高效液相色谱法直接测定尿中尿酸和肌酐

收集位（ａ Ｃ ｓ Ｒｃ ａｅ ｋ ） 进样时间（ｉ）Ｉｊｔ ｍｎ ｎｃ ｅ） 收集门限％（ｅｅ Ｌｖｌ ） 延迟时间（ｉ）Ｄｌ ） ｍｎ（ｅｙ ａ
收集峰数（ Ｂ ｋ） Ｎ Ｐａｓ ｅBiblioteka Baidu
（ｅ Ｐ ｋ
１． ００ ０１ ． ８０ ． ０２ ．４
２０ ．
清洗时间（ｉ）Ｒｎｅ ｍｎ（ｉ ） ｓ 循环次数（Ｂ ｌ Ｎ Ｃｃ ） ｙｅ
醇中， 检测波长２４ 。 ５ｎ ｍ
制备时采用甲醇洗脱， 流速 ５ ｌ ｉ， ｍ／ ｎ 压力 ｍ ４８ Ｐ， ．Ｍ ａ操作参数如下：
制集 备方 收式
仪器和试剂
法 国 ＧＬＯ Ｉ Ｎ梯度洗脱 自动分析系统 （ Ｓ 配 Ａ ＰＥ 型屏幕显示系统，２ 数据处理器，０ 程 ＰＬ ６０ ７４ 序软盘和 Ｈ Ｌ Ｃ Ｒ Ｍ 紫外分光光度检测器） ＯＯＨ Ｏ Ｅ ， Ｙ －１ ＷＧＣ８ 反相柱（ 天津化学试剂二厂填料， 中科院大
０ １。 ．８
参
考
文 献
［ 林其燧等译，临床化学诊断方法大全》 ］ 《 ， 北京大学出 版社， Ｐ２， ９． 北京， ７１ ０ ． ９
［］ ． ． ａ ａ ｅａ ， ｍ Ｒ ｖ Ｒ ｓｒ ｉ ， ３ ，３ ２ ＪＤ Ｈ ｓ ｄ ｔ Ａ ． ｅ． ｅ ｉ ｓ １５５４ ｌ ． ｐ．Ｄ ．
（９ ７ ． １８）
高效液相色谱法直接测定尿中尿酸和肌酐
李 克
（ 南京部队南京总医院中心仪器分析科 ，１０２ ２００）
尿中尿酸与肌酐比值的测定对于某些疾病的诊 断及病理研究很有意义（ ３但一般需先分别测出二 １） －， 者浓度， 再计算比值， 这样不仅测定周期长， 而且干 扰影响大， 结果准确性差。 采用色谱法测定尿酸和肌
物所，０ｍ １ｍ ｉ ． ， ２０ｍ ０ｍ ）自装Ｃ８ ． ｄ １ 预柱。 甲醇（ 分析纯， 北京化工厂产品）二次蒸馏水都 ，
经过滤脱气处理 。
色谱条件
分析时采用甲醇 ： 水＝９ ８ ２为洗脱液， 流速 １０ ｌ ｉ， ．ｍ／ ｎ进样量 ５ ， ｍ ｌ样品浓度为 １－ ｏＬ在甲 ０３ ｌ ， ｍ／
谱图。
本文推荐了一种基于液相色谱分离，Ｖ３ｎ Ｕ ２４ ｍ
检测的分析方法， ５ 在 分钟内可完成对尿中尿酸和 肌酐的同时测定。尿样只需用流动相稀释后便可直 接进样， 操作简便、 干扰少， 是一种特异、 灵敏、 准确
的测定方法 。
结果与讨论 （ 流动相条件 实验结果表明， 一） 增加流动相 甲醇比例或ｐ Ｈ值， 尿酸保留缩短， 且灵敏度略有增 加； 而增大缓冲溶液浓度则尿酸保留延长。 但这些参 数的变化对肌酐的结果影响不大。 （ 重复性 对同时含有尿酸１１ １－ｍｌ 二） ．９ ０５ｏ ／ Ｌ和肌酐 １７ １－ｍ ｌ ．７ ０５ｏＬ的标准混合溶液重复 ９ ／ 次测定后， 其峰高变异系数分别为１７ ．％和 ２７ ．％， 同一份尿样重复 ９ 次测定时， 尿酸和肌酐的变异系 数分别为１７ ．％和３６ ．％。 （ 线性及检测限 在选定的实验条件下， 三） 尿 酸和肌酐的色谱峰高与被测浓度均呈良好的线性关
（ 收稿日 １９年 ８ １ ， 期： １ 月 ８日 修回日 １月 ２ 日 ９ 期： ０ ７ ）
Ｄｉ ｃ Ｄｅ ｒ ｎ ｔ ｎ Ｕｒ Ａｃ ａ ｄ ｒａｉｉｅ ｒ ｔ ｔ ｍｉａｉ ｏ ｅ ｅ ｏ ｆ ｉ ｃ ｉ ｎ Ｃ ｅｔ ｎ ｉ ｄ ｎ ｎ
Ｕｉｅ Ｈｉ Ｐ ｒ ｒ ａｃ Ｌｑ ｉ Ｃ ｒｍａ ｇａｈ Ｌ ｒ ｂ ｎ ｙ ｇ ｅｆ ｍ ｎｅ ｕｄ ｏ ｔ ｒ ｙ ｈ ｏ ｉ ｈ ｏ ｐ Ｋ ，Ｄ ｒ ｅ ｏ Ｉ ｔ ｅ ｅｔｍ ｎ ｆ ｒ ｔ ｎ ｓ ｍａ ｓ ， ｅ ｒ Ｈ ｓ ａ ｏ ｌ Ｇ ｎ ｌ ｐｌ ｙｓ ｉ ａ ｏ ｆ
高效液相色谱法用于品红 ＤＲ成色剂的制备分离 Ｉ
阎 芳
（ 中国科 学院感 光化 学所， 北京 １００） ０１１
成色剂是彩色感光材料中的主要助剂， 曝光后 经显影可形成不同的影像。它们都是分子量较大的 复杂有机分子， 且合成路线冗长。 尽管产物经过重结 晶， 但仍然难免有一些未反应物或副产物杂质， 影响 产品质量。 例如在合成品红成色剂 Ｉ 总是存在相 时， 当多的原料 ， 二者化学性质相近， 用经典柱色谱技 术无法分开； 用制备薄层色谱， 由于其Ｒ 值相差极 ｆ 小， 分离也很困难。我们采用高效液相色谱制备分 离， 可以使产物达到很高的纯度要求。 品红成色剂的结构式为：
ｏ ｐ ３０ ａ ｍ ｂｅ ｓ， ｅ ｃｄ ２０ｍ ｈ ｆ ．０ ｏｉ ｐａ ｄｔｔ ａ ０ｎ ．Ｔ ｅ Ｈ ｓ ｌ ｈ ｅ ｅｅ ｔ ｌ ｉｏ ｔ ｍ ｔ ｄ ｌｓ ｎ １－ （ ／ ， ｈ ｉ ｔ ｈ ｅ ｏ ｉ ｅ ｔ １ ０ ５ ＶＶ）Ｔ ｅ ｍ ｆ ｅ ｈ ｓ ｈ ｓ ａ
水均 为二次 重蒸馏水 。
系。 其回归 方程和相关系数分别为Ｙ ５２ ＝４．１ Ｘ－
０９ ， ＝ ０９９ ．３ ．９９及 Ｙ ＝ ４． ８ － １８ ， ＝ ７９Ｘ ．８
０９９。 ．９６ 其检测限分别为２４ １－ｍ ｌ 和 ３５ ． ０７ｏ Ｌ ． ／
１ －ｍ ｌＬ ０ ７ ｏ／ 。
（ 尿样测定 采用本法对 １ 例正常人员留 四） ０ 取晨尿测定尿酸与肌酐 摩尔浓度比值， 其结果为 １２ ０１， ８ ．８ ．５对 例肾脏病患者测定结果为 ０８ ．２
１０ ． ６． ５０
单循环进样量 ０５ １６ｇｍ 甲醇）平均制备周期 ．ｍ（ｍ ／ｌ ， ５６ ｉ， ．ｍｎ制备时间６。 ｈ
连化物所装柱，０ ， ０ｍ ４６ｍ ．， 装 １ｍ２ ｍ ２ ．ｍ ｉ ． 自 ｄ
Ｃ８ １ 预柱。 法国ＧＬＯ ＩＳＮ恒溶剂洗脱自动制备系统（ ２１ 配 ０ 型馏分收集器） ＷＧＣ８ 。Ｙ －１ 半制备柱（ 中科院大连化
结
果
： 组分 ） 。
Ｈ Ｌ 分析表 明， 中含两个组分 （ ＰＣ 产物 见图 １ ， ）其
积分面积比值为７． ： ４４组分 ５６ ２．（
酐可较好地改善检测 的特 异性（ 。 －）
ｐ ６３ ＝７ ２ （ ／ ）检 测波 长 Ｕ ２４ｍ 流 量 Ｈ ． ） ５： ５ Ｖ Ｖ Ｖ ３ｎ
０８ｌ ｉ， ．ｍ／ ｎ定量管体积１ 。 ｍ ０ｌ （ 尿样测定 取尿样 ５ｌ 四） ， 以流动相稀释２０ ５ 倍混匀后进样测定。图 １ 分别为标准品和尿样的色
［］ ． Ｍｃ ｏ ｅ ａ ， ｍ ｅ．Ｒｓ ３ ＪＬ ｋ ｎ ｌ Ａ ．Ｒｖ ｅ ｅ ｔ ． ｐｒＤｓ， ４ ， ｉ １２ ８ ．
（ 色谱条件 ．ｍ 三） ４６ ｍ ３０ｍ ｏｄｐｋ ０ｍ Ｂｎａａ Ｃ８ 流动相为甲醇 ： １ 柱； 磷酸盐缓冲液（．１ｍ ｌ ， ００５ｏ Ｌ ／
（９ ０ ． １９） ［］ ｚ ｉ ｅ ａ． Ｃｉ．Ｃ ｅ ，３ ，０ １ ９ ５ ． ４ Ａ． ｈｒ ｔ ， ｌ ｉ ｌ ｎ ｈｍ． １ １ ９ ８ ）
ｐｏ ｈｔ ｂｆ ｒ（５： ５ Ｖ ）ａｄ ｃｍ ｏｎｓ ｈｓ ａ ｕ ｅ ７ ２ ， Ｖ ，ｎ ｔ ｏ ｐｕｄ ｐ ｅ ｆ ｈ ｅ
ｗｅｅ ｏ ｉ ｒｄ ＵＶ ３ ｎ ｒ ｍ ｎｔ ｅ ａ ｏ ｔ ２ ４ ｍ．Ｔｈ ｄｔｃｉｎ ｔ ｆｒ ｅ ｅｔ ｌ ｓ ｅ ｏ ｉ ｍｉ ｏ
Ｎｎ ａｊｎＣｍ ａｄ Ｐ Ａ， １０ ２ ｏｍ ｎ， Ｌ ２０ ０ Ａ ｅｓ ｉ ， ｒｐ ａ ｄ ｍ ｌ ｈ ｈ ｒｏｍａｃ ｓ ｉｖ ｎ ｔ ｅ ａｉ ｎ ｓ ｐ ｄ ｉ ｅ ｇ ｐ ｆｒ ｎ ｉ ｅ ｅ ｌ ｕ ｃｒｍａ ｇａｈｃ ｔ ｄ ａ ｉｔ ｄ ｃｄ ｏ ｉ ｉ ｈｏ ｔ ｒｐ ｉ ｍｅ ｏ ｗ ｓ ｒ ｕｅ ｆｒ ｑ ｄ ｏ ｈ ｎｏ ｓ ｕｔ ｅｕ ｑａ ｔｉ ｔ ｎ ｕｉａｉ ａｄ ａ ｎ ｅ ｉ ｌ ｎｏｓ ｎｉｃ ｉ ｏ ｒ ｃ ｎ ｃ ｔ ｉ ｉ ｍ ａ ｕ ｆ ａ ｏ ｆ ｃ ｄ ｒ ｉｎ ｎ
实验部分 （ 主要仪器 ＷＧ － 型高压平流泵（ 一） Ｐ６ 杭州之 江科学仪器厂）Ｚ １ ；Ｗ－ 型分光检测器（ 南京分析仪器 厂）台式记录仪（ ， 上海大华仪表厂） 。
（ 主要试剂 二） 标准 品尿酸 、 肌酐分别为 Ｓ ｍ ｉａ ｇ
和Ｍ ｒ 产品， ｅｋ ｃ 其它试剂均为分析纯级试剂， 实验用
［］ ． ｒｅｅ ａ ， ．ｈ ｍ ｔ ｒ， ２ ，６ ９０． ５ Ｇ Ｗｅ ｒ ｌ ＪＣ ｒ ａ ｇ． ５５２５ ９） ｎ ｔ ． ｏ ｏ
ｕｉ ．Ｆ ｌｗ ｎ ｔｅ ｕ ｏ ｏ ｕｉｅ ｔ ｔｅ ｂ ｅ ｒ ｅ ｏｏ ｉｇ ｄ ｔ ｎ ｒ ｗ ｈ ｍｏｉ ｎ ｈ ｉ ｉ ｆ ｎ ｉ ｈ ｌ ｌ ｐａｅ ｈ ｓｍ ｌ ｗ ｓ ｅ ｌ ｉｊ ｔ ｉｔ ａ １ｃ ｈｓ，ｔｅ ｐ ａ ｅ ａ ｄ ｃ ｙ ｅ ｎｏ Ｃ８ ｉ ｔ ｎ ｄ ｒ － ｏ ｌｍ ． Ｔ ｅ ｂ ｅ ａ ｃｎｉｅ ｏ ｍｅ ａ ｏ ａｄ ｕｎ ｈ ｍｏｉ ｐ ｓ ｏ ｓｔ ｌ ｈ ｅ ｓ ｄ ｆ ｔ ｎ ｌ ｈ ｎ
ｕｉ ａｉ ａｄ ｅｔｉ ｗ ｒ ０２ ｏ Ｌ ｎ ｒ ｃ ｃ ｄ ｎ ｃ ａｎ ｅ ｅ ｒ ｉｎ ｅ ．４ｍ ｌ ａｄ ／ ０３ ｏ Ｌ ｒ ｐｃｖｌ ｗｔ ｔ ｃｅ ｉ ｎ ｏ ．５ｍ ｌ ， ｅ ｅ ｉ ｙ ｉ ｈ ｏ ｆｉ ｔ ｆ ／ ｓ ｔｅ ｈ ｅ ｆｃ ｓ ｅ ｖｒ ｔｎ １７ ａｄ ６ ａｄ ｒ ｏｅｅ ｏ ａｉｉ ｏ ． ａｏ ｆ ｎ ３ ％ ｔ ｅ ｖｒｓ ． ｎ ｈ ｃ ｉ ｆ ｅ ９．－ １０１ ａｄ ．－ １５ １ ，ｅ ｅｉ ｌ ２８ ０． ％ １１５ ０． ｎ ０ ｒｐｃｖ ｙ ｓ ｔｅ ．
ｃｅ ． ｆ ｉｉ ｉ ｅ ｔ ｎ ｅｃ ｓ ｅ ｉｃ ｏｆ ｏｖｒｔｎ ｓ ｈ ３ ｘｌｉ ｏｃｒ ａｄ ｆ ａａｏ ｓ ａ ％ ｕ ｖ ｆ ｃ ｌｓ ｔ ｉ ｉ （Ｖ ． Ｃ ＝８７ ． ｔ ｒ ｕ ｃ ｇ ｔ ｓ ｄ ｃ ｓ ． Ｏｈ ｉ ｌ ｎｉ ｆ ｏ ａ ｉｕ ｅ ｅ ｎ ｅ ｎ ａ ｒ ｒ ｓ ｓｄ ｆ ｃ ｅ