风信子离体快繁体系的建立
风信子的繁殖方式
风信子的繁殖方式风信子（Hyacinthus orientalis）是一种美丽的多年生草本植物，被广泛栽培为观赏植物。
它们以其鲜艳多彩的花朵和芳香的气味受到人们的喜爱。
要想培育更多的风信子，了解其繁殖方式是至关重要的。
风信子主要有三种繁殖方式：球茎分蘖、种子繁殖和离体繁殖。
1. 球茎分蘖球茎分蘖是风信子最常见的繁殖方式。
通过分蘖，一个母球茎可以产生多个新球茎，每个新球茎都能够生长并开花。
这种繁殖方式可以在秋季或冬季进行。
首先，选择具有健康外观的母球茎。
在球茎休眠期间，将球茎从土壤中取出并清洁干净。
然后，将球茎剥离成小块，每块应该有一个芽和一些鳞片。
将这些小块重新植入土壤中，并确保芽朝上。
在适当的湿度和温度下，新球茎将从小块中生长出来。
2. 种子繁殖种子繁殖是一种相对较慢的繁殖方式，但它可以创造出更多的多样性。
风信子的种子可以从成熟的花朵中收集到。
然而，由于风信子花朵的授粉非常困难，种子的获取相对较为困难。
将风信子种子从花朵中提取出来后，需要进行一定的处理。
首先，将种子浸泡在温水中，保持在合适的温度下进行冷层激活处理，通常是将种子放入冷冻库中一段时间。
然后，将种子放入适当的培养基中，提供适当的温度和光照条件加速种子的发芽和生长。
3. 离体繁殖离体繁殖是一种高效的繁殖方式，通过离体培养可以快速产生大量的风信子植株。
这种繁殖方式是在无菌条件下进行的。
首先，选择健康的植物材料，如茎尖、叶片或花蕾。
将这些材料取出并进行消毒处理，确保无菌。
然后，将消毒后的材料放入含有适当培养基的培养皿中。
培养基中含有一些必需的营养物质和生长调节剂，以促进植物的生长和分化。
在适当的温度和光照条件下，植物材料将形成新的芽，并逐渐形成植株。
总结而言，风信子的繁殖方式主要包括球茎分蘖、种子繁殖和离体繁殖。
球茎分蘖是最常见的方式，种子繁殖可以创造更多多样性，而离体繁殖则是一种高效的繁殖方式。
可以根据实际需要选择适合的繁殖方式，以扩大风信子的种植量并欣赏其美丽的花朵。
第五章 植物离体快速繁殖和脱毒培养
4、试管苗驯化移栽——Transplanting
• 炼苗（驯化）：移栽 前将培养物不开口， 移到自然光照下锻炼 2-3d，让试管苗接受 强光的照射，使其长 得壮实起来，然后再 开口炼苗1-2d，经受 较低湿度的处理，以 适应将来自然湿度的 条件 。
驯化:试管苗在移栽之前所进行的逐步锻炼和适应自然生长环境的过程
第五章 植物离体快速繁殖和脱毒培养
第一节 离体快速繁殖技术
• 离体繁殖：利用离体培养技术，将植物的
外植体在人工培养基和合适的条件下进行
培养，以在短期内获得大量遗传性一致个
体的方法。
一、植物快速繁殖的主要步骤
• • • • 1、建立无菌培养体系 2、无菌培养体系的快速增殖 3、诱导生根 4、试管苗的驯化与移植。
通常幼龄部位产生褐化较轻，随着组织的老 龄化含醌类物质增多而褐化加重。 一般在春夏季，尤其是春季采取生长旺盛的 外植体产生褐化较轻，已木栓化或木质化的枝 条和处于休眠状态的芽作为外植体时褐化严重。
外植体褐变原因
3）与培养基成分有关
高的无机盐浓度
不适宜的植物生长调节物质（如BA过高）
会受到影响。植物种类不同，对矿物质的
量、离子形态、离子间的比例要求不同。
如果培养基中离子种类及其比例不适宜该
种植物，玻璃化苗的比例就会增加。
玻璃化及预防
4.环境条件-温度
适宜的温度可以使试管苗生长良好，
当温度低时，容易形成玻璃化苗，温度越
低玻璃化苗的比例越高。温度高时玻璃化
苗减少，且发生的时间较晚。
2、培养物的增殖
• 1）腋芽增殖： • 离体条件下腋芽 在细胞分裂素作 用下形成丛生芽 • 激素调节：细胞 分裂素（BA）、 低浓度的生长素 • 优点：保持物种 的遗传稳定性。
风箱果的组织培养与离体快繁技术
风箱果的组织培养与离体快繁技术杨晓光;张桓【期刊名称】《特种经济动植物》【年(卷),期】2018(021)007【总页数】3页(P27-29)【作者】杨晓光;张桓【作者单位】吉林市林业科学研究院吉林吉林 132013;吉林市林业科学研究院吉林吉林 132013【正文语种】中文风箱果（Physocarpus amurensis）别名托盘幌，原产于黑龙江及俄罗斯远东地区，属蔷薇科灌木，其花色秀美，为优良的绿化树种。
为保护和开发利用风箱果种质资源，并保持优良个体遗传性状，笔者对其进行组织培养和离体快繁技术研究，为探索其发育规律性与开发利用起到促进作用。
1 材料与方法1.1 试验材料采集与预处理2015年12月于吉林市北华大学校内采集多年生健壮风箱果树的休眠枝条用于试验。
材料取回后，用水洗净，将枝条剪成70cm左右的长度，放入塑料桶内水培。
1.2 外植体的灭菌枝条萌发后，选取饱满的腋芽，放入小烧杯中，盖上纱布，用自来水反复冲洗至干净为止。
在超净工作台上先用0.1%的升汞溶液中浸泡10分钟，取出后用无菌水反复冲洗6～8次。
1.3 培养基与培养条件以最常用的MS或WPM为基本培养基，附加外源激素BA（0.1～0.5mg/L）与NAA（0.1～0.5mg/L）。
培养温度25±5℃、湿度60%～70%、光照强度2000～2500lx。
1.4 诱导培养将灭菌处理过的腋芽接种到设计好的诱导培养基上，及时观察。
1.5 增殖与继代培养将诱导产生的愈伤组织转接到增殖培养基上继代培养，此时应特别注意丛生芽产生时间的长短与数量。
1.6 生根培养当分化苗长到 4～5cm高时转入到不同配比的生长培养基内诱导生根，每瓶置8～10株，注意观察生根情况。
2 结果与分析2.1 初代培养诱导愈伤组织情况由于实验操作方法的不完善，起初的污染率达50%以上，改善后污染基本能控制在10%左右。
培养至第8天开始看到冬芽形态上有明显的变化，发生变形。
风信子的养殖条件繁殖方法栽培技术
风信子的养殖条件|繁殖方法|栽培技术风信子的花色彩丰富，经过长时间的杂交与繁殖栽培，风信子渐渐产生了一些特殊的重瓣品种。
信子葬心，其花语为：悲伤的爱情、永远的怀念等，是常见的水培花木品种，现将风信子的养殖方法介绍如下。
风信子的养殖条件1、种球。
风信子开花所需养分，主要靠鳞茎叶中储存的养分供给，只要选择表皮无损伤、肉质鳞片不过分皱缩、较坚硬而沉重、饱满的种球，才能开出丰硕美丽的花。
2、土壤。
要求土壤肥沃、有机质含量高、团粒结构好、pH值6～7的水平;可按腐叶土5∶园土3∶粗沙1.5∶骨粉0.5的比例配制培养土;在栽种前，可用福尔马林等化学药剂，在土温10～15℃的情况下，在土壤表面施药后立即覆盖薄膜，温暖天气3天后，撤去薄膜，晾置1天后进行栽种，保持土壤湿润。
3、光照。
风信子只需5000Lx以上，就可保持正常生理活动。
光照过弱，会导致植株瘦弱、茎过长、花苞小、花早谢、叶发黄等情况发生，可用白炽灯在1米左右处补光，但光照过强也会引起叶片和花瓣灼伤或花期缩短。
4、温度。
温度过高，甚至高于35℃时，会出现花芽分化受抑制，畸形生长，盲花率增高的现象;温度过低，又会使花芽受到冻害。
5、湿度。
土壤湿度应保持在60～70%之间，过高，根系呼吸受抑制易腐烂，过低，则地上部分萎蔫，甚至死亡;空气湿度应保持在80%左右，并可通过喷雾、地面洒水增加湿度，也可用通风换气等办法，降低湿度。
风信子的繁殖方法以分球繁殖为主，育种时用种子繁殖，也可用鳞茎繁殖。
母球栽植1年后分生1～2个子球，也有各品种可分生十个以上子球。
可用于分球繁殖，子球繁殖需3年开花。
种子繁殖，秋播，翌年2月才发芽，实生苗培养4～5年后开花。
1、分球繁殖在6月份把鳞茎挖回后，将大球和子球分开，“大球秋植后来年早春可开花，子球需培养3年才能开花。
由于风信子自然分球率低，一般母株栽植一年以后只能分生1～2个子球，为提高繁殖系数，可在夏季休眠期对大球采用阉割手术，刺激它长出子球。
植物离体快繁
植物离体快繁技术
第三节 离体无性繁殖的商业化 生产的范围和应用
园艺植物生物技术课件
五四 三二一 、、 、、、 用濒及雌用用 于危基雄于于 种植因异脱稀 质物工株毒缺 的的程植苗或 试拯植物的急 管救株、快需 保 的三速良 存 快倍繁种 及 速体殖植 交 繁、 物 换 殖单 的
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
• 7. 原球茎是兰花的种子发芽过程中特有的一种形 态学结构。 （判断正误）
• 8.玻璃化苗与正常苗相比生长速度下降，甚至最 后死亡（判断正误）
• 9.不定芽可 直接从植物器官、组织发生也可先形 成愈伤组织；然后形成不定芽。 （判断正误）
• 10.利用体细胞胚状体来进行无性系的大量繁殖其 特点是：A繁殖系数高、B成苗快、C结构完整、D 不存在嵌合现象（选择）
园艺植物生物技术课件
植物离体快繁技术
一般, 植物离体培养的温度低于15 ℃或高于35℃， 对分化和生长都不利。大多数植物最适的培养温度 在23-32 ℃之间，一般控制在(25±2) ℃条件下培养， 热带园艺植物培养温度稍高。
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植物离体快繁技术
离体培养中环境的湿度主要指培养容器内的湿度， 相对湿度常达100％，但液体培养与固体培养时湿 度可能有变化，固体培养时琼脂的用量与质量对培 养环境的湿度有影响。
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植物离体快繁技术
②外植体的生理状态对茎芽的反应能力有明 显的影响 选取相对较为幼嫩、生长能力较强的部位 的材料 生长季节 > 休眠季节 幼嫩部分 > 成熟组织
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植物离体快繁技术
根据外植体的特点选择适宜的消毒剂种类、浓 度和消毒时间进行外植体的表面消毒。参考第一章外植
风信子紫色情感组培快繁技术研究
风信子紫色情感组培快繁技术研究摘要以风信子“紫色情感”鳞片为试验材料，开展了外植体的选择，诱导培养基、继代培养基、大鳞茎培养基以及生根培养基的筛选试验。
结果表明：适宜风信子“紫色情感”组培快繁的外植体为内鳞片，诱导培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 5.0 mg/L，继代扩繁培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L，大鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+KH2PO4 0.4 mg/L，生根诱导培养基为MS+IBA 2 mg/L。
关键词风信子；外植体；培养基风信子（Hyacinthus orientalis）为百合科风信子属多年生具鳞茎草本植物，原产于欧洲的地中海东岸与亚洲的小亚细亚等地。
风信子植株低矮，色彩艳丽，花具芬香，适宜庭院布置、盆栽或水养，深受世界各国人民的喜爱，是国际花卉市场上重要的球根花卉之一，我国一直在引种栽培[1]。
风信子主要通过分球繁殖，但自然条件下繁殖率很低。
种子繁殖结籽率和发芽率也很低，播种后需生长4～5年才能开花，且变异性大。
人工切割鳞茎盘繁殖虽比自然繁殖效率高，但1年也仅能获得10～30个子球，仍不能满足生产需要。
国内外已经对风信子的组培快速繁殖技术进行了不少研究，并取得了一定的成效[2-14]。
该文以风信子“紫色情感”鳞片为材料探讨了外植体位置、激素种类及其浓度对不定芽诱导、继代培养、大鳞茎诱导和生根培养的影响，以期选出“紫色情感”组培各个阶段的最适培养基。
1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 外植体的选择。
以风信子品种“紫色情感”的鳞茎为材料，选取健壮无病的鳞片作为外植体，外、中、内鳞片各占鳞茎横切面的1/3。
1.1.2 培养基和培养条件。
诱导培养基：MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 4.0 mg/L （A1）、MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 5.0 mg/L（A2）、MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 6.0 mg/L（A3）、MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 4.0 mg/L（A4）、MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 5.0 mg/L（A5）、MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 6.0 mg/L（A6）。
西伯利亚杏离体快繁体系的建立
㊀山东农业科学㊀２０２３ꎬ５５(１０):３０~３６ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２３.１０.００５收稿日期:２０２２－１２－２８基金项目: 十三五 国家重点研发计划项目 特色经济林高效育种技术与品种创制 (ＳＱ２０１９ＹＦＤ１０００７１)ꎻ辽宁山杏种质资源保存与育种国家长期科研基地运行补助项目(２０２０１３２５１９)作者简介:王世鹏(１９９９ )ꎬ男ꎬ河北唐山人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为经济林良种选育及高效栽培ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｗｓｐｈｂｔｓ＠１６３.ｃｏｍ通信作者:刘权钢(１９８７ )ꎬ男ꎬ吉林辽源人ꎬ博士ꎬ讲师ꎬ主要从事经济林种质创制与培育ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｑｕａｎｇａｎｇｌｉｕ＠ｓｙａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ西伯利亚杏离体快繁体系的建立王世鹏ꎬ高子荑ꎬ孙永强ꎬ陈建华ꎬ董胜君ꎬ刘权钢(沈阳农业大学林学院/辽宁省森林培育重点实验室ꎬ辽宁沈阳㊀１１０８６６)㊀㊀摘要:本试验以西伯利亚杏种子和茎段为材料ꎬ进行不同外植体消毒方法㊁种子无菌苗培养最适条件及茎段腋芽诱导㊁增殖和生根培养的最佳激素配比筛选ꎮ结果表明ꎬ西伯利亚杏种子最适消毒方法为７５％乙醇３０ｓ＋２％ＮａＣｌＯ１０ｍｉｎꎬ茎段则以７５％酒精３０ｓ＋０.１％ＨｇＣｌ２１.５ｍｉｎ消毒效果最佳ꎮ种子用１.０ｇ/ＬＧＡ３溶液浸泡６ｈ后接种到ＭＳ基本培养基上的萌发率高(９１.６７％)ꎬ且无菌苗根长㊁根鲜重㊁根干重均最高ꎬ分别达到２９.９３ｍｍ㊁８３ｍｇ㊁９.６７ｍｇꎬ是西伯利亚杏种子无菌苗培养的最适培养条件ꎻ茎段腋芽诱导的最佳培养基为ＭＳ＋０.２ｍｇ/ＬＩＢＡꎬ诱导率为８５.８３％ꎻＭＳ添加１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ和０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ为腋芽增殖的最适培养基ꎬ增殖系数高ꎬ为３.６８ꎻ最佳生根培养基为１/２ＭＳ＋０.５ｍｇ/ＬＩＢＡꎬ生根率为８０.００％ꎮ本试验结果可为西伯利亚杏种子打破休眠㊁快速获得无菌苗提供方法依据ꎬ为其遗传转化研究奠定基础ꎬ同时也为推进西伯利亚杏的良种化进程提供技术支撑ꎮ关键词:西伯利亚杏ꎻ种子萌发ꎻ无菌苗培养ꎻ离体快繁中图分类号:Ｑ６６２.２０４＋.３㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２３)１０－００３０－０７ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｉｎＶｉｔｒｏＲａｐｉｄＰｒｏｐａｇａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍｏｆＰｒｕｎｕｓｓｉｂｉｒｉｃａＷａｎｇＳｈｉｐｅｎｇꎬＧａｏＺｉｙｉꎬＳｕｎＹｏｎｇｑｉａｎｇꎬＣｈｅｎＪｉａｎｈｕａꎬＤｏｎｇＳｈｅｎｇｊｕｎꎬＬｉｕＱｕａｎｇａｎｇ(ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙꎬＳｈｅｎｙａｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ/ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＳｉｌｖｉｃｕｌｔｕｒｅｏｆＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅꎬＳｈｅｎｙａｎｇ１１０８６６ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀ＴｈｅＰｒｕｎｕｓｓｉｂｉｒｉｃａｓｅｅｄｓａｎｄｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｔｅｓｔｍａｔｅｒｉａｌｓｔｏｓｅｌｅｃｔｏｐｔｉｍａｌｄｉｓ￣ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｐｌａｎｔｓꎬｓｅｅｄｓｔｅｒｉｌｅｓｅｅｄｌｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｎｄｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｒｅｇｕｌａｔｏｒｓｆｏｒａｘｉｌｌａｒｙｓｈｏｏｔｉｎｄｕｃｔｉｏｎꎬｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｒｏｏｔｉｎｇｏｆｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｂｅｓｔｄｉｓｉｎｆｅｃ￣ｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｅｅｄｓｗａｓ７５％ｅｔｈｙｌａｌｃｏｈｏｌｆｏｒ３０ｓ＋２％ＮａＣｌＯｆｏｒ１０ｍｉｎꎬａｎｄｔｈａｔｆｏｒｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓｗａｓ７５％ｅｔｈｙｌａｌｃｏｈｏｌｆｏｒ３０ｓ＋０.１％ＨｇＣｌ２ｆｏｒ１.５ｍｉｎ.Ａｆｔｅｒｓｏａｋｅｄｉｎ１.０ｇ/ＬＧＡ３ｓｏｌｕｔｉｏｎｆｏｒ６ｈａｎｄｔｈｅｎｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｏｎｔｏｔｈｅＭＳｂａｓｉｃｍｅｄｉｕｍꎬｔｈｅｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓｈｉｇｈｅｒａｓ９１.６７％ꎬａｎｄｔｈｅｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈꎬｒｏｏｔｆｒｅｓｈｗｅｉｇｈｔａｎｄｒｏｏｔｄｒｙｗｅｉｇｈｔｏｆｓｔｅｒｉｌｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｗｅｒｅｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔꎬｒｅａｃｈｉｎｇ２９.９３ｍｍꎬ８３ｍｇａｎｄ９.６７ｍｇꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬｓｏｉｔｗａｓｔｈｅｍｏｓｔｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｓｔｅｒｉｌｅｓｅｅｄｌｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅｏｆＰ.ｓｉｂｉｒｉｃａｓｅｅｄｓ.ＴｈｅｂｅｓｔｍｅｄｉｕｍｆｏｒｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔａｘｉｌｌａｒｙｂｕｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｗａｓＭＳ＋０.２ｍｇ/ＬＩＢＡꎬａｎｄｔｈｅｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅｗａｓ８５.８３％ꎻｔｈｅｂｅｓｔｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｍｅｄｉｕｍｗａｓＭＳ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡｗｉｔｈａｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆ３.６８ꎻｔｈｅｂｅｓｔｒｏｏｔｉｎｇｍｅｄｉｕｍｗａｓ１/２ＭＳ＋０.５ｍｇ/ＬＩＢＡｗｉｔｈｔｈｅｒｏｏｔｉｎｇｒａｔｅｏｆ８０.００％.ＴｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｅｓｆｏｒｂｒｅａｋｉｎｇｄｏｒｍａｎｃｙｏｆＰ.ｓｉｂｉｒｉｃａｓｅｅｄｓａｎｄｏｂｔａｉｎｉｎｇｓｔｅｒｉｌｅｓｅｅｄｌｉｎｇｓｒａｐｉｄｌｙꎬｌａｙｔｈｅｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｉｔｓｇｅｎｅｔｉｃｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｒｅｓｅａｒｃｈꎬａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｔｅｃｈｎｉｃａｌｓｕｐｐｏｒｔｆｏｒａｃｃｅｌｅｒａｔｉｎｇｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆＰ.ｓｉｂｉｒｉｃａｂｒｅｅｄｉｎｇ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＰｒｕｎｕｓｓｉｂｉｒｉｃａꎻＳｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎꎻＳｔｅｒｉｌｅｓｅｅｄｌｉｎｇｃｕｌｔｕｒｅꎻＩｎｖｉｔｒｏｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ㊀㊀西伯利亚杏(ＰｒｕｎｕｓｓｉｂｉｒｉｃａＬ.)又名山杏ꎬ为蔷薇科(Ｒｏｓａｃｅａｅ)李属(Ｐｒｕｎｕｓ)植物[１]ꎬ适生于我国温带㊁暖温带地区[２]ꎮ西伯利亚杏是集生态㊁经济㊁社会效益于一身的优良乡土树种[３]ꎬ生态适应性强ꎬ能在干旱㊁瘠薄㊁寒冷㊁风沙大等恶劣条件下正常生长ꎬ具有防风固沙㊁涵养水源等改善生态环境的功能[４]ꎻ此外ꎬ杏仁富含丰富的蛋白质㊁维生素㊁苦杏仁苷等多种营养及药用成分ꎬ具有较高经济价值和药用价值[５]ꎮ目前ꎬ我国西伯利亚杏种质资源开发和育种工作已取得很大进展ꎬ培育出了 山杏１号 等一批高产㊁稳产新品种[６]ꎮ但在实际生产中ꎬ西伯利亚杏一直处于自然落种的野生㊁半野生状态ꎬ苗木品质参差不齐ꎬ即使是人工经营的林地ꎬ也处于 有种就摘ꎬ有苗就栽 的粗放管理状态ꎬ经济效益并不可观ꎬ严重阻碍了西伯利亚杏产业的发展[３]ꎮ因此ꎬ如何快速推广具有高产稳产特性的优良品种成为西伯利亚杏产业发展的当务之急ꎮ组织培养技术作为一种成本低㊁效率高㊁生产周期短的无性繁殖技术ꎬ是种质资源收集与创新㊁良种工厂化育苗的有效手段[７]ꎬ已成为越桔属[８]㊁绣球属[９]㊁槭属[１０]等经济林植物扩繁的重要手段ꎬ被广泛应用于种质资源保护㊁遗传育种和无性系苗木的商业化生产中ꎮ组织培养技术与基因工程㊁原生质融合等育种方法紧密结合ꎬ在种质资源创新和新品种选育中发挥着越来越重要的作用[１１]ꎮ植物种子具有便于储藏㊁取材不受季节制约的优势[１２]ꎬ近年来很多学者以香椿[１３]㊁柳杉[１１]㊁珙桐[１４]等树木种子为初代培养材料获得无菌苗并建立了组培快繁体系ꎮ目前关于杏组织培养方面的研究已有报道ꎬ主要以下胚轴㊁子叶㊁茎尖㊁叶片等作为外植体材料ꎬ进行组培幼化效果[１５]㊁愈伤组织诱导[１６]㊁不定芽诱导[１７]和生根诱导[１８]等研究ꎮ总体而言ꎬ杏植株再生相对困难ꎬ受外植体类型㊁激素配比和培养条件等多种因素的制约[１２]ꎬ目前缺乏相对高效㊁完善的离体快繁体系ꎮ本研究以西伯利亚杏种子和茎段为外植体材料ꎬ利用ＧＡ３处理快速打破西伯利亚杏种子休眠机制ꎬ筛选适用于不同外植体的最佳消毒方法㊁种子无菌苗培养最适条件及茎段腋芽诱导㊁增殖㊁生根的最适培养基ꎬ以期建立西伯利亚杏种子和茎段离体快繁体系ꎬ为实现西伯利亚杏的规模化生产㊁加速良种化进程提供理论与技术参考ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀试验材料西伯利亚杏种子于２０２１年６月采自沈阳农业大学喀左县山杏国家林木种质资源保存库ꎮ收集成熟果实ꎬ去除果肉ꎬ杏核清洗后在室温下风干２~３ｄꎬ经选种㊁净种后储存在４ħ冰箱中备用ꎮ茎段采自沈阳农业大学科研基地１０ａ生西伯利亚杏母树ꎬ６月上旬采集生长良好的一年生枝条ꎬ用保鲜盒带回实验室备用ꎮ１.２㊀试验方法１.２.１㊀外植体消毒方法筛选㊀种子:选取饱满度一致的种子ꎬ去除核壳后用１.０ｇ/ＬＧＡ３溶液浸泡６ｈꎬ然后流水冲洗１ｈꎻ在超净工作台中将其放入７５％乙醇中消毒３０ｓꎬ用无菌水冲洗３~４次ꎬ再分别用２％ＮａＣｌＯ㊁５％ＮａＣｌＯ和０.１％ＨｇＣｌ２进行灭菌处理ꎬ灭菌时间设置为８㊁１０㊁１２ｍｉｎꎬ共９个处理ꎮ浸泡过程中不断用玻璃棒轻微搅拌ꎬ使种子充分消毒ꎮ消毒结束后用无菌水冲洗３~４次ꎬ去除种皮ꎬ接种到ＭＳ基本培养基中ꎮ每个处理接种３０粒种子ꎬ重复３次ꎬ１４ｄ后统计萌发率和污染率ꎮ茎段:将茎段放置到烧杯内ꎬ流水冲洗１ｈꎬ在超净工作台中将其放入７５％乙醇中用玻璃棒搅拌３０ｓꎬ然后用无菌水冲洗３次ꎬ再用０.１％ＨｇＣｌ２或２％ＮａＣｌＯ进行灭菌处理ꎬ灭菌时间设置为１.０㊁１.５㊁２.０ｍｉｎꎻ取出ꎬ用无菌水冲洗３次ꎬ放置在无菌滤纸上吸干水分ꎬ然后将茎段剪成１ｃｍ长带有一个芽点的小段ꎬ接种到ＭＳ培养基ꎬ每个处理接种３０个ꎬ重复３次ꎬ１４ｄ后统计存活率和污染率ꎮ１.２.２㊀种子无菌苗培养条件的优化㊀为了获得西伯利亚杏种子萌发和生长的最佳培养条件ꎬ分别设置不同基本培养基(ＭＳ㊁１/２ＭＳ㊁ＷＰＭ)和不同浓度(０.５㊁１.０㊁１.５ｇ/Ｌ)ＧＡ３溶液处理ꎮ每处理接种３０粒消毒种子ꎬ重复３次ꎮ置于(２４ʃ２)ħ组培室内进行遮光培养ꎮ１４ｄ后统计种子萌发率ꎬ测１３㊀第１０期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀王世鹏ꎬ等:西伯利亚杏离体快繁体系的建立量根长ꎬ称量根鲜重ꎬ然后将根放入玻璃培养皿中置于烘箱中ꎬ１０５ħ杀青２０ｍｉｎꎬ８０ħ烘干至恒重ꎬ称重ꎮ１.２.３㊀茎段腋芽诱导㊀将消毒后的西伯利亚杏茎段接种到添加不同浓度ＩＢＡ(０㊁０.２㊁０.４㊁０.６㊁０.８ｍｇ/Ｌ)的ＭＳ启动培养基上ꎬ研究不同浓度ＩＢＡ对其腋芽诱导的影响ꎮ每个处理接种４０个外植体ꎬ重复３次ꎮ接种后观察并记录腋芽生长状况ꎬ２１ｄ左右统计诱导率ꎮ１.２.４㊀腋芽增殖培养㊀将启动培养基中诱导获得的长势一致且健壮的无菌西伯利亚杏芽苗分别接种到５种增殖培养基上:ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁ＭＳ＋０.２ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁ＷＰＭ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁ＷＰＭ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡꎮ每个处理接种４０个芽苗ꎬ重复３次ꎮ观察并记录幼苗生长状况ꎬ３０ｄ左右统计增殖系数ꎮ１.２.５㊀生根培养㊀选择增殖培养获得的２ｃｍ左右丛生芽ꎬ剪取单芽接种至分别添加０.２㊁０.５㊁０.８ｍｇ/ＬＩＢＡ或ＮＡＡ的１/２ＭＳ培养基中进行生根培养ꎮ上述每处理接种１０个芽ꎬ重复３次ꎬ接种后观察并记录幼苗生根状况ꎬ３０ｄ左右统计生根率ꎮ１.３㊀数据处理与分析使用ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＥｘｃｅｌ２０２１软件进行数据的记录和整理ꎻ使用ＳＰＳＳ２６.０软件进行统计分析ꎮ计算公式如下:萌发率(％)＝(萌发种子数/接种种子数)ˑ１００ꎻ污染率(％)＝(污染外植体数/接种外植体数)ˑ１００ꎻ茎段腋芽诱导率(％)＝(萌发茎段数/接种茎段数)ˑ１００ꎻ增殖系数＝增殖芽数/接种芽数ꎻ生根率(％)＝(生根苗数/接种苗数)ˑ１００ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀不同外植体的最佳消毒处理筛选２.１.１㊀种子消毒㊀由表１可知ꎬ不同消毒处理对西伯利亚杏种子萌发率和污染率具有显著影响ꎮ５％ＮａＣｌＯ消毒不同时间的污染率均为零ꎬ但种子萌发受到显著抑制ꎬ萌发率较低ꎬ且消毒时间越长萌发率越低ꎮ２％ＮａＣｌＯ与５％ＮａＣｌＯ的消毒效果相比ꎬ种子的萌发率(ȡ８０％)显著升高ꎬ尤以消毒１０ｍｉｎ的萌发率最高ꎬ达到９１.６７％ꎬ其次为消毒８ｍｉｎꎬ两者间差异不显著ꎮ比较０.１％ＨｇＣｌ２和２％ＮａＣｌＯ的消毒效果发现ꎬ西伯利亚杏种子的萌发率均表现为随着灭菌时间的延长先升高后降低ꎬ灭菌１０ｍｉｎ的萌发率最高ꎬ分别为８０.００％和９１.６７％ꎮ综合分析ꎬ用２％ＮａＣｌＯ消毒１０ｍｉｎ对种子进行消毒的效果最佳ꎮ㊀㊀表１㊀不同消毒处理对西伯利亚杏种子的消毒效果比较㊀％编号处理萌发率污染率１０.１％ＨｇＣｌ２８ｍｉｎ７７.６７ʃ６.８１ＡＢａｂ２２.２２ʃ１.９３Ａａ２０.１％ＨｇＣｌ２１０ｍｉｎ８０.００ʃ１０.００ＡＢａｂ１３.３３ʃ３.３３Ｂｂ３０.１％ＨｇＣｌ２１２ｍｉｎ７６.６７ʃ５.７７ＡＢｂ０.００ʃ０.００Ｄｄ４２％ＮａＣｌＯ８ｍｉｎ８６.７７ʃ１２.５８Ａａｂ６.６７ʃ０.００Ｃｃ５２％ＮａＣｌＯ１０ｍｉｎ９１.６７ʃ２.８９Ａａ０.００ʃ０.００Ｄｄ６２％ＮａＣｌＯ１２ｍｉｎ８０.００ʃ５.００ＡＢａｂ１２.２２ʃ１.９３Ｂｂ７５％ＮａＣｌＯ８ｍｉｎ６３.６８ʃ１０.９７Ｂｃ０.００ʃ０.００Ｄｄ８５％ＮａＣｌＯ１０ｍｉｎ４１.６７ʃ２.８９Ｃｄ０.００ʃ０.００Ｄｄ９５％ＮａＣｌＯ１２ｍｉｎ２６.６７ʃ２.８９Ｃｅ０.００ʃ０.００Ｄｄ㊀㊀注:同列数据后不同大㊁小写字母分别表示处理间在０.０１㊁０.０５水平上差异显著ꎬ下同ꎮ２.１.２㊀茎段消毒㊀由表２可知ꎬ２％ＮａＣｌＯ处理的茎段污染率整体高于０.１％ＨｇＣｌ２处理ꎬ且存活率整体低于０.１％ＨｇＣｌ２处理ꎻ随着处理时间的延长ꎬ两种消毒剂处理的茎段污染率均降低ꎬ而存活率均先升高后降低ꎮ其中ꎬ０.１％ＨｇＣｌ２消毒１.５ｍｉｎ处理(处理２)的茎段存活率最高ꎬ为６１.６７％ꎬ污染率为１２.２２％ꎻ０.１％ＨｇＣｌ２消毒２ｍｉｎ处理的茎段污染率最低ꎬ为零ꎬ但存活率仅为２７.７８％ꎬ极显著低于处理２ꎮ综上ꎬ茎段最佳消毒处理为０.１％ＨｇＣｌ２消毒１.５ｍｉｎꎮ㊀㊀表２㊀不同消毒处理对西伯利亚杏茎段的消毒效果比较㊀％编号处理存活率污染率１０.１％ＨｇＣｌ２１.０ｍｉｎ５６.６７ʃ２.８９ＡＢａ１６.６７ʃ５.７７Ｃｃ２０.１％ＨｇＣｌ２１.５ｍｉｎ６１.６７ʃ２.８９Ａａ１２.２２ʃ１.９３ＣＤｃ３０.１％ＨｇＣｌ２２.０ｍｉｎ２７.７８ʃ４.１９ＢＣｂ０.００ʃ０.００Ｄｄ４２％ＮａＣｌＯ１.０ｍｉｎ２２.２２ʃ１.９３Ｃｂ７７.７８ʃ１.７３Ａａ５２％ＮａＣｌＯ１.５ｍｉｎ２４.４４ʃ０.９６Ｃｂ７２.２２ʃ９.２４ＡＢａ６２％ＮａＣｌＯ２.０ｍｉｎ１６.６７ʃ２８.８７Ｃｂ６１.１１ʃ７.２１Ｂｂ２.２㊀不同浓度ＧＡ３、培养基类型对西伯利亚杏种子无菌苗培养的影响２.２.１㊀不同浓度ＧＡ３对种子萌发和生长的影响㊀不同浓度ＧＡ３对西伯利亚杏种子的萌发和生长有显著影响(表３)ꎮ随着ＧＡ３浓度的升高ꎬ种子萌发率及根长㊁根鲜重㊁根干重均表现出先增长再降低的规律ꎮＧＡ３浓度为１.０ｇ/Ｌ时ꎬ种子萌发率最高ꎬ无菌苗长势最好ꎬ种子萌发率㊁根长㊁根鲜重㊁２３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀根干重分别为９１.６７％㊁２９.９３ｍｍ㊁８３.００ｍｇ㊁９.６７ｍｇꎬ均显著高于其他处理ꎮ综上ꎬ选用１.０ｇ/ＬＧＡ３浸泡种子ꎬ对西伯利亚杏种子萌发和无菌苗生长的效果最好ꎮ㊀㊀表３㊀不同浓度ＧＡ３对西伯利亚杏种子萌发和生长的影响处理编号ＧＡ３浓度/(ｇ/Ｌ)萌发率/％根长/ｍｍ根鲜重/ｍｇ根干重/ｍｇ１０.５４６.６７ʃ５.７７Ｂｂ２５.４２ʃ０.９４Ｂｂ７８.３３ʃ２.０８Ｂｂ８.３３ʃ０.５８Ａｂ２１.０９１.６７ʃ２.８９Ａａ２９.９３ʃ０.９１Ａａ８３.００ʃ１.３７Ａａ９.６７ʃ０.４７Ａａ３１.５３５.００ʃ２.５０Ｂｃ１４.９５ʃ０.８９Ｃｃ４３.００ʃ０.８１Ｃｃ６.３３ʃ０.５８Ｂｃ２.２.２㊀不同培养基类型对种子萌发与生长的影响㊀在明确最佳消毒方法和ＧＡ３浓度的基础上ꎬ进一步筛选最佳培养基类型ꎮ结果表明ꎬ种子接种在ＭＳ培养基上５ｄ后开始萌动ꎬ长出下胚轴ꎻ接种在１/２ＭＳ和ＷＰＭ培养基上的种子则均在８ｄ左右才有萌动反应ꎮ由表４可知ꎬ处理１(ＭＳ)的种子萌发率最高(９１.６７％)ꎬ极显著优于处理２(１/２ＭＳ)和处理３(ＷＰＭ)ꎬ处理２的种子萌发效果最差(３１.６７％)ꎮ从无菌苗根的生长状况看ꎬＭＳ培养基中无菌苗的根长㊁根鲜重和根干重极显著优于１/２ＭＳ和ＷＰＭꎬ分别达到２９.９３ｍｍ㊁８３.００ｍｇ㊁９.６７ｍｇꎮ综上ꎬＭＳ培养基是最适合西伯利亚杏种子萌发与生长的培养基ꎮ㊀㊀表４㊀不同培养基类型对种子萌发与生长的影响处理编号基本培养基萌发率/％根长/ｍｍ根鲜重/ｍｇ根干重/ｍｇ１ＭＳ９１.６７ʃ２.８９Ａａ２９.９３ʃ０.９１Ａａ８３.００ʃ１.３７Ａａ９.６７ʃ０.４７Ａａ２１/２ＭＳ３１.６７ʃ１.５３Ｃｃ１９.４０ʃ１.００Ｃｃ２４.００ʃ０.８８Ｃｃ２.６７ʃ０.１２Ｃｃ３ＷＰＭ４２.３３ʃ２.０８Ｂｂ２５.７１ʃ０.９９Ｂｂ４７.３３ʃ１.５２Ｂｂ４.３３ʃ０.５８Ｂｂ２.３㊀不同浓度ＩＢＡ对西伯利亚杏茎段腋芽诱导的影响不同浓度ＩＢＡ对西伯利亚杏茎段腋芽的诱导率达３５.００％~８５.８３％ꎬ随着ＩＢＡ浓度的升高呈现先增加后降低的趋势(表５)ꎮ其中ꎬ在０.２ｍｇ/ＬＩＢＡ处理下ꎬ腋芽诱导率最高(８５.８３％)且萌发早ꎬ接种６~９ｄ芽点即开始萌动ꎬ至２０ｄ左右形成２~４ｃｍ小绿梢ꎬ叶片自然舒展ꎬ生长状况良好(图１Ａ㊁Ｂ)ꎮＩＢＡ浓度过高(>０.２ｍｇ/Ｌ)会导致腋芽诱导率显著降低ꎬ腋芽长势较差ꎬ节间不易伸长ꎮ因此ꎬ西伯利亚杏茎段腋芽诱导的最佳ＩＢＡ浓度为０.２ｍｇ/Ｌꎮ㊀㊀表５㊀不同浓度ＩＢＡ对西伯利亚杏腋芽诱导的影响处理编号ＩＢＡ/(ｍｇ/Ｌ)诱导率/％１０５１.６７ʃ１.４４Ｃｃ２０.２８５.８３ʃ２.８９Ａａ３０.４７３.３３ʃ２.８９Ｂｂ４０.６５０.８３ʃ３.８２Ｃｃ５０.８３５.００ʃ２.５０Ｄｄ图１㊀西伯利亚杏腋芽诱导(Ａ和Ｂ)㊁增殖(Ｃ)和生根培养(Ｄ和Ｅ)３３㊀第１０期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀王世鹏ꎬ等:西伯利亚杏离体快繁体系的建立２.４㊀不同基础培养基类型及激素浓度对腋芽增殖的影响由表６可以看出ꎬ当６－ＢＡ浓度为０.５ｍｇ/Ｌ时ꎬ西伯利亚杏腋芽的增殖系数较低ꎬ丛生芽叶片弯曲ꎬ节间无法伸长(图１Ｃ㊁图２Ａ)ꎮ当６－ＢＡ浓度增至１.０ｍｇ/Ｌ时ꎬ腋芽的增殖系数显著增加ꎬ处理３(ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ)增殖系数较高ꎬ为３.６８ꎬ丛生芽的叶片舒展ꎬ节间能够伸长(图２Ｂ)ꎻ处理５(ＷＰＭ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ)增殖系数最高ꎬ但丛生芽基部产生大量愈伤组织ꎬ叶片无法展开(图２Ｃ)ꎮ综上ꎬＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ为腋芽增殖的最适培养基ꎮ㊀㊀表６㊀不同基础培养基类型及激素浓度对腋芽增殖的影响处理编号培养基增殖系数１ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ２.００ʃ０.１８Ｂｂ２ＭＳ＋０.２ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ１.７３ʃ０.１３Ｂｂ３ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ３.６８ʃ０.２４Ａａ４ＷＰＭ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ２.１１ʃ０.２５Ｂｂ５ＷＰＭ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ４.１１ʃ０.３６ＡａＡ㊁Ｂ㊁Ｃ培养基分别为ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁ＭＳ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁ＷＰＭ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡꎮ图２㊀不同增殖培养基中丛生芽的生长状态２.５㊀不同生长素种类及浓度对生根的影响１/２ＭＳ培养基添加不同浓度ＮＡＡ或ＩＢＡ均可以诱导生根ꎮ从接种后３ｄ起ꎬ添加ＮＡＡ处理的茎段基部处开始膨大形成愈伤组织ꎬ随着培养时间延长ꎬ愈伤组织不断增大增多ꎻ培养两周后ꎬ愈伤组织处开始有乳白色的根长出ꎬ但无侧根分化ꎮ添加ＩＢＡ处理的茎段底端形成的愈伤组织量少ꎬ接种后７ｄ底端就有乳白色的根长出ꎬ而且具有侧根ꎻ随着培养时间的延长ꎬ根系逐渐增长ꎬ无菌苗长势优于ＮＡＡ处理(图１Ｄ㊁Ｅ)ꎮ添加０.５ｍｇ/ＬＩＢＡ生根率最高ꎬ为８０.００％ꎬ极显著高于其他处理(表７)ꎮ因此ꎬ西伯利亚杏最佳生根培养基为１/２ＭＳ＋０.５ｍｇ/ＬＩＢＡꎮ㊀㊀表７㊀不同生长素种类及浓度对生根的影响处理编号ＩＢＡ/(ｍｇ/Ｌ)ＮＡＡ/(ｍｇ/Ｌ)生根率/％１０.２０１３.３ʃ１.２０Ｆｆ２０.５０８０.０ʃ１.６５Ａａ３０.８０４３.８ʃ１.１０Ｄｄ４００.２５０.０ʃ２.１８Ｃｃ５００.５６０.０ʃ２.６１Ｂｂ６００.８３１.２ʃ３.４０Ｅｅ３㊀讨论与结论外植体灭菌是体外再生的重要环节ꎬ直接影响再生体系的建立ꎮ由于植物组织中存在的污染微生物不同ꎬ找到适当的消毒方法至关重要[１９]ꎮ目前多采用ＮａＣｌＯ㊁ＨｇＣｌ２㊁酒精等一种或多种消毒剂联合对外植体进行消毒ꎮ宫惠[２０]和杨超臣[１３]等研究表明ꎬＨｇＣｌ２对种子具有毒害作用ꎬ用其进行种子消毒时会对细胞造成损伤ꎬ不利于种子萌发ꎮ本试验也发现０.１％ＨｇＣｌ２对西伯利亚杏种子的消毒效果差于２％ＮａＣｌＯꎻ以２％ＮａＣｌＯ消毒１０ｍｉｎ的效果最佳ꎬ种子萌发率达到９１.６７％ꎬ污染率为零ꎮ另外ꎬ外植体不同ꎬ其适宜的消毒剂种类和消毒方法也不尽相同ꎮ本研究中ꎬ０.１％ＨｇＣｌ２对西伯利亚杏茎段的消毒效果明显优于２％ＮａＣｌＯꎬ在粉花山杏茎段消毒研究中也得出相同的结论[２１]ꎮ原因可能是茎段外源菌较多ꎬＮａＣｌＯ难以清除ꎬ同时也说明茎段对短时ＨｇＣｌ２处理具有一定的耐受性[２２]ꎮ西伯利亚杏种子具有生理后熟性ꎬ具有较长的休眠期ꎮ目前解除果树种子休眠主要采用沙藏４３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀低温层积法和外源激素处理[２３]ꎬ其中施用外源激素所需时间较短且使用相对灵活ꎮ已有研究表明ꎬ外源ＧＡ３在打破种子生理休眠和促进萌发方面具有重要作用[２４－２５]ꎬ适宜浓度的ＧＡ３能够促进楸树[２６]和沙枣[２７]种子萌发ꎮ本试验利用ＧＡ３溶液浸泡打破西伯利亚杏种子休眠ꎬ在０.５~１.５ｇ/Ｌ范围内ꎬＧＡ３处理对西伯利亚杏种子萌发和生长表现出低浓度促进㊁高浓度抑制的规律ꎬ与在楸树[２６]和沙枣[２７]上的研究结果一致ꎻ以１.０ｇ/ＬＧＡ３处理的种子萌发效果最好ꎬ同时促进了无菌苗的发育和根的生长ꎮ培养基作为植物组织培养的营养基础ꎬ是决定组织培养成功与否的关键因素ꎬ需要根据不同的组培生产和试验目的㊁植物种类和培养部位等选择适宜的培养基ꎮＭＳ培养基无机盐含量较高ꎬ微量元素种类齐全㊁浓度较高ꎻＷＰＭ培养基不含锰和碘ꎬ钙㊁钾和硝态氮的含量高ꎬ适用于大多数木本植物的培养ꎮ本试验选用ＷＰＭ㊁１/２ＭＳ和ＭＳ培养基ꎬ不添加任何激素ꎬ以探究适合西伯利亚杏种子萌发和生长的基本培养基ꎬ结果发现ＭＳ较ＷＰＭ和１/２ＭＳ更利于西伯利亚杏种子萌发和生长ꎬ这与王立科等[２８]对野生黑果枸杞组培试验的结果相似ꎬ但与在铁皮石斛[２９]和香椿[１３]中的试验结果不同ꎮ这可能是由于不同植物品种具有不同的遗传㊁生物和生态特征ꎬ影响了对营养物质的需求[３０]ꎮ通过茎段腋芽诱导直接获得无菌芽苗的方式能够实现植物离体快繁且遗传稳定[３１]ꎮ单独使用生长素可以促进腋芽直接萌发成芽[３２]ꎬ在紫花槭[３３]和元宝枫[３４]的离体快繁中ꎬ适宜浓度的ＩＢＡ对茎段腋芽诱导具有显著效果ꎻ但高浓度的ＩＢＡ也会抑制腋芽的萌发[３３]ꎮ本研究发现ＩＢＡ对西伯利亚杏茎段腋芽诱导的影响显著ꎬ当ＩＢＡ浓度为０.２ｍｇ/Ｌ时诱导率最高ꎮ不同植物品种增殖培养中使用的培养基类型及激素种类和浓度存在差异ꎮ李属植物增殖培养中比较常用的激素组合为６－ＢＡ与ＮＡＡ或ＩＢＡ[３５－３６]ꎮ如仁用杏品种 围选１号 和 优一 腋芽增殖培养中以ＭＳ为基本培养基ꎬ添加１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ㊁０.１ｍｇ/ＬＮＡＡꎬ获得了较好的增殖效果ꎻ而李㊁杏砧木品种 Ｓｔ.ＪｕｌｉｅｎＡ 在ＷＰＭ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ＋０.１ｍｇ/ＬＩＢＡ中增殖系数高ꎬ且生长良好ꎮ本研究对不同浓度６－ＢＡ与０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ组合用于西伯利亚杏腋芽增殖时发现ꎬ在ＭＳ培养基中ꎬ１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ的增殖系数显著高于０.５ｍｇ/Ｌ６－ＢＡꎬ且丛生芽长势良好ꎬ节间能够伸长ꎬ叶片舒展ꎬ说明较高浓度的细胞分裂素与较低浓度的生长素组合可获得良好的增殖效果[１０]ꎻ在ＷＰＭ培养基中ꎬ虽腋芽增殖系数高于在ＭＳ培养基中ꎬ但丛生芽生长状况较差ꎬ基部产生大量愈伤组织ꎬ叶片无法展开ꎮ所以ＭＳ培养基更适合西伯利亚杏腋芽的增殖培养ꎮ有效的生根诱导是建立西伯利亚杏离体快繁的重要前提[３７]ꎮＩＢＡ和ＮＡＡ是植物生根培养中最常用的生长素ꎮ本研究发现ꎬＮＡＡ和ＩＢＡ均能诱导西伯利亚杏生根ꎮ但在添加ＮＡＡ的生根培养基中ꎬ与培养基接触的茎段基部先长出愈伤组织ꎬ根从愈伤组织处长出且生根缓慢ꎻ而在添加ＩＢＡ的生根培养基中ꎬ不易产生愈伤组织ꎬ根系从茎段基部直接长出ꎬ生根效率高ꎮ可见ꎬＩＢＡ对西伯利亚杏的生根效果优于ＮＡＡꎬ与前人研究结论[３６－３９]相似ꎮ综上ꎬ本试验通过对西伯利亚杏种子和茎段最佳消毒处理㊁种子无菌苗培养条件及茎段腋芽诱导㊁增殖和生根的组培体系研究ꎬ建立了西伯利亚杏种子和茎段无菌苗培养及快繁技术体系:西伯利亚杏种子采取７５％乙醇３０ｓ＋２％ＮａＣｌＯ１０ｍｉｎ的消毒方式进行灭菌ꎬ用１.０ｇ/ＬＧＡ３溶液浸泡６ｈ后接种到ＭＳ基本培养基上ꎬ种子萌发率高达９１.６７％ꎻ茎段用７５％乙醇３０ｓ＋０.１％ＨｇＣｌ２１.５ｍｉｎ消毒ꎬ然后接种到腋芽诱导培养基(ＭＳ＋０.２ｍｇ/ＬＩＢＡ)上ꎬ腋芽诱导率达８５.８３％ꎻ３０ｄ时转接入腋芽增殖培养基ＭＳ＋１.０ｍｇ/Ｌ６－ＢＡ＋０.１ｍｇ/ＬＮＡＡ上ꎬ增殖系数可达３.６８ꎻ３０ｄ时转接入生根培养基(１/２ＭＳ＋０.５ｍｇ/ＬＩＢＡ)上ꎬ生根率可达８０.００％ꎮ本研究为西伯利亚杏遗传转化研究奠定了基础ꎬ对实现西伯利亚杏的规模化生产㊁加速良种化进程工作具有重要意义ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀张加延ꎬ张钊.中国果树志:杏卷[Ｍ].北京:中国林业出版５３㊀第１０期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀王世鹏ꎬ等:西伯利亚杏离体快繁体系的建立社ꎬ２００３:３２－３３.[２]㊀王利兵.三种山杏资源调查与其分布规律[Ｊ].林业资源管理ꎬ２０１１(５):６５－７０.[３]㊀吴月亮ꎬ许淼ꎬ张静涵ꎬ等.山杏不同无性系的产量性状及种仁营养成分研究[Ｊ].西南林业大学学报(自然科学)ꎬ２０１８ꎬ３８(６):２７－３３.[４]㊀刘明国ꎬ王威ꎬ贺江ꎬ等.山杏混交林花果期小气候特点及其对坐果率的影响[Ｊ].东北林业大学学报ꎬ２０１０ꎬ３８(６):２８－３０.[５]㊀包文泉ꎬ乌云塔娜ꎬ王淋.内蒙古野生山杏优良单株核仁成分的遗传变异分析[Ｊ].中南林业科技大学学报ꎬ２０１６ꎬ３６(４):２５－２９.[６]㊀董胜君ꎬ尹健ꎬ刘明国ꎬ等.山杏新品种光合生理特性研究[Ｊ].经济林研究ꎬ２０１６ꎬ３４(２):６７－７２.[７]㊀王超.苹果品种及砧木脱毒和快繁体系建立[Ｄ].杨凌:西北农林科技大学ꎬ２０１４.[８]㊀李雪ꎬ李国泽ꎬ杨玲ꎬ等.越桔属植物组织培养研究进展[Ｊ].植物生理学报ꎬ２０２０ꎬ５６(５):９２１－９３０.[９]㊀秦紫艺ꎬ陈双双ꎬ王华娣ꎬ等.绣球属植物组织培养研究进展[Ｊ].江苏农业科学ꎬ２０２１ꎬ４９(１９):４５－５０.[１０]胡选萍ꎬ蒋景龙.槭属(ＡｃｅｒＬ.)植物组织培养技术的研究进展[Ｊ].分子植物育种ꎬ２０２１ꎬ１９(２２):７５６１－７５６９. 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Ｂｒａｖｏ [Ｊ].ＳａｕｄｉＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏ￣ｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０２１ꎬ２８(７):３７０１－３７０９.[２３]刘晓光ꎬ李贺丹.山杏胚培养影响因素研究[Ｊ].北方园艺ꎬ２０１６(３):１０６－１０８.[２４]ＭａｔｉｌｌａＡＪꎬＭａｔｉｌｌａ￣ＶáｚｑｕｅｚＭＡ.Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅｉｎｓｅｅｄｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ[Ｊ].ＰｌａｎｔＳｃｉｅｎｃｅꎬ２００８ꎬ１７５(１/２):８７－９７. [２５]ＬｉｎｋｉｅｓＡꎬＬｅｕｂｎｅｒ￣ＭｅｔｚｇｅｒＧ.Ｂｅｙｏｎｄｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｓａｎｄａｂ￣ｓｃｉｓｉｃａｃｉｄ:ｈｏｗｅｔｈｙｌｅｎｅａｎｄｊａｓｍｏｎａｔｅｓｃｏｎｔｒｏｌｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａ￣ｔｉｏｎ[Ｊ].ＰｌａｎｔＣｅｌｌＲｅｐｏｒｔｓꎬ２０１１ꎬ３１(２):２５３－２７０. [２６]崔令军ꎬ陈诗嘉ꎬ刘瑜霞ꎬ等.激素处理对楸树种子在不同温度下萌发特性的影响[Ｊ].东北林业大学学报ꎬ２０２０ꎬ４８(２):１２－１６.[２７]陈建新ꎬ李明ꎬ王娟ꎬ等.不同处理方式对沙枣种子萌发的影响研究[Ｊ].种子ꎬ２０２２ꎬ４１(６):７０－７５.[２８]王立科ꎬ毛善国ꎬ杨平ꎬ等.野生黑果枸杞组培快繁体系的建立[Ｊ].分子植物育种ꎬ２０２１ꎬ１９(１２):４０８３－４０８７. [２９]邱诗春ꎬ张世平ꎬ冯山柴ꎬ等.铁皮石斛种子快繁培养体系的优化[Ｊ].江苏农业科学ꎬ２０２１ꎬ４９(３):５８－６１. [３０]孙小兵ꎬ郭素娟.成龄板栗组培快繁体系的建立及影响因素的研究[Ｊ].中南林业科技大学学报ꎬ２０１５ꎬ３５(４):５１－５５.[３１]丁光雪ꎬ杨迪ꎬ辛纳慧ꎬ等. 翠香 猕猴桃离体再生研究[Ｊ].山东农业大学学报(自然科学版)ꎬ２０２１ꎬ５２(３):６. [３２]许丁帆ꎬ刘艳军ꎬ张彤ꎬ等.垂丝海棠组培快繁体系的建立[Ｊ].种子ꎬ２０２２ꎬ４１(２):１４４－１４８.[３３]张佳奇ꎬ高玉福ꎬ徐博ꎬ等.长白山特有彩叶树种紫花槭的组培快繁[Ｊ].植物生理学报ꎬ２０２１ꎬ５７(８):１７０１－１７０７. 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经典：第五章--植物离体快速繁殖
茎尖培养类型
根据培养目的和取材大小分为： 微茎尖培养 普通茎尖培养
22
普通茎尖指几毫米到几十毫米的芽尖及侧芽
23
微茎尖为0.3-0.5mm
24
普通茎尖培养方法
材
料
取
处
接
材
理
及
种
消
毒
培
驯 化
养
移 栽
25
取材
①直接取材： 在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株
上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1 －2cm）（取前可喷杀菌药），取顶芽 或侧芽。 ②从试管苗获取。
取1-2㎝顶梢
26
茎尖培养时需要注意的问题
一般都采用稍大一些的茎尖来培养。之所以用茎尖培养，是为了脱 除病毒病的危害，因为只有茎尖未受病毒侵染。
如果是经过病毒鉴定的母株，或该种植物有无病毒并不在考虑之中， 当然最好是采用腋芽，或带腋芽的茎切段。过小的茎尖只有很低的 存活率，并且最初生长太慢。
如果某些植物具有比较强的顶端优势，那么在培养中也同样有所表 现，往往顶芽抑制侧芽的萌发，这样总是获得分枝很少的独立的枝 条，限制了繁殖的速度，通常采取切除顶芽和适当增加细胞分裂素 两项措施加以克服。
47
移栽前的准备
A. 试管苗壮苗 加入生长控制剂，如多效唑，B9（丁酰肼），CCC（矮壮素），
其作用是使苗粗壮，叶绿素增加。
48
B.试管苗炼苗
移栽前可将培养物不打开瓶 口移到自然光照下锻炼2-3d，让 试管苗接受强光的照射，使其长 得壮实起来，然后再开口练苗13d，经受较低湿度的处理，以适 应将来自然湿度的条件。
胚状体产生的五种方式： ① 由外植体的表皮细胞直接产生胚状体； ② 由外植体组织内部的细胞产生胚状体； ③ 由愈伤组织的表面细胞产生胚状体； ④ 由胚性细胞复合体的表面细胞产生胚状体； ⑤ 由单个游离细胞直接产生胚状体。
蓝靛果忍冬E8离体快繁无菌体系建立分析
蓝靛果忍冬E8离体快繁无菌体系建立分析
离体培养是一种在无菌条件下进行的体外植物培养方法。
离体快速繁殖是指在短时间
内大量繁殖植物组织的技术。
本论文将建立一种离体快速繁殖无菌体系，以研究蓝靛果和
忍冬的细胞组织培养和快速繁殖。
实验设计：以蓝靛果和忍冬为研究对象，建立基于MS培养基的离体快速繁殖无菌体系。
首先将植物组织消毒处理，然后在无菌条件下进行培养，探究植物激素种类和浓度对植物
生长和繁殖的影响。
最后，通过分子生物学方法对组织培养过程中基因表达的变化进行分析。
结果分析：通过对蓝靛果和忍冬组织进行消毒和无菌处理，建立了离体快速繁殖无菌
体系。
在探究植物激素种类和浓度对生长和繁殖的影响方面，发现蓝靛果的最佳培养基是MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA，而忍冬的最佳培养基是MS + 0.2 mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA。
在该条件下，蓝靛果和忍冬的生长和繁殖均得到了显著提高。
通过分子生物学方法对组织培养过程中基因表达的变化进行分析，发现在离体培养过
程中，蓝靛果和忍冬的各种基因表达均发生了变化，包括生长发育相关基因、激素代谢相
关基因和抗性相关基因等。
这些结果表明，在离体培养中，植物组织呈现出明显的适应性
变化。
中国莲离体快繁体系建立及愈伤诱导的研究的开题报告
中国莲离体快繁体系建立及愈伤诱导的研究的开题报告一、选题背景中国莲作为一种优秀的观赏植物和药用植物，在经济和生态两个方面都有着重要的地位。
然而，由于中国莲的栽培过程较为繁琐，繁殖速度不够快，限制了其在现代农业中的应用。
近年来，离体快繁技术因其高效、快速的优势，成为了中国莲快速繁殖的重要手段之一。
目前，虽然中国莲离体快繁技术已经初步建立，但是存在一些问题尚待解决。
例如，愈伤组织诱导效率不够高、离体快繁体系稳定性不够理想等。
因此，开展中国莲离体快繁体系建立及愈伤诱导的研究，对于解决上述问题，在中国莲快速繁殖中具有重要的理论和实践意义。
二、研究目的本研究旨在建立中国莲离体快繁体系，并探索影响愈伤诱导效果的关键因素，提高离体快繁效率和体系的稳定性，为中国莲的快速繁殖提供可靠的技术支持和理论基础。
三、研究内容1.优选中国莲愈伤组织诱导的培养基成分与浓度。
2.研究中国莲离体快繁体系中的关键因素及其影响。
3.探索中国莲愈伤诱导中外源激素种类与浓度的影响。
4.利用核糖体RNA基因间隔序列（ITS）对离体快繁体系中不同种质的遗传多样性进行分析。
四、研究方法1.优选愈伤组织诱导的培养基：采取单因素实验，以不同的基本盐和生长调节剂为设计因素，探究其对愈伤组织的影响，选择效果最佳的培养基。
2.建立离体快繁体系：采取无菌技术，利用愈伤组织和茎尖作为原料，建立中国莲离体快繁体系。
3.探索愈伤诱导的关键因素及不同外源激素的影响：采用对照组设计，通过对不同因素的处理，记录愈伤诱导成功率，探索关键影响因素。
4.ITS序列测定：利用随机引物扩增ITS序列，从而分析不同种质中国莲的遗传多样性，评估离体快繁体系在品种保护中的应用效果。
五、研究意义本研究在建立中国莲离体快繁体系的基础上，探索了愈伤诱导的关键因素，为进一步提高离体快繁效率和体系的稳定性提供了技术支持。
同时，通过ITS序列测定，也为中国莲品种保护提供了新的方法和手段。
这些研究成果为中国莲的快速繁殖和保护提供了理论基础和实践指导。
利用组培法快速繁殖风信子
利用组培法快速繁殖风信子
刘志强;韩艺
【期刊名称】《河南科技：上半月》
【年(卷),期】1999(000)012
【总页数】1页(P10)
【作者】刘志强;韩艺
【作者单位】河南科学院生物研究所;郑州市人民公园
【正文语种】中文
【中图分类】S682.290.3
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红叶石楠离体快繁体系的建立
安徽科技学院学报,２０１９,３３(１):２３~２８㊀㊀㊀㊀㊀㊀J o u r n a l o fA n h u i S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y U n i v e r s i t y收稿日期:２０１８Ｇ０５Ｇ０３基金项目:安徽省科技厅攻关项目(１７０４a ０７０２００８１).作者简介:钱晶晶(１９８２－),女,吉林长春人,博士,讲师,主要从事园艺生物技术研究.∗通信作者:张远兵,教授,E Ｇm a i l :z h a n g yb ＠a h s t u ．e d u ．c n.红叶石楠离体快繁体系的建立钱晶晶１,㊀周玉丽１,㊀吴㊀燕１,㊀江文林２,㊀张香杨２,㊀张远兵１∗(１．安徽科技学院农学院,安徽凤阳㊀２３３１００;２．润林建设有限公司,安徽滁州㊀２３９０００)摘㊀要:目的:建立红叶石楠离体快速繁殖育苗体系.方法:选取红叶石楠茎尖作为外植体,通过不同消毒方式㊁添加不同激素㊁不同炼苗及移栽条件,讨论规模化红叶石楠离体快繁苗的最优生产体系.结果:(１)外植体的最佳消毒方案为:０．１％H g C l ２消毒８mi n ;(２)不定芽分化最佳培养基为:M S ＋１．５m g /L６－B A＋０．６m g /L K T ;(３)红叶石楠最优生根培养基为:M S＋１．５m g /L６－B A＋０．９m g /L N A A ＋０．２m g/LK T ;(４)光照１０００L X 强度下炼苗５d ㊁移栽７０％空气湿度３０d 后,统计移栽成活率达到９９％.结论:采用茎尖作为外植体可用于红叶石楠离体快繁.关键词:红叶石楠;离体快繁;茎尖中图分类号:S ７２２．３＋７文献标志码:A文章编号:１６７３Ｇ８７７２(２０１９)０１Ｇ００２３Ｇ０６开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):D O I :１０．１９６０８/j．c n k i ．１６７３－８７７２．２０１７．０５９５C o n s t r u c t i o no f i nV i t r o C u l t u r e a n d I n d u s t r i a l S e e d l i n g S ys t e mf o r P h o t i n i aF r a s e r i D r e s s Q I A NJ i n g j i n g １,㊀Z H O U Y u l i １,㊀WU Y a n １,㊀J I A N G W e n l i n ２,Z H A N G X i a n g y a n g ２,㊀Z H A N G Y u a n b i n g１∗(１．C o l l e g e o fA g r i c u l t u r e ,A n h u i S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y U n i v e r s i t y ,F e n g y a n g ２３３１００,C h i n a ;２．R u nL i nC o ．,L t d ．,C h u z h o u２３９０００,C h i n a)A b s t r a c t :O b je c t i v e :T oh a v ea p l a n t i nv i t r oc u l t u r ea n d i n d u s t r i a l s e e d l i n g s y s t e m of P h o t i n i a f r a s e r i D r e s s ．M e t h o d s :W i t h t h e s t e mt i n e a s t h e e x p l a n t ,t h e e f f e c t s o f d i f f e r e n t s t e r i l i z i n gt i m e ,h o r m o n e s o n t h e e x p l a n t s t i s s u ec u l t u r e p r o c e s sa n dc o n d i t i o n so fa c c l i m a t i z a t i o na n dt r a n s p l a n tw e r e i n u e s t i ga t e d ．R e s u l t s :(１)T h eb e s t d i s i n f ec t i o n s c h e m e f o r e x p l a n t sw a s ０．１％H g C l ２f o r ８m i n ;(２)t h e b e s tm ed i a m f o r a d ve n t i t i o u s b u dd if f e r e n t i a t i o nw a sM S ＋１．５mg /L６－B A＋０．６m g/L K T ;(３)T h eb e s tm e d i a m f o r r o o t i n g o f P h o t i n i a f r a s e r i w a sM S ＋１．５m g /L６－B A＋０．９m g /L N A A＋０．２m g /L K T ;(４)T h e s u r v i v a l r a t e o f t r a n s p l a t e d s e e d l i n g s r e a c h e d ９９％a f t e r ５d o f a c c l i m a t i z a t i o n a n d ７０％a i r h u m i d i t y af t e r t r a n s p l a n t i ng f o r３０d ．C o n c l u s i o n :Thi sc o n d i t i o n s w e r ef i tf o rs e e d l i n g s ys t e m o f P h o t i n i a f r a s e r i D r e s s ．４２㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽科技学院学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０１９年K e y w o r d s:P h o t i n i a f r a s e r i D r e s s;I n v i t r o c u l t u r e a n d i n d u s t r i a l s e e d l i n g s y s t e m;S h o o t t i p s红叶石楠(P h o t i n i a f r a s e r i D r e s s)是蔷薇科石楠属植物,分布广泛[１].因其新稍为亮红色,具有较高的观赏价值,所以经常作为园林植物应用于道路绿化㊁园区美化等方面[２].该树耐盐碱性及耐旱能力较强,适合在土壤贫瘠的地区种植,生长速度快及管理方法简单,在我省极具推广价值和前景[３－４].但目前红叶石楠的繁殖主要依靠扦插,这种方法受到土地㊁环境和气候等外界因素制约较多,导致其繁育较慢[５－６],尤其是占用土地资源较多,也影响农业生产用地.另外扦插繁殖所带来的品种退化,植物寿命短等问题也越来越凸显,因而发展一种现代繁育技术培育红叶石楠种苗,成为目前的当务之急.组织培养可以通过植物的一部分组织或细胞成功的 克隆 出一个完整的植物,也可以缩短植物的繁殖周期.组织培养环境是一个相对封闭㊁统一的人工环境[７－９].避免了外界的光㊁水㊁养分和菌落的差异,统一了植物的培养环境,避免外界干扰,有利于培养高质量的红叶石楠无性繁殖苗,提高红叶石楠种苗的质量.本试验通过组织培养的方法,获得可以移栽的红叶石楠离体快繁苗,从而建立红叶石楠的快速繁殖体系,以解决其扦插繁殖品种退化以及受季节㊁土地限制等问题,为红叶石楠的现代化大规模繁育优质种苗提供参考.１㊀材料方法１．１㊀供试材料外植体来源于安徽科技学院种植基地,采集健壮的无病虫害红叶石楠新生嫩茎,去除叶片作为外植体,用流水冲洗１０m i n,采用赤霉素浸泡３０m i n后备用.培养室培养条件:光照为２４００L X,温度为２５ʃ１ħ,光照时间为１２h/d,相对湿度为６０％.１．２㊀试验方法１．２．１㊀外植体消毒㊀取红叶石楠茎尖(红叶石楠尖端１c m嫩芽),清水冲洗１０m i n,再放入７０％乙醇浸泡３０s,放入超净工作台中,用无菌水冲洗３次,分别用消毒剂进行消毒处理(消毒剂及处理时间见表１),再用无菌水冲洗５次,最后将冲洗好的材料放于滤纸上备用.１．２．２㊀外植体接种㊀在解剖镜下,用解剖针将外植体茎尖苞片逐层拨开,直到只剩下叶原基生长点,直径约为０．３~０．５m m.用手术刀切下生长点接种于培养基中,于培养室中培养.３５d后统计污染状况和成活状况.污染率＝(污染植株/接种数)ˑ１００％,成活率＝(成活数/未污染数)ˑ１００％.比较不同消毒剂及消毒时处理对红叶石楠茎尖生长的影响,每个处理进行３组平行试验,每组１０颗植株进行试验,记录数据,并计算平均数.表１㊀不同消毒剂及消毒时间T a b l e１㊀T h e d i f f e r e n t k i n d s d i s i n f e c t a n t s a n d t h e d i s i n f e c t i o n t i m e消毒剂消毒时间/m i n５％N a C l O１０１５２０２５１５％H２O２１０１５２０２５０．１％H g C l２５８１１１５１．２．３㊀不定芽分化及生根培养㊀接种４５d当成活外植体长到０．５c m左右时取出,接种到培养基中,培养３５d,统计不定芽诱导率和生长状况,分化率＝(分化不定芽数/接种数)ˑ１００％,生根＝(生根组培苗数/接种数)ˑ１００％.试验采取三因素五水平正交设计,比较不同激素及浓度处理对红叶石楠组培苗分化及生根的影响,共２５组(表２).试验中,以不加激素处理为对照.每个处理进行３组平行试验,每组１０颗植株进行试验,记录数据计算平均数.表２㊀不同激素及浓度处理组合T a b l e ２㊀T h e d i f f e r e n t h o r m o n e c o m b i n a t i o n s组号激素浓度/(m g/L )６－B A N A A K T１０．００．００．０２０．００．３０．２３０．００．６０．４４０．０１．２０．６５０．０１．２０．８６０．５０．００．２７０．５０．３０．４８０．５０．６０．６９０．５０．９０．８１００．５１．２０．０１１１．００．３０．４１２１．００．３０．６１３１．００．６０．８１４１．００．９０．０１５１．０１．２０．２１６１．５０．００．６１７１．５０．３０．８１８１．５１．２０．０１９１．５０．９０．２２０１．５１．２０．４２１２．００．００．８２２２．００．３０．０２３２．００．６０．２２４２．００．９０．４２５２．０１．２０．６１．２．４㊀炼苗㊀将生根健壮的组培苗打开组培瓶盖,进行炼苗５d .炼苗室环境为温度２５ʃ１ħ,光照时间１２h /d ,相对湿度６０％~６５％.统计成活＝(成活数/总炼苗数)ˑ１００％.比较不同光照强度(１０００㊁１２００㊁１４００㊁１６００㊁１８００㊁２０００L X )对红叶石楠炼苗成活率影响.每个光照强度为一个处理,每个处理１００颗植株,记录数据.１．２．５㊀移栽㊀炼苗后,挑选健壮幼苗洗净根部培养基,移栽到基质育苗盘中,放置于温室中,光照为自然光照,每日早晚于叶片上喷水,保持叶面及土壤湿润,每隔两周喷施稀释１０倍M S 工作液.３０d 后比较不同湿度(５０％㊁６０％㊁７０％㊁８０％㊁９０％)对红叶石楠移栽苗成活率影响.每个梯度湿度为一个处理,每个处理５０颗植株,记录数据.１．３㊀数据统计本试验采用E x c e l ２０１０进行数据统计和分析.２㊀结果与分析２．１㊀不同消毒剂及消毒时间对红叶石楠茎尖接种的影响红叶石楠茎尖接种后,５~７d 内开始返青.接种１５d 能看到明显的芽点分化,４５d 时茎尖完全分化为红叶石楠组培苗,此时苗高达到０．５c m 以上即可以进行后续试验(图１).图１㊀红叶石楠生长离体快繁接种后生长状态F i g ．１㊀T h e g r o w t h s t a t u s o f P h o t i n i a f r a s e r i D r e s s a f t e r b e i n g cu l t u r e d ５２第３３卷第１期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀钱晶晶,等:红叶石楠离体快繁体系的建立从表３可以看出,５％N a C l O 消毒２０m i n 以上和H g C l ２的消毒８mi n 以上时污染率明显低于其他处理污染率,可降至１６．７％甚至更低.但是N a C l O 处理过后的红叶石楠茎尖明显出现褐化的现象.H g C l ２处理时间超过８m i n ,虽然没有出现褐化现象,但是茎尖活力明显降低,接种３５d 后茎尖返青率从８m i n 的７６．７％迅速降到消毒１４m i n 的４６．７％.因此,在外植体的最佳消毒方案为０．１％H g C l ２消毒８m i n .表３㊀不同消毒剂及消毒时间对红叶石楠茎尖接种的影响T a b l e ３㊀T h e e f f e c t o f d i f f e r e n t k i n d s d i s i n f e c t a n t s a n d t h e d i s i n f e c t i o n t i m e 消毒剂时间/m i n 污染率/％成活率/％１０５６．７ʃ０．０６a b c４０．０ʃ０．１０b c d５％N a C l O１５３３．３ʃ０．１５c d ４３．３ʃ０．０６b c d ２０１６．７ʃ０．０６d e ５６．７ʃ０．０６a b c ２５１３．３ʃ０．１２d e １６．７ʃ０．１５d １０７３．３ʃ０．０６a２３．３ʃ０．０６d １５％H ２O ２１５６６７ʃ０．１５a b３０．０ʃ０．１７c d ２０５０．０ʃ０．１０b c ３６．７ʃ０．１５b c d２５４６．７ʃ０．０６b c ２０．８ʃ０．２１b c d ５３６．７ʃ０．０６c d ４６．７ʃ０．０６c d ０．１％H g C l ２８１６．７ʃ０．０６d e７６．７ʃ０．０６a １１６．７ʃ０．０６e ６０．０ʃ０．１０a b １４６．７ʃ０．１２e ４６．７ʃ０．０６b c d２．２㊀不同激素及浓度组合对红叶石楠不定芽分化的影响从表４可以看出,第１１㊁１６㊁２３组诱导不定芽分化效果较好.激素组合中显示:６－B A 对红叶石楠组培苗不定芽起到较好诱导作用,当６－B A 浓度高于１．０m g /L 诱导出不定芽也较多,但是当６－B A 浓度过高达到２．０m g /L 时,诱导出的不定芽茎细,叶片小,继代后出现死亡现象(第２３组).在试验过程中还发现,K T 的存在对诱导出不定芽分化有较为明显的促进作用,K T 高于０．４m g /L 时诱导出的不定芽较为粗壮,更适合继代㊁不定芽分化及生根等.因而最适合红叶石楠不定芽分化培养基为:M S ＋１．５m g /L６－B A＋０．６m g/LK T ,使用该培养基对红叶石楠组培苗进行培养时,分化率能够达到１００％,每株组培苗可以诱导出分化不定芽７．１ʃ１．０８棵,分化出的不定芽平均高度为１．９９ʃ０．１５３c m ,较为健壮适合后续培养(图２A ).图２㊀不同激素处理下红叶石楠生长状况F i g．２㊀T h e g r o w t h c o n d i t i o n s o f d i f f e r e n t h o r m o n e s o f P h o t i n i a f r a s e r i D r e s s ６２㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽科技学院学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０１９年表４㊀不同激素及浓度组合对红叶石楠组培苗生长的影响T a b l e ４㊀T h e e f f e c t o f d i f f e r e n t h o r m o n e c o m b i n a t i o n s组号苗高/c m不定芽诱导率/％平均有效诱导不定芽数有效诱导生根总植株数生根率/％平均生根数平均根长/c m１０．２７ʃ０．１１０k－－７２３．３ʃ０．０６d０．３ʃ０．７６d１．７６ʃ０．３５８d２－－－－－－－３－－－－－－－４－－－－－－－５－－－－－－－６－－－－－－－７４．４７ʃ０．１４９b７０．０ʃ０．００b１．１ʃ０．８９d－－－－８０．５２ʃ０．１４８j－－－－－－９－－－－－－－１００．３３ʃ０．１２４j １０．０ʃ０．１０d０．２ʃ０．５３d１７５６．７ʃ０．０６c１．３ʃ１．３０d２．７１ʃ０．８４０c１１１．３０ʃ０．１６５k １００．０ʃ０．００a５．３ʃ０．９４c－－－－１２１．４４ʃ０．１９１g３３．３ʃ０．１２c d０．５ʃ０．７８d－－－－１３０．４９ʃ０．０８７j１６．７ʃ０．２１d０．２ʃ０．５７d－－－－１４－－－－－－－１５－－－－－－－１６１．９９ʃ０．１５３d１００．０ʃ０．００a７．１ʃ１．０８a b－－－－１７２．５２ʃ０．２２７c３３．３ʃ０．０６c d０．５ʃ０．７８d２１７０．０ʃ０．１０b c１．６ʃ１．５２d４．７０ʃ１．３２９b１８－－－－－－－１９５．３６ʃ０．１４８a －－３０１００．０ʃ０．００a １４．９ʃ２．４２a ８．４７ʃ０．９５９a ２０－－－－－－－２１－－－－－－－２２０．５２ʃ０．０９７j ７６．７ʃ０．１２a b６．８ʃ３．９７b－－－－２３１．８０ʃ０．３７５e１００．０ʃ０．００a７．９ʃ０．７８a－－－－２４１．６２ʃ０．１２７f６３．３ʃ０．１２b１．０ʃ１．０３d２６８６．７ʃ０．１６a b１２．２ʃ５．４１b５．１８ʃ０．８５０b２５１．０１ʃ０．１４８i５６．７ʃ０．２１b c ０．８ʃ０．８１d ２２７３．３ʃ０．１５b c５．２ʃ４．３２c４．６２ʃ０．６７０b ２．３㊀不同激素及浓度组合对红叶石楠组培苗生根的影响本试验红叶石楠最优生根培养基为第１９组:M S ＋１．５m g /L６－B A＋０．９m g /L N A A＋０．２m g /L K T .该条件下培养３５d 后诱导生根率可达到１００％,培养每棵组培苗平均生根数为１４．９ʃ２．４２,根红褐色㊁粗壮,平均根长８．４７ʃ０．９５９c m .苗高５．３６ʃ０．１４８c m ,茎粗,非常适合移栽(图２B ).值得注意的是,对照组(第１组)在各个激素为零的情况下,也出现了部分组培苗生根情况,说明该植株较易生根,添加N A A 浓度为０．３m g/L 时就出现红叶组培苗在分生不定芽的同时有７０．０％ʃ０．１０％的组培苗诱导生根的现象(第１７组).但是红叶石楠组培苗生根水平并不是随着N A A 的生根而持续升高,在N A A 浓度为１．２m g/L 时(第１０组和第２５组),其生根率和生根数都出现了下降趋势.因而,本试验中红叶石楠生根培养中N A A 最适添加浓度为０．９m g /L .２．４㊀炼苗移栽选取粗壮的红叶石楠组培苗进行炼苗及移栽试验.炼苗中,光照强度直接影响到组培苗的存活率,在光照强度低的情况下炼苗５d ,红叶石楠组培苗存活率最高,光照强度达到２０００L X 时,红叶石楠组培苗成活率明显降低仅为４５％,且移栽过程中未出现明显差异.表５㊀不同光照条件下炼苗５d 红叶石楠组培苗存活率T a b l e ５㊀T h e s u r v i v a l r a t e o f t i s s u e c u l t u r e s e e d l i n g s u n d e r d i f f e r e n t l i gh t c o n d i t i o n s f o r ５d 光照/L X 颗数存活数存活率/％１０００１００９８９８a １２００１００９５９５a b１４００１００８８８８b １６００１００８２８２b １８００１００７２７２c ２０００１００４５４５d ７２第３３卷第１期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀钱晶晶,等:红叶石楠离体快繁体系的建立８２㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽科技学院学报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀２０１９年㊀㊀空气湿度时影响红叶石楠组培苗移栽成活率的重要因素,表６显示,在移栽温室空气湿度为７０％,移栽成活率可达９９％,是最为理想的移栽条件.移栽３０d后的红叶石楠叶片生长加快㊁茎节短㊁腋芽开始萌发㊁根部逐渐变黑㊁生长明显㊁长势佳(图３C),符合工厂化育苗要求.表６㊀不同空气湿度条件下红叶石楠移栽成活率T a b l e６㊀T h e f r a c t i o n s u r v i v i n g o f d i f f e r e n t a i r h u m i d i t y i n t h e p r o c e s s o f t r a n s p l a n t i n g空气湿度/％颗数成活数成活率/％５０１００６５６５c６０１００７２９４a b７０１００９９９９a８０１００８６８６b９０１００６２６２c３㊀结论与讨论本试验从消毒剂种类㊁激素添加量等对红叶石楠组织培养过程进行筛选:(１)外植体的最佳消毒方案为:０．１％H g C l２消毒８m i n;(２)不定芽分化最佳培养基为:M S＋１．５m g/L６－B A＋０．６m g/L K T;(３)红叶石楠最优生根培养基为:M S＋１．５m g/L６－B A＋０．９m g/L N A A＋０．２m g/L K T.避免了近年来关于红叶石楠的组织培养研究中研究不系统等[１０－１３]问题.其次,关于红叶石楠组织培养的研究生中,并未明确炼苗和移栽的研究条件及成活率,使规模化育苗的成本难以统计,不具备生产价值[１４].本试验从炼苗和移栽主要条件进行筛选出移栽苗最大成活率,试验显示１０００L X强度下炼苗５d后.放置于温室中,光照为自然光照,每日早晚于叶片上喷水,保持叶面及土壤湿润,每隔两周喷施稀释１０倍M S工作液,在空气湿度７０％的条件下,移栽苗成活率达到９９％,适合红叶石楠大规模工业生产.多数研究文章选取腋芽或茎段作为外植体,使得外植体取样时间多在早春中进行,范围较为窄小[１５].另外,本试验采取红叶石楠茎尖作为材料进行外植体接种,由于红叶石楠自身生长特性,使接种时间扩大到４至１１月份,随时取样㊁随时接种,扩展了接种时间.最后,本试验通过茎尖剥离的方法对红叶石楠进行离体快繁处理,使红叶石楠苗更加健壮,解决了传统扦插繁殖红叶石楠品种退化㊁植株老株病株多等问题.参考文献:[１]㊀王真真,王卫娜,徐国超,等．红叶石楠研究现状及发展前景[J]．黑龙江农业科学,２０１１(６):１５０－１５３．[２]㊀芦建国,连洪燕．红叶石楠在园林中的应用[J]．现代农业科技,２００７(１):４０－４１．[３]㊀杜建会,魏兴琥．园林红叶植物新贵 红叶石楠[J]．安徽农业科学,２００９,３７(１１):５２６３－５２６５．[４]㊀张俊叶．红叶石楠的绿枝扦插繁殖技术[J]．陕西林业科技,２０１５(４):１０４－１０５．[５]㊀刘柏玲,李守洁,张凯,等．彩叶植物红叶石楠离体再生体系的研究[J]．林业科技,２０１６,９(５):１－４．[６]㊀王迅,谢云军,蔡金术,等．红叶石楠离体培养体系的构建[J]．湖南农业科学,２０１３(１):１０８－１１０．[７]㊀S i v a n e s a n I,P a r kS W．T h e r o l e o f S i l i c o n i n p l a n t t i s s u e c u l t u r e[J]．F r o n tP l a n t S c i,２０１４,５(５):５７１．[８]㊀周权男,张慧君,戴雪梅,等．植物组织培养在农业生产中的应用研究进展[J]．北方园艺,２０１４(１３):１９６－１９９．[９]㊀陈海伟．植物组织培养研究进展[J]．赤峰学院学报(自然科学版),２００７(６):１６－１７．[１０]㊀梁月香,梁慧敏,燕丽萍,等．红叶石楠茎段再生快繁体系的建立[J]．江苏农业科学,２０１１,３９(６):６８－７０．[１１]㊀王会．红叶石楠组培苗生根培养的研究[J]．北方园艺,２００７(１０):１７８－１８０．[１２]㊀张爱莲．红叶石楠试管苗培养与快繁技术研究[J]．山西农业科学,２０１０,３８(６):１２－１４．[１３]㊀黄新,傅玉兰,杨海燕,等．石楠的组织培养研究[J]．安徽农业科学,２００４,３２(６):１１６６－１１６８．[１４]㊀杨雪,吴国盛,张雯雯,等．红叶石楠组织培养技术比较研究[J]．安徽农业科学,２００９,３７(１６):７３３７－７３４０．[１５]㊀王晓冬,韩国辉,李绍臣,等．红叶石楠组织培养技术的研究[J]．吉林林业科技,２００５,３４(１):６－７,１０．(责任编辑:黄保宏)。
风信子如何繁殖,风信子的繁殖方法.doc
风信子如何繁殖，风信子的繁殖方法
风信子在10月份种下，基本上第二年的春天都会开花，香气扑鼻。
这个时候，很多人会想怎么让它第二年还能开花。
风信子是怎么繁殖的呢？下面为大家介绍风信子的繁殖方法。
风信子的繁殖方法
由于风信子是地中海植物，在国内一般不好繁殖，只作为一次性花卉，如果想要风信子繁殖，最好用土培。
想让风信子繁殖，需要一个温暖的冬季，这种温暖的环境持续的时间越长，越有利于风信子生长发育，保证叶片不至于提前衰老，而无法储蓄足够的营养。
那样的话，连自己都保不住了，更谈不上繁殖小球了。
还有就是，你可以选择将开过花的种球剪掉残花，继续培养，但叶片万万不可摘除，并需要充足的日照，即使不繁殖小球，第二年应该也能开花，只不过数量肯定是没第一年多的。
如果在家养殖风信子的话，你可以采用上面的方法，让风信子繁殖。
如果懒得这样做的话，开花后进行相应的处理，也可以让风信子在第二年开花的哦！
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风信子离体快速繁殖方法[发明专利]
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(10)申请公布号 CN 102511391 A(43)申请公布日 2012.06.27C N 102511391 A*CN102511391A*(21)申请号 201110404105.X(22)申请日 2011.12.07A01H 4/00(2006.01)(71)申请人上海交通大学地址200240 上海市闵行区上海市东川路800号(72)发明人马晓红 史益敏 董易 程鹏(74)专利代理机构上海汉声知识产权代理有限公司 31236代理人郭国中(54)发明名称风信子离体快速繁殖方法(57)摘要本发明涉及一种生物技术领域内的风信子离体快速繁殖方法，所述方法包括如下步骤：(a)取露地种植2～3个月的风信子种球，消毒，剥除外层鳞片；(b)剥取小花花瓣，平放在MS 固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；(c)纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；(d)不定芽伸长至2～4cm时，切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得风信子幼苗。
本发明的方法利用风信子的幼嫩小花瓣片为外植体，直接再生大量不定芽，继而得到再生苗，与使用鳞片作为外植体进行组织培养相比，本发明的方法再生效率增高，出芽率达到100％左右，平均每个外植体诱导再生的芽数量可达20个左右。
(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书3页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 3 页1/1页1.一种风信子离体快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：取风信子小花花瓣作为外植体，进行再生培养，获得风信子幼苗。
2.如权利要求1所述的风信子离体快速繁殖方法，其特征在在于，包括如下步骤：(a)取露地种植2～3个月的风信子种球，消毒，剥除外层鳞片；(b)剥取小花花瓣，平放在MS 固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；(c)纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；(d)不定芽伸长至2～4cm 时，切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得风信子幼苗。
松毛翠的离体快繁体系建立及种质试管保存
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黄金络石的离体快繁体系的建立
黄金络石的离体快繁体系的建立王莹;钱杨;赵湘;李伟【期刊名称】《浙江农业科学》【年(卷),期】2016(057)002【摘要】以黄金络石 ( Trachelospermum asiaticum cv. Ougonnishiki) 一年生茎段为外植体, 研究了不同生长调节剂对黄金络石初代培养、增殖培养以及生根阶段的影响. 结果表明, 腋芽诱导最佳培养基为MS+0. 6 mg·L-1 NAA +1. 0 mg·L-16-BA+0. 2 mg·L-1TDZ, 腋芽诱导率达100%; 愈伤组织诱导最佳培养基为MS+0. 4 mg·L-1 NAA+1. 0 mg·L-1 6-BA+1. 0 mg·L-1 TDZ, 愈伤组织诱导率达100%; 最佳增殖培养基为MS+0. 1 mg·L-1 NAA +2. 5 mg·L-1 6-BA, 增殖系数达6. 7; 最佳生根培养基为1/2 MS+0. 1 mg · L-1 IBA +3%AC, 生根率达95%.【总页数】3页(P227-229)【作者】王莹;钱杨;赵湘;李伟【作者单位】江苏美尚生态景观股份有限公司, 江苏无锡 214125;江苏美尚生态景观股份有限公司, 江苏无锡 214125;江苏美尚生态景观股份有限公司, 江苏无锡214125;江苏美尚生态景观股份有限公司, 江苏无锡 214125【正文语种】中文【中图分类】S687.3【相关文献】1.黄金锦络石组织培养快繁技术体系的建立 [J], 李峰卿;曾满生;姚甲宝;曾平生;周志兰;罗艳兰2.花叶络石离体快繁技术研究 [J], 王福银;史清云;朱艳3.黄金络石容器育苗技术要点 [J], 邱春英4.黄金络石盆栽快速成型技术试验 [J], 邱春英;余水军;蓝海燕;卢钇沁;郑晓东5.金叶络石组培快繁技术体系的建立 [J], 李永欣;王晓明;曾慧杰;蔡能;宋庆安因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葡萄风信子基因转化受体系统的建立
葡萄风信子基因转化受体系统的建立许胜;王飞;刘雅莉【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(035)010【摘要】以葡萄风信子(Muscari botryoides Mill)品种"紫葡萄"(Cantat)的鳞茎和叶片为外植体,通过植物组织培养再生系统的建立和抗生素敏感性试验,建立了稳定的葡萄风信子基因转化受体系统.结果表明,葡萄风信子的鳞茎和叶片均可被诱导形成大量的愈伤组织;叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D +0.1 mg/L 6-BA,其诱导频率可达100%;鳞茎诱导愈伤组织的最适培养基为MS+ 3.0 mg/L 2,4-D +0.3 mg/L 6-BA,其诱导频率达91.2%;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA, 生根最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1% AC;筛选卡那霉素的临界质量浓度为60 mg/L,羧苄青霉素的适宜质量浓度为300 mg/L.【总页数】6页(P71-76)【作者】许胜;王飞;刘雅莉【作者单位】西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S682.2+9【相关文献】1.普通小麦基因枪转化高效受体系统的建立 [J], 权军利;何玉科;陈耀锋;李春莲;郭东伟;韩德俊;余玲2.生菜基因转化组织培养受体系统的建立 [J], 罗雯;孙东妮;王甜;王钢3.马铃薯基因转化受体系统的初步研究及建立 [J], 张西英;刘江娜;白云凤;闫建俊;张爱萍4.外源基因转化受体系统高效再生体系的建立 [J], 隋昌海;张美萍;王义5.芝麻子叶基因转化受体系统的建立 [J], 魏利斌;马琴;琚铭;张体德;王慧丽;苗红梅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
风信子的组织培养和植株再生
风信子的组织培养和植株再生
刘勇刚;徐子勤
【期刊名称】《西北大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2001(031)003
【摘要】以风信子鳞茎为外植体经灭菌后切成小块接入到风信子愈伤组织诱导培养基MS1上得到了愈伤组织，这些愈伤组织在含6BA，KT的MS分化培养基（MS2）上分化得到了芽，并在同样的培养基上有少量的根分化出来。
当芽移至生根培养基上时可生成大量健壮的根，从而得到完整植株。
建立了风信子离体诱导再生植株的体系。
使用的方法不需要进行低温处理，摆脱了因设备不足在组织培养生产中的限制。
同时还对风信子的灭菌方法进行了研究，发现对风信子地下器官的表面灭菌应以75%乙醇浸泡5 min后再以15%新洁尔灭浸泡10 min，剥叶后用0.1% 升汞浸泡15 min，无菌水清洗5次效果最好。
【总页数】4页(P255-258)
【作者】刘勇刚;徐子勤
【作者单位】西北大学;西北大学
【正文语种】中文
【中图分类】Q943-1
【相关文献】
1.风信子2个品种鳞片植株再生能力的比较研究 [J], 李艳;王青;方宏筠
2.风信子外植体植株再生系统的研究 [J], 李艳;李英慧
3.红豆草组织培养及植株再生体系的优化 [J], 康红霞;朱永红;赵萌;贾姝;伍国强
4.影响棉花组织培养及植株再生的主要因素 [J], 高颖慧;包颖
5.大豆体细胞组织培养再生植株的研究——Ⅰ 培养基、基因型、植物激素对诱导大豆再生植株的影响 [J], 隋德志;王连铮;尹光初;雷勃君
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风信 子离体 快繁体 系的建 立
孙 晓梅 ， 李 妍 ， 宏 光 ， 文 山 ， 亚斌 杨 崔 王
（ 阳 农业 大 学 林 学 院 ， 阳 １ ０ ６ ） 沈 沈 １ ８６
摘 要 ： 究 以风 信 子 Ｇｐｙｑ ｅｎ的 鳞 片 及 幼 叶 为 外 植 体 直 接 诱 导 不 定 芽 生 成 ． 果 表 明 ： ｉｓ ｕｅ 单 鳞 片 、 鳞 片 的 初 代最 佳 研 ｉｓ ｕ ｅ 结 Ｇｐ ｙ ｅ ｎ ｑ 双 诱 导 培 养 基 为 ： ＋ 一 Ａ ．ｍ ・ 一 Ｎ Ａ ． ・ ～ 且 双鳞 片 诱 导 效 果 好 于单 鳞 片 ， 导 率 达 １０ ， 殖 系 数 达 １ ； 叶 外 植 体 ＭＳ ６ Ｂ ５０ ｇ Ｌ ＋ Ａ ０１ Ｌ ， ｍｇ 诱 ０％ 增 ０幼 初 代 最 佳 诱 导 培 养 基 为 ： ＋ 一 Ａ ． ・ ～ Ｎ Ａ ．ｍ ・～， 叶 作 为 外 植 体 比鳞 片 诱 导 效 果 好 ， 导 率 达 １０ ， 殖 系 数 达 ＭＳ ６ Ｂ ３０ ｍｇ Ｌ ＋ Ａ ０２ ｇ Ｌ 幼 诱 ０％ 增
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