流动相使用

注意缓冲液的pH值与使用的色谱柱匹配 缓冲液必须过滤膜。 使用缓冲液期间，用注射器推纯水，清 洗柱塞杆，延长泵密封垫寿命。 分析完后用纯水清洗系统。

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6. 自动进样器清洗液
如选择不当重现性不好 常用1：1的甲醇水或不含盐的流动相 清洗液必须过滤，经常更换。 清洗液需对样品有一定的溶解度。 不可用乙腈作为自动进样器的清洗液。
甲醇
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乙睛
正己烷
General Maintenance and Troubleshooting
2. 溶 剂 等 级
缓冲液的使用

使用前必须过滤 使用后一定要进行清洗 ，以免造成腐蚀、磨损、阻塞: 用纯水冲洗30-60min（1ml/min），再用甲醇冲洗30min 易受到细菌和霉菌的影响
液相色谱保养与维修培训班
LC-10A系列
一. 液相色谱日常使用注意事项 二. 输液泵、检测器、手动进样 器故障与维修
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一. 液相色谱日常使用 注意事项
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6. 开机后检查
送液泵：进液管是否有气泡，压力显示？ 是否波动太大（0.3-0.5 MPa之内)，有无 漏液。 柱温箱：温度设定，Oven 键开启，是否 升温 检测器：开机后自检正常，出现初始画面 ，确认分析波长。 基线检查：噪声、波动和漂移

微量分析、梯度洗脱
都经过蒸馏和0.45u的过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒
优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂
HPLC级经过0.2u的过滤,且除去有紫外吸收的杂质
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2. 溶 剂 等 级
分析纯级和 HPLC 级溶剂的吸光度比较图

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7. 关机时注意事项
保存数据，退出工作站 清洗柱子及系统 保留在柱子和系统中的液体（甲醇或异 丙醇），水能够发霉及长菌，乙腈长期 保存对吸液管和PEEK头有危害。

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不能直接用有机溶剂冲洗
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3. 溶 剂 前 处 理
脱气：除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡 气泡对测定的影响： 1）泵中气泡使液流波动，改变保留时间和峰面积 2）柱中气泡使流动相绕流，峰变形 3）检测器中的气泡产生基线波动 无在线脱气应注意： 1）每天脱气 2）如使用氦脱气，对混合溶剂脱气时间不能过长

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2. 溶 剂 等 级

水的等级
纯化水 蒸馏水 去离子水

吸 光 率
去离子水
纯化水
波长 (nm)
因为不纯物的存在，去离子的吸光率较高
纯化水中去除了无机和有机的污染物
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1. 流动相的选择和注意事项
流动相的选择
采用 “HPLC” 级溶剂 避免使用会引起柱效损失或保留特性变 化的溶剂 对试样有适宜的溶解度 溶剂粘度要小

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1. 流动相的选择和注意事项
水的纯度：去离子水，最好用二次重蒸水。 乙腈的特性：低波长吸收小，极性较甲醇大 有一定的粘黏度（易使单向阀粘黏），对 PEEK及Tefl管有侵蚀性。 使用二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷 、氯仿溶剂时，对PEEK管和头有侵蚀作用， 因此请勿将两者在一起使用。
4. 更换流动相时的注意事项


更换互溶流动相时注意清洗吸滤头
更换不互溶流动相时必须用中间过渡液 清洗系统，例如异丙醇 更换缓冲液时，应用纯水过渡。 更换流动相后应使用PURGE键快速排液。 排去残液或气泡。

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5. 使用缓冲液注意事项

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3. 溶 剂 前 处 理

过滤：用0.45um或更小孔径滤膜
目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞 色谱柱、在线过滤板及进样器.
*HPLC级的试剂有些也应过膜。水也应过膜。 尤其是缓冲液必须过膜。 *注意滤膜的质量。
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2. 溶 剂 等 级
鬼峰的出现
水 / MeOH梯度
Baidu Nhomakorabea
ODS 柱 1 ml/min, 0-100% MeOH over 10 mins and hold for 15 mins.
鬼峰
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2. 溶 剂 等 级

溶剂的等级
HPLC级 优级纯 分析纯 工业纯