浅析多肽类药物常用的分析方法

１多肽类药物及 其主要优势 多肽是 由多 于 ２ ０个 的氨基酸残基 组成 ， 而多肽又 组成氨 基酸 。人体的生长和发育都 离不 开多肽 ， 多肽是调节系统功能 和细胞生长的基础。多肽类 药物作 为药物 开发 的主要方 向 ， 它 包括多种类型 ， 常见 的多肽类药物有如下几种 。 多肽类疫苗 ： 多肽类疫苗 的研制 为人类 攻克肝炎 、 艾 滋病 等疾病带来了希望。国内外对多肽疫苗进行 了大量的研究 。 早 在１ ９ ９ ９年 ， 美 国就公 布了两种 Ｈ Ｉ Ｖ — Ｉ 病 毒多肽疫苗 的人体 试 验结果 ， 该 项研究发现 ， 多肽类疫苗确实能够使 得人体产生 特 异性抗体 。国内外学 者还针对丙肝病毒进行 了多肽疫苗 的研 究， 并取得 了较大 的进展 。 抗肿瘤多肽类药物 ： 肿瘤危害人类 的生存 ， 其 产生是多 方 面因素共同作用的结果 ， 但归根到底是癌基因表达的问题。美 国学者发现 ， 一个小肽能够显著抑制癌 细胞 生长 ， 诱导并加 速
表 ２ 比较不同年龄段使用阿奇霉素出现不 良反应的情况（ 例）
浅析 多肽 类药物 常用 的分 析方法
谭松 文 （ 浙江省杭州华津药业股份有限公司 杭州 ３ １ １ ２ ４ １ ）
摘要 ： 多肽类药物作为药物研 究的新课题越 来越 多地受到 了人们 的关注 ， 其分析手段 的研 究也成 为 了最活跃、 发展 最迅速 的领 域之一 。 目前 ， 建 立灵敏 、 准确、 操作 简便的 多肽类 药物分析方法 面临着诸 多挑战和机 遇。 本文 中， 作者首先介绍 了几种常见的多 肽 类药物及其主要优 势， 进而介 绍 了几种备 受关注的 多肽 类药物的分析 方法。 关键词 ： 多肽 类 药 物 分析 方 法 中图分类号 ： Ｒ ９ ６ ９ 文献标识码 ： Ｂ 文章编号 ： １ ６ ７ ２ — ８ ３ ５ １ （ ２ ０ １ ３） ０ ７ — ０ １ ０ １ — ０ ２
北方药学 ２ ０ １ ３年第 １ ０卷第 ７期 特别注意 ， 尽 量避免发生不 良反应 。
１ ０ １
体后 ， 阿奇霉素 的血 可以持续 达到 ３ ５ ４ ８小 时， 而其组织可 以 持续 更长 时间 ， 达到 ６ ８ ～ ７ ６小时 ， 对 杀菌有 明显 杀菌后效 应 ， 为 临床 医生以及患者提供 了治疗方便 ，在使用 时不需要通过 皮试 ， 杀菌时间持续久 ， 可以延长给药 时间。 使患者不需要频 繁用药 ，并 且 由于阿奇霉 素杀菌效果 明 显， 在治疗 时可以缩短治疗时间 ， 使患者早 日康复 。所 以， 临床 医生使用 阿奇霉 素的频 率不断增加 ，随着越来越 多的患者使 用阿奇霉素 ， 出现的不 良反应几率也不 断增 加 ， 使 患者在使用 阿奇霉素时产生了恐惧 心理 。随着生活水平 的提高 ， 患者在对 ２ ＿ ３ 使用 阿奇霉素 出现不 良反应与原患病之 间的关 系 ： ４ ５例出 使用药物 出现 的不 良反应不 断重视 ，对于使用较频 繁的阿奇 现不良反应的患者 中有 ３ ｌ 例患者患呼吸系统感染疾病 ， ６例患 霉素 出现 的不 良反应受 到了临床 医师的重视 ， 目前 对于阿奇 者患牙龈炎 ， ５例患者患 胃肠炎 ， ３ 例患者患糖尿病肾病 。在 ４ ５ 霉素 出现 的不 良反应 医学 界学者未 能找到有 效的解决 方法 。 例 出现不 良反应患者中以呼吸系统感染疾病较多 。临床医生在 阿奇霉素 的不 良反 应涉及较广 ， 心、 肝、 肾、 造 血系统 、 神 经系 使用阿奇霉素时 ， 针对患者患病 情况以及身体情况使用药物。 统、 肌 肉骨骼 、 心脏等均 可受 到影 响 ， 可严 重影响患者身 体健 ２ ． ４不 良反应症状 分析 ： ①使用 阿奇 霉素出现不 良反 应 中以胃 康 。本文针对使用阿奇霉素 出现 的不 良反 应寻找减少 出现的 肠 道反应最 常见 ， 主要 临床症状 为腹痛 、 腹泻 、 腹胀、 恶心 、 呕 方法 。通 过对 ７ ５ 例 患者采 用减速滴注阿奇霉素 ， 与标准滴入 吐等 ， １ ５ ０例患 者中有 ２ ０例患者均出现 胃肠道反应 ， 患者在第 速度滴入 的患者相 比， 对 胃肠道及局部刺激减少 。所 以 ， 临床 １日使 用阿奇霉素就 开始 出现腹痛 、 腹泻 等症状 ； 在第 ２日使 医生在使 用阿奇霉素时需要根据 临床经验 ，根 据患者所患疾 用时， 腹痛、 腹泻等 症状 明显 加重 ； ②过 敏反应也 是使用 阿奇 病 、 年龄使用药物 ， 在使用药物时需要针对不 同患者情况进行 霉素 出现不 良反应 中较常见 的 ， ７ ５例患 者 中有 ８例患者 出现 观察 ， 以避免出现严重后果 。 过敏反 应 ， 临床症 状为红斑 、 发热、 皮炎 、 血管 神经性水 肿 、 过 参 考 文 献 敏性休克 、 支气管痉挛 、 哮喘等症状 。临床以过敏性休克 最严 『 １ １ 魏 锦绣 ， 张虹云 ， 崔向丽， 等Ｉ ３ ２ 例静 脉滴注阿奇霉素致 不 良 重； ③ 神经系统损 害在使用 阿奇霉素 中会 出现 的不 良反应 。 临 反应分析Ⅲ． 中国药物警戒， ２ ０ １ ０ （ １ ） ： ５ ２ — ５ ５ ． 床主要症状 为头痛 、 嗜睡、 惊厥 、 头晕 、 多动 、 易激动及 昏厥 、 焦 【 ２ 】 张俊 ， 王春婷 ， 纪立伟 ， 等． 阿奇霉 素不良反 应／ 不 良事件分析 虑等症状 。４ ５例患者在停药后不 良症状逐渐消失。 报告『 Ｊ ］ ． 临床 药物治疗杂志， ２ ０ １ １ （ ３ ） ： ４ ２ — ４ ６ ． ３结 论 ［ ３ ］ 周延 平 ． 阿奇霉素 不 良反应 的临床 观察 『 Ｊ １ ． 中国 当代 医药 ， 阿奇霉素在 临床使用 范围较广 ，主要是 通过与细菌 细胞 ２ ０ １ ０ （ ５ ） ： ４ ５ — ４ ８ ． 中的 ５ ０ ｓ 核糖体进行 结合 ，干扰 细菌的蛋 白质合成 以达 到杀 『 ４ １ 华冬梅 ． 阿奇霉素的 临床 作用及 不 良反应 分析【 Ｊ ］ ． 中国 实用 菌作用 。尤其对 于革 兰阳性以及革兰 阴性需氧菌 、 厌 氧菌 、 军 医 药 ， ２ ０ １ １ （ ４ ） ： １ ６ ８ — １ ６ ９ ． 团菌 、 衣原体等 以及其他微生物有 明显 的杀菌作用刚 。阿奇霉 【 ５ 】 王迎春 ， 周 学琴 ， 刘玉琴． 阿奇霉 素药物不 良反 应／ 事件报 告 素的上市弥补 了许多抗生 素的欠缺不足 ， 目前 医学界未能研 相关 因素的分析『 Ｊ ］ ． 中国抗生素杂志 ， ２ ０ １ ２ （ １ ） ： ７ ３ — ７ ５ ． 究出可以代 替阿奇霉 素的抗生 素，使 阿奇霉 素从 上市至今 ｌ Ｏ ［ ６ ］ 张春 红 ， 徐 凤玲． 注射用阿奇霉素对 儿童的安全性和 不 良反 几 年时间 内， 在临床使用仍然较频繁目 。阿奇霉 素在临床 主要 应回顾性分析［ Ｊ 】 ． 中国医院药 学杂志 ， ２ ０ １ ０ （ ９ ） ： ８ ０ ３ — ８ ０ ５ ． 用 于治疗敏感菌引起 的呼吸道感染 、尿道感染 以及皮肤软组 『 ７ １ 白平生 ， 熊凤梅 ． 阿奇霉素在儿科 临床应 用 中的不 良 反 应及 织感染 。而阿奇霉素对于杀菌具 有较 长时持续性日 。在进入人 药学监护［ Ｊ 】 ． 西北 药学杂志 ， ２ ０ １ １ （ ４ ） ： ３ １ ２ — ３ １ ４ ．
ｌ ０ ２
北方药学 ２ ０ １ ３年第 １ ０卷第 ７期
法探究 了力达霉素在小 鼠和犬 中的药 物代 谢动力学 ，结 合同 位素跟踪法反应了药物代谢 的过程 。 ２ ． ２同位素示踪技术 ： 同位 素示踪 技术 包括稳定 同位 素示 踪技 术和放射性同位素示踪技术两种 。前者无放射性 ， 但是其物理 和化学性质较 为稳定 ， 因此 ， 在药物合成过程 中引入稳 定同位 素， 通过气质 和液质方法进行定量测定。放射性 同位素示踪技 wenku.baidu.com 由于具有放 射性 ， 其灵敏 度更高 ， 操作起 来也更方 便快捷 ，
过程 。该方法适用于不能用 Ｘ 一 射线 晶体衍射分析方法检测 的 多肽 。它可用于确定氨基酸序列 、 定 量混合物 中的各组分组成 含量等分析 中 ， 在分析分子 中含少 于 ３ ０个氨基酸 的小 肽时是 非常有用 的 ，可以克服上述蛋 白质分析 中的缺点 而达到快速 准确分析 的 目的。 ２ ． ５色谱分析法 ：每一种多肽类药物 的色谱 图都是专一 的 ， 因 此， 色谱是鉴定多肽类药物 、 提高药物质量 的重要 手段 。常用 成 为 了研 究 多 肽 类 药 物 的 主要 手 段 。 的色谱分 析法包括高效液 相色谱 （ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） 、 高效 毛细管 电泳法 ２ ． ３质谱检定技术 ：质谱是多肽类药物结构 分析 的重要手段 ， 等 ，此处 以 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ为例进行介 绍。多肽类药物分 析中常用 的 它通 过分子碎片提供的质量信息 ，从 中分析化 合物的结构特 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ主要包括凝胶过滤色谱 、 离子交换色谱和反 向色谱三种 征。随着质谱分析技术的不断发展 ， 其在多肽类药 物分析 中的 模式 。 应用 越来 越广泛 。常用 的质谱分析工具有 ： 快原子轰击质 谱 、 ２ ． ６其 他 ： 除上述 方法之 外 ， 氨 基酸组 成分 析 、 氨 基酸序 列分 电喷雾质谱和基质辅助激光解吸等 。快原子轰 击质谱应用 于 析 、 场解析质谱 、 Ｉ Ｒ、 ｕ ｖ光谱等都 已应用 于多肽类 物质 的结果 小分子多肽药物 的分析 ， 并能够 准确分析热不稳定 以及难挥发 鉴 定 、 分析检测之中。 的多肽类药物。对 于一些人工合成的具有保护基 的寡肽而言 ， ３总 结 快原 子轰击质 电喷雾质谱法则擅长测量 大分子多肽类药物 ， 并 随着多肽类药物 的不断研究和应用 ，多肽类药物 的分 析 准确 分析其分子量 。通过与 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ连用 ， 能够得到精确的分 子 手段也呈现 出了多样化 的发展趋势 。在 多肽类药物 的实 际分 结构信息 ， 快速获得完整的氨基酸序列信息。同时， 他还可以得 析检定 中，多种检定工具相互结合 能够 大大提高药物分析 的 到分子量小于 ４ ０ ０ Ｕ的小分子碎片 ，提高多肽类药物 的鉴别精 准确度 。随着分析技术 的不断发展 ， 质谱 、 色谱和凝胶 电泳 等 准度。基质辅助激光解吸质谱最大的优势在于他提供了一种更 技术越来越多地被应用 于多肽类药物 的分析领域。 好的离子化方式 ， 避免 了多肽类药物直接进行离子化。 参考文献 ２ ． ４ 核 磁共 振检定技术 ： 核磁 共振 检定 技术作为一种重要 的分 【 １ 】 陈淑珍 ， 汤仲明 ， 甄永芳． 用生物检定法研 究力达霉素在 小鼠 子生物学分析技术 ，它广泛 应用于多肽微观理化性质 的核定 和 犬的 药代动力学『 Ｊ １ ． 药学学报 ； ２ ０ ０ ４ ， ３ ９ （ ９ ） ： ７ ０ ０ — ７ ０ ４ ．
癌 细胞 的凋 亡过程。多肽类抗癌药物 由于其能够成 为肿瘤基 因表达时 的调控 因子 ， 因而成为 了抗癌药物研究 的新 希望 。 抗病毒类多肽药 物 ： 一般来说 ， 病毒感染细胞 的过程包括 以下几 个主要 阶段 ： 吸附 、 自我复 制 、 重新组合 、 释 放病毒等 。 因此 ，抗病毒类 药物多在阻止以上某一过程或者多个 过程发 生。 抗 病毒多肽通 常作用 于病毒吸附和病毒复制两个阶段 ， 通 过与宿主细胞特异性结合或者病毒蛋 白酶结合来发挥作用 。 ２多肽类药物的常用分析方法 ２ ． １生物检定 法 ： 不 同类 型的多肽具有 不 同的生 物活性 ， 多肽 类药物 的一级结构 ，包括二三级结 构都 与其生物有着密 切的 关系。因此 ， 生物检定法可以用来研究多肽类药物的药物动力 学及其生物活性 。 目前 ， 生物检定法主要有两种方 式 ： 活 体检 定法和体外检定法 。活体检定法检测 动物对某种多肽类 药物 的反应 ， 提供 相应 的实验数据支持 。陈淑珍Ｉ ｌ ＿ 等利用生物 检定