高效液相色谱法直接测定尿中尿酸和肌酐
尿中肌酐的高效液相色谱法-职业卫生所
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尿中肌酐的高效液相色谱法1 原理尿样用水稀释100倍后,经C18柱分离,紫外检测器检测,以保留时间定性,以峰高或峰面积定量。
2 仪器2.1 塑料瓶,50mL。
2.2 容量瓶,10mL,25mL。
2.3 涡旋振荡器。
2.4 精密分析天平,感量0.01mg。
2.5 高效液相色谱仪,紫外检测器。
3 试剂3.1 盐酸(ρ20=1.19g/mL),优级纯。
3.2 乙酸钠(CH3COONa),优级纯。
3.3 乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取4.1g乙酸钠,溶解于水后,稀释至1000mL。
3.4 甲醇(CH3OH),色谱纯。
3.5 肌酐(C4H7N3O),优级纯。
3.6 盐酸溶液(0.1mol/L),取4.2mL盐酸加水稀释至500mL。
3.7 流动相:乙酸钠溶液+甲醇=95+5。
3.8 肌酐标准贮备溶液[ρ(C4H7N3O)=10mg/mL]:准确称取250.00mg肌酐(经110℃干燥2h),溶于盐酸溶液,定量转移入25mL容量瓶中,并稀释至刻度,此溶液为10mg/mL肌酐标准贮备液。
该溶液置于冰箱4℃冷藏保存可稳定6个月。
3.9 肌酐标准应用溶液[ρ(C4H7N3O)=100µg/mL]:用水将标准储备液稀释成浓度为100µg/mL 标准应用溶液。
该应用液置于冰箱4℃冷藏保存可稳定1个月。
4 样品的采集、运输和保存依据《职业卫生生物监测总则》进行样品采集。
将采集后的尿液在室温下运输。
4℃条件下保存样品有效期为14d。
5 分析步骤5.1 仪器操作参考条件波长:254nm色谱柱:250mm×4.6mm×5µm C18进样量:10µL流动相:乙酸钠溶液+甲醇=95+5流速:0.9mL/min5.2 标准曲线的配制和测定取5只10mL容量瓶,用流动相稀释肌酐标准应用溶液,配制成浓度为0.0µg/mL ~50.0µg/mL 的标准系列溶液。
HPLC法测定人体尿液中有机酸的含量
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HP LC 法测定人体尿液中有机酸的含量高素莲1,周宁国2,王雪梅1(1.安徽大学化学化工学院,安徽合肥 230039;2.甘肃长颖投资开发有限公司,甘肃兰州 730000)摘 要:以苯酚为内标物,用反相高效液相色谱法(RP -HP LC )测定了人体晨尿中尿酸(UA )、对-氨基苯甲酸(P -ABA )、马尿酸(HA )、高香草酸(HVA )的含量;探讨了尿样预处理技术。
该法的检测限为0.23~0.59ng;回收率为97.65%~98.49%;相对标准偏差为1.05%~2.73%。
本文建立的分析方法可满足临床胃癌、肺癌等病人的尿液中有机酸的监测与诊断。
关键词:高效液相色谱法;尿酸;马尿酸;高香草酸;对-氨基苯甲酸中图分类号:O657.7+4 文献标识码:A 文章编号:1000-2162(2005)04-0075-04尿酸(UA )、马尿酸(HA )、高香草酸(HVA )和对-氨基苯甲酸(P -ABA )在尿液中的含量变化可以反应肝脏、肾脏的实质性病变。
某些肿瘤病人的尿液中HVA 的含量显著提高;某些职业病人,如甲苯、铅中毒也会引起它们含量明显变化。
因此,研究人体尿液中有机酸的分离测定在临床与职业病防治方面有重要意义[1-2]。
国内外相继报道了用高效液相色谱荧光法[3]、电化学法[4]、紫外法[5]及紫外-电化学法[6]测定尿液中某些有机酸,但大多数需要复杂的样品前处理,且效果不佳。
用反相高效液相色谱(RP -HP LC )紫外法同时测定上述4种有机酸与其病变关系尚未见报道。
本文中采用RP -HP LC 紫外和内标法对正常成人、胃癌、肺癌病人各15例晨尿中UA,HA,HVA 及P -ABA 的含量进行定性定量测定,为临床分析提供了简便、快速、准确的分析方法。
1 实验部分1.1 仪器与试剂日本岛津高效液相色谱仪(LC -6A 型);日本岛津紫外扫描仪(UV -265);离心机(国产G L -10A 型)。
液相色谱法测定尿中肌酐含量
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A in obxE t d— 1 ( . m x 5 m, I 柱 , 甲 醇 一 . 5m lL乙酸 钠 ( get ra xe l Z n C 8 4 6m 2 0m 5 x m) 以 00 o / 5+9 ) 流 动 相 , 速 0 9m / i, 温 3 5为 流 . Lmn 柱 0℃ ,
[ ] 中国超 声 医学杂志,0 3 1 ( )6 1— 0 . J. 20 ,9 8 :0 6 3 [] 5 郭文 , 张亚历 , 张振 书, 内镜 活检 与超 声 内镜 对 弥漫浸 润 等. 型 胃癌诊 断价值的探 讨[ ] 20 ,8 4 :2 25 J .0 11 ( ) 24— 2 . [] 6 蔡静玲. 进展 期 胃癌 的彩 色超 声诊 断价 值 [ ] 实 用 医技 杂 J.
[ ] 亚, 7崔 叶秀芳 , 马乾凤 , 等.胃窗超 声造影 在 胃癌 定量诊 断 中
液相 色谱 法 测 定 尿 中肌 酐含 量
吴 燕
宜兴市疾病预 防控 制 中心( 苏 宜兴 24 0 ) 江 12 6
【 摘要 】 目的 用液相 色谱 法测 定尿 中肌 酐的含量 。方 法 样 品经流 动相稀释 , 微孔 滤膜过 滤后 进样 液相 色谱 测定 ; 色谱 柱为
14 分析步骤 .
14 1 试样测定 .. 取 0 0 l 样 , .5 m 尿 用流 动相 稀释 至 1 1即 0m ,
色谱法对尿 中肌酐进行测定 , 作简单 , 操 灵敏度 高 , 响因素少 , 影
结果准确 。
1 材 料 与 方 法
但在波长选择 上 , 分别采集 了 2 4n 和最大 吸收波长20n 5 m 3 m的 数据 , 标准谱 图见下 。20a 比2 4a 3 m 5 m灵 敏度 高了两倍 多 , 由 但 于在肌酐 的峰前有一个小峰 , 在样 品测定时容易影响被测组 分 的
人血清中尿素、尿酸及肌酐的测定研究
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人血清中尿素、尿酸及肌酐的测定研究发表时间:2020-12-22T15:03:29.647Z 来源:《健康世界》2020年第21期作者:武帅[导读] 为了更好的检测人体血清中尿素含量,武帅中国人民解放军总医院京北医疗区北清路门诊部北京 100094摘要:为了更好的检测人体血清中尿素含量,为临床医学,病情诊断提供技术支持,本文特别针对人体血清中尿素含量测定方法做出一定研究。
本文建立ILD-LCMS/MS法相对于传统检测ID-GC/MS法前处理较为简单,过程得到简化。
利用同位素稀释质谱法保证了该检测方法的准确度和溯源性,且利用括号法矫正质谱仪的波动,保证了数据处理的准确性。
通过样本试验比对,证实了该方法的回收率和线性范围。
最后通过测定两种浓度的血清标准物质,证实了该方法的可行性,为将来血清尿素标准物质的研究提供支持。
关键词:血清;尿素;LD-LCMS/MS;同位素稀释质谱法; Determination of urea, uric acid and creatinine in human serum Abstract: in order to better detect the urea content in human serum and provide technical support for clinical medicine and disease diagnosis, this paper makes a certain research on the determination method of urea content in human serum. Compared with the traditional id-gc / MS method, the ild-lcms / MS method is simpler and the process is simplified. Isotope dilution mass spectrometry is used to ensure the accuracy and traceability of the detection method, and bracket method is used to correct the fluctuation of mass spectrometer to ensure the accuracy of data processing. The recovery and linear range of the method were confirmed by the comparison of sample tests. Finally, the feasibility of this method was confirmed by the determination of two concentrations of serum reference materials, which provides support for the future study of serum urea reference materials. Keywords: Serum; urea; ld-lcms / MS; isotope dilution mass spectrometry;人体的血清中含有多种元素,医学常用通过检测血清中元素的含量来检查病人身体健康情况。
嘌呤的液质检测方法
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嘌呤的液质检测方法
嘌呤的液质检测方法主要包括高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱联用法(LC-MS)。
这些方法可以用于测定生物样品中嘌呤的含量,包括尿酸、肌酐、次黄嘌呤、黄嘌呤和鸟嘌呤等。
其中,高效液相色谱法是一种常用的分离和检测方法,具有分离效果好、灵敏度高、样品处理简单等优点。
该方法主要利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异进行分离,通过检测器检测物质的浓度或质量,实现对目标物质的定量或定性分析。
液相色谱-质谱联用法则结合了液相色谱的高分离效能和质谱的高鉴别能力,能够同时测定多种化合物。
该方法通过将样品注入色谱柱,在流动相的带动下经过一系列的分离后进入质谱仪进行分析,从而实现对目标化合物的定性和定量分析。
需要注意的是,生物样品中的嘌呤含量较低,因此需要进行适当的样品处理和前处理,以提高检测的灵敏度和准确性。
同时,在分析过程中需要注意干扰物质的影响,如蛋白质、色素等,以保证检测结果的可靠性。
常见肾脏疾病的生物化学测定方法和评价
![常见肾脏疾病的生物化学测定方法和评价](https://img.taocdn.com/s3/m/986dce5e804d2b160b4ec042.png)
肾脏疾病的生物化学检测方法主要 是采用光谱技术、电泳技术、 是采用光谱技术、电泳技术、免疫学和 酶学分析技术,检测血或/ 酶学分析技术,检测血或/和尿中的蛋 白质及其非蛋白含氮化合物、 白质及其非蛋白含氮化合物、酶、水、 电解质和酸碱物质等。蛋白质、酶、水、 电解质和酸碱物质等。蛋白质、 电解质和酸碱物质的检测方法参见相关 章节,本节介绍尿素、 章节,本节介绍尿素、肌酐和尿酸的检 测方法。 测方法。
(二)实验室检查 二 实验室检查 1. 尿常规检查 血尿为急性肾炎重要表现,为肉 . 血尿为急性肾炎重要表现, 眼血尿或镜下血尿;尿蛋白定量通常为 眼血尿或镜下血尿;尿蛋白定量通常为1-3g/24h, / , 尿蛋白多属非选择性;尿渗量大于 尿蛋白多属非选择性;尿渗量大于350mOsm/ / kgH2O。 。 2.电解质、血浆蛋白和脂质测定 尿钠减少,一 .电解质、 尿钠减少, 般可有轻度高血钾。血浆清蛋白可因水、钠滞留, 般可有轻度高血钾。血浆清蛋白可因水、钠滞留, 血容量增加致血液稀释而轻度下降, 血容量增加致血液稀释而轻度下降,血清蛋白电泳 多见清蛋白降低,丁球蛋白增高,少数病例有a 多见清蛋白降低,丁球蛋白增高,少数病例有a或B 球蛋白增高并同时存在高脂血症。 球蛋白增高并同时存在高脂血症。
一、血、尿中尿素测定 尿素酶法 二乙酰一肟法
二、血、尿中肌酐测定 Jaffe反应法 酶联法
三、血、尿中尿酸测定 磷钨酸法 尿酸酶法 高效液相色谱测定法
第四节 常见肾脏疾病的生物化学诊断
一、急性肾小球肾炎 主要临床表现 实验室检查
急性肾小球肾炎,简称急性肾炎, 急性肾小球肾炎,简称急性肾炎,是 以血尿、蛋白尿、高血压、水肿、 以血尿、蛋白尿、高血压、水肿、肾 小球滤过率降低为主要表现, 小球滤过率降低为主要表现,并可有 一过性氮质血症的肾小球疾病。常急 一过性氮质血症的肾小球疾病。 性起病,多数为急性链球菌感染 ~ 性起病,多数为急性链球菌感染1~3 周后, 周后,因变态反应而引起双侧肾弥漫 性的肾小球损害。 性的肾小球损害。
关于婴幼儿阶段肌酐正常参考值论文
![关于婴幼儿阶段肌酐正常参考值论文](https://img.taocdn.com/s3/m/f46c52176bd97f192279e974.png)
关于婴幼儿阶段肌酐正常参考值的探讨【摘要】目的:通过对婴幼儿血清肌酐的测定,了解婴幼儿各阶段血清肌酐的范围,为其临床提供一个合理的参考值范围。
方法:通过对我院2100例门诊患者和儿科非肾病的患者血清肌酐的测定,并按年龄和性别分组统计,以确定儿童血清肌酐的参考范围。
结果:通过实验得出:幼儿组(0-3岁):15.4-45.8 mol/l;学龄前组(3-6岁):22.1-50.9 mol/l;儿童组(6-16岁):36.2-64.2 mol/l。
结论:在同一年龄组内性别之间无明显的差异,男性略大于女性。
不同年龄组婴幼儿血清肌酐参考值差异具有统计学意义,并且随着年龄的增长而增加。
应该为婴幼儿血清肌酐建立合理的参考值,为其婴幼儿临床病症诊断提供重要依据。
【关键词】婴幼儿;肌酐;参考值【中图分类号】r446 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484(2013)06-0443-01目前测定肌酐的方法有jaffe法,酶联法,高效液相色谱法,其中高效液相色谱法特异性高,准确性好,一般用来作为参考方法评价常规肌酐测定。
目前临床应用较多的是改良的jaffe碱性苦味酸法即利用速率法测定血清肌酐,它根据血清中肌酐与碱性苦味酸形成复合物的速度与假肌酐不同可去除假肌酐的影响。
肌酐浓度在血液和尿液中比较稳定,当肾功能有异常或发生实质性损害时,血液中肌酐浓度会有增高的变化,故临床上常用测定肌酐浓度的方法作为判断肾功能受损的主要指标之一【1】。
我国目前《全国临床检验操作规程》中的参考值对于成人来说比较适用,但在实际工作过程中发现儿童血清肌酐水平比成人要低,为了更好地指导临床并且能更准确地反映和了解病情变化,有必要各地区应建立婴幼儿血清肌酐的参考值范围。
1 资料与方法1.1标本来源:对我院2100例门诊患者和儿科非肾病住院患者利用jaffe碱性苦味酸法进行血清肌酐的测定,所有标本均空腹采血,1h内分离血清并与2h内检测完成,其年龄覆盖从新生婴儿到16岁之间,将2100例标本按年龄分成3组:幼儿组(0~3岁)(男392,女394);学龄前组(3~6岁)(男300,女258);儿童组(6~16岁)(男354,女402);成年组(20~63岁)(男298,女234).1.2试剂与仪器:所有标本全部采用olympic au640全自动生化分析仪及原装试剂进行检测和朗道质控血清质控【2】。
尿分析知识点总结
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尿分析知识点总结一、尿液形成1. 尿液是由肾脏产生的尿液是肾脏对血液进行过滤、分泌、重吸收等多种生理过程的结果。
在肾小球滤过血液后,得到的原始尿液通过肾小管逐渐被重吸收和分泌,最终形成成熟的尿液。
2. 尿液成分尿液是由水、无机盐和代谢产物等多种成分组成的,其中主要有以下几种成分:- 水分:尿液中水分的含量约为95%,是尿液的主要成分。
- 无机盐:主要是由钠、钾、氯等离子组成。
- 有机物质:包括尿素、尿酸、肌酐等代谢产物。
- 细胞和细胞成分:包括白细胞、红细胞、上皮细胞等。
3. 尿液的生理特点尿液在形成过程中会受到多种因素的影响,包括饮食、运动、生理状态等。
因此,尿液的成分和性状在不同的情况下会有所不同,医生需要结合临床情况进行综合分析。
二、尿液分析方法1. 尿液的理化分析方法尿液的理化分析是通过对尿液的颜色、透明度、比重、pH值等进行检测,从而了解尿液的基本性状和成分。
2. 尿液的检查方法除了理化分析外,通过显微镜检查尿液中的有无红细胞、白细胞、上皮细胞等,还可以了解尿液中是否有蛋白质、葡萄糖等物质的存在。
3. 尿液的尿路感染检测方法针对尿路感染,可以通过细菌培养、荧光标记细菌等方法对尿液中的细菌进行检测和鉴定。
4. 尿液中代谢产物的检测方法针对尿液中的代谢产物,可以利用高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法等进行检测,从而了解肾功能、糖代谢、蛋白质分解等方面的情况。
三、尿液分析的临床意义1. 诊断疾病通过对尿液的分析,可以帮助医生诊断多种疾病,如泌尿系统疾病、代谢性疾病、感染性疾病等。
2. 监测疾病尿液分析还可以用于监测疾病的疗效和进展情况,如肾脏病变、糖尿病、肝病等。
3. 预防疾病通过尿液分析,可以及早发现一些潜在的健康问题,如肾功能障碍、糖尿病前期、尿路感染等,有助于及早预防和治疗。
四、尿液分析的注意事项1. 采集标本尿液标本应该采集新鲜的中段尿,避免受到外界杂质的污染。
2. 保存和运输尿液样本在采集后应尽快送往检验中心进行分析,避免样本质量的改变。
血清中尿酸的测定方法及其研究进展
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血清中尿酸的测定方法及其研究进展血清中尿酸的测定方法及其研究进展1 12 1 1 1戴新华徐锐锋张春梅全灿方向徐蓓1 2中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所北京化工大学北京 100013Email: xhdai_75@//0>.摘要描述了尿酸的检测在涉及临床诊断研究方面具有重要意义。
尿酸常用的检测方法有 : 酶法、伏安法、毛细管电泳法、高效液相色谱法和同位素稀释质谱法等。
本文比较全面的总结了血清中尿酸的检测方法及其研究进展。
关键词尿酸 ; 酶法 ; 伏安法 ; 毛细管电泳法 ; 高效液相色谱法 ; 同位素稀释质谱法Determination of Uric Acid in Serum and Its Developments1 12 1 1 1Dai Xinhua , Xu Ruifeng , Zhang Chunmei , Quan Can , Fang Xiang , Xu Bei1Department of Chemical Metrology and Analytical Science, NationalInstitute of Metrology2Beijing University of Chemical Technology, Beijing 100013, China Abstract It is very important to measure uric acid in the field of clinical diagnosis. There are lots of determination methods for uric acid, such as, enzyme method, capillary electrophoresis, high performance liquid chromatography ,and isotopedilution mass spectrometry and so on. This paper systematically summarizes a few familiar determination methods and progress for uric acid.Key words Uric acid; enzyme method; voltammetry; capillary electrophoresis; high performance liquid chromatography;Isotope dilution mass spectrometry2.1 酶法1 引言20 世纪 30 年代酶试剂用于临床生化指标测定,70尿酸是嘌呤代谢的最终产物 ,它具有清除氧自由年代得到了较大发展。
UPLC-MS/MS法测定高尿酸血症大鼠血清及尿液中的尿酸和肌酐
![UPLC-MS/MS法测定高尿酸血症大鼠血清及尿液中的尿酸和肌酐](https://img.taocdn.com/s3/m/16d85eb2f121dd36a22d820f.png)
相色谱. 质谱联用( U P L C . M S ) 技术显著提高了分析速度 、 样品通量 、 灵敏度和选择性 , 被广泛应用于生 物样 品 、环境样 品 和食 品中 目标化 合 物 的定 量分 析 I 7 1 .本 文建 立 了高尿 酸 血症 大 鼠血 清 及 尿液 中尿
酸 和肌酐 的 U P L C . MS / MS定量分 析方 法.该方 法样 品处理 简单 、 无 需 液 相分 离 、分 析速 度 快 、 灵 敏 度
和准确度高, 并且能同时测定血清中尿酸和肌酐.将该方法应用于抗痛风 中药筛选及其作用机制研 究, 结果表明, 与阳性对照药物别嘌呤醇和苯溴马隆相 比,中药二妙丸、 黄柏和苍术均能在一定程度 上降低血尿酸水平 , 并可显著逆转肾功能损伤 , 对肾功能具有一定 的保护作用.
联系人简介 : 刘志强 , 男 ,博士 , 研究员 , 博士生导师 , 从事天然产物质谱 及中药活性成分筛选研究 .E - ma i l : l i u z q @c i a c . j 1 . c n
马青 山等 :U P L C . MS / M S法测定高尿 酸血症大鼠血清及尿液 中的尿酸和肌 酐
U P L C- MS / MS法 测定 高尿 酸 血 症 大 鼠血 清 及 尿 液 中的尿 酸 和肌 酐
马青山 ,王 茜 , 赵 凯姝 ,翟淑波 ,刘 舒 ,刘 志强
( 1 .吉林大学第一医院4 , J h 肾病科 , 长春 1 3 0 0 2 1 ; 2 .吉林大学 中日联谊医院肾内科 ,长春 1 3 0 0 3 3 ; 3 .中国科学院长春应用化学研究 所 , 长春 1 3 0 0 2 2 ) 摘要 建立了一 种测定血 清和尿 液 中尿 酸和肌 酐含量 的超 高效液相 色谱- 串联质 谱联用 ( U P L C — M S / MS ) 方
尿酸怎么测量方法
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尿酸怎么测量方法尿酸是人体新陈代谢产物之一,它在体内的水平受到多种因素的影响,包括饮食、遗传、肾脏功能等。
高尿酸水平与痛风、尿酸性肾病等疾病的发生密切相关,因此及时测量尿酸水平对于预防和治疗这些疾病非常重要。
那么,尿酸怎么测量呢?下面将为您介绍几种常用的尿酸测量方法。
1. 血清尿酸测定法。
血清尿酸测定是目前临床上最常用的测量尿酸水平的方法之一。
这种方法通过提取患者的血清样本,利用尿酸酶法或尿酸氧化酶法测定血清中尿酸的浓度。
这种方法操作简便,结果准确可靠,是目前临床上常用的尿酸测量方法之一。
2. 尿液尿酸测定法。
尿液尿酸测定是另一种常用的尿酸测量方法。
这种方法通过收集患者的尿液样本,利用尿酸酶法或尿酸氧化酶法测定尿液中尿酸的浓度。
尿液尿酸测定方法操作简单,结果准确可靠,适用于一些无法采集血清样本的患者。
3. 色谱法测定尿酸。
色谱法是一种高效液相色谱法,它是通过将患者的血清或尿液样本进行分离,然后利用色谱仪测定样本中尿酸的浓度。
这种方法操作相对复杂,需要一定的实验技术和设备,但结果准确可靠,对于一些特殊情况下的尿酸测定具有重要的临床意义。
4. 尿酸电化学法测定。
尿酸电化学法是一种新型的尿酸测定方法,它是通过电化学传感器测定样本中尿酸的浓度。
这种方法操作简便,结果快速准确,适用于一些需要快速测定尿酸水平的临床情况。
总结。
尿酸的测量方法有多种,包括血清尿酸测定法、尿液尿酸测定法、色谱法测定尿酸和尿酸电化学法测定等。
这些方法各有特点,可以根据临床需要选择合适的方法进行尿酸测定。
在进行尿酸测定时,需要注意样本的采集、保存和运输等环节,以保证测定结果的准确性和可靠性。
希望本文对您了解尿酸测量方法有所帮助。
尿酸测定方法的研究进展李扬吴岸峰周原玲龙腾镶
![尿酸测定方法的研究进展李扬吴岸峰周原玲龙腾镶](https://img.taocdn.com/s3/m/097c77fe1b37f111f18583d049649b6648d70906.png)
尿酸测定方法的研究进展李扬吴岸峰周原玲龙腾镶发布时间:2023-06-24T02:46:27.928Z 来源:《中华医学信息导报》5期作者:李扬吴岸峰周原玲龙腾镶[导读] 由嘌呤代谢紊乱、尿酸代谢减少引起的高尿酸血症已成为继高血压、高血糖、高血脂“三高”之后的“第四高”,其患病人数不断增长,同时还易引发一系列疾病,因此对尿酸的监测有着很重要的临床意义和价值。
迈克生物股份有限公司四川成都 611730 摘要:由嘌呤代谢紊乱、尿酸代谢减少引起的高尿酸血症已成为继高血压、高血糖、高血脂“三高”之后的“第四高”,其患病人数不断增长,同时还易引发一系列疾病,因此对尿酸的监测有着很重要的临床意义和价值。
本文主要综述了几种尿酸测定的方法学及其优缺点,并对尿酸家庭自测式的发展趋势进行了总结。
关键词:尿酸检测;分光光度法;酶法;电化学传感器;家用尿酸测试仪尿酸是嘌呤代谢的最终产物,当人体内出现嘌呤代谢紊乱、尿酸排泄减少时,就会导致血液中尿酸含量升高。
《中国高尿酸血症和痛风诊断和治疗指南》(2019年)中指出男性或女性非同日2次空腹血尿酸水平超过420umol/L,就可被诊断为高尿酸血症。
高尿酸血症除了引发痛风外,同时还会诱发如高血压、高血脂、慢性肾病、心脑血管等疾病。
近几年来,我国高尿酸血症患病情况逐年攀升,总体患病率占比13.3%,患病人群约1.77亿,另有数据显示约有60%的患者是18-35岁的年轻人,这意味着高尿酸血症及痛风并不是所谓的“中老年疾病”了。
因此,对于尿酸含量的准确、便捷检测是很有必要的。
1 尿酸检测方法常见的尿酸检测方法众多,包括磷钨酸还原法、高效液相色谱法、分光光度法、酶法、电化学传感器法等。
1.1磷钨酸还原法该方法是早期临床常用的一种方法,其原理是在碱性条件下磷钨酸将尿酸氧化成尿囊素和二氧化碳,自身被还原为有色物质钨蓝,利用特定波长的滤光板滤除杂色后,与尿酸标准液进行比色,根据生成的钨蓝颜色深浅获得尿酸浓度。
肌酐纯度标准物质的定值方法及其不确定度评定研究
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肌酐纯度标准物质的定值方法及其不确定度评定研究黄亮;张伟;黄挺;戴新华;李红梅;陈炜庆【摘要】通过定性及定量分析,研究了肌酐纯度标准物质的定值方法,并进行了定值分析的不确定度评定.首先使用三重四极杆质谱仪及核磁共振谱仪(氢谱)对肌酐样品进行定性分析,然后采用质量平衡法(包括液相色谱法、水分、灰分、挥发性物质和无机元素分析)与定量核磁共振法共同对肌酐纯度标准物质进行准确定值,最后对定值结果进行不确定度评定.肌酐的定值结果为99.7%,扩展不确定度为0.4%.该研究对于实际检测中肌酐的准确测定及临床上相关疾病的正确诊断治疗具有重要意义,且经过定值的肌酐纯品还可做定量核磁共振法的定量内标使用.定量分析后的肌酐经过均匀性检验和稳定性考察后可申报为国家标准物质.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2014(033)007【总页数】7页(P840-846)【关键词】肌酐;纯度定值;质量平衡法;定量核磁共振法【作者】黄亮;张伟;黄挺;戴新华;李红梅;陈炜庆【作者单位】广州计量检测技术研究院,广东广州510030;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013;广州计量检测技术研究院,广东广州510030【正文语种】中文【中图分类】O657.3;TQ460.72肌酐是一种白色结晶物质,分子式为C4H7N3O,分子量较小(为113.118 8),能溶于水,微溶于乙醇,几乎不溶于乙醚、丙酮和氯仿等有机溶剂。
由于肌酐是由肌肉中的磷酸肌酸通过不可逆的方式转化而形成,当人体中肌酐的浓度超过一定量时,就会通过肾脏排泄随尿液排出体外,尿中尿酸和肌酐的比值测定与某些疾病的诊断及病理研究有关,因此肌酐水平的测定在临床上对这些疾病,特别是肾病的确认具有重要的指导意义[1-2]。
尿中肌酐的高效液相色谱法1原理
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尿中肌酐的高效液相色谱法1 原理尿样用水稀释100倍后,经C18柱分离,紫外检测器检测,以保留时间定性,以峰高或峰面积定量。
2 仪器2.1 塑料瓶,50mL。
2.2 容量瓶,10mL,25mL。
2.3 涡旋振荡器。
2.4 精密分析天平,感量0.01mg。
2.5 高效液相色谱仪,紫外检测器。
3 试剂3.1 盐酸(ρ20=1.19g/mL),优级纯。
3.2 乙酸钠(CH3COONa),优级纯。
3.3 乙酸钠溶液(0.05mol/L):称取4.1g乙酸钠,溶解于水后,稀释至1000mL。
3.4 甲醇(CH3OH),色谱纯。
3.5 肌酐(C4H7N3O),优级纯。
3.6 盐酸溶液(0.1mol/L),取4.2mL盐酸加水稀释至500mL。
3.7 流动相:乙酸钠溶液+甲醇=95+5。
3.8 肌酐标准贮备溶液[ρ(C4H7N3O)=10mg/mL]:准确称取250.00mg肌酐(经110℃干燥2h),溶于盐酸溶液,定量转移入25mL容量瓶中,并稀释至刻度,此溶液为10mg/mL肌酐标准贮备液。
该溶液置于冰箱4℃冷藏保存可稳定6个月。
3.9 肌酐标准应用溶液[ρ(C4H7N3O)=100µg/mL]:用水将标准储备液稀释成浓度为100µg/mL 标准应用溶液。
该应用液置于冰箱4℃冷藏保存可稳定1个月。
4 样品的采集、运输和保存依据《职业卫生生物监测总则》进行样品采集。
将采集后的尿液在室温下运输。
4℃条件下保存样品有效期为14d。
5 分析步骤5.1 仪器操作参考条件波长:254nm色谱柱:250mm×4.6mm×5µm C18进样量:10µL流动相:乙酸钠溶液+甲醇=95+5流速:0.9mL/min5.2 标准曲线的配制和测定取5只10mL容量瓶,用流动相稀释肌酐标准应用溶液,配制成浓度为0.0µg/mL ~50.0µg/mL 的标准系列溶液。
两种测定肌酐方法的结果比较
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两种测定肌酐方法的结果比较
林颖
【期刊名称】《求医问药:下半月刊》
【年(卷),期】2012(010)002
【摘要】临床实验室测定肌酐的方法有很多,有碱性苦味酸法(jaffet)、酶法、高效液相层析法、拉曼散射法、同位素稀释质谱法、毛细管电泳法及电极法等。
从传统的全血肌酐碱性苦味酸法(jaffet)到血清肌酐苦味酸比色法,再到同一原理的速率法[1],目前大多数实验室采用jaffet反应速率法来测定肌酐。
肌酐是肾功能检查的重要指标之一。
传统的苦味酸法除线形范围较小外,对全自动生化分析仪的管理污染很大;而酶法的抗干扰力强、污染少。
笔者采用本室Olympus Au 480全自动生化分析仪分别对苦味酸法和酶测定法做了比较,认为酶测定法的结果线形范围大且不污染管理,是一种值得推广的方法。
【总页数】1页(P577-577)
【作者】林颖
【作者单位】永康市第六人民医院,浙江永康321300
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.两种方法测定绿盲蝽气味结合蛋白AlucOBP21配体结合特性的结果比较 [J], 刘航玮;张强;耿亭;董昆;安兴奎;王琪;张永军;郭予元
2.两种方法测定血尿素、尿酸、肌酐的结果比较和评估偏倚 [J], 蒋莉;张丽芬;杨阳;沈化清
3.CA-1500全自动血凝仪两种方法测定纤维蛋白原的结果比较 [J], 欧阳贵平;谢香萍;李小花;刘石长;江萍
4.两种测定肌酐方法的结果比较 [J], 林颖
5.两种检测系统测定尿微量白蛋白、尿肌酐及ACR结果比较 [J], 郑登滋;朱爱兰;陈则金;徐丛荣;魏建威
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高效液相色谱法准确测定血清中的尿酸
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高效液相色谱法准确测定血清中的尿酸
张春梅;戴新华;杨屹;齐韬;方向
【期刊名称】《分析试验室》
【年(卷),期】2008(27)5
【摘要】建立了准确测定血清中尿酸含量的高效液相色谱方法,血清样品利用乙腈沉淀蛋白,过滤后直接进样测定。
所采用的色谱柱为Inertsil ODS-SP(4.6mm i.d.×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相体系为10 mmol/L乙酸铵(pH 4.5),流速为1.0 mL/min,紫外检测波长为280 nm。
线性范围12.5~150μg/g,回收率为99.79%~100.5%。
本文采用乙酸铵缓冲体系,对环境的污染小,同时也为建立液相色谱-质谱法测定尿酸奠定了良好的基础。
【总页数】4页(P84-87)
【关键词】尿酸;高效液相色谱法;血清
【作者】张春梅;戴新华;杨屹;齐韬;方向
【作者单位】北京化工大学理学院,北京100029;中国计量科学研究院化学计量与分析科学研究所,北京100013
【正文语种】中文
【中图分类】O657.7
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法同时测定尿中尿酸,肌酐,尿苷和马尿酸 [J], 杨越冬
2.高效液相色谱法测定血清中尿酸的含量 [J], 周桂芳;傅旭春;王建平
3.反相高效液相色谱法同时测定血清(浆)中的尿酸和肌酐 [J], 杨树德;张京城
4.高效液相色谱法同时测定血清中肌酸、尿酸和肌酐 [J], 周永国
5.高效液相色谱法定量尿酸、黄嘌呤和次黄嘌呤在人体血清中的浓度 [J], 施政;刘健;申屠建中;王建平
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如何测定肾脏残余功能?
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如何测定肾脏残余功能?引言肾脏是人体重要的排泄器官之一,对于维持体内水盐平衡、清除代谢废物和维持酸碱平衡具有关键作用。
当肾脏出现疾病时,可能会导致肾脏功能的损害。
因此,及时准确地测定肾脏残余功能对于诊断和治疗肾脏疾病至关重要。
本文将介绍几种常用的测定肾脏残余功能的方法。
尿液分析尿液分析是一种常见的评估肾脏功能的方法。
通过分析尿液中的成分,可以了解肾脏对废物和病理产物的排泄功能。
常见的尿液分析包括检测尿液的pH值、比重、蛋白质、尿酸和尿素等指标。
尿液分析可以初步判断肾脏的滤过功能和排泄功能是否正常。
血清肌酐测定血清肌酐测定是一种可靠且常用的测定肾脏残余功能的方法。
血清肌酐是肌肉代谢废物,在肾脏滤过后排泄出体外。
因此,血清肌酐水平的升高可能表明肾脏滤过功能的减退。
常见的血清肌酐测定方法包括酶法和高效液相色谱法,可以通过检测血液中的肌酐浓度来评估肾脏的滤过功能。
血尿素氮测定血尿素氮(BUN)测定也是评估肾脏残余功能的重要方法之一。
尿素氮是代谢产物,在肾脏滤过后排泄出体外。
因此,血尿素氮水平的升高可能表明肾脏滤过功能的减退。
常见的血尿素氮测定方法包括酶法和尿素酶法,可以通过检测血液中的尿素氮浓度来评估肾脏的滤过功能。
肾小球滤过率测定肾小球滤过率(GFR)是评估肾脏滤过功能的重要指标。
正常情况下,肾小球滤过率可以反映肾脏的滤过功能正常与否。
常见的测定肾小球滤过率的方法包括血液清除法和尿液代谢物清除率法。
血液清除法通过测定血液中特定物质的清除率来评估肾小球滤过率,尿液代谢物清除率法则通过测定尿液中特定物质的清除率来评估肾小球滤过率。
影像学检查除了上述的生化指标测定外,还可以通过影像学检查来评估肾脏的残余功能。
常见的影像学检查方法包括超声检查、CT扫描和磁共振成像(MRI)等。
这些检查方法可以观察肾脏的形态、大小、血流量和肾组织的病变情况,从而间接评估肾脏的残余功能。
结论准确测定肾脏残余功能对于判断肾脏疾病的严重程度、制定治疗方案和评估治疗效果具有重要意义。
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本文推荐了一种基于液相色谱分离,V3n U 24 m
检测的分析方法, 5 在 分钟内可完成对尿中尿酸和 肌酐的同时测定。尿样只需用流动相稀释后便可直 接进样, 操作简便、 干扰少, 是一种特异、 灵敏、 准确
的测定方法 。
结果与讨论 ( 流动相条件 实验结果表明, 一) 增加流动相 甲醇比例或p H值, 尿酸保留缩短, 且灵敏度略有增 加; 而增大缓冲溶液浓度则尿酸保留延长。 但这些参 数的变化对肌酐的结果影响不大。 ( 重复性 对同时含有尿酸11 1-ml 二) .9 05o / L和肌酐 17 1-m l .7 05oL的标准混合溶液重复 9 / 次测定后, 其峰高变异系数分别为17 .%和 27 .%, 同一份尿样重复 9 次测定时, 尿酸和肌酐的变异系 数分别为17 .%和36 .%。 ( 线性及检测限 在选定的实验条件下, 三) 尿 酸和肌酐的色谱峰高与被测浓度均呈良好的线性关
醇中, 检测波长24 。 5n m
制备时采用甲醇洗脱, 流速 5 l i, m/ n 压力 m 48 P, .M a操作参数如下:
制集 备方 收式
仪器和试剂
法 国 GLO I N梯度洗脱 自动分析系统 ( S 配 A PE 型屏幕显示系统,2 数据处理器,0 程 PL 60 74 序软盘和 H L C R M 紫外分光光度检测器) OOH O E , Y -1 WGC8 反相柱( 天津化学试剂二厂填料, 中科院大
ui ai ad eti w r 02 o L n r c c d n c an e e r in e .4m l ad / 03 o L r pcvl wt t ce i n o .5m l , e e i y i h o fi t f / s te h e fc s e vr tn 17 ad 6 ad r oee o aii o . ao f n 3 % t e vrs . n h c i f e 9.- 101 ad .- 15 1 ,e ei l 28 0. % 115 0. n 0 rpcv y s te .
10 . 6. 50
单循环进样量 05 16gm 甲醇)平均制备周期 .m(m /l , 56 i, .mn制备时间6。 h
连化物所装柱,0 , 0m 46m ., 装 1m2 m 2 .m i . 自 d
C8 1 预柱。 法国GLO ISN恒溶剂洗脱自动制备系统( 21 配 0 型馏分收集器) WGC8 。Y -1 半制备柱( 中科院大连化
o p 30 a m be s, e cd 20m h f .0 oi pa dtt a 0n .T e H s l h e ee t l io t m t d ls n 1- ( / , h i t h e o i e t 1 0 5 VV)T e m f e h s h s a
( 收稿日 19年 8 1 , 期: 1 月 8日 修回日 1月 2 日 9 期: 0 7 )
Di c De r n t n Ur Ac a d raiie r t t miai o e e o f i c i n C et n i d n n
Uie Hi P r r ac Lq i C rma gah L r b n y g ef m ne ud o t r y h o i h o p K ,D r e o I t e etm n f r t n s ma s , e r H s a o l G n l pl ys i a o f
[] . Mc o e a , m e.Rs 3 JL k n l A .Rv e e t . prDs, 4 , i 12 8 .
( 色谱条件 .m 三) 46 m 30m odpk 0m Bnaa C8 流动相为甲醇 : 1 柱; 磷酸盐缓冲液(.1m l , 005o L /
(9 0 . 19) [] z i e a. Ci.C e ,3 ,0 1 9 5 . 4 A. hr t , l i l n hm. 1 1 9 8 )
po ht bf r(5: 5 V )ad cm ons hs a u e 7 2 , V ,n t o pud p e f h e
wee o i rd UV 3 n r m nt e a o t 2 4 m.Th dtcin t fr e et l s e o i mi o
Nn ajnCm ad P A, 10 2 om n, L 20 0 A es i , rp a d m l h h romac s iv n t e ai n s p d i e g p fr n i e e l u crma gahc t d a it d cd o i i ho t rp i me o w s r ue fr q d o h no s ut eu qa ti t n uiai ad a n e i l nos nic i o r c n c t i i m a u f a o f c d r in n
0 1。 .8
参
考
文 献
[ 林其燧等译,临床化学诊断方法大全》 ] 《 , 北京大学出 版社, P2, 9. 北京, 71 0 . 9
[] . . a a ea , m R v R sr i , 3 ,3 2 JD H s d t A . e. e i s 1554 l . p.D .
(9 7 . 18)
实验部分 ( 主要仪器 WG - 型高压平流泵( 一) P6 杭州之 江科学仪器厂)Z 1 ;W- 型分光检测器( 南京分析仪器 厂)台式记录仪( , 上海大华仪表厂) 。
( 主要试剂 二) 标准 品尿酸 、 肌酐分别为 S m ia g
和M r 产品, ek c 其它试剂均为分析纯级试剂k ) 进样时间(i)Ijt mn nc e) 收集门限%(ee Lvl ) 延迟时间(i)Dl ) mn(ey a
收集峰数( B k) N Pas e
(e P k
1. 00 01 . 80 . 02 .4
20 .
清洗时间(i)Rne mn(i ) s 循环次数(B l N Cc ) ye
物所,0m 1m i . , 20m 0m )自装C8 . d 1 预柱。 甲醇( 分析纯, 北京化工厂产品)二次蒸馏水都 ,
经过滤脱气处理 。
色谱条件
分析时采用甲醇 : 水=9 8 2为洗脱液, 流速 10 l i, .m/ n进样量 5 , m l样品浓度为 1- oL在甲 03 l , m/
ce . f ii i e t n ec s e ic of ovrtn s h 3 xli ocr ad f aao s a % u v f c ls t i i (V . C =87 . t r u c g t s d c s . Oh i l ni f o a iu e e n e n a r r s sd f c e
结
果
: 组分 ) 。
H L 分析表 明, 中含两个组分 ( PC 产物 见图 1 , )其
积分面积比值为7. : 44组分 56 2.(
高效液相色谱法直接测定尿中尿酸和肌酐
李 克
( 南京部队南京总医院中心仪器分析科 ,102 200)
尿中尿酸与肌酐比值的测定对于某些疾病的诊 断及病理研究很有意义( 3但一般需先分别测出二 1) -, 者浓度, 再计算比值, 这样不仅测定周期长, 而且干 扰影响大, 结果准确性差。 采用色谱法测定尿酸和肌
酐可较好地改善检测 的特 异性( 。 -)
p 63 =7 2 ( / )检 测波 长 U 24m 流 量 H . ) 5: 5 V V V 3n
08l i, .m/ n定量管体积1 。 m 0l ( 尿样测定 取尿样 5l 四) , 以流动相稀释20 5 倍混匀后进样测定。图 1 分别为标准品和尿样的色
水均 为二次 重蒸馏水 。
系。 其回归 方程和相关系数分别为Y 52 =4.1 X-
09 , = 099 .3 .99及 Y = 4. 8 - 18 , = 79X .8
099。 .96 其检测限分别为24 1-m l 和 35 . 07o L . /
1 -m lL 0 7 o/ 。
( 尿样测定 采用本法对 1 例正常人员留 四) 0 取晨尿测定尿酸与肌酐 摩尔浓度比值, 其结果为 12 01, 8 .8 .5对 例肾脏病患者测定结果为 08 .2
[] . ree a , .h m t r, 2 ,6 90. 5 G We r l JC r a g. 5525 9) n t . o o
ui .F lw n te u o o uie t te b e r e oo ig d t n r w h moi n h i i f n i h l l pae h sm l w s e l ij t it a 1c hs,te p a e a d c y e no C8 i t n d r - o lm . T e b e a cnie o me a o ad un h moi p s o st l h e s d f t n l h n
高效液相色谱法用于品红 DR成色剂的制备分离 I
阎 芳
( 中国科 学院感 光化 学所, 北京 100) 011
成色剂是彩色感光材料中的主要助剂, 曝光后 经显影可形成不同的影像。它们都是分子量较大的 复杂有机分子, 且合成路线冗长。 尽管产物经过重结 晶, 但仍然难免有一些未反应物或副产物杂质, 影响 产品质量。 例如在合成品红成色剂 I 总是存在相 时, 当多的原料 , 二者化学性质相近, 用经典柱色谱技 术无法分开; 用制备薄层色谱, 由于其R 值相差极 f 小, 分离也很困难。我们采用高效液相色谱制备分 离, 可以使产物达到很高的纯度要求。 品红成色剂的结构式为: