药代动力学实验 ppt
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药物代谢动力学-药动学PPT课件
药物通过肾脏以尿液的形式排出体外，这是药物排泄的主要途径。
肾脏排泄
部分药物经肝脏代谢后，随胆汁排入肠道，最终以粪便的形式排出体外。
胆汁排泄
部分药物可通过皮肤排泄，以汗液的形式排出体外，但这种方式排泄的药物量相对较少。
皮肤排泄
药物排泄的途径
肝功能障碍
胆汁排泄主要依赖肝脏，肝功能障碍会影响药物的胆汁排泄。
胞饮和胞吐作用
药物分布的机制
如脂溶性、解离常数、分子大小等。
药物的理化性质
血流量影响药物在组织器官中的分布。
组织器官血流量
细胞膜通透性影响药物进入细胞的速度和程度。
细胞膜通透性
药物与组织成分的结合力影响其在组织中的浓度。
药物与组织的结合力
影响药物分布的因素
利用动物模型研究药物在体内的分布。
动物实验
通过药物代谢动力学研究，可以了解药物在体内的变化过程，降低不良反应的风险。
02
CHAPTER
药物吸收
药物通过细胞膜的被动转运，由高浓度区域向低浓度区域扩散，不需要能量。
被动扩散
主动转运
胞饮作用
药物通过细胞膜的主动转运，需要载体和能量，可以将药物从低浓度区域转运到高浓度区域。
大分子物质或团块被细胞膜包裹进入细胞内的过程。
药物代谢动力学-药动学ppt课件
目录
药物代谢动力学概述 药物吸收 药物分布 药物代谢 药物排泄 药物代谢动力学参数计算
01
CHAPTER
药物代谢动力学概述
药物代谢动力学是研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）过程的学科。
定义
通过了解药物在体内的动态变化，为药物的合理使用、药物设计和新药开发提供科学依据。
万晓莉第五次药代动力学参数测定幻灯片
Vd=gD/01/C000m(单l）位：L／kg)
注：D0为用药剂量(150mg/kg), t1为用药后到第一次取血的
时间间隔
Vd单位 ml /kg L／kg
lg-1 (0. 301× t1/t 1/ 2)=10 0. 301× t1/t 1/ 2
3、清除率(CL)
CL=0.693／t1/ 2× Vd （单位：ml/min.kg）
实验步骤
实验准备(取离心管3支及试管5支，编号备
用，于1-3号离心管及4、5号试管 中分别加入10％三氯醋酸7ml）
麻醉（4ml/kg）
手术（远心端结扎，近
心端动脉夹夹闭，然后剪 开动脉插管。）
取血（2ml，放入1号离心管）
给药
(耳缘静脉注射10％水 杨酸钠，150mg/kg
1.5ml/kg）
取血 5分钟后取血2ml放入 2号离心管，
实验动物
家兔， 体重 ？kg， 雌／雄
实验材料 1.器材 试管5支、离心管3支、试管架、小玻棒、
10ml吸管、注射器(１ml肝素、2ml抽血、5ml注射 药、20ml注射麻药〕、手术器械、动脉插管、动脉 夹、722分光光度计、离心机 2.试剂和药品 25％氨基甲酸乙酯〔乌拉坦〕、10％及 0.02％水杨酸钠溶液、10％三氯醋酸溶液、10％三 氯化铁溶液 0.5%利多卡因溶液
• 表观分布容积：反响药物在体内大致分布---当血 浆和组织内药物分布到达平衡后，药物在组织中的 分布范围广不广、结合程度高不高。
• 去除率：反响去除器官的功能，肝、肾等功能降低 时，去除药物慢，给药间隔时间应延长，药量应适 当降低。
表观分布容积越大，在组织中分布越多； 表观分布容积越小，在组织中分布越少。
35分钟后取血2ml放入3号离心管， 加蒸馏水2ml到4号试管，
注：D0为用药剂量(150mg/kg), t1为用药后到第一次取血的
时间间隔
Vd单位 ml /kg L／kg
lg-1 (0. 301× t1/t 1/ 2)=10 0. 301× t1/t 1/ 2
3、清除率(CL)
CL=0.693／t1/ 2× Vd （单位：ml/min.kg）
实验步骤
实验准备(取离心管3支及试管5支，编号备
用，于1-3号离心管及4、5号试管 中分别加入10％三氯醋酸7ml）
麻醉（4ml/kg）
手术（远心端结扎，近
心端动脉夹夹闭，然后剪 开动脉插管。）
取血（2ml，放入1号离心管）
给药
(耳缘静脉注射10％水 杨酸钠，150mg/kg
1.5ml/kg）
取血 5分钟后取血2ml放入 2号离心管，
实验动物
家兔， 体重 ？kg， 雌／雄
实验材料 1.器材 试管5支、离心管3支、试管架、小玻棒、
10ml吸管、注射器(１ml肝素、2ml抽血、5ml注射 药、20ml注射麻药〕、手术器械、动脉插管、动脉 夹、722分光光度计、离心机 2.试剂和药品 25％氨基甲酸乙酯〔乌拉坦〕、10％及 0.02％水杨酸钠溶液、10％三氯醋酸溶液、10％三 氯化铁溶液 0.5%利多卡因溶液
• 表观分布容积：反响药物在体内大致分布---当血 浆和组织内药物分布到达平衡后，药物在组织中的 分布范围广不广、结合程度高不高。
• 去除率：反响去除器官的功能，肝、肾等功能降低 时，去除药物慢，给药间隔时间应延长，药量应适 当降低。
表观分布容积越大，在组织中分布越多； 表观分布容积越小，在组织中分布越少。
35分钟后取血2ml放入3号离心管， 加蒸馏水2ml到4号试管，
药理学第二章药物代谢动力学PPT课件
半衰期（T1/2）
总结词
描述药物在体内消除一半所需时间的参数。
详细描述
半衰期是药物在体内消除一半所需的时间，它是药物代谢动力学的重要参数之一。T1/2值越短，药物 消除越快。药物的消除途径、代谢速率和排泄速率等因素都会影响T1/2值。
清除率（Cl）
总结词
描述肾脏清除药物的能力的参数。
详细描述
清除率是指肾脏清除药物的能力，它是药物代谢动力学的重要参 数之一。Cl值越大，肾脏清除药物的能力越强。药物的排泄速率 、尿液pH值和尿液流量等因素都会影响Cl值。
二室模型
总结词
二室模型考虑了药物在体内分布的不均 匀性，将身体分为中央室和周边室两个 部分。
VS
详细描述
二室模型将身体分为中央室和周边室两个 部分，中央室包括血液和主要的脏器，周 边室包括其他组织。该模型适用于药物在 体内分布不均匀，且在中央室和周边室的 转运速率不同的情况。
微生物模型
总结词
微生物模型是用于描述药物在微生物中的代谢和消除过程的模型，常用于药物制剂的微 生物学质量控制。
05
药物代谢动力学的实际应用
个体化给药方案设计
根据患者的年龄、体重、性别、生理状态等因素，制定个性化的给药方案，确保 药物在体内达到最佳的治疗效果。
通过监测患者的药物代谢情况，调整给药剂量和频率，以实现最佳的治疗效果并 减少不良反应。
新药研发与评价
药物代谢动力学是新药研发的重要环 节，用于评估药物的吸收、分布、代 谢和排泄等特性。
疾病状态
疾病状态可以影响药物的吸收、分布、代谢和排泄，导致药 物代谢动力学参数的变化。
肝肾功能不全的患者对药物的代谢和排泄能力较弱，需要调 整药物剂量。
药代动力学模型ppt(38张)
Css
k0 kV
定义任意时间血药浓度与稳态浓度比为fss, 即：
f ss
C C ss
从而可以计算血药浓度达到稳态浓度的某一分数fss所需要的时间长短。
假定该时间相当于nt1/2，由3-19式得到： n ln(1 f ss ) 0.693
静脉滴注给药存在下列特征：
1) 按恒速滴注给药， 血药浓度随时间递增，当时间趋
药物进入组织中的速率主要受组织血流灌注速率的控制 膜限制模型(membrane limited) 毛细血管膜的通透性成为药物进入组织的主要限制因素。 如脑、睾丸等
药代动力学模型(PPT38页)
药代动力学模型(PPT38页)
肝清除率(Hepatic clearance,CLH )
概念：在单位时间内肝脏清除药物的总量与当
无穷大时， 血药浓度达稳态。对于同一药物，稳态浓度
大小取决于滴注速率。
2) 达到稳态某一分数所需要的时间长短取决于半衰期，
而与滴注速率无关。当时间相当于3.32t1/2,时，血药浓度 相当于稳态浓度的90%， 当时间相当于6.64t1/2时，血药 浓度相当于稳态浓度的99%。
3)已知期望血药浓度，可以确定静脉滴注速率k0
各阶统计矩的计算
1.零阶矩
AUC c(t)dt
0
2.一阶矩
MRT 0 tC(t)dt AUMC
AUC
AUC
3.二阶矩
误差大、结果不肯定、应用价值小，故不用
药代动力学模型(PPT38页)
用统计矩计算药代动力学参数
一、清除率
是指单位时间内多少表观分布容积内的药物被清除掉。
Cl
( dx )dt 0 dt
第3节 生理药物代谢动力学模型 一、生理药物代谢动力学模型的基础
药物代谢动力学(第六章)非房室模型PPT课件
02
房室模型适用于药物分布较为局限、消除较快的情况，而非房室模型则更适用 于药物分布广泛、消除缓慢的情况。
03
非房室模型可以更准确地描述药物在体内的实际过程，因为它避免了房室模型 对药物分布的简化假设。
应用场景与优势
应用场景
非房室模型适用于研究那些在体内分布广泛、消除缓慢的药物，如某些抗生素、抗癌药 物等。它也适用于研究药物在特殊生理状态下的动力学行为，如新生儿、老年人、疾病
03
非房室模型的数学表达
微分方程与差分方程
微分方程
描述药物在体内的动态变化，通过建立药物浓度与时间的关系式来描述药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过 程。
差分方程
将时间离散化，通过建立药物浓度在不同时间点的关系式来描述药物在体内的动态变化。
模型的数值解法
离散化方法
将微分方程或差分方程进行离散化，将连续的时间变量转换为离散 的数值，通过迭代或直接计算求解模型。
03
02
分布容积
描述药物在体内的分布情况，反映 药物在体内的分布范围。
排泄速率常数
描述药物从体内排出的速率，反映 药物的排泄能力。
04
04
非房室模型在药常数（Ka）： 预测药物在体内的吸收速 度。
药物消除速率常数（Ke）： 预测药物在体内的消除速 度。
复杂药物制剂的模型建立
1 2 3
概述
复杂药物制剂如纳米药物、脂质体等具有特殊的 物理化学性质，其药物代谢动力学行为与传统药 物有所不同。
具体方法
针对复杂药物制剂的特点，需要建立特定的药物 代谢动力学模型，以准确描述其在体内的吸收、 分布、代谢和排泄过程。
发展趋势
随着新药研发中对药物制剂的要求越来越高，复 杂药物制剂的模型建立将成为研究热点。
药代动力学-PPT
斜率为
：体形变异指数 常数
药物间的主要差别在于
多数组织重量的约等于1
与机体功能有关的在0.65-0.8之间（GFR，耗氧量等）
帕尼培南（碳青霉烯类抗生素）
氨替比林
内 在 清 除 率
苯妥英
氨替比林和苯妥英肝内在清除率和体重的关系
注意点：
1,异速增大方程对多数药物适用，但也有预测值 与实测值相差大的药物，此时用校正法校正。
周边室 Xp。Vp
dXc dt =-(k12+k10)Xc+k21Xp dXp dt =k12Xc- k21Xp 经拉普拉斯转换
Ct=A e- t + B e- t
计算药代动力学参数的程序
PCNONLIN, 3P87, 3P97, PK-BP-NI等
k10k21 k21 k12 k10
4）效应为间接的, 存在时间差。
3．药物效应超前于血药浓度变化
如果按时间顺序进行浓度-效应一对一作图，得到曲线呈顺时 针滞后环（clockwise-hysteresis）
造成这种现象的原因
1）快速耐受性(受体的下向调节或非活性产物增多） 2）形成抑制代谢物 3）立体选择性代谢仍然用消旋体表示。
② 生化参数如酶活性参数（Vmax,Km）
③药物热力学性质如脂溶性, 电离性等
④药物与机体相互作用性质, 如膜通透 性、药物与血浆蛋白结合率以及药物与 组织亲和力等。
组织/血浆中药物浓度比Kp测定
1）稳态给药方法 非消除性组织
Kp
CT ,ss CA,ss
消除性组织 2）面积法
非消除性组织
Kp
CT ,ss C A,ss (1 E)
4，消除过程为物理性 5，有足够的数据回归
药物代谢动力学ppt课件精选全文完整版
• 主动转运(active transport) • 易化扩散(facilitated diffusion)
●胞裂外排（exocytosis）
药物代谢动力学
跨膜转运（Membrane Transfer）
simple diffusion
carrier-mediated
active
facilitated
1. 药物理化性质； 2. 给药途径； 3. 药物剂型； 4. 影响药物从消化道内吸收的主要因素；
药物代谢动力学
1. 药物理化性质：
●分子量； ●脂溶性； ●解离度；
问题：什么样的药物容易被吸收？
药物代谢动力学
2. 给药途径
●常见的给药方式：
静脉 、吸入 、舌下和直肠、肌内注射 、皮下注射 、 口服 、皮肤
药物代谢动力学
（二）吸入（呼吸道给药，inhalation）
�定义：经口鼻吸入的药物从肺泡吸收的给药方式； 肺泡上皮细胞能吸收5 µm左右微粒， 肺泡表面积大(达200m2) ，
●适用于挥发性药物和气体药物，如鼻炎喷雾剂 ；
药物代谢动力学
（三）局部用药
●完整的皮肤吸收能力差 ； �适用于脂溶性高的药或加促皮吸收的药剂，如皮康王、无极膏 。 �问题生活当中，还有哪些是局部给药？
药物代谢动力学
6）药物通过胞膜的速度受药物理化性质的影响；
�药物分子大小； �药物脂溶性； �药物解离状况；
分子量小、脂溶性高、极性小、非解离型的药物容易透过细胞膜。
药物代谢动力学
7）药物通过细胞膜的速度受环境pH的影响
� --------------离子障 ion-trapping �大多数药物为弱酸性或弱碱性；
�原则：药物解离程度脂溶性 跨膜转运 效应。
●胞裂外排（exocytosis）
药物代谢动力学
跨膜转运（Membrane Transfer）
simple diffusion
carrier-mediated
active
facilitated
1. 药物理化性质； 2. 给药途径； 3. 药物剂型； 4. 影响药物从消化道内吸收的主要因素；
药物代谢动力学
1. 药物理化性质：
●分子量； ●脂溶性； ●解离度；
问题：什么样的药物容易被吸收？
药物代谢动力学
2. 给药途径
●常见的给药方式：
静脉 、吸入 、舌下和直肠、肌内注射 、皮下注射 、 口服 、皮肤
药物代谢动力学
（二）吸入（呼吸道给药，inhalation）
�定义：经口鼻吸入的药物从肺泡吸收的给药方式； 肺泡上皮细胞能吸收5 µm左右微粒， 肺泡表面积大(达200m2) ，
●适用于挥发性药物和气体药物，如鼻炎喷雾剂 ；
药物代谢动力学
（三）局部用药
●完整的皮肤吸收能力差 ； �适用于脂溶性高的药或加促皮吸收的药剂，如皮康王、无极膏 。 �问题生活当中，还有哪些是局部给药？
药物代谢动力学
6）药物通过胞膜的速度受药物理化性质的影响；
�药物分子大小； �药物脂溶性； �药物解离状况；
分子量小、脂溶性高、极性小、非解离型的药物容易透过细胞膜。
药物代谢动力学
7）药物通过细胞膜的速度受环境pH的影响
� --------------离子障 ion-trapping �大多数药物为弱酸性或弱碱性；
�原则：药物解离程度脂溶性 跨膜转运 效应。
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0 5
0 .0 0 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
M inutes
-
19
标准加入法举例 • 废水样品中五氯苯（PCP）的分析
PCP
4 ppm 3 ppm 2 ppm 1 ppm
静注加替沙星在家兔体内的药代动力学研究
-
4
HPLC原理与标准操作规程(SOP)
1.HPLC的组成 2.分配色谱的原理 3.色谱柱 4.流动相 5.定性与定量方法 6.样品的预处理 7.反相色谱分析方法的开发
-
5
High Performance Liquid Chromatography
HPLC 的组成
– 碳十八、碳八、胺基等基团 – 反相色谱固定相多为键合相
-
10
对HPLC柱的了解
• 色谱柱分类 • 填料，含碳量，基质，粒径 • 色谱柱的应用 • 正相柱，反相柱，预处理柱 • 色谱柱的规格 • 岛津 Shimadzu VP-ODS; 150L×2.0; 5μm;
柱号 8082693.
-
11
键合相色谱柱
流动相的脱气
• 流动相脱气的目的
– 使色谱泵的输液准确
• 输液均匀准确，并且脉动减小 • 保留时间及色谱峰面积的重现性提高
– 提高检测的性能
• 防止气泡引起的尖峰 • 基线稳定，信噪比增加 • 溶剂的紫外吸收本底降低
– 保护色谱柱
• 减少死体积 • 防止填料的氧化
-
16
流动相脱气的方法
• 加热
– 简单，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流动相组 成的变化
Minutes
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
Minutes
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
-
13
色谱柱的存放
• 存放前的处理
– 除去杂质、盐
• 合适的存放溶剂 • 避免色谱柱床的干枯 • 避免机械震动 • 防止细菌生长 • 注意存放的温度
-
14
液相色谱对流动相的要求
• 除色谱柱对流动相对的要求外，还有∶
– 与检测器匹配 – 脱气 – 避免卤素离子（不锈钢系统） – 溶剂的粘度 –
-
15
-
8
LC-MS/MS Thermo TSQ Quantum Access
分配色谱的分离机理
-
9
分配色谱概述
• 反相色谱的主要类型，基于分子的极性分离 • 洗脱次序：一般为反相，即极性高的先被洗脱 • 常用的流动相：
– 有机溶剂如甲醇、乙腈，水 – 应用添加剂，成为离子对、离子抑制方法
• 常用固定相：
-
2
药物代谢动力学
定量研究药物（包括外来化学物质）在生物体内吸收、分布、排泄和代谢（简 称体内过程）规律的一门学科。
• HPLC-UV ?
生物样品 常用测
定方法
•GC-MS ?
数据处理分析
•LC-MS/MS ?
-
3
实验安排
• 1.HPLC原理与标准操作规程(SOP) • 2.实验设计与动物实验 • 3.样品处理与方法开发 • 4.定性定量与分析测定 • 5.数据处理与药动学参数计算 • 6.实验报告
• 抽真空
– 同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果
• 超声波
– 简单，但效果不理想。
• 通惰性气体（一般用氦气）
– 可保持连续脱气，多用于低压梯度
• 脱气机
– 可保持连续脱气，多用于低压梯度
-
17
色谱峰定性
• 鉴别每个色谱峰
– 通过比较保留值(通常是保留时间)的方法，找 到各色谱峰所对应的组份
• Pump 泵 • Injector/Autosampler 进样器/自动进样器 • Column 色谱柱 • Detector 检测器 • Data System/Integrator 数据系统/积分仪表
-
6
高效液相色谱系统
色谱泵 进样器
数据处理 检测器
色谱柱
-
7
高效液相色谱系统
SHIMADZU LCMS-2010EV
药物代谢动力学实验
赵娣 中国药科大学药代研究中心
2012年10月16日
神农尝百草
传说神农一生下来就是个 “水晶肚”，几乎是全透明的， 五脏六腑全都能看得见，还能 看得见吃进去的东西。那时候， 人们经常因乱吃东西而生病， 甚至丧命。神农为此决心尝遍 百草，能吃的放在身体左边的 袋子里，介绍给别人吃；不好 吃的就放在身体右边袋子里， 作药用。不能吃的就提醒人们 注意。
– 大多数情况下用比较保留时间来定性
即所谓：
保留时间相同，可能是同样的组份 保留时间不同，肯定不是同样的组份
-
18
用保留时间定性 • 用“标样”的保留值定出被测组份的位置
0 .4 0
E thylparaben
0 .3 5
0 .3 0
0 .2 5
AU
0 .2 0
0 .1 5
U racil
P ropylparaben
-
20
常用的定量方法
• 峰面积百分比法
– 由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用
• 外标法
– 在液相色谱中用的最多
• 内标法
– 准确，但是麻烦 – 在标准方法中用的最多
-
21
外标法定量 • 配制一系列已知浓度的标样
-
22
外标法定量（二） • 实际色谱图
5,000
4,000
响应值 (峰面积)
3,000 2,000
• 以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳 八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
• 优点∶
– 固定相稳定，不易流失 – 应用广泛，可使用多种溶剂 – 消除硅羟基的不良影响
• 缺点∶
– pH值不能小于3 – 同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同
-
12
反相C18色谱柱的活化
• 步骤一： • 90%甲醇1mL/min流速冲洗30min • 步骤二： • 10%甲醇1mL/min流速冲洗30min • 步骤三： • 90%甲醇1mL/min流速冲洗60min
1,000
0 0
0.30
0.30
0.30
0.25
0.25
0.25
0.20
0.20
0.20
0.15
0.15
0.15
0.10
0.10
0.10
0.05
0.05
0.05
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
0 .0 0 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
M inutes
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标准加入法举例 • 废水样品中五氯苯（PCP）的分析
PCP
4 ppm 3 ppm 2 ppm 1 ppm
静注加替沙星在家兔体内的药代动力学研究
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4
HPLC原理与标准操作规程(SOP)
1.HPLC的组成 2.分配色谱的原理 3.色谱柱 4.流动相 5.定性与定量方法 6.样品的预处理 7.反相色谱分析方法的开发
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High Performance Liquid Chromatography
HPLC 的组成
– 碳十八、碳八、胺基等基团 – 反相色谱固定相多为键合相
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10
对HPLC柱的了解
• 色谱柱分类 • 填料，含碳量，基质，粒径 • 色谱柱的应用 • 正相柱，反相柱，预处理柱 • 色谱柱的规格 • 岛津 Shimadzu VP-ODS; 150L×2.0; 5μm;
柱号 8082693.
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11
键合相色谱柱
流动相的脱气
• 流动相脱气的目的
– 使色谱泵的输液准确
• 输液均匀准确，并且脉动减小 • 保留时间及色谱峰面积的重现性提高
– 提高检测的性能
• 防止气泡引起的尖峰 • 基线稳定，信噪比增加 • 溶剂的紫外吸收本底降低
– 保护色谱柱
• 减少死体积 • 防止填料的氧化
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流动相脱气的方法
• 加热
– 简单，如同抽真空一起使用，其效果很好。但容易造成流动相组 成的变化
Minutes
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
Minutes
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00
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13
色谱柱的存放
• 存放前的处理
– 除去杂质、盐
• 合适的存放溶剂 • 避免色谱柱床的干枯 • 避免机械震动 • 防止细菌生长 • 注意存放的温度
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14
液相色谱对流动相的要求
• 除色谱柱对流动相对的要求外，还有∶
– 与检测器匹配 – 脱气 – 避免卤素离子（不锈钢系统） – 溶剂的粘度 –
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LC-MS/MS Thermo TSQ Quantum Access
分配色谱的分离机理
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分配色谱概述
• 反相色谱的主要类型，基于分子的极性分离 • 洗脱次序：一般为反相，即极性高的先被洗脱 • 常用的流动相：
– 有机溶剂如甲醇、乙腈，水 – 应用添加剂，成为离子对、离子抑制方法
• 常用固定相：
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药物代谢动力学
定量研究药物（包括外来化学物质）在生物体内吸收、分布、排泄和代谢（简 称体内过程）规律的一门学科。
• HPLC-UV ?
生物样品 常用测
定方法
•GC-MS ?
数据处理分析
•LC-MS/MS ?
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实验安排
• 1.HPLC原理与标准操作规程(SOP) • 2.实验设计与动物实验 • 3.样品处理与方法开发 • 4.定性定量与分析测定 • 5.数据处理与药动学参数计算 • 6.实验报告
• 抽真空
– 同上，一般在溶剂抽滤的同时，也有脱气的效果
• 超声波
– 简单，但效果不理想。
• 通惰性气体（一般用氦气）
– 可保持连续脱气，多用于低压梯度
• 脱气机
– 可保持连续脱气，多用于低压梯度
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色谱峰定性
• 鉴别每个色谱峰
– 通过比较保留值(通常是保留时间)的方法，找 到各色谱峰所对应的组份
• Pump 泵 • Injector/Autosampler 进样器/自动进样器 • Column 色谱柱 • Detector 检测器 • Data System/Integrator 数据系统/积分仪表
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高效液相色谱系统
色谱泵 进样器
数据处理 检测器
色谱柱
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高效液相色谱系统
SHIMADZU LCMS-2010EV
药物代谢动力学实验
赵娣 中国药科大学药代研究中心
2012年10月16日
神农尝百草
传说神农一生下来就是个 “水晶肚”，几乎是全透明的， 五脏六腑全都能看得见，还能 看得见吃进去的东西。那时候， 人们经常因乱吃东西而生病， 甚至丧命。神农为此决心尝遍 百草，能吃的放在身体左边的 袋子里，介绍给别人吃；不好 吃的就放在身体右边袋子里， 作药用。不能吃的就提醒人们 注意。
– 大多数情况下用比较保留时间来定性
即所谓：
保留时间相同，可能是同样的组份 保留时间不同，肯定不是同样的组份
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用保留时间定性 • 用“标样”的保留值定出被测组份的位置
0 .4 0
E thylparaben
0 .3 5
0 .3 0
0 .2 5
AU
0 .2 0
0 .1 5
U racil
P ropylparaben
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常用的定量方法
• 峰面积百分比法
– 由于检测技术的影响，在液相色谱中不常用
• 外标法
– 在液相色谱中用的最多
• 内标法
– 准确，但是麻烦 – 在标准方法中用的最多
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外标法定量 • 配制一系列已知浓度的标样
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外标法定量（二） • 实际色谱图
5,000
4,000
响应值 (峰面积)
3,000 2,000
• 以硅胶为基质，通过化学键合方式把碳十八、碳 八、胺基等基团联在基质上，作为固定相。
• 优点∶
– 固定相稳定，不易流失 – 应用广泛，可使用多种溶剂 – 消除硅羟基的不良影响
• 缺点∶
– pH值不能小于3 – 同样填料，各种牌号色谱柱不尽相同
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反相C18色谱柱的活化
• 步骤一： • 90%甲醇1mL/min流速冲洗30min • 步骤二： • 10%甲醇1mL/min流速冲洗30min • 步骤三： • 90%甲醇1mL/min流速冲洗60min
1,000
0 0
0.30
0.30
0.30
0.25
0.25
0.25
0.20
0.20
0.20
0.15
0.15
0.15
0.10
0.10
0.10
0.05
0.05
0.05
0.00 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 4.50 5.00 5.50 6.00 6.50 7.00