抗氧化功能评价方法
3种抗氧化活性测定方法
3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定是评估物质抗氧化能力的重要方法,常用于食品、药物和化妆品等领域。
下面将介绍三种常用的抗氧化活性测定方法。
一、DPPH自由基清除法DPPH(2,2-二苯基-1-苦味肼)是一种常用的抗氧化剂,它能采用紫色的自由基形式存在,并且在反应中会转变为无色的稳定形式。
DPPH自由基清除法是一种简单而直观的测定方法。
该方法的基本原理是将待测物添加到预先溶解的DPPH中,反应一段时间后,根据颜色变化程度来评估抗氧化活性。
通过测量样品溶液吸光度的降低来计算其清除率,清除率越高,抗氧化能力越强。
二、FRAP法FRAP(铁还原能力)法是一种评估抗氧化物质电子给予能力的方法。
抗氧化物质能够通过给予电子来中和自由基的电子,从而保护细胞免受氧化损伤。
FRAP法通过反应产生的铁(II)络合物的吸光度变化来评估样品的抗氧化能力。
具体操作中,将待测物加入到铁(III)试剂(通常为铁(III)氯化物)中,待反应一定时间后,读取吸光度。
样品的抗氧化能力可以通过吸光度的变化来计算。
三、TBARS法TBARS(硫代巴比妥酸反应物)法是一种评估脂质过氧化的方法。
脂质过氧化是一种自由基引起的反应,会导致脂质的氧化和脂质分解产生不稳定化合物。
TBARS法主要用于评估食品和药物等样品中脂质过氧化的程度。
该方法通过将待测样品与反应试剂(如硫代巴比妥酸)反应生成稳定的色素产物,然后测量这种产物的吸光度来评估脂质过氧化的程度。
吸光度越高,脂质过氧化程度越高。
综上所述,DPPH自由基清除法、FRAP法和TBARS法是常用的抗氧化活性测定方法。
每种方法都有其独特的原理和应用范围,选择适合的方法可以准确评估样品的抗氧化能力。
在实际应用中,可以根据实验需求选择合适的方法,或结合多种方法综合评估抗氧化活性。
抗氧化功能评价方法
抗氧化功能评价方法
一、化学方法
1.自由基清除能力测定法:常见的方法有DPPH自由基清除法、ABTS 自由基清除法和超氧阴离子清除法。
这些方法通过测定样品对自由基的清除能力,间接反映了其抗氧化能力。
2.过氧化氢清除能力测定法:该方法通过测定样品对过氧化氢的清除能力,评价其抗氧化能力。
3.金属螯合能力测定法:该方法测定样品与金属离子的结合能力,反映了样品的抗氧化能力。
4.过氧化物酶活性测定法:该方法测定样品中过氧化物酶的活性,评价其抗氧化能力。
二、生物学方法
1.细胞实验法:该方法通过将样品加入细胞培养基中,观察其对细胞的保护作用,评价其抗氧化能力。
2.动物模型实验法:将样品通过灌胃、注射等方式给予动物,观察其对动物体内氧化损伤的保护作用,评价其抗氧化能力。
3.人体试验法:将样品通过口服、注射等方式给予人体,观察其对人体内氧化损伤的保护作用,评价其抗氧化能力。
三、综合方法
1.多指标评价法:综合考虑样品在化学方法和生物学方法中的多个指标,给予综合评分,评价其抗氧化能力。
2.生物传感器法:利用生物传感器对样品进行检测,通过测定信号的变化来评价其抗氧化能力。
3.分子生物学方法:通过测定样品中相关基因的表达水平和蛋白质的表达水平,评价其抗氧化能力。
以上仅为抗氧化功能评价方法的一部分,不同方法的选择应根据具体的研究目的和样品类型来确定。
在实际应用中,常常需要结合多个方法进行综合评价,以获得更准确的结果。
抗氧化功能评价方法
抗氧化功能评价方法1.自由基清除试验法:自由基清除试验法是通过测定物质对特定自由基的清除能力来评价其抗氧化能力。
常用的自由基包括DPPH(2,2’-二苯基-1-苦基肼)、ABTS (2,2’-氨基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸))、OH•(羟基自由基)、O2•-(超氧自由基)等。
这些自由基能与物质发生反应并转化为稳定的产物,从而评定物质的抗氧化能力。
2.铁螯合能力评价法:铁螯合能力评价法是通过测定物质与亚铁离子的络合反应来评价其抗氧化能力。
亚铁离子常常参与引发氧化反应的过程,在生物体内产生自由基,导致氧化应激。
物质能与亚铁离子发生络合反应,减少亚铁离子的可用性,降低氧化反应速率,从而发挥抗氧化作用。
3.过氧化物清除能力测定法:过氧化物清除能力测定法是通过测定物质对过氧化物的清除能力来评价其抗氧化能力。
过氧化物是一类活跃的自由基,对生物体产生氧化应激。
物质能够清除过氧化物,可以有效降低氧化应激反应,起到抗氧化作用。
4.DNA氧化损伤修复能力测定法:DNA氧化损伤修复能力测定法是通过测定物质对DNA氧化损伤的修复能力来评价其抗氧化能力。
DNA氧化损伤是氧化应激的一种重要反应,物质能够修复DNA中的氧化损伤,可以减轻氧化应激对细胞和组织的损害,从而发挥抗氧化作用。
5. Lipid peroxidation抑制试验法:Lipid peroxidation抑制试验法是通过测定物质对脂质过氧化反应的抑制能力来评价其抗氧化能力。
脂质过氧化是一种重要的氧化反应,能够导致脂质分子的氧化断裂,进而破坏细胞膜结构。
物质能够抑制脂质过氧化反应,可以保护细胞膜的完整性,发挥抗氧化作用。
以上是几种常见的抗氧化功能评价方法,通过这些方法可以客观地评价物质的抗氧化能力,为研发和筛选具有抗氧化活性的物质提供参考。
3种抗氧化活性测定方法
3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对氧化过程的抑制作用,能够减缓或阻断自由基对细胞和组织的损害。
目前,常用的抗氧化活性测定方法主要包括DPPH 自由基清除法、ABTS自由基清除法和铁还原能力测定法。
以下将对这三种方法进行详细介绍。
1.DPPH自由基清除法:DPPH(2,2-二苯基-1-若氧基-苯基-π-苦味噁唑)自由基清除法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
该方法是通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
DPPH自由基是一种紫色稳定的自由基,在接触到氢供体(抗氧化剂)后,会发生颜色变化从紫色转变为黄色。
可以通过测定样品溶液的吸光度来评估其抗氧化能力。
吸光度的降低表明样品对DPPH自由基的清除能力较强。
2.ABTS自由基清除法:ABTS(2,2'-联氨基双(3-乙基苯并噻唑))自由基清除法也是一种常用的抗氧化活性测定方法。
ABTS自由基是一种无色可溶性自由基,其生成主要通过氧化剂与ABTS反应而产生。
测定方法是将ABTS与过氧化氢反应,生成蓝色自由基溶液,然后将样品加入到溶液中,通过测定吸光度的变化来评估样品的抗氧化活性。
吸光度的降低表明样品对ABTS自由基的清除能力较强。
3.铁还原能力测定法:铁还原能力测定法是一种评估抗氧化活性的常用方法,通过测定样品对Fe3+还原为Fe2+的能力来评估其抗氧化能力。
在这个方法中,还原剂(如抗氧化剂)会与Fe3+反应,生成Fe2+,并且Fe2+的浓度可以通过测量其吸光度来确定。
浓度越高,吸光度越高,表明样品的抗氧化能力越强。
这三种抗氧化活性测定方法各有其优势和适用范围。
DPPH自由基清除法适用于评估样品对自由基的清除能力,但其结果受其他化合物的影响较大;ABTS自由基清除法对于水溶性和脂溶性样品均适用,但其结果也受其他化合物的影响;铁还原能力测定法适用于样品中还原型物质的测定,可评估样品对金属离子的还原能力。
因此,在实际应用中,可以根据需要选择适合的方法来评估样品的抗氧化活性。
食品中的抗氧化剂及其功能性评价
食品中的抗氧化剂及其功能性评价随着现代生活方式的改变和环境污染的增加,人们的生活中充满了各种自由基,这些自由基会对我们的身体健康产生负面影响。
因此,食品中的抗氧化剂在维护人体健康方面扮演着重要角色。
本文将重点讨论食品中常见的抗氧化剂及其功能性评价。
抗氧化剂是一种能够阻止或减缓氧化反应的物质,其通过捕捉自由基,从而减少有害物质在体内的积累,提供更好的抗氧化保护。
食品中常见的抗氧化剂包括维生素C、维生素E、多酚类化合物和锌等。
维生素C是一种水溶性维生素,在食品中广泛存在。
它具有强抗氧化能力,可以降低体内自由基的水平。
此外,维生素C还可以提高身体的免疫力,有助于预防感冒和其他疾病。
维生素C的功能性评价主要通过检测其抗氧化活性和稳定性来衡量。
维生素E是一种脂溶性维生素,主要存在于植物油、坚果和种子中。
它是细胞膜的重要组成部分,具有抗氧化和抗炎作用。
维生素E对于保护细胞膜免受氧化损伤至关重要。
功能性评价方法包括测定维生素E的抗氧化能力和抗炎能力。
多酚类化合物是一类在植物中广泛存在的天然抗氧化物质,在食品中也常见。
多酚类化合物具有较强的抗氧化活性,能够中和自由基并修复细胞损伤。
此外,多酚类化合物还具有抗炎、抗菌和降低血糖的作用。
功能性评价方法包括测定多酚类化合物的总抗氧化能力、抑制自由基生成和抗炎效果。
锌是一种微量元素,存在于多种食物中。
它是许多抗氧化酶的重要组成部分,参与了细胞抗氧化反应。
锌的摄入不足会导致免疫力下降和细胞氧化损伤。
功能性评价方法包括测定锌的生物利用度和抗氧化能力。
对于抗氧化剂的功能性评价,除了上述提到的方法,还可以利用体外和体内实验。
体外实验通常使用人工模型或化学试剂来评估抗氧化剂的活性和稳定性。
体内实验则需要进行动物实验或人类临床试验,以检测抗氧化剂在体内的生物活性和效果。
综上所述,食品中的抗氧化剂对于维护人体健康至关重要。
不同的抗氧化剂具有不同的抗氧化能力和功能性评价方法。
通过评估抗氧化剂的功能性,可以为人们选择更适合的食物和饮食习惯,从而提供更好的抗氧化保护。
国家食品药品监督管理局关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知
国家食品药品监督管理局关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知
文章属性
•【制定机关】国家食品药品监督管理总局(已撤销)
•【公布日期】2012.04.23
•【文号】国食药监保化[2012]107号
•【施行日期】2012.05.01
•【效力等级】部门规范性文件
•【时效性】现行有效
•【主题分类】健康促进
正文
国家食品药品监督管理局关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知
(国食药监保化[2012]107号)
各省、自治区、直辖市食品药品监督管理局(药品监督管理局),有关单位:为贯彻落实《食品安全法》及其实施条例对保健食品实行严格监管的要求,加强保健食品准入管理,切实提高准入门槛,国家食品药品监督管理局组织修订了抗氧化等9个功能的评价方法,已经保健食品安全专家委员会审议通过,现予印发。
自2012年5月1日起,对受理的申报注册保健食品的相关产品检验申请,保健食品注册检验机构应当按照新发布的9个功能评价方法开展产品功能评价试验等各项工作。
附件:1.抗氧化功能评价方法
2.对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法
3.辅助降血糖功能评价方法
4.缓解视疲劳功能评价方法
5.改善缺铁性贫血功能评价方法
6.辅助降血脂功能评价方法
7.促进排铅功能评价方法
8.减肥功能评价方法
9.清咽功能评价方法
国家食品药品监督管理局
二○一二年四月二十三日。
塑料的抗氧化老化性能评估
塑料的抗氧化老化性能评估近年来,随着塑料制品的广泛应用,对其质量和性能的要求也越来越高。
在长期使用过程中,塑料制品容易受到氧化和老化的影响,从而影响其使用寿命和性能稳定性。
因此,对塑料的抗氧化老化性能进行评估变得至关重要。
本文将重点介绍塑料抗氧化老化性能评估的方法和评估指标。
一、抗氧化老化性能评估方法为了评估塑料的抗氧化老化性能,我们可以采用以下几种方法:1. 加速老化试验法加速老化试验是一种常用的评估塑料抗氧化老化性能的方法。
常见的加速老化试验方法有热氧老化试验、紫外光老化试验和臭氧老化试验。
这些试验通过模拟真实使用环境中的氧化老化条件,将塑料制品暴露于高温、高湿度、紫外光或臭氧等环境中,观察塑料的物理、化学性能的变化,从而评估其抗氧化老化性能。
2. 物化性能测试法除了加速老化试验,物化性能测试也是评估塑料抗氧化老化性能的重要手段。
通过对塑料制品的力学性能、热性能、电性能等进行测试,可以了解塑料在老化过程中的变化情况。
常用的物化性能测试方法有拉伸试验、冲击试验、热分析试验等。
3. 化学分析法化学分析法是评估塑料抗氧化老化性能的另一种常用方法。
通过对塑料中的氧化产物、降解产物进行分析,可以了解塑料在老化过程中发生的化学反应,从而评估其抗氧化老化性能。
常用的化学分析方法包括红外光谱、质谱、核磁共振等。
二、抗氧化老化性能评估指标在评估塑料抗氧化老化性能时,我们可以从以下几个方面进行考虑:1. 机械性能指标塑料的机械性能是其最基本的性能之一,也是评估其抗氧化老化性能的重要指标之一。
常用的机械性能指标包括拉伸强度、断裂伸长率、冲击强度等。
通过比较塑料在老化前后的机械性能参数,可以评估其抗氧化老化性能的优劣。
2. 热性能指标塑料的热性能也是评估其抗氧化老化性能的重要指标之一。
常用的热性能指标包括热变形温度、热稳定性等。
通过比较塑料在老化前后的热性能参数,可以评估其抗氧化老化性能的稳定性。
3. 化学性能指标塑料的化学性能是评估其抗氧化老化性能的重要参考指标之一。
塑料的抗氧化性能评估
塑料的抗氧化性能评估塑料在日常生活中广泛应用于各个领域,它的抗氧化性能是其使用寿命的一个重要因素。
本文将介绍塑料抗氧化性能的评估方法和相关研究进展。
一、概述塑料材料在使用过程中,受到环境氧气的氧化作用,会导致塑料材料性能的降低,从而影响其使用寿命。
因此,评估塑料的抗氧化性能,对于材料的研发和应用具有重要意义。
二、常见的抗氧化性能评估方法1. 表面氧化指数(SOI)表面氧化指数是评估塑料材料抗氧化性能的一项重要指标。
它可以通过测量塑料材料在一定温度下在空气中的质量变化来计算得出。
SOI值越小,则说明塑料材料的抗氧化性能越好。
2. 热重分析(TGA)热重分析是评估塑料材料的热稳定性和抗氧化性能的常用方法之一。
通过在一定温度范围内,连续地测量材料的质量变化,可以得到材料的热分解温度、残留物含量等数据,从而评估材料的抗氧化性能。
3. 差热分析(DSC)差热分析是评估塑料材料的热性能和热稳定性的重要手段之一。
通过在一定温度范围内,对材料的热容量进行测量,可以得到材料的熔点、玻璃化转变温度等数据,从而间接反映材料的抗氧化性能。
4. 氧化诱导时间(OIT)氧化诱导时间是评估塑料材料抗氧化性能的常用指标之一。
它是在一定温度下,材料开始发生氧化反应所需的时间,可以通过运用一些仪器设备进行测量得到。
OIT值越大,则说明塑料材料的抗氧化性能越好。
三、塑料抗氧化性能的研究进展近年来,随着工业技术的不断发展,各种新型的塑料材料涌现出来,它们的抗氧化性能也受到了研究人员的关注。
例如,一些科学家针对不同应用领域的塑料材料做了具体的抗氧化性能研究,探索了新的改性方法和添加剂,提高塑料材料的抗氧化性能。
此外,一些研究还关注塑料材料在不同环境下的抗氧化性能。
例如,塑料材料在海水环境中的抗氧化性能与其在常规环境中的性能可能存在差异,因此针对不同应用场景的塑料材料进行抗氧化性能评估也是一项重要工作。
四、结论综上所述,塑料材料的抗氧化性能评估对于材料研发和应用具有重要意义。
测定抗氧化的六种方法是
测定抗氧化的六种方法是
1.自由基清除能力测定法:通过测定样品对自由基的清除能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括DPPH(2,2-二苯基-1-苦基肼)自由基清除法和ABTS(2,2'-联氨基二-(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸))自由基清除法。
2.氧化还原能力测定法:通过测定样品在氧化还原反应中的电子接受能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括还原能力测定法和Ferric reducing antioxidant power(FRAP)法。
3.金属离子螯合能力测定法:通过测定样品对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括铁离子螯合能力测定法和铜离子螯合能力测定法。
4.脂质过氧化抑制能力测定法:通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括脂质过氧化抑制能力测定法和TBARS(硫代巴比妥酸反应物)测定法。
5.蛋白质氧化抑制能力测定法:通过测定样品对蛋白质氧化的抑制能力来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括蛋白质碳氧化酶活性测定法和蛋白质过氧化物酶活性测定法。
6.细胞抗氧化能力测定法:通过测定样品对细胞内氧化应激的保护作用来评估其抗氧化能力。
常用的方法包括细胞活力测定法和细胞内氧化应激指标测定法。
抗氧化能力分析方法
抗氧化能力分析方法抗氧化能力分析方法是评估物质对氧化损伤的抵抗能力的一种方法。
氧化损伤是指由于自由基和其他氧化物质的作用而导致的细胞和组织的损伤,与许多疾病的发展有关。
抗氧化能力分析方法可以帮助我们了解物质的抗氧化能力,进而在食品、医药和化妆品等领域中的应用。
以下是几种常用的抗氧化能力分析方法:1.自由基清除能力分析法:自由基清除能力是物质对自由基的消除能力,常用的分析方法包括DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法和超氧阴离子自由基清除法等。
这些方法通过测定物质与自由基反应后的颜色变化来评估其抗氧化能力。
2.还原能力分析法:还原能力是物质还原氧化剂的能力,可以通过测定物质与还原剂反应后的颜色变化来评估。
常用的方法有铁还原能力法、铁螯合能力法和硫酸钼蓝法等。
3.抗氧化酶活性分析法:抗氧化酶是一类能够清除自由基和其他氧化物质的酶,包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)等。
通过测定这些酶的活性,可以评估物质对氧化损伤的抵抗能力。
4.氧化指标分析法:氧化指标是反映物质氧化损伤程度的指标,通常通过测定脂质过氧化产物、蛋白质氧化产物和DNA氧化产物等来评估。
常用的方法有TBARS法、氧化还原电位法和免疫学方法等。
5.细胞实验分析法:细胞实验可以模拟体内环境,通过测定细胞对氧化损伤的抵抗能力来评估物质的抗氧化能力。
常用的方法有细胞存活率测定法、DNA损伤测定法和细胞色素C释放法等。
综上所述,抗氧化能力分析方法有多种不同的方法,可以通过测定自由基清除能力、还原能力、抗氧化酶活性、氧化指标和细胞实验等来评估物质的抗氧化能力。
这些方法在食品、医药和化妆品等领域中的应用,有助于筛选和评估具有抗氧化性能的物质,为开发新的抗氧化剂提供科学依据。
食品中植物提取物的抗氧化活性评价方法
食品中植物提取物的抗氧化活性评价方法随着人们对健康生活的追求,越来越多的人关注食品中的植物提取物,并且研究表明这些植物提取物具有抗氧化活性。
那么问题来了,我们如何评价食品中植物提取物的抗氧化活性呢?本文将介绍一些常用的评价方法。
一、体外抗氧化活性评价方法1. DPPH 自由基清除法:DPPH(2,2-二苯基-1-苦肟基-1-丙烷)是一种广泛用于评价抗氧化活性的化合物,其带有紫色。
在受到自由基清除作用后,它会从紫色转变为黄色。
这个方法的原理是通过测量样品对DPPH自由基的清除能力来评价其抗氧化活性。
2. ABTS 自由基清除法:ABTS(2,2'-联氨基二(-2,6-二甲基苯基)氧化物)也是一种常用的评价抗氧化活性的化合物。
ABTS在受到自由基清除作用后,其吸收峰会由蓝色转变为无色。
通过测量样品对ABTS自由基的清除能力,可以评价其抗氧化活性。
3. 总抗氧化能力评价法:该方法通过测量样品与抗氧化剂(如维生素C或天然多酚)的协同作用来评价其抗氧化能力。
通常使用Fe2+和Fe3+离子体系作为模型,测量样品对Fe2+的抗氧化能力。
这个方法还可以评估样品中各种抗氧化剂之间的协同作用。
二、体内抗氧化活性评价方法1. SOD酶活力测定法:SOD(超氧化物歧化酶)是一种常见的抗氧化酶,能够清除生物体内产生的超氧阴离子自由基。
通过测量样品对SOD酶活力的影响,可以评价其在体内的抗氧化活性。
2. MDA含量测定法:MDA(丙二醛)是脂质过氧化产生的代谢产物,也是氧化应激损伤的指标之一。
通过测量样品对MDA含量的影响,可以评价其抗氧化活性。
这个方法常用于评价食品对脂质过氧化的抑制效果。
3. 细胞实验法:利用细胞模型评价抗氧化活性是一种比较常见的方法。
可以通过测量样品对细胞的保护效果,如抑制细胞氧化应激、提高细胞存活率等来评价其抗氧化活性。
这些方法虽然各有特点,但也存在一些局限性。
例如,体外抗氧化活性评价方法无法真实反映样品在体内的抗氧化能力;而体内抗氧化活性评价方法需要动物实验,成本较高且时间较长。
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较1.DPPH自由基清除法:DPPH是一种紫色自由基,具有很强的吸收特性。
该方法通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
这种方法简单、快速,广泛用于抗氧化活性的初步筛选。
但是该方法只能反映样品对一种自由基的清除能力,不能全面评估其抗氧化性能。
2.ABTS自由基清除法:ABTS是一种蓝色自由基,其吸收波长与DPPH不同,具有更广的吸收范围。
该方法通过测定样品对ABTS自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
与DPPH法相比,ABTS法可以更全面地评估样品的抗氧化性能。
但是该方法需要较长时间才能得到准确结果。
3.过氧化氢清除法:该方法通过测定样品对过氧化氢的清除能力来评估其抗氧化活性。
过氧化氢是一种常见的氧化剂,可以导致细胞损伤。
该方法简单、快速,适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是过氧化氢法只能评估样品对过氧化氢的清除能力,不能反映其对其他自由基的清除能力。
4.铁离子还原能力法:该方法通过测定样品对Fe3+的还原能力来评估其抗氧化活性。
Fe3+是一种常见的氧化剂,可以与还原剂发生反应,形成Fe2+。
该方法简单、快速,适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是铁离子还原能力法只能评估样品对Fe3+的还原能力,不能全面评估其抗氧化性能。
5.脂质过氧化抑制能力法:该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力来评估其抗氧化活性。
脂质过氧化是一种常见的氧化反应,可以导致脂质的氧化损伤。
该方法能够全面评估样品的抗氧化性能,适用于多种样品的抗氧化活性测定。
但是该方法操作繁琐,需要较长时间才能得到准确结果。
总体来说,不同的抗氧化活性测定方法各有优劣。
在实际应用中,可以根据需要选择适合的方法进行测定。
此外,多种方法的综合比较可以更全面地评估样品的抗氧化性能。
化妆品中的抗氧化功能的筛选与评价
化妆品中的抗氧化功能的筛选与评价引言:随着现代生活方式的改变,环境污染、紫外线辐射等外界因素对肌肤造成的氧化损伤日益严重。
而抗氧化功能的化妆品能有效防止氧化反应的发生,减少自由基对皮肤的伤害,保护肌肤免受老化和损伤。
本文旨在探讨化妆品中抗氧化功能的筛选与评价方法,为化妆品行业提供科学依据与指导。
一、抗氧化成分的筛选抗氧化成分是化妆品中发挥抗氧化作用的重要成分,其筛选需考虑以下因素:1. 活性:抗氧化成分需具有抑制自由基产生和清除自由基的活性,如维生素C、维生素E等。
2. 稳定性:由于化妆品常受到光热等因素的影响,抗氧化成分需具备较好的稳定性,以确保产品长期有效。
3. 安全性:化妆品对肌肤的使用频率和接触面积较大,抗氧化成分需经过严格的安全性评估,确保不会对肌肤产生不良反应。
二、抗氧化功能的评价方法为了准确评价化妆品中的抗氧化功能,常用的评价方法包括以下几种:1. 自由基清除能力:通过体外实验,使用合适的自由基发生剂,测量化妆品对自由基的清除能力,如DPPH自由基法、ABTS自由基法等。
2. 抗氧化酶活性:抗氧化酶如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶等在体内发挥重要的抗氧化作用,通过测量化妆品对这些抗氧化酶活性的影响,评估抗氧化能力。
3. 细胞保护作用:将化妆品应用于细胞实验中,通过测量其对细胞的保护作用,评估其抗氧化功能。
三、抗氧化指标的评价标准对于抗氧化功能的评价,可以根据以下指标制定评价标准:1. IC50值:体外实验中,IC50值是衡量化妆品抗氧化能力的重要指标。
IC50值越小,说明化妆品对自由基的清除能力越强。
2. 酶活性的变化:抗氧化功能强的化妆品能显著影响抗氧化酶的活性,通过测量酶活性的变化,定量评估抗氧化能力。
3. 细胞存活率:细胞保护作用的评估可通过测量细胞的存活率,抗氧化功能强的化妆品能有效保护细胞免受氧化损伤。
结论:抗氧化功能的筛选与评价涉及多个方面,包括抗氧化成分的筛选、抗氧化功能的评价方法以及抗氧化指标的评价标准。
抗氧化活性测定方法
抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对抗氧化过程的干预能力,即能够延缓或阻止氧自由基的产生,并减少氧自由基对生物体产生的损害。
抗氧化活性测定方法用于评估物质的抗氧化能力,常用的测定方法主要包括体外试验和体内试验两类。
体外试验是通过模拟体外环境,测定物质对捕捉自由基或抗氧化酶活性的影响来评估抗氧化活性。
常用的体外试验方法包括自由基清除能力测定、铁螯合能力测定、抑制脂质过氧化试验等。
自由基清除能力测定是通过测定物质对自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
常用的自由基包括DPPH自由基、ABTS自由基等。
测定方法主要通过测定反应后自由基的消失程度来评估抗氧化能力。
铁螯合能力测定是通过测定物质对铁离子的螯合能力来评估其抗氧化活性。
铁离子在体内可能通过Fenton反应生成高活性的氢氧自由基,因此物质对铁离子的螯合能力可以减少氧自由基的生成。
脂质过氧化是氧自由基对脂质的直接损害,因此抑制脂质过氧化试验常用于评估物质的抗氧化活性。
该试验主要通过测定物质对氧自由基引起的脂质过氧化的抑制程度来评估其抗氧化能力。
体内试验是通过给动物或人类实验体内投与抗氧化物质,然后测定其体内的抗氧化能力来评估物质的抗氧化活性。
常用的体内试验方法包括血浆抗氧化能力测定、组织氧化损伤程度测定等。
血浆抗氧化能力测定是评估物质对血液中氧自由基的抑制能力。
该试验主要通过测定血浆中一系列抗氧化物质的浓度以及抗氧化酶活性来评估抗氧化能力。
组织氧化损伤程度测定是通过测定组织中氧自由基引起的损伤程度来评估物质的抗氧化活性。
常用的方法主要包括测定组织中氧自由基水平、脂质过氧化程度、蛋白质氧化程度等指标。
此外,近年来还出现了一些新的抗氧化活性测定方法,如典型抗氧化能力(TEAC)测定法、氧自由基吞没能力(ORAC)测定法等。
这些新的方法在测定速度快、准确性高、操作简单等方面具有优势。
总体而言,抗氧化活性测定方法的选择应根据需要评估的物质特性、目的和实验条件等进行选择。
食品中抗氧化剂的筛选与功能评价研究
食品中抗氧化剂的筛选与功能评价研究导语:现代社会生活的高压快节奏给人们的身体健康带来了挑战。
繁忙的生活节奏和不健康的饮食习惯,导致了自由基的过度积累。
而自由基的过度积累会引发氧化应激反应,对人体细胞造成损伤,甚至诱发多种疾病。
因此,寻找食品中的抗氧化剂成为了当代食品科学研究的热点之一。
一、抗氧化剂的筛选方法在食品中筛选出优质的抗氧化剂是食品科学研究的重要任务。
目前,常用的抗氧化剂筛选方法主要有两种:化学法和生物法。
1.1 化学法化学法是通过化学反应来评价食品样品中的抗氧化活性。
其中最常用的是DPPH(2,2-二苯基-1-苦基肼)处理法,它是通过测定抗氧化剂与自由基DPPH的反应程度来评价抗氧化剂的能力。
还有比色法、氧自由基吸收能力法等。
1.2 生物法生物法是通过研究生物体内抗氧化酶系统的活性来评价食品样品中的抗氧化活性。
这种方法更接近真实的体内环境,能够更准确地评价食品样品的抗氧化能力。
二、抗氧化剂的功能评价抗氧化剂的功能评价是为了了解其对人体健康的具体作用和效果。
目前,抗氧化剂的功能评价主要从以下几个方面展开:2.1 抗衰老自由基在机体内引起的氧化反应不仅会导致DNA、蛋白质和脂质等生物大分子的受损,还会引起氧化应激反应,从而导致细胞衰老。
抗衰老是抗氧化剂的重要功能之一。
2.2 抗炎当机体遭到外界刺激,例如病毒感染、组织损伤等时,会诱发炎症反应。
而炎症反应会激活产生更多的自由基,引起氧化应激反应。
抗氧化剂可以有效抑制自由基的产生和氧化应激反应,从而发挥抗炎作用。
2.3 抗肿瘤氧化应激反应对细胞DNA的损伤是癌症发生和发展的重要环节。
抗氧化剂可以减少DNA的氧化损伤,从而具有一定的抗肿瘤作用。
2.4 保护心脑血管氧化应激反应对心脑血管系统的影响较为显著。
抗氧化剂可以保护心脑血管系统免受自由基的损伤,减少心脑血管疾病的发生。
三、抗氧化剂的源头与应用在食品中,抗氧化剂的源头主要来自于天然植物。
蔬菜、水果以及各种植物提取物都被广泛用于食品加工中。
抗氧化能力检测方法如何选择
抗氧化能力检测方法如何选择1.避免氧自由基法避免氧自由基法是一种常用的营养物质抗氧化能力检测方法,通过测定物质对人工合成的活性氧自由基的清除能力来反映其抗氧化能力。
常用的活性氧自由基包括DPPH自由基和ABTS自由基。
该方法简单易行,适用于大批量样品处理。
2.过氧化氢降解法过氧化氢降解法是一种定量测定物质抗氧化能力的方法,通过测定物质对过氧化氢的消耗程度来评估其抗氧化能力。
该方法操作简便,适用于多种样品类型。
3.金属离子螯合能力法金属离子螯合能力法是一种常用的抗氧化能力检测方法,通过测定物质对金属离子的螯合能力来评估其抗氧化性能。
常用的金属离子包括铁离子、铜离子等。
该方法适用于多种样品类型,尤其适用于检测多酚类化合物的抗氧化能力。
4.体外细胞模型法体外细胞模型法是一种模拟人体细胞环境,通过测定物质对细胞的氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的细胞模型包括人类肝细胞HepG2、人类白血病细胞HL-60等。
该方法较为贴近真实的生理环境,但操作较为繁琐。
5.动物模型法动物模型法是一种模拟人体内环境,通过测定物质对动物体内氧化损伤程度来评估其抗氧化能力。
常用的动物模型包括小鼠、大鼠等。
该方法能够更好地反映物质的抗氧化能力,在药物研发领域较为常见,但需注意动物伦理和实验条件等问题。
在选择抗氧化能力检测方法时,需要综合考虑实验目的、被测物的特性、实验条件、预算等因素。
有时需要结合多种方法来评估物质的抗氧化能力,增加研究可靠性。
同时,还需注意选择已经被广泛验证和接受的方法,以确保实验结果的准确性和可重复性。
抗氧化活性测定方法
抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定是指评估化合物或物质对抗自由基或其他氧化物种的能力。
氧化反应是生物体代谢过程中不可避免的一环,会产生各种有害氧化物,如自由基。
自由基对人体细胞和分子造成损害,导致各种疾病的发生。
因此,评估物质的抗氧化活性具有重要的生物学和医学意义。
目前有许多方法可用于测定抗氧化活性,常用的方法有自由基清除法、还原能力测定法和氧化物抑制法。
下面将对它们进行详细介绍。
1.自由基清除法:自由基清除法主要是通过测定物质对自由基的清除速率来评估其抗氧化能力。
常用的方法有DPPH自由基法、ABTS自由基法和超氧阴离子自由基法。
其中,DPPH自由基法是最常用的一种方法。
该法是将DPPH自由基与物质反应,通过测定DPPH自由基消失的程度来反映物质的抗氧化活性。
2.还原能力测定法:还原能力是物质抗氧化活性的重要指标之一、通常是通过测定物质还原过程中电子释放的程度来评估其抗氧化活性。
常用的方法有Fe3+/Fe2+离子还原法和Cu2+/Cu+离子还原法。
其中,Fe3+/Fe2+离子还原法是最常用的一种方法。
该法是将Fe3+还原为Fe2+的过程中,测定还原剂的浓度变化或颜色的变化。
3.氧化物抑制法:氧化物抑制法是通过测定物质对氧化物的生产和活性的抑制能力来评估其抗氧化活性。
常用的方法有脂质过氧化抑制能力法和DNA损伤抑制法。
其中,脂质过氧化抑制能力法是最常用的一种方法。
该法是通过测定物质对脂质过氧化的抑制作用来评估其抗氧化活性。
此外,还有其他一些辅助方法可用于评估物质的抗氧化活性,包括电子顺磁共振(EPR)、化学发光法和细胞抗氧化活性测定等。
这些方法可以提供更加准确和全面的抗氧化活性评估。
总之,抗氧化活性测定是评估物质对自由基和其他氧化物的抗氧化能力的重要手段。
不同的测定方法各有特点,可根据需要选择合适的方法进行评估。
抗氧化活性测定方法的发展将为药物研发、食品安全和环境保护等领域提供有力的支持。
抗氧化功能评价方法
附件1:抗氧化功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目动物实验体重脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)蛋白质氧化产物:蛋白质羰基抗氧化酶:超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶抗氧化物质:还原性谷胱甘肽人体试食试验脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)超氧化物歧化酶谷胱甘肽过氧化物酶2 试验原则动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8-表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定,动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。
氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
在进行人体试食试验时,应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定动物实验:脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。
人体试食试验:脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性,且对机体健康无影响,可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法Method for the Assessment of Antioxidative Function1 动物实验实验动物选用10月龄以上老龄大鼠或8月龄以上老龄小鼠,也可用氧化损伤模型鼠。
单一性别,小鼠每组10-15只,大鼠8-12只。
剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个溶剂对照组,以人体推荐量的10倍(小鼠)或5倍(大鼠)为其中的一个剂量组,另设两个剂量组,高剂量一般不超过30倍,必要时设阳性对照组、空白对照组。
受试样品给予时间30天,必要时可延长至45天。
实验方法老龄动物选用10月龄以上大鼠或8月龄以上小鼠,按血中MDA水平分组,随机分为1个溶剂对照组和3个受试样品剂量组。
抗氧化功能评价与衡量方法
附件1:抗氧化功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2 脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)1.1.3 蛋白质氧化产物:蛋白质羰基1.1.4 抗氧化酶:超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶1.1.5 抗氧化物质:还原性谷胱甘肽1.2 人体试食试验1.2.1 脂质氧化产物:丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)1.2.2 超氧化物歧化酶1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶2 试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
2.2 脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8-表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定,动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。
2.3 氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
2.4 在进行人体试食试验时,应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验:脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。
3.2 人体试食试验:脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性,且对机体健康无影响,可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法Method for the Assessment of Antioxidative Function1 动物实验1.1 实验动物选用10月龄以上老龄大鼠或8月龄以上老龄小鼠,也可用氧化损伤模型鼠。
单一性别,小鼠每组10-15只,大鼠8-12只。
1.2 剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个溶剂对照组,以人体推荐量的10倍(小鼠)或5倍(大鼠)为其中的一个剂量组,另设两个剂量组,高剂量一般不超过30倍,必要时设阳性对照组、空白对照组。
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附件1:抗氧化功能评价方法试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2 脂质氧化产物:丙二醛或血清8- 表氢氧异前列腺素( 8-Isoprostane )1.1.3 蛋白质氧化产物:蛋白质羰基1.1.4 抗氧化酶:超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶1.1.5 抗氧化物质:还原性谷胱甘肽1.2 人体试食试验1.2.1 脂质氧化产物:丙二醛或血清8- 表氢氧异前列腺素( 8-Isoprostane )1.2.2 超氧化物歧化酶1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶2 试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
2.2 脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8- 表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定,动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。
2.3 氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。
2.4 在进行人体试食试验时,应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验:脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。
3.2 人体试食试验:脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性,且对机体健康无影响,可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法Method for the Assessment of Antioxidative Function1 动物实验1.1 实验动物选用10 月龄以上老龄大鼠或8 月龄以上老龄小鼠,也可用氧化损伤模型鼠。
单一性别,小鼠每组10-15 只,大鼠8-12 只。
1.2 剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组和一个溶剂对照组,以人体推荐量的10 倍(小鼠)或5 倍(大鼠)为其中的一个剂量组,另设两个剂量组,高剂量一般不超过30 倍,必要时设阳性对照组、空白对照组。
受试样品给予时间30 天,必要时可延长至45 天。
1.3 实验方法1.3.1 老龄动物选用10月龄以上大鼠或8月龄以上小鼠,按血中MDA水平分组,随机分为1个溶剂对照组和3 个受试样品剂量组。
3 个剂量组给予不同浓度受试样品,对照组给予同体积溶剂,实验结束时处死动物测脂质氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化酶活力。
1.3.2 D -半乳糖氧化损伤模型1.3.2.1 原理D-半乳糖供给过量,超常产生活性氧,打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的平衡状态,引起过氧化效应。
1.3.2.2 造模方法选25-30g健康成年小鼠,除空白对照组外,其余动物用D-半乳糖40mg- 1.2g/kg BW颈背部皮下注射或腹腔注射造模,注射量为0.1mL/10g ,每日 1 次,连续造模6周,取血测MDA按MDA水平分组。
随机分为1个模型对照组和3个受试样品剂量组,3个剂量组经口给予不同浓度受试样品,模型对照组给予同体积溶剂,在给受试样品的同时,模型对照组和各剂量组继续给予相同剂量D-半乳糖颈背部皮下或腹腔注射,实验结束处死动物测脂质氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化酶活力。
1.3.3 乙醇氧化损伤模型1.3.3.1 原理乙醇大量摄入,激活氧分子产生自由基,导致组织细胞过氧化效应及体内还原性谷胱甘肽的耗竭。
1.3.3.2 造模方法选25-30g 健康成年小鼠(180-220g 大鼠),随机分为 4 个组,1 个模型对照组和 3 个受试样品剂量组,必要时可增设 1 个空白对照组。
3 个剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予同体积溶剂,连续灌胃30天,末次灌胃后,模型组对照组和 3 个剂量组禁食16 小时(过夜),然后1次性灌胃给予50%乙醇12ml/kgBW,6 小时后取材(空白对照组不作处理,不禁食取材),测血清或肝组织脂质氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化酶活力。
1.3.4 脂质氧化产物测定1.341 血中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA含量测定血中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA含量可采用荧光法和比色法测定,方法任选其1.3.4.1.1 荧光法1.3.4.1.1.1 荧光法原理MDA(malondiadehycle )是细胞膜脂质过氧化的终产物之一,测其含量可间接估计脂质过氧化的程度。
1个丙二醛(MDA分子与2个硫代巴比妥酸(TBA分子在酸性条件下共热,形成粉红色复合物。
以波长536nm为激发光,在550nm有最强荧光强度。
可用荧光法进行微量测定。
1.3.4.1.1.2 仪器与试剂仪器:荧光分光光度计、微量加样器、恒温水浴锅、普通离心机、混旋器、具塞离心管试剂:10mmol/L四乙氧基丙烷(贮备液,棕色瓶4C保存12个月),临用前用纯水稀释成1nmol/mL29mmol/L 硫代巴比妥酸工作液硫代巴比妥酸0.209gEDTA.2H 2025mg谷胱甘肽(还原型)用0.02mol/L NaQH 50 mL 1mg溶解(微温助溶,棕色瓶4C保存2周)酸水解液0.1mol/L H 2SQ4125mL0.1mol/L Na 2SQ4125mL加水150mL用H2SQ调pH 1.5,加水稀释至500mL正丁醇以上所用玻璃器皿均需经50%硝酸浸泡24h 后,再经蒸馏水、双蒸水淋洗干燥,试剂(选AR级)最好用双蒸水配制。
1.341.1.3 实验步骤1.341.131 样品制备全血上清液:取血50卩I加入0.5mL生理盐水,2000r/min 离心10min ,取上清液待测。
血清样品:取血0.5mL室温静置10min, 2000r/min 离心10min,取上清液待测。
1.341.132 标准曲线制作将10nmol/mL四乙氧基丙烷,用双蒸水稀释成0.0、0.25、0.5、1.0、1.5、2、3、5、10nmol/mL分别取0.1mL加入酸水解液2mL、TBA工作液0.5mL~混匀,避光、沸水浴60min T流水冷却至室温T 3mL正丁醇振荡抽提1min~ 3000r/min离心5min~取上清液(正丁醇层)测荧光强度(入射狭缝 1.5nm,出射狭缝5nm, 激发波长536nm,发射波长550nm)以四乙氧基丙烷浓度为横坐标,荧光强度为纵坐标作图。
1.341.133 样品测定*全血上清液0.5mL (空白管加蒸馏水0.5mL,标准管加标准0.1mL、蒸馏水0.4mL)# 1nmol/mL四乙氧基丙烷(标准)血清0.1mL (或全血上清液0.5mL)T加入酸水解液2mL、TBA工作液0.5mL T混匀,避光、沸水浴60min T流水冷却至室温T 3mL正丁醇振荡抽提1min T 3000r/min离心5min T取上清液(正丁醇层)测荧光强度(入射狭缝 1.5nm,出射狭缝5nm, 激发波长536nm发射波长550nm)1.3.4.1.1.3.4 计算公式:B-A B-A过氧化脂质含量(nmo 1/mL血清)= ------ x C X K =--------------- x 1 x 1F-A F-AB-A B-A 1过氧化脂质含量(nmo 1/mL血液)= ------ x C X K =------------ x 1 xF-A F-A 0.05A:空白管荧光度B:样品荧光度F:四乙氧基丙烷荧光度C:四乙氧基丙烷浓度(1nm ol/mL)K:稀释倍数1.341.2 比色法1.34121 比色法原理MD(malondiadehycle )是细胞膜脂质过氧化的终产物之一,测其含量可间接估计脂质过氧化的程度。
1个丙二醛(MDA分子与2个硫代巴比妥酸(TBA)分子在酸性条件下共热,形成粉红色复合物。
该物质在波长532nm有极大吸收峰。
可用分光光法进行测定。
1.3.4.1.2.2 仪器与试剂仪器:可见光分光光度计、酶标仪、微量加样器、恒温水浴锅、普通离心机、混旋器、具塞离心管。
试剂:0.2M乙酸盐缓冲液pH3.50.2M乙酸溶液185mL0.2M乙酸钠溶液15mL1mmol/L四乙氧基丙烷(贮备液,4 C保存3个月),临用前用水稀释成40nmol/mL8.1%十二烷基硫酸钠SDS0.8%硫代巴比妥酸TBA0.2M磷酸盐缓冲液pH7.40.2M磷酸氢二钠1920mL0.2M 磷酸二氢钾480mL1.3.4.1.2.3 实验步骤1.3.4.1.2.3.1 样品制备溶血液样品:取血20卩L加入0.98mL蒸馏水制成2%溶血液。
1.3.4.1.2.3.2 样品测定*若用血清,样品管0.15mL,标准管0.15mL。
1.3.4.1.2.3.3 计算B -A B -A过氧化脂质含量(nmol/mL2%溶血液)= ------------- x C X K = -------------------- X 40X 1F -A F -AB -A B -A过氧化脂质含量(nmo 1/mL血清)=--------- x C X K = ------------------- x 40 x 1F -A F -AB - A B- A 1过氧化脂质含量= ------------ x C x K = ------------ X 40 X --------------------- (nmol/mg 组织) F - A F - A 0.2 x 10%x 1000A空白管吸光度B:样品管吸光度F:四乙氧基丙烷吸光度C:四乙氧基丙烷浓度(40 nm ol/mL)K:稀释倍数40nmol/mL四乙氧基丙烷0.2mL8.1%SDS0.2mL0.2mL0.2mL0.2M乙酸盐缓冲液 1.5mL 1.5mL 1.5mL0.8%TBA 1.5mL 1.5mL 1.5mLH2O0.8mL0.6mL0.6mL混匀,避光沸水浴60min,流水冷却,于532nm比色注:如用试剂盒,可按试剂盒的操作要求进行。
A空白管吸光度B:样品吸光度F:四乙氧基丙烷吸光度C:四乙氧基丙烷浓度(40 nm ol/mL)K:稀释倍数1.342 组织中过氧化脂质降解产物丙二醛( MDA含量测定1.342.1 原理见 1.3.4.1.2.11.3.4.2.2 仪器与试剂仪器:可见光分光光度计、酶标仪、微量加样器、恒温水浴锅、普通离心机、混旋器、具塞离心管、组织匀浆器试齐U :见 1.3.4.1.2.21.3.4.2.3 实验步骤1.3.4.2.3.1 样品制备组织匀浆样品:取一定量的所需脏器,生理盐水冲洗、拭干、称重、剪碎,置匀浆器中,加入0.2M磷酸盐缓冲液,以20000r/min匀浆10s,间歇30s,反复进行3次,制成10%组织匀浆(W/V, 3000r/min 离心5 —10min,取上清液待测。