.0cm 样点直径:2-4mm 点间距离:1.5-2.0cm
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40
2、点样
(3)点样方法: 划线、样品记号点、点样
注:动作要轻, 毛细管或点样器不能混用, 斑点大小适当,可多次点样。
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50
(二)杂质检查(杂质限量检查)
2、自身稀释对比法(杂质结构不明或无杂质对照品)
样品溶液稀释制成一定浓度的溶液 样品制成一定浓度溶液
按相同的点样量点样
展开后观察斑点颜色深浅和大小
如地西泮中有关物质的检查: 取本品的细粉适量(约相当于地西泮200mg),加丙酮5ml,振
摇,使地西泮溶解,滤过,取滤液作为供试品溶液;精密量取适量, 加丙酮稀释成每1ml中含地西泮0.20mg的溶液,作为对照溶液。点 样展开后,供试品溶液如显杂质斑点,与对照溶液的主斑点比较, 不得更深。
PPT课件
48
四、结果计算和判断 (一)定性鉴别
判断依据:Rf值、Rs值 1、查找资料:影响Rf值的因素
吸附剂种类、活度、颗粒大小;展开剂纯度和极性; 薄层厚度;点样量;展开方式、温湿度;展开槽中的预饱 和状态等。 2、对照品比较法:常用。

《色谱分析法》PPT课件

《色谱分析法》PPT课件
死时间tm:不被固定相溶解或吸附的组分的保留时 间(即组分在流动相中的所消耗的时间),或流动 相充满柱内空隙体积占据的空间所需要的时间,又 称流动相保留时间
调整保留时间tR’:组分的保留时间与死时间之差值, 即组分在固定相中滞留的时间
tR' tR tm
或t
' R
tR
t0
保留体积VR:从进样开始到组分出现浓度极大点时 所消耗的流动相的体积

16(
t
' R
)2
W
5.54( tR' )2 W1 2
H eff L / neff
讨论:neff 和H eff 扣除了死时间,更能真实的反映柱效 k ,neff n理
小结
塔板理论的贡献:从热力学角度Hale Waihona Puke 提出了评价柱效高低的n和H的计算式
塔板数 n是色谱柱的特征参数。当色谱柱长度一定时,
2. 纵向扩散项(分子扩散项):B/u
产生原因: 峰在固定相中被流动相推动向前、展开 →两边浓度差
纵向扩散系数 B 2 Dg
— 弯曲因子( 1) 填充柱 1 空心毛细管柱 1
Dg — 组分在载气中的扩散系数(常数)
影响因素: B u tR ,B Dg
Dg

T

一般分类 液相色谱LC
分离方法
L-L分离
固定相
吸附在固定相表面的液体
液相-固定相 固定相表面键合的有机相
液固或吸附
离子交换
尺寸排阻
气 相 色 谱 GC (流动相为气 体)
气、液 气-键相 气-固定体
超临界流体色 谱 SFC ( 流 动 相超临界流体)
固体 离子交换树脂 聚合物中间隙 吸附在固定相表面的液体 固体表面键合的有机物 固体 固体表面键合的有机物

色谱分析气相色谱课件

色谱分析气相色谱课件

色谱分析气相色谱课件一、教学内容本节课的教学内容选自人教版小学科学教材六年级下册第四章“物质的组成与结构”中的第二节“色谱分析”。

本节内容主要介绍了色谱分析的基本原理、气相色谱的实验操作以及色谱在科学研究和生产中的应用。

二、教学目标1. 让学生了解色谱分析的基本原理,知道气相色谱的实验操作步骤。

2. 培养学生运用色谱分析解决实际问题的能力。

3. 激发学生对科学探究的兴趣,培养学生的创新精神和实践能力。

三、教学难点与重点重点:色谱分析的基本原理、气相色谱的实验操作步骤。

难点:色谱在科学研究和生产中的应用。

四、教具与学具准备教具:多媒体课件、气相色谱仪模型、色谱柱、样品瓶、注射器等。

学具:实验报告册、色谱纸、彩笔、剪刀等。

五、教学过程1. 情景引入:通过播放一段关于警察利用气相色谱仪抓犯罪分子的新闻报道,引发学生对色谱分析的兴趣。

2. 探究色谱分析的基本原理:引导学生观察气相色谱仪模型,了解色谱柱、检测器等组成部分,并通过PPT讲解色谱分析的基本原理。

3. 实验操作:学生分组进行气相色谱实验,观察不同样品在色谱柱中的运行情况,记录实验数据。

4. 分析与讨论:引导学生根据实验现象,分析色谱分析的原理,讨论色谱在实际生活中的应用。

六、板书设计色谱分析的基本原理1. 色谱柱:分离混合物的主要部分2. 检测器:检测分离后的组分3. 流动相:携带样品运行色谱柱4. 固定相:吸附样品中的组分气相色谱实验操作步骤1. 样品制备:将样品溶解在适当的溶剂中2. 样品注射:用注射器将样品注入色谱柱3. 色谱运行:打开气源,观察样品在色谱柱中的运行情况4. 数据记录:记录色谱峰的位置、大小等信息七、作业设计答案:色谱分析的基本原理是利用样品在固定相和流动相中的不同分配系数,实现混合物的分离。

实验操作步骤包括样品制备、样品注射、色谱运行和数据记录等。

2. 思考题:结合生活实际,思考色谱在科学研究和生产中的应用。

答案:色谱在科学研究和生产中广泛应用,如石油化工、医药、食品安全、环境监测等领域。

《色谱分析基础》课件

《色谱分析基础》课件

薄层色谱法:利用薄层色谱技术, 分离和分析液体和固体混合物
色谱分析的原理
色谱分析是一种分离和鉴定混合物的方法 原理:利用不同物质在固定相和流动相中的分配系数不同,实现分离 色谱分析包括气相色谱和液相色谱两种类型 气相色谱适用于分析挥发性物质,液相色谱适用于分析非挥发性物质
色谱柱的选择和使用
色谱柱类型: 填充柱、毛细 管柱、微板柱

样品保存:选 择合适的保存 方法和保存条

样品预处理: 包括样品的粉 碎、研磨、过
筛等
样品提取:选 择合适的提取 方法和提取条

样品净化:去 除样品中的杂 质和干扰物质
样品浓缩:将 提取液浓缩至 适宜的浓度进
行色谱分析
进样技术
进样方式:手动进样、自动进样 进样量:根据样品浓度和检测需求确定 进样时间:根据仪器性能和样品性质确定 进样温度:根据样品性质和检测需求确定
检测:选择合适的检 测器,如紫外检测器、 荧光检测器等,检测 样品的响应信号
添加标题
数据处理:对检测信 号进行数据处理,如 峰面积、保留时间等, 得到样品的定性和定 量结果
实验结果和数据分析
实验结果:色谱图中的峰高、峰面积、保留时间等参数 数据分析:通过峰高、峰面积、保留时间等参数进行定性和定量分析 结果解释:根据分析结果,对样品进行定性和定量分析 数据处理:对实验数据进行处理,如平滑、基线校正等 结果报告:撰写实验报告,包括实验方法、结果、讨论和结论等

实验结束后, 及时清理实验 现场,确保实
验室整洁
仪器设备安全防范措施
确保仪器设备接地良好,避免静电 干扰
操作仪器设备时,应佩戴防护眼镜 和手套等防护用品
添加标题
添加标题

《色谱法分析法 》课件

《色谱法分析法 》课件

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汇报人:
色谱法分析法的优 缺点
优点
分离效果好:能够 将复杂混合物中的 组分分离出来
灵敏度高:能够检 测到微量的组分
应用广泛:适用于 各种样品的分析, 包括气体、液体和 固体
自动化程度高:可 以实现自动化操作 ,提高工作效率
缺点
样品处理复杂,需要专业的技术人员进行操作 分析时间长,需要等待较长时间才能得到结果 仪器设备昂贵,需要投入较大的资金进行购买和维护 操作环境要求高,需要保持实验室的洁净和温度稳定
评估指标:分离度、分辨率、 峰形、保留时间等
分离度:衡量两个相邻峰的 分离程度,越高越好
分辨率:衡量色谱图中两个 相邻谱峰的形状, 越尖锐越好
保留时间:衡量物质在色谱 柱中的保留时间,越短越好
色谱法分析法的应 用
在食品分析中的应用
检测食品中的添加 剂和污染物
鉴别食品中的营养 成分和功能成分
分离原理
色谱法分析法是 一种分离混合物 的方法
原理:利用不同物 质在固定相和流动 相中的分配系数不 同,实现分离
色谱法分析法可 以分为气相色谱 法和液相色谱法
气相色谱法适用 于挥发性物质, 液相色谱法适用 于非挥发性物质
检测原理
色谱法分析法是一种分离和检测混合物的方法 原理:利用不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同,实现分离 检测方法:通过检测器检测出各组分的信号,进行定性和定量分析 应用:广泛应用于化学、生物、医药等领域
和杂质
生物技术:检 测生物样品中 的蛋白质、核 酸等生物大分

法医学:检测 生物样品中的 毒品、毒物等
色谱法分析法的实 验操作
实验前的准备
样品准备:样品处理、样品 稀释等

色谱分析课件(第1章)

色谱分析课件(第1章)

05-23-02
1-2 色谱法基本概念
固定液
载体
液体固定相
05-23-02
返回主目录
结束
1-2 色谱法基本概念 流动相:分离过程中携带
待分离组分在色谱柱中流 过固定相的流体, 过固定相的流体,如石油 醚. ①气体:载气, 气体:载气, N2,H2,He,Ar. ②液体:载液,有机溶 液体:载液, 剂,甲醇,乙醚、丙酮等 甲醇,乙醚、 及水。 及水。
05-23-02
返回主目录
结束
1-1 色谱、色谱法、色谱分析法 色谱、色谱法、
色谱分离示意图
05-23-02
返回主目录
结束
1-1 色谱、色谱法、色谱分析法 色谱、色谱法、
色谱: 色谱:分离出的植物色素 谱带。 谱带。 色谱法:通过特殊装置将 色谱法: 植物色素—混合物分离 植物色素 混合物分离 的方法。 的方法。 色谱分析法: 色谱分析法:高选择高效 能的分离作用与高灵敏 度的检测技术的结合进
05-23-02
返回主目录
结束
思考题
1、色谱分离的本质(依据)是什么? 色谱分离的本质(依据)是什么? 2、色谱、色谱法和色谱分析法的由来? 色谱、色谱法和色谱分析法的由来? 3、分配系数的表示式,以及由色谱图的出峰顺 分配系数的表示式, 序判断期分配系数的大小? 序判断期分配系数的大小? 4、色谱分析法的分类的依据及其分类方法? 色谱分析法的分类的依据及其分类方法? 5、试列举5例说明分析法的应用范围。 试列举5例说明分析法的应用范围。
多媒体CAI课件 多媒体CAI课件 CAI
化工系
over
05-23-02
分析化学
前 言
17世纪 利用化学反应及计量关系的分析方法) 世纪, 化学分析 (17世纪,利用化学反应及计量关系的分析方法) 19世纪 采用复杂的仪器设备, 世纪, 仪器分析 (19世纪,采用复杂的仪器设备,通过测定物质的物理或化学性 质的参数及变化确定物质的化学组成、含量及结构方法) 质的参数及变化确定物质的化学组成、含量及结构方法)

色谱分析法专业知识讲座

色谱分析法专业知识讲座
能够直接从色谱图上计算分离度。
12/30/2023
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§19—5 定性和定量分析
一、定性分析 色谱定性分析旳任务是拟定色谱图上每一
种峰所代表旳物质。在色谱条件一定时,任 何一种物质都有拟定旳保存时间。所以,在 相同色谱条件下,经过比较已知物和未知物 旳保存值,即可拟定未知物是何种物质。但 是,一般来说,色谱法是分离复杂混合物旳 有效工具,假如将色谱与质谱或其他光谱法 联用,则是目前处理复杂混合物中未知物定 性分析旳最有效旳技术。
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§19—2 线性洗脱色谱及有关术语
在洗脱色谱法中,假如将试样注入色谱柱
头,试样本身不久Байду номын сангаас会在固定相和流动相之间
到达分配平衡。当流动相流过时,试样将在流
动相和新旳固定相上又到达分配平衡。同步,
原来仍在固定相中旳试样与新旳流动相之间也
会形成新旳分配平衡。伴随流动相不断旳流过,
它们就会携带发生分配平衡后而存在于流动相
物质作为内标物,然后进行色谱分析,再由被
测物和内标物在色谱图上相应旳峰面积(或峰高) 和相对校正因子,求出某组分旳含量。
(3)调整保存时间t’R 某组分旳保存时间扣 除死时间后称为该组分旳调整保存时间,即
t’R = tR- tM
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因为组分在色谱柱中旳保存时间tR包括了 组分随流动相经过柱子所需旳时间和组分 在固定相中滞留所需旳时间,所以t’R实 际上是组分在固定相中停留旳总时间。保 存时间可用时间单位(如s)或距离单位(如cm) 表达。
保存时间是色谱法定性旳基本根据,但
同一组分旳保存时间常受到流动相流速旳
影响,在气相色谱中尤为如此,故色谱工 作者常用保存体积等参数进行定性鉴定。

色谱分析(气相)PPT课件

色谱分析(气相)PPT课件

在进行实验之前,应仔细阅读实验指导手 册,了解实验步骤、注意事项和可能的风 险。
使用正确的实验器材
注意实验室通风
确保使用与实验要求相符的器材,如色谱 柱、进样针、检测器等,避免因器材不当 导致实验失败或安全事故。
在实验过程中,应确保实验室通风良好, 避免有害气体积聚。
废弃物处理及环保要求
分类收集废弃物
型。
根据分离要求选择
根据所需的分离度、分析时间 、峰形等要求选择合适的色谱 柱类型和规格。
根据仪器条件选择
根据仪器的型号、规格、操作 条件等选择合适的色谱柱类型 和规格。
根据经验和实践选择
根据实验室经验和实践,选择 常用的、性能稳定的色谱柱类
型和规格。
05
实验操作过程及注意事项
仪器启动与关闭流程
色谱分析(气相)PPT课件
目 录
• 色谱分析概述 • 气相色谱仪器组成及工作原理 • 样品前处理与进样技术 • 色谱柱类型与选择依据 • 实验操作过程及注意事项 • 结果评价与质量控制方法 • 实验安全规范与环保意识培养
01
色谱分析概述
色谱法定义与原理
定义
色谱法是一种物理分离技术,利用物质在固定相和流动相之间的分配平衡,实 现对复杂样品中各组分的分离与纯化。
鼓励使用可再生资源和可降解材料,减少对环境的负担。同时,实验 室也应积极推广循环经济和资源回收利用的理念。
THANK YOU
数据处理
对采集的数据进行定性定量分析,包括峰识 别、积分、校正等步骤。
注意事项
在数据采集和处理过程中要确保数据的准确 性和可靠性,避免误差的产生。
06
结果评价与质量控制方法
定性分析方法
保留时间定性

经典课件仪器分析第九章色谱分析方法导论演示文稿

经典课件仪器分析第九章色谱分析方法导论演示文稿
第四十二页,共101页。
当分配次数足够多时,就能将 具有不同K的组分分开。所以, 我们可以认为,气相色谱法是利 用不同的物质具有不同的K而进 行分离的。而K的不同则是由于 各组分在固定相中的溶解度(对 气-液色谱)或吸附能力(对气固色谱)不同而造成的。
第四十三页,共101页。
2. 分配比:
在一定温度和压力下,组份在两
第二十八页,共101页。
d. 死体积V0:色谱柱管内固定相
颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空 隙和检测器间隙的总和。忽略后两项可 得到:
V0 t0Fco
第二十九页,共101页。
其中,Fco为柱出口的载气流速 (mL/min),其值为:
Fco
F0
Tc Tr

p0 pw p0
F0-检测器出口流速;Tr-室温; Tc-柱温;p0-大气压;pw-室温时水 蒸汽压。
经典课件仪器分析第九章色 谱分析方法导论演示文稿
第一页,共101页。
(优选)经典课件仪器分析第 九章色谱分析方法导论
第二页,共101页。
色谱法的最早应用是 用于分离植物色素,其方 法是这样的:在一玻璃管 中放入碳酸钙,将含有植 物色素(植物叶的提取液) 的石油醚倒入管中。
第三页,共101页。
此时,玻璃管的上端立即出现几 种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗, 随着石油醚的加入,谱带不断地向下移动, 并逐渐分开成几个不同颜色的谱带,继续 冲洗就可分别接得各种颜色的色素,并可 分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。
第二十五页,共101页。
3)保留值
a. 死时间(t0) :不与固定相作用的物
质从进样到出现峰极大值时的时间,它与 色谱柱的空隙体积成正比。由于该物质不 与固定相作用,因此,其流速与流动相的

色谱分析课件

色谱分析课件
用GF254板 -------显色剂显色,破坏性检出方法
通用显色剂
定性分析
1. 与标准对照品在三种不同的展开剂中展开 (加熔点);
2. 制备TLC,将待定性化合物分离后,刮下、 洗脱,再波谱分析;
3. TLC与其它技术联用
定量分析
1. 间接定量(洗脱测定法); 2. 直接定量(薄层扫描法)
薄层扫描法:以一定波长的光照射展开后 的薄层色谱板上被分离组分的斑点,测定 斑点对光的吸收强度或所发出的荧光强度, 进行定量分析的方法。 薄层吸收扫描法 薄层荧光扫描法
色谱法的特点
(1)分离效率高 复杂混合物,有机同系物、异构体。手性异构体。
(2) 灵敏度高 可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。
(3) 分析速度快 一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
(4) 应用范围广 气相色谱:沸点低于400℃的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱:高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。
GC的特点
1. 分离效率高(填充柱上千块塔板;开管柱 106块塔板)
2. 分析速度快 3. 样品用量少(检测限低,高灵敏检测器) 4. 缺点:(约20%样品适用) A. 样品须能气化(350度下有一定的挥发性) B. 热稳定性要好 C. 定性困难
第二节 气相色谱术语、理论
1. 气相色谱流出曲线 2. 分配系数与容量因子 3. 塔板理论 4. 速率理论 5. 分离度 6. 基本分离方程
• 添加剂
荧光指示剂
硝酸银溶液
制板、活化
点样
1.溶剂对样品的溶解度适中; 2.溶剂沸点适中; 3.样品浓度适中; 4.原点位置应在展开剂液面上; 5.定性分析:内径0.5mm管口平整的毛细管

色谱分析实验讲义

色谱分析实验讲义

实验一气相色谱的基本操作及进样练习一、实验目的(1) 了解气相色谱仪的主要结构组成和应用。

(2) 掌握仪器基本操作和调试程序,熟悉气路运行过程。

(3) 明确热导池检测器的操作注意事项。

(4) 掌握气相色谱进样操作要领,练习微量注射器的使用方法。

二、实验原理通过实验了解气相色谱仪的结构与原理。

气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器,按其使用目的可分为分析型、制备型和工艺过程控制型。

但无论气相色谱仪的类型如何变化,构成色谱仪的5个基本组成部分皆是相同的,它们是载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统及数据处理系统。

载气系统:载气是构成气相色谱过程中的重要一相——流动相,一般由高压钢瓶供气。

进样系统:汽化室是进样系统中不可缺少的组成部分,它的作用是把液体样品瞬间加热变成蒸汽,然后由载气带人色谱柱。

分离系统:色谱柱比作气相色谱仪的“心脏”,样品就是在此根据其性质的不同进行分离的。

检测系统:检测器是气相色谱仪的关键部件。

它的作用是将经色谱柱分离后顺序流出的化学组分的信息转变为便于记录的电信号,然后对被分离物质的组成和含量进行鉴定和测量。

数据处理系统:数据处理系统目前多采用微机型色谱数据处理机和配备操作软件包的工作站,既可对色谱数据进行自动处理,又可对色谱系统的参数进行自动控制。

三、仪器与试剂1.仪器气相色谱仪(GC9790型);检测器(热导池TCD);色谱柱(邻苯二甲酸二壬酯DNP);微量进样器(1 μL)。

2.试剂环己烷(AR);载气(氮气或氢气,含量99.99%以上)。

四、实验内容1.开机操作步骤(1)通气:首先连接好色谱柱,在检查气路密封良好的情况下,先逆时针旋转钢瓶总阀,调整减压阀输出压力0.4 ~ 0.5 Mpa,调节气相色谱仪上的载气稳压阀(总压),使其输出压力为0.3Mpa,调节柱前压1和2的稳流阀2~3圈,载气流量氮气约为30mL·min-1,氢气约为40 mL·min-1。

《色谱分析法下》课件

《色谱分析法下》课件
详细描述
色谱分析法与质谱法联用(LC-MS/MS),可以实现样品的快速分离、高灵敏度检测和结构鉴定,广 泛应用于药物代谢、食品安全、环境监测等领域。色谱分析法与光谱法(如红外光谱、拉曼光谱)联 用,可以提供化合物分子结构和官能团的信息,有助于深入了解化合物的性质和行为。
色谱分析法在微流控芯片上的应用
营养成分分析
通过色谱分析法,可以测定食品中的脂肪、蛋白 质、碳水化合物等营养成分的含量,为食品营养 标签提供依据。
食品真伪鉴别
利用色谱分析法可以鉴别食品的真伪,如检测牛 奶是否掺假、蜂蜜是否经过掺杂等。
在环境监测中的应用
大气污染监测
色谱分析法可用于检测 大气中的有害气体和颗 粒物,如二氧化硫、氮 氧化物、PM2.5等,评 估空气质量。
色谱分析法在便携式设备上的应用
总结词
色谱分析法在便携式设备上的应用,可实现现场快速检测和实时分析,满足应急响应、 野外调查等实际需求。
详细描述
便携式色谱分析仪具有轻便、易携带的特点,可随时随地进行样品分析。通过采用高性 能的色谱柱和检测器,以及优化的操作软件,便携式色谱分析仪可实现高灵敏度、高分 辨率的分离和检测,为环境监测、食品安全、药品检测等领域提供便捷的现场分析手段
薄层色谱法
总结词
一种快速、简便的分离分析方法
详细描述
薄层色谱法是一种快速、简便的分离分析方法,适用于小量样品的分离和定性分析。它利用吸附剂表面的吸附作 用将不同物质吸附在固定相上,然后通过溶剂的洗脱进行分离,最后通过观察斑点的颜色或使用检测器进行定量 分析。
高效液相色谱法
要点一
总结词
一种高分离效能、高灵敏度、高选择性的分离分析方法
总结词
色谱分析法在微流控芯片上的应用,可 以实现微型化、集成化、自动化的分离 和检测,提高分析速度和通量,降低分 析成本。

色谱分析法概论(讲义)

色谱分析法概论(讲义)

=
Xa / Sa X m / Vm
吸附系数与吸附剂的 活性、组分的性质和 流动相的性质有关。
X a + nYm
32
2、固定相 多为吸附剂,如硅胶、氧化铝。 硅胶表面硅醇基为吸附中心。
• 经典液相柱色谱和薄层色谱:一般硅胶 • 高效液相色谱:球型或无定型全多孔硅
胶和堆积硅珠。 • 气相色谱:高分子多孔微球等
tR=t0(1+K
Vs Vm
)
k
=
t R
−t 0
=
t' R
tt
0
0
色谱过程方程
23
(三)色谱分离的前提
• KA≠KB 或kA≠kB 是色谱分离的前提。
推导过程:
tV
=
RA
t0(1+KA
s
Vm
)
t R B=
t0(1+KB
Vs ) Vm
ΔtR=
t0
(KA-KB)
Vs Vm
ΔtR≠0
KA≠KB kA≠kB
18
(四)色谱峰区域宽度(柱效参数)
1、标准差(standard deviation;σ):是正态色谱流出 曲线上两拐点间距离之半,即0.607倍峰高处的峰
宽之半。σ的大小表示组分被洗脱出色谱柱的分散 程度。σ越大,组分越分散;反之越集中。
2、半峰宽 (W1/2):峰高一半处的峰宽。
W1/2=2.355σ
30
三、吸附色谱法
1、分离原理 利用被分离组分对固定相表面吸附中 心吸附能力的差别而实现分离。 吸附过程是试样中组分的分子(X)与流动相分子(Y) 争夺吸附剂表面活性中心的过程,即为竞争吸附过 程。
31

色谱讲义

色谱讲义

色谱一、气相色谱的定义:气相色谱是色谱的一种,就是用气体做为流动相的色谱法。

二、气相色谱的分离原理:气相色谱是一种物理的分离方法,利用被测物质各在不同两相间系数(溶液度)的微小差异,当两相作相对运动时,这些物质在两相间进行反复多次的分配,使原来只有微小的差异变成了很大的差别,从而使各组份分离,随后逐一导入鉴定管,由各组份的尝试变化转变为电信号的变化再由鉴定管输出信号,经过电子放大系统在记录仪上描绘出该物质各组份相应的色谱图。

三、在分离分析方面,气相色谱具有以下几个特点:1、高灵敏度:可检出1.0—10g 的物质,可作超纯气体,高分子单体的痕迹量杂质分析和空气中微量毒物的分析。

2、高选择性:可有效地分离性质极为相近的各种同分导构体和各种同位素。

3、高效能:可把组分复杂的榈分离成单组分。

4、速度快:一般分析只需要几分钟即可完成,有得指导和控制生产。

5、应用范围广:即可分析低含量的气、液体,亦可分析高含量的气液体,可不受组分含量的限制。

6、所需式样量少,一般气体量用几ul,微升或几十微升。

7、设备和操作比较简单,仪器价格便宜。

四、色谱的组成1、载体系统:一般有气源钢瓶,稳压恒流装置,净化器压力表和流量计以及供载体连续进行的密闭管路组成。

2、进样系统:就把样品快速而定量地价到色谱术柱上端,以便进行分离,包括进样器和气化室两部分。

3、分离:色谱柱,色谱炉(柱箱)和高温控制装置。

4、监测系统:监测器是色谱仪的眼睛,是一种肥把进入其中各组分的量转换成易于测量的电信号的装置。

5、记录系统:就是色谱工作站,是由检测器输出电信号,转换成数字电信号的装置。

五、色谱注意事项1、不要在不通载体的情况下打开仪器电源并升高柱温。

2、在仪器做样品和老化柱子时柱温不能高于柱子的最高使用温度,否则会损坏柱子。

3、要定期老化柱子(最短一个小时)。

4、要定期清洗进样器衬管。

5、必须确定有柱前压力才能打开仪器,进样器温度要比柱温略高(范围20—40℃)6、柱温不可高于毛细管温度。

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色谱分析实验讲义2014.03.12实验一气相色谱的基本操作及进样练习一、实验目的(1) 了解气相色谱仪的主要结构组成和应用。

(2) 掌握仪器基本操作和调试程序,熟悉气路运行过程。

(3) 明确热导池检测器的操作注意事项。

(4) 掌握气相色谱进样操作要领,练习微量注射器的使用方法。

二、实验原理通过实验了解气相色谱仪的结构与原理。

气相色谱仪是实现气相色谱过程的仪器,按其使用目的可分为分析型、制备型和工艺过程控制型。

但无论气相色谱仪的类型如何变化,构成色谱仪的5个基本组成部分皆是相同的,它们是载气系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统及数据处理系统。

载气系统:载气是构成气相色谱过程中的重要一相——流动相,一般由高压钢瓶供气。

进样系统:汽化室是进样系统中不可缺少的组成部分,它的作用是把液体样品瞬间加热变成蒸汽,然后由载气带人色谱柱。

分离系统:色谱柱比作气相色谱仪的“心脏”,样品就是在此根据其性质的不同进行分离的。

检测系统:检测器是气相色谱仪的关键部件。

它的作用是将经色谱柱分离后顺序流出的化学组分的信息转变为便于记录的电信号,然后对被分离物质的组成和含量进行鉴定和测量。

数据处理系统:数据处理系统目前多采用微机型色谱数据处理机和配备操作软件包的工作站,既可对色谱数据进行自动处理,又可对色谱系统的参数进行自动控制。

三、仪器与试剂1.仪器气相色谱仪(GC9790型);检测器(热导池TCD);色谱柱(邻苯二甲酸二壬酯DNP);微量进样器(1 μL)。

2.试剂环己烷(AR);载气(氮气或氢气,含量99.99%以上)。

四、实验内容1.开机操作步骤(1)通气:首先连接好色谱柱,在检查气路密封良好的情况下,先逆时针旋转钢瓶总阀,调整减压阀输出压力0.4 ~ 0.5 Mpa,调节气相色谱仪上的载气稳压阀(总压),使其输出压力为0.3Mpa,调节柱前压1和2的稳流阀2~3圈,载气流量氮气约为30mL·min-1,氢气约为40 mL·min-1。

(2) 通电:检查仪器开关都应处于“关闭”位置后,开启气相色谱仪右侧的电源开关,仪器接通电源以后计算机首先进入仪器的自检程序,其状态显示为指示灯全部打开,直到屏幕出现“OK!”字样后表示仪器自检通过,可以进入正常操作程序,并且显示器自动切换到屏幕显示状态,等待用户输入操作信息,此时若不进行任何信息输入,仪器保持此状态15秒后,将执行上一次关机前所设定的储存参数。

(3) 升温:系统自检完毕后,通过按[热导]、[注样器]、[柱箱]键,设定热导检测器的温度、注样器的温度和色谱柱的温度,各温度设定值检查无误后,按[输入] 键,仪器进入加热升温状态。

当实际温度达到设定温度后,恒温后仪器已进入稳定状态。

(4) 热导池电流调整:通过按[参数]键,设定热导检测器控制器参数,选择极性为1,桥电流120mA(氢气作载气)。

(5) 打开计算机和色谱工作站,双击桌面上图标,进入色谱工作站操作界面,把此界面中的信号通道改为B,选择“操作”菜单中的“谱图采集”命令或单击工具条上的“谱图采集”绿色按钮,这时文档窗口谱图区内开始有谱线走动,按下色谱仪上的通桥电流的红色按键,通上桥电流,观察基线是否稳定。

基线稳定后,通过[调零]旋钮调整基线位置。

基线位置调整好以后,即可进样分析。

2.液体进样操作练习(1) 每人选用一支1μL微量进样器,在实验老师的指导下,取0.5 μL的环己烷进样,进样的同时按下绿色遥控开关或单击工具条上的谱图采集绿色按钮,进行谱图采集,文档窗口内开始有谱图走动。

如果要调节谱图在横向和纵向上的缩放,请分别调节“谱图参数”表中“满屏时间”和“满屏量程”两个谱图显示参数,也可分别单击这两个参数旁的“满屏”按钮,使当前已采集到的谱图分别在横向和纵向上满屏。

如果谱图严重闪烁,可以通过加大满屏时间值来降低闪烁的程度。

(2) 待色谱峰出完后,选择“操作”菜单中“手动终止”命令或工具条上的手动停止红色按钮,这时将终止程序对谱图信号数据的实时采集和处理。

实际上,当谱图采集时间到达谱图参数表中的“采集时间”参数所指定的值时不用手动下达这个命令,程序也会自动结束谱图信号数据的实时采集和处理。

(3) 在谱图采集结束时程序会弹出一保存对话框,提示将整个文档窗口中的内容存到哪个磁盘文件中,这时可将程序推荐的文件名改为更有意义的文件名进行保存,然后记录色谱峰的峰面积,峰面积记录完毕后,执行下一次的进样操作,这样的操作总共进行8次,最后以8次进样的峰面积,求出极差和相对标准偏差。

(4) 微量进样器的使用方法及注意事项老师会进行讲解,每次实验后,要用适当溶剂清洗进样器。

3.关机实验结束后,首先按起桥电流的红色按钮,断掉桥电流。

然后将[柱箱]、[检测器]、[注样器]的温度都设定为50℃,待各温度降至设定温度后,关闭主机上的加热电源开关和总的电源开关,最后关闭载气。

五、注意事项(1) 取好样后应立即进样,进样时整个动作应稳定、连贯、迅速。

(2) 硅橡胶密封垫圈在几十次进样后,容易漏气,须及时更换。

(3) 先通载气,确保载气通过热导检测器后,再打开热导桥流。

(4) 当使用双气路色谱仪时,两路的载气流速应保持相同。

(5) 热导池系统使用氢气作载气时,必须置毛细管系统稳压阀处于关闭状态。

六、问题与讨论(1) 为什么有时同一样品同一进样量时色谱峰形(如峰高)不同?(2) 为什么有时进样后不出峰?实验二 内标法定量分析正己烷中的环己烷一、实验目的(1) 了解内标法的定量原理以及选择内标物的原则。

(2) 学会用内标法进行定量分析的实验技术。

(3) 熟悉氢火焰检测器的特点和使用方法。

二、实验原理内标法也是常用的一种比较准确的定量方法。

当样品中的所有组分因各种原因不能全部流出色谱柱,或检测器不能对各组分都有响应,或只需测定样品中某几个组分时,可用内标法定量。

内标法的原理是,准确称取一定量样品,加入一定量的内标物,根据被测物和内标物的质量及其在色谱图上的峰面积比,求出被测组分的含量,计算公式如下:%100⨯=ms s s i i i W f A W f A P 式中,P i 是组分i 的百分含量;W m ,W s 分别是样品和内标物的质量;A i ,A s 分别是被测组分和内标物的峰面积;f i ,f s 分别是被测组分和内标物的质量校正因子。

试样中各组分经色谱柱分离后进入检测器被检测,在一定操作条件下,被测组分i 的质量(m i )或其在裁气中的浓度与检测器响应讯号(色谱图上表现为峰面积A i 或峰高h i )成正比,可写作:i ii=A f m ′ 这就是色谱定量分析的依据,式中i f ′为比例常数,称为被测组分i 的绝对质量校正因子。

由于同一种检测器,对不同物质具有不同的响应值,这样就不能用峰面积来直接计算物质的含量。

为了使检测器产生的响应讯号能真实地反映出物质的含量,需要对响应值进行校正,这就是校正因子的意义。

根据上式得:ii i A m =f ′ 可见i f ′就是单位峰面积所代表物质的质量,它主要由仪器的灵敏度所决定。

由于i f ′值与色谱操作条件有密切关系而不易准确测定,因此在色谱定量分析中,采用相对校正因子i f ,即被测物质i 与标准物质s 的绝对校正因子之比值,此比值不受实验条件的影响,只与检测器类型有关:is s i s s i i s i i A m A m =A m A m =f f =f ′′ 式中s f ′、m s ,、A s 分别为标准物质的绝对校正因子、质量及峰面积。

按被测组分使用的不同计量单位,可分为质量校正因子及体积校正因子等(通常把“相对”二字略去)。

测定i f 时,先准确称量被测物质i 和标准物质s 的m i 和m s ,混合后在一定的实验条件下进行色谱测定,然后测量相应的峰面积A i 和A s ,,再按上式计算i f 值。

为了方便起见,在内标法当中,常以内标物本身作为标准物,其f s =1.00。

内标法要求选择一个适宜的内标物,它在样品中不存在,当加入内标物进行色谱分离时,在色谱图上它应与被测组分靠近并与其他组分完全分离,内标物的量也应与被测组分的量相当,以提高定量分析的准确度。

内标法的定量分析方法中还有一种内标工作曲线法。

首先配制一系列的标准溶液,测得相应的A i /A s 值,绘制A i /A s ~m i /m s 标准曲线,如下图所示。

这样可在无需预先测定f i 的情况下,称取固定量的试样和内标物质,混合均匀后即可进样,根据A i/A s 之值求得样品的含量。

内标法定量结果准确,对于进样量及操作条件不需严格控制,内标工作曲线法更适合用于工厂的控制分析。

内标工作曲线示意图三、仪器与试剂1.仪器气相色谱仪(GC9790型,福立分析仪器有限公司);热导检测器(TCD);色谱柱(7%DNP);微量进样器(1 μL ,5 μL )。

2.试剂氢气;正己烷(AR);环己烷(AR);苯(AR);未知样品。

四、实验内容(1) 打开载气,确保载气流经热导检测器,并调整流速大约为30 mL·min-1。

(2) 打开色谱仪的电源开关,待自检结束后,打开加热电源开关,在操作面板上通过按[注样器]、[柱箱]、[热导]键将汽化室、柱箱、检测器的温度分别设定为为100℃、60℃、80℃。

(3) 打开计算机和色谱工作站,点击计算机桌面上HW-2000色谱工作站图标,进入色谱工作站操作界面,选择色谱通道B,点击快捷菜单上的绿色按钮进入谱图采集状态。

(4) 当实际温度达到设定值后,通过仪器上的控制面板设定热导检测器桥电流为100mA,然后打开热导检测器开关,通上桥电流,观察基线是否稳定,通过调零旋钮调整基线位置。

(5) 待色谱仪稳定后,用微量注射器注入2 μL按质量法配置的已知浓度的环己烷、苯标准溶液,记录保留时间和峰面积。

重复操作三次(计算组分的校正因子)。

(6) 将0.5 μL正己烷、环己烷、苯分别注人色谱柱,记下各自的保留时间(目的是利用保留时间定性未知组分)。

(7) 称量一定量的未知物W m。

(8) 称量一定量的内标物W s,将其加入上述未知物中,并混合均匀。

(9) 取2 μL含有内标物的未知样品注入色谱仪,记录保留时间和峰面积。

此步骤重复三次。

(10) 实验结束后,首先按起桥电流的红色按钮,断掉桥电流。

然后将柱温、检测器、注样器的温度设定为50℃,待温度降至设定温度后,关闭各部分电源开关,最后关闭载气。

五、数据处理(1) 列表整理保留值及峰面积的数据。

(2) 以苯为标准物质计算环己烷的校正因子。

(3) 以苯为内标物利用内标法计算环己烷的含量。

六、注意事项(1) 先通载气,确保载气通过热导检测器后,再打开热导桥流。

(2) 当使用双气路色谱仪时,两路的载气流速应保持相同。

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