微血管计数与乳腺癌临床病理因素及预后的关系.

微血管计数与乳腺癌临床病理因素及预
后的关系
乳腺癌的生长、侵袭与转移依赖于血管形成。

我们用Ⅷ因子相关抗原对癌组织中新生血管进行免疫组化染色，探讨微血管计数(MVC)与乳腺癌侵袭、转移及预后的关系。

一、材料与方法
1.临床材料：收集1986～1988年间辽宁省肿瘤医院乳腺科收治的女性乳腺癌56例，年龄29～72岁(平均年龄46.2岁）。

手术方式为简化根治术或标准根治术。

术前未经任何治疗，术后均行化疗，17例行术后放疗。

术后病理均为侵袭性非特殊型癌。

组织学分级：1级22例，2级17例，3级17例。

临床病理分期：Ⅰ期8例，Ⅱ期40例，Ⅲ期8例。

56例无失访，最长随访8年。

以乳腺癌术后石蜡块制作切片，另取乳腺良性病变及正常组织蜡块10例作为对照组。

2.染色方法：免疫组化染色采用S-P法，切片经脱蜡、固定，0.3%H
2 O
2
加
非免疫性动物血清阻断后，依次加1，2，3抗体，分别孵育30 min，DAB染色，苏木素复染，脱水透明、封片。

以PBS替代一抗作为阴性对照，用试剂盒中已知阳性片作为阳性对照。

兔抗人Ⅷ因子相关抗原多克隆抗体及广谱S-P染色试剂盒均为福州迈新生物技术产品。

3.结果判定：微血管判定及计数参照文献［1］。

每张切片在低倍镜(100倍)视野中，选出血管最丰富的3个区域；然后，在200倍视野下，由两位经验丰富的病理医师同时计数微血管，计数3次，取其均值。

棕色染色的内皮或内皮细胞簇作为是单个、可计数的微血管。

4.统计学处理：应用χ2检验及t检验。

二、结果
癌组织内微血管形态不规则，部分血管无明显管腔。

新生血管可分布在肿瘤的任何位置，以靠近癌组织的间质中居多。

在导管原位癌向侵袭性导管癌过渡型的7例中，可见微血管呈环状包绕原位癌组织。

56例乳腺癌平均MVC为73.2±28.8，以73.2作为高血管计数组与低血管计数组的分界点［2］，对照组10例MVC平均值为32.3±12.5，两组差异有显著性（P＜0.01)。

MVC与乳腺癌组织学分级、临床分期、淋巴结转移相关（P＜0.05），而与绝经状况、肿瘤直径、ER、PR表达无明显关系(P＞0.05)。

随访5年，存活45例，死亡11例；随访8年，存活38例，死亡18例。

死亡患者的MVC平均值（90.4±39.5）较存活患者（60.1±29.8）明显增高(P＜0.01）。

经8年随访，在腋淋巴结阴性乳腺癌中，23例存活，8例死亡。

其存活组MVC为52.9±28.2，死亡组为80.7±36.1，两组差异有显著性(P＜0.01)。

在腋淋巴结阳性患者中，15例存活,10例死亡，MVC平均值分别为86.3±32.3和93.8±36.4，两组差异无显著性(P＞0.05 )。

三、讨论
恶性肿瘤的生物学行为及预后与新生血管的关系已引起人们的关注。

早在1971年，Folkman便提出肿瘤生长依赖于血管形成。

实验证明，如果没有补充新血管的能力，多数肿瘤会局限于原发部位，而一旦新生血管形成，供应肿瘤的初始血压随着肿瘤体积的增大，呈幂级升高，肿瘤血供由弥漫式变为灌注式，肿瘤组织营养丰富，增长迅速。

因此，新生血管形成是肿瘤转移过程中的关键环节。

本实验观察到的围绕原位癌的血管环，可能是对癌组织释放的血管生成因子的一种反应。

有人将肿瘤边缘区与中央区的微血管密度相比较，发现周边区血管明显较中央区多，从而证明肿瘤组织血管的生成与其生长的关系密切［3］。

Horak报道，MVC与肿瘤大小有关。

但本组研究未发现其相关性，而发
现MVC与乳腺癌的组织学分级、临床分期、及淋巴结转移呈正相关。

组织学分级常代表肿瘤细胞的增殖速度，癌细胞增殖速度可能与血管生成因子诱导微血管生成的能力有关。

由于新生的血管分化不成熟，内皮细胞中管样小体增多，细胞间连接松散，血管壁基底膜厚薄不一，导致断裂或缺乏。

因此，癌细胞极易穿透血管壁，经新生血管、淋巴管向腋窝或远处转移。

此外，肿瘤内新生血管的增多也增加了癌细胞进入血循环的机会。

本组手术后5，8年死亡患者的MVC较存活患者明显增高，说明乳腺癌的血管形成、微血管计数与血行转移密切相关。

对腋淋巴结阴性患者生存状况比较发现，死亡组MVC明显高于存活组；而在腋淋巴结阳性患者中，死亡组的MVC
虽较存活组高，但差异无显著性。

Weidner的研究发现，肿瘤内微血管与转移
密切相关，并明显影响患者的预后。

在放大200倍的肿瘤组织切片视野中，微血管计数超过100时，所有患者均发生区域淋巴结或（和）远处转移。

微血管每增加10个，淋巴结转移的危险性就增加1.59倍，远处转移的危险性增加
1.17倍。

因此，我们认为MVC可用于判断患者预后，或作为筛选高危转移患者的可靠指标。

特别是对腋窝淋巴结阴性患者，如肿瘤组织内微血管计数明显增高，应加强术后全身治疗，以提高长期生存率。

李艳萍（辽宁省肿瘤医院乳腺科沈阳，110042）
徐惠绵（中国医科大学附属第一临床医院肿瘤科）
张斌（辽宁省肿瘤医院乳腺科沈阳，110042）
参考文献
1，Bosari S,Delellis RA, Heatley GJ. Microvessel quantitation and prognosis in invasive breast carcinoma. Hum pathol, 1992,23: 755-761. 2，Ogawa Y, Chung YS, Nakata B, et al. Microvessel quantitation in invasive breast cancer by staining for factor Ⅷ-related antigen. Br J Cancer,1995, 71：1297-1301.
3，孟刚，张洪福，饶慧蓉，等. 乳腺癌组织内微血管分布的定量研究. 临床与实验病理学杂志，1995，11:17-19.
(收稿日期：1999-06-29)。