分子生物学与基因工程复习资料
分子生物学复习资料
分子生物学复习资料分子生物学是研究生命体内分子结构和功能的一门学科，其研究范围包括基因表达和调控、蛋白质结构和功能、DNA重复和修复、细胞信号传递等多个方面。
以下是分子生物学复习资料，帮助大家复习此学科。
DNA1. DNA是双螺旋结构，由磷酸、核糖和四种碱基（腺嘌呤、胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶）组成。
2. DNA的复制包括三个步骤：解旋、合成和连接。
3. DNA合成是通过DNA聚合酶进行的，这些酶在模板链上添加互补碱基。
4. DNA可以通过DNA甲基化调节基因表达。
5. DNA可以被DNA锁蛋白等转录因子识别和结合。
RNA1. RNA是由核糖、磷酸和四种碱基 （腺嘌呤、尿嘧啶、胸腺嘧啶和鸟嘌呤）组成。
2. RNA主要分为三种类型：mRNA （信使RNA）、rRNA （核糖体RNA）和tRNA （转运RNA）。
3. 基因表达分为两个步骤：转录和翻译。
4. 转录过程分为三个步骤：启动、延伸和终止。
5. tRNA担任将氨基酸与相应的密码子匹配的角色。
蛋白质1. 蛋白质是由氨基酸组成的长链。
2. 氨基酸有20种类型，它们是由不同的侧链区分的。
3. 蛋白质折叠形态对其功能至关重要。
4. 蛋白质可以通过转录调节子的活性来控制基因表达。
5. 蛋白质可以通过磷酸化、甲基化和泛素化等方式进行修饰，从而调节其功能。
细胞信号传递1. 细胞信号传递是细胞中信号分子相互作用的过程。
2. 细胞信号分为内部信号和外部信号。
3. 细胞膜可以通过受体蛋白与外部信号相互作用。
4. 内部信号分子可以通过传递信号的级联反应来控制基因表达等生物过程。
5. 蛋白激酶和蛋白磷酸酶是关键的信号传递分子。
总结以上是分子生物学的复习资料，包括DNA、RNA、蛋白质和细胞信号传递等方面的知识点。
学习分子生物学需要积累大量的概念和实验技术，以便理解分子间相互作用和影响它们在细胞和生物中的功能。
希望此资料对大家的复习有所帮助。
分子生物学与基因工程复习题
一、名词解释1、分子生物学2、基因工程3、DNA的变性与复性4、细胞学说5、遗传密码的简并性6、DNA半保留复制、半不连续复制7、SD序列8、开放阅读框（ORF）9、多顺反子10、蓝白斑筛选11、中心法则12、限制修饰系统13、断裂基因14、单链结合蛋白15、核酶16、密码子家族17、TA克隆18、PCR19、SNP20、操纵子学说21、DNA重组技术22、减色效应-增色效应23、可变剪接24、反转录25、同尾酶26、加帽反应27、蓝白斑筛选28、表观基因组学29、DNA的溶解温度30、DNA的大C值31、重叠基因32、引物酶33、逆转录34、限制性内切酶35、载体的选择标记36、DNA甲基化37、端粒38、端粒酶39、前导链40、启动子41、反式作用因子42、同义密码子43、多克隆位点（MCS）44、基因组计划45、C值悖论46、顺式作用元件47、胸腺嘧啶二聚体48、寄主的限制修饰现象49、拓扑异构酶50、DNA的溶解51、拓扑异构体52、间隔基因53、假基因54、同源异型蛋白55、翻译56、多重PCR57、抗终止作用58、SD序列59、空载tRNA60、cDNA RACE61、分子杂交62、cDNA文库63、载体64、RT-PCR65、反义RNA66、延伸tRNA67、起始tRNA68、探针69、反式剪接70、增强子71、动物基因工程72、基因组73、限制性内切酶74、单顺反子75、密码子76、转录77、RNA干扰78、中心法则79、回环模型80、TATA box81、前导链82、目的基因83、RFLP84、RACE二、判断1、大肠杆菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。
( )2、DNA半保留复制时，后随链的总体延伸方向与先导链的延伸方向相反。
( )3、原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。
（）4、以一条亲代DNA(3’→ 5’)为模板时，子代链合成方向5’→ 3’，以另一条亲代DNA链5’→ 3’为模板时，子代链合成方向3’→ 5’。
分子生物学与基因工程
分子生物学与基因工程引言：分子生物学与基因工程是现代生物学领域中最为重要和前沿的研究方向之一。
分子生物学研究了生物体内分子的结构、功能和相互作用，而基因工程则利用分子生物学的原理和技术，对生物体内的基因进行操作和改造，以实现对生物体的控制和改良。
本教案将分为三个小节，分别探讨分子生物学的基础知识、基因工程的原理和应用以及分子生物学与基因工程在生物医学领域的应用。
第一小节：分子生物学的基础知识（700字左右）1. 分子生物学的起源和发展- DNA的发现和双螺旋结构的揭示- 中心法则的提出和基因的概念- 分子生物学的研究方法和技术的发展2. DNA的结构和功能- DNA的化学组成和结构特点- DNA的复制、转录和翻译过程- DNA的遗传信息传递和遗传变异3. RNA的结构和功能- mRNA、tRNA和rRNA的功能和作用- RNA的修饰和调控- RNA在基因表达中的重要性第二小节：基因工程的原理和应用（700字左右）1. 基因工程的基本原理- DNA的重组和修饰技术- 基因的克隆和表达- 基因组编辑和定点突变2. 基因工程在农业领域的应用- 转基因作物的培育和应用- 抗虫、抗病和耐逆性的改良- 农作物品质和产量的提高3. 基因工程在医学领域的应用- 基因治疗和基因药物的研发- 基因诊断和个性化医疗- 基因工程在疾病治疗中的前景第三小节：分子生物学与基因工程在生物医学领域的应用（700字左右）1. 基因组学和蛋白质组学的发展- 基因组学和蛋白质组学的研究方法和技术- 基因组学和蛋白质组学在疾病研究中的应用2. 疾病基因的发现和研究- 遗传性疾病的基因定位和克隆- 疾病相关基因的功能解析和调控机制研究- 基因工程在疾病治疗中的应用前景3. 基因工程在干细胞和再生医学中的应用- 干细胞的特性和应用前景- 基因工程在干细胞治疗和组织工程中的应用- 基因工程在器官移植和再生医学中的前景结语：分子生物学与基因工程作为现代生物学的重要分支，不仅推动了生物学的发展，也为人类社会的进步和生活质量的提高做出了巨大贡献。
精选分子生物学原理基因工程资料
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分子生物学原理
重组体的转化
• 转化：重组载体导入宿主后，利用宿主 的酶系统表达的过程。即改变宿主性状 的过程。
2019/6/29
分子生物学原理
基因工程的表达体系的发展
第一代 第二代 第三代 第四代
2019/6/29
载体
宿主
质粒、噬菌体 细菌
穿梭质粒
酵母
动 植 物 病 毒 、 组织培养细胞 昆虫载体 DNA 直 接 导 入 生 殖 细 胞
分子生物学原理
基因诊断和基因治疗
2019/6/29
分子生物学原理
基因工程产品的开发和应用
• 基因工程疫苗：安全廉价 乙肝疫苗、甲肝疫苗 巨细胞病毒、流行性出血热、轮状病毒、
• 基因工程生产激素类： 胰岛素、生长激素
• 细胞因子： 生长因子、肿瘤坏死因子、造血因子、 干扰素
2019/6/29
分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
• 灭活法 筛选重 组体。
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分子生物学原理
重组体的筛选与鉴定
提取转化细胞DNA
限制性内切酶
琼脂糖凝胶电泳
与原来载体及重组体比较
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分子生物学原理
DNA重组体的筛选与鉴定
硝酸纤维素滤膜
探针
平板
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菌落
X线底片
分子生物学原理
将细菌涨破。 2019/6/29
分子生物学原理
• 溶原 和裂 解可 以相 互转 变。
2019/6/29
整合
分子生物学原理
转导
• 溶原菌中 DNA可以原样地切离出来， 也可以把邻近的宿主DNA在切离时带走 一部分。后者称转导。
（完整版）分子生物学与基因工程复习资料
（完整版）分子生物学与基因工程复习资料分子生物学与基因工程绪论1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。
基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
2、分子生物学与基因工程的发展简史，特别是里程碑事件，要求掌握其必要的理由上个世纪50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型；60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型；70年代，Berg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子；80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术；90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，分子生物学进入“基因组时代”3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用。
核酸概述1、核酸的化学组成2、核酸的种类与特点：DNA和RNA的区别（1）DNA含的糖分子是脱氧核糖，RNA含的是核糖；（2）DNA含有的碱基是腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T），RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同，只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶（U）所代替；（3）DNA通常是双链，而RNA主要为单链；（4）DNA的分子链一般较长，而RNA分子链较短。
3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据；间接：（1）一种生物不同组织的细胞，不论年龄大小，功能如何，它的DNA含量是恒定的，而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。
多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的，但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。
（2）DNA在代谢上较稳定。
（3）DNA是所有生物的染色体所共有的，而某些生物的染色体上则没有蛋白质。
（4）DNA通常只存在于细胞核染色体上，但某些能自体复制的细胞器，如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。
分子生物学复习提纲
分子生物学复习提纲分子生物学复习提纲一、重组DNA技术1、基本概念1)DNA克隆：获得DNA相同副本或拷贝的过程。
2)基因工程：实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程，又称重组工艺学。
3)限制性核酸内切酶：是一类能识别双链DNA分子中的某些特定核苷酸序列，并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。
4)DNA载体：携带目的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。
5)DNA体外重组：在DNA连接酶的催化作用下，将外源DNA分子（目的基因）与载体DNA分子连接成一个重组分子的过程。
6)粘性末端：在双链DNA分子的末端，有一条链的3’或5’端比另一条链的3’或5’端要长，这样的双链DNA分子的末端称为粘性末端。
7)基因组DNA文库：存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所有基因组DNA的集合。
2、重组DNA技术的基本过程1)分2)切3)接4)转5)筛6)表达3、重组DNA技术中常用工具酶有哪些？各有什么特点和作用。
限制性核酸内切酶：识别特异序列，切割DNA。
DNA连接酶：催化DNA中相邻的5´磷酸基和3´羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA切口封合或使两个DNA分子或片段连接。
DNA聚合酶：以DNA为模板合成双链DNA分子。
4、作为基因工程载体所需具备的基本条件：1)能自主复制2)有多个单一酶切位点，称为多克隆位点（MCS），利于外源DNA分子插入3)具有两个以上的选择性遗传标记，便于重组体的筛选和鉴定4)分子量小，以容纳较大的外源DNA5)拷贝数高6)具有较高的遗传稳定性人工染色体载体包含的调控元件7、人工接头有什么特点？有什么用途？人工接头特点：有限制性核酸内切酶的酶切位点人工接头用途：在平末端上形成粘性末端8、宿主细胞应具备的条件1)处于感受态2)对载体无严格限制3)限制酶和重组酶缺陷4)不对外源DNA进行修饰5)能表达重组体所提供表型特征9、原核表达体系有什么特点？其优点：简单、迅速、经济、适合大规模生产。
基因工程复习资料
基因工程复习资料基因工程复习资料基因工程是一门涉及生物学、生物化学、遗传学和分子生物学等多个学科的综合性科学，它通过对生物体基因的操作和改造，实现对生物体性状的调控和改良。
本文将从基本概念、技术原理、应用领域和伦理道德等方面进行探讨。
一、基本概念基因工程是指通过对生物体基因进行操作和改造，实现对生物体性状的调控和改良的科学技术。
基因工程的核心是对基因的操作，包括基因的克隆、重组、突变等。
通过这些操作，可以使生物体获得新的性状，或者改良原有性状，从而实现对生物体的精准控制。
二、技术原理基因工程的技术原理主要包括基因克隆、基因重组和基因转导等。
基因克隆是指将感兴趣的基因从一个生物体中分离出来，并进行复制。
基因重组是指将不同来源的基因进行组合，形成新的基因组合。
基因转导则是将重组的基因导入到目标生物体中，使其表达出新的性状。
三、应用领域基因工程在农业、医学和环境保护等领域都有广泛的应用。
在农业方面，基因工程可以通过转基因技术改良农作物，使其具有抗虫、抗病、耐旱等性状，提高农作物的产量和品质。
在医学方面，基因工程可以用于疾病的基因诊断、基因治疗和基因药物的研发。
在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复，通过改造微生物的基因，使其能够降解有害物质，清除环境污染。
四、伦理道德基因工程的发展给人类带来了巨大的福祉，但也引发了一系列的伦理道德问题。
例如，转基因食品是否安全？基因编辑技术是否会导致基因歧视？这些问题都需要我们认真思考和探讨。
在推动基因工程的发展过程中，必须注重伦理道德的约束，确保科学的发展与社会的福祉相协调。
总结起来，基因工程是一门综合性科学，通过对生物体基因的操作和改造，实现对生物体性状的调控和改良。
它在农业、医学和环境保护等领域都有广泛的应用。
然而，基因工程的发展也引发了一系列的伦理道德问题，我们需要在科学发展的同时，注重伦理道德的约束，确保基因工程的应用符合社会的利益和道德准则。
分子生物学复习资料全
分子生物学复习资料全1. 概述- 分子生物学是研究生物体分子层面结构和功能的科学领域。
- 分子生物学主要关注DNA、RNA、蛋白质等生物分子的合成、结构和功能。
2. DNA- DNA是遗传物质，储存了生物体的遗传信息。
- DNA由核苷酸组成，包括脱氧核糖核苷酸和四种碱基：腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和鳕嘧啶。
- DNA的双螺旋结构由两条互补链以螺旋形式相互缠绕而成。
3. RNA- RNA在细胞中起着重要的生物学功能。
- RNA由核苷酸组成，包括核糖核苷酸和四种碱基：腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶和胞嘧啶。
- RNA分为多种类型，包括mRNA、tRNA和rRNA等。
4. 蛋白质合成- 蛋白质合成是通过转录和翻译两个过程完成的。
- 转录是将DNA转录成mRNA的过程。
- 翻译是将mRNA翻译成蛋白质的过程。
5. 基因调控- 基因调控是控制基因表达水平的过程。
- 基因调控包括转录因子的结合、DNA甲基化和染色质重塑等。
6. 克隆技术- 克隆技术是复制生物体基因或DNA序列的方法。
- 主要克隆技术包括限制性内切酶切割、聚合酶链式反应和DNA串联。
7. PCR- PCR是一种通过体外扩增DNA片段的技术。
- PCR包括三个步骤：变性、退火和延伸。
8. 分子遗传学- 分子遗传学研究基因在遗传传递中的分子机制。
- 分子遗传学主要研究基因突变、基因重组和基因表达等。
9. DNA测序- DNA测序是确定DNA序列的方法。
- DNA测序技术包括Sanger测序和高通量测序等。
10. 基因工程- 基因工程是利用DNA技术修改或转移基因的技术。
- 基因工程在农业、医药和生物学研究等领域有着广泛的应用。
以上是关于分子生物学的简要复习资料，希望能对你的学习有所帮助。
分子生物学考试复习题及答案
分⼦⽣物学考试复习题及答案第⼀章绪论⼀．简述分⼦⽣物学的主要内容。
1.DNA重组技术（⼜称基因⼯程）2.基因表达调控研究3.⽣物⼤分⼦的结构功能的研究——结构分⼦⽣物学4.基因组、功能基因组与⽣物信息学研究⼆．什么是遗传学的中⼼法则和反中⼼法则？遗传学中⼼法则：描述从⼀个基因到相应蛋⽩质的信息流的途径。
遗传信息贮存在DNA中，DNA被复制传给⼦代细胞，信息被拷贝或由DNA转录成RNA，然后RNA翻译成多肽。
反中⼼法则：由RNA逆转录到DNA，再由DNA转录到RNA，然后RNA翻译成多肽、蛋⽩质。
第⼆章染⾊体与DNA⼀、名词解释半保留复制：DNA复制时，以亲代DNA的每⼀条链作为模版，合成完全相同的两个双链⾃带DNA分⼦，每个⼦代DNA分⼦中都含有⼀条亲代DNA链的复制⽅式。
冈崎⽚段：在DNA复制过程中，前导链能连续合成，⽽滞后链只能是断续的合成5 3 的多个短⽚段，这些不连续的⼩⽚段称为冈崎⽚段。
复制⼦：从复制原点到终点，组成⼀个复制单位，叫复制⼦。
插⼊序列：最简单的转座⼦，不含有任何宿主基因，它们是细菌染⾊体或质粒DNA的正常组成部分。
DNA的变性和复性：变性：指DNA双链的氢键断裂，完全变成单链。
复性：指热变性的DNA缓慢冷却，单链恢复成双链。
双向复制：复制从⼀个固定的起始点开始，同时向两个⽅向等速进⾏。
引物酶：⼀种特殊的RNA聚合酶，在DNA模版上合成⼀段RNA链，这段RNA链是DNA复制起始时必需的引物。
转座⼦：存在与染⾊体DNA上可⾃主复制和位移的基本单位。
碱基切除修复：⾸先由糖苷⽔解酶识别特定受损核苷酸上的N-β糖苷键，在DNA上形成AP位点，由AP核酸内切酶把受损的核苷酸的糖苷-磷酸键切开，移去包括AP位点在内的⼩⽚段DNA，由聚合酶Ⅰ合成新⽚段，DNA连接酶最终把两者连接成新的DNA链。
DNA重组修复：即“复制后修复”。
机体细胞对在复制起始时尚未修复的DNA部位可先复制再修复。
在复制时，先跳过损伤部位，在和成链中留下⼀个缺⼝。
分子生物学与基因工程复习提纲
分子生物学与基因工程复习提纲第一章绪论1、分子生物学简史理论上的三大发现生物的遗传物质是DNADNA双螺旋模型遗传信息的传递方式技术上的三大发现基因操作的工具酶的发现载体的应用逆转录酶的发现2、证明遗传物质是DNA的三大经典实验肺炎双球菌转化实验噬菌体感染实验病毒重建实验3、1953年，Watson/Crick 提出了DNA双螺旋结构模型。
4、遗传信息的传递方式的发现1961 年Monod 和Jacob 提出了操纵子学说；1964 年Nirenberg 等提出了“三联体密码说”；Crick 提出了遗传信息流向和表达的中心法则。
5、限制性核酸内切酶的定义、特点以及在基因工程中的意义；DNA连接酶6、克隆载体和表达载体第二章染色体与DNA1、核酸、核苷酸、核苷、碱基、嘌呤、嘧啶、DNA、RNA、磷酸二酯键2、染色体、核小体、组蛋白、非组蛋白3、基因组大小与C值矛盾、重复序列4、真核基因组结构的特点；与原核基因组的差异5、DNA双螺旋结构的要点、氢键、碱基堆集力、A、B、Z型结构6、超螺旋结构、正/负超螺旋7、DNA复制、半保留复制、半不连续复制、冈崎片段、拓扑异构酶、Klenow片段8、真核生物DNA复制的特点9、转座、转座子、转座子的分类和共同特点、转座的遗传效应第三章RNA合成1、转录、转录泡、有义链、反义链、RNA聚合酶2、启动子、终止子、增强子、依赖ρ因子的终止、不依赖ρ因子的终止3、原核生物转录的过程4、真核生物mRNA转录后的加工5、真核生物成熟mRNA的结构特点第四章蛋白质的合成1、遗传密码、密码子、反密码子、密码子偏好性、简并性2、起始密码子：AUG 终止密码子：UAA、UAG、UGA3、错义突变、无义突变、同义突变、移码突变4、tRNA的结构：两个关键部位3ˊ端CCA：接受氨基酸，形成氨酰-tRNA；与mRNA的结合部位—反密码子。
5、SD序列、反SD序列6、蛋白质合成过程（翻译的过程）7、蛋白质转运的机制、信号肽第五章基因表达调控1、基因组、管家基因、组成性表达、可诱导基因（奢侈基因）、诱导、阻遏2、操纵子、顺势作用元件、反式作用因子3、原核生物基因调控模型乳糖操纵子调控的机制：阻遏蛋白负调控以及CAP正调控色氨酸操纵子调控的机制：反馈抑制和衰减子调控4、RNA干扰、小干扰RNA（siRNA）、微小RNA (miRNA)第六章基因工程的酶学基础1、限制性内切酶、DNA连接酶、DNA聚合酶和反转录酶、DNA修饰酶、外切核酸酶、单链内切核酸酶、RNA酶2、回文序列、II型限制性内切酶、粘性末端、同工酶、同尾酶、同裂酶3、TaqDNA聚合酶的特点以及在PCR中的应用第七章基因工程载体1、载体、克隆载体、表达载体2、质粒、噬菌体、柯斯质粒、酵母人工染色体、细菌人工染色体3、标记基因（报告基因）、插入失活、α-互补、蓝白斑筛选4、质粒作为基因工程载体的优点5、碱变性抽提法提取质粒的原理6、穿梭载体第八章基因操作的主要技术原理1、提取核酸的一般程序2、碱变性法提取质粒DNA的步骤3、核酸浓度与纯度测定的方法：紫外吸收4、核酸电泳：琼脂糖电泳、脉冲场凝胶电泳第九章目的基因的获取1、PCR的原理和步骤2、基因组文库、cDNA文库、鸟枪法、DNA化学合成第十章基因工程的操作过程1、表达载体的结构特征2、将目的基因导入受体：植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法动物：显微注射法微生物：化学转化法、电转化法3、重组子筛选：双抗生素法、蓝白斑筛选4、重组子鉴定：核酸分子杂交法裂解细菌电泳鉴定分子大小限制性内切酶法PCR法基因产物检测法序列分析5、Northern杂交、Southern杂交、Western Blot、Elisa（酶联免疫吸附）第十一章基因工程的应用1、植物基因工程2、动物基因工程3、基因工程药物4、基因治疗5、基因工程与环保第十二章基因工程及其产品安全性管理1、基因工程产品对人类健康的影响2、基因工程产品对生态系统的影响3、基因工程生态安全性评价的指标复习题：简答题：1、分子生物学历史上，具有重要意义的理论上和技术上的三大发现分别是什么？2、什么叫转座子？列举转座子的类型及其共同特点。
第1章-分子生物学与基因工程绪论
采用几种限制性内切酶组合可以使DNA分 子产生特定的片段.
– e.g. EcoRI + HindIII
DNA连接酶(DNA ligase )
1967年在三个实验室同时发现的。 活性：封闭DNA链上缺口，借助ATP或
NAD水解提供的能量催化DNA链的5’PO4与另一DNA链的3’-OH生成磷酸二 酯键。 要求：这两条链必须是与同一条互补链 配对结合的(T4DNA连接酶除外)，而且 必须是两条紧邻DNA链才能被DNA连接 酶催化成磷酸二酯键。
分子生物学的研究内容
DNA重组技术 基因表达调控研究 生物大分子的结构功能研究——结构
分子生物学 基因组、功能基因组与生物信息学研
究
基因工程（DNA重组技术）
将不同的DNA片段按照人们的设计定 向连接起来，在特定细胞中复制、表 达，产生影响受体细胞的新的遗传性 状
DNA重组技术是核酸化学、蛋白质化 学、酶工程及微生物学、遗传学、细 胞学长期深入研究的结晶，限制性内 切酶、DNA连接酶及其它工具酶发现 与应用则是这一技术得以建立的关键。
DNA双螺旋结构模型的意义
DNA双螺旋模型结构同时表明了DNA复制的明显方式— —碱基互补配对原则上的半保留复制。
提示了基因和多肽成线性对应的一个可能理由：DNA核 苷酸顺序规定该基因编码蛋白质的氨基酸顺序；DNA中 的遗传信息就是碱基序列；并存在某种遗传密码，将核 苷酸序列译成蛋白质氨基酸顺序。
鲍林研究小组 威尔金斯、富兰克林研究小组 沃生、克里克研究小组
鲍林(Pauling)研究小组
主要工作： – 鲍林等1951年(提出蛋白质α-螺旋模型后)开始研究DNA 分子结构。
分子生物学与基因工程主要知识点
分子生物学与基因工程复习重点第一讲绪论1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。
基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
2、分子生物学与基因工程的发展简史，特别是里程碑事件，要求掌握其必要的理由上个世纪50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型；60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型；70年代，Berg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子；80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术；90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，分子生物学进入“基因组时代”；目前，分子生物学进入了“后基因组时代”或“蛋白质组时代”。
3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用：从专业基础课角度阐述对专业课程的支撑作用第二讲核酸概述1、核酸的化学组成（图画说明）2、核酸的种类与特点：DNA和RNA的区别（1）DNA含的糖分子是脱氧核糖，RNA含的是核糖；（2）DNA含有的碱基是腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T），RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同，只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶（U）所代替；（3）DNA通常是双链，而RNA主要为单链；（4）DNA的分子链一般较长，而RNA分子链较短。
3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据；间接：（1）一种生物不同组织的细胞，不论年龄大小，功能如何，它的DNA含量是恒定的，而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。
多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的，但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。
（2）DNA在代谢上较稳定。
分子生物学复习资料-绝对重点
分子生物学复习资料（第一版）一名词解释1 Southern blot / Northern blot—DNA斑迹法 / RNA转移吸印技术。
是为了检测待检基因或其表达产物的性质和数量（基因拷贝数）常用的核酸分子杂交技术。
二者均属于印迹转移杂交术，所不同的是前者用于检测DNA样品；后者用于检测RNA样品。
2 cis-acting element / trans-acting factor—顺式作用元件 / 反式作用因子。
均为真核生物基因中的转录调控序列。
顺式作用元件是与结构基因表达调控相关、能被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定DNA序列，包括启动子和上游启动子元件、增强子、反应元件和poly（A）加尾信号。
反式作用因子是能与顺式作用元件特异性结合、对基因表达的转录起始过程有调控作用的蛋白质因子，如RNA 聚合酶、转录因子、转录激活因子、抑制因子。
3VNTR / STR—可变数目串联重复序列 / 短串联重复。
均为非编码区的串联重复序列。
前者也叫高度可变的小卫星DNA，重复单位约9～24bp,重复次数变化大,变化高度多态性；后者也叫微卫星DNA，重复单位约2～6 bp，重复次数约10～60次，总长度通常小于150bp 。
（参考第7题）4 viral oncogene / cellular oncogene—病毒癌基因 / 细胞癌基因。
病毒癌基因指存在于逆转录病毒中、体外能使细胞转化、体内能导致肿瘤发生的基因；细胞癌基因也叫原癌基因，指存在于细胞内，与病毒癌基因同源的基因序列。
正常情况下不激活，与细胞增殖相关，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。
当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。
第1 页/共16 页5 ORF / UTR—展开阅读框 / 非翻译区。
均指在mRNA中的核苷酸序列。
前者是特定蛋白质多肽链的序列信息，从起始密码子开始到终止密码子结束，决定蛋白质分子的一级功能；后者是位于前者的5＇端上游和3＇端下游的、没有编码功能的序列，主要参加翻译起始调控，为前者的多肽链序列信息改变为多肽链所必须。
分子生物学与基因工程 补考复习题
一、单项选择题1、证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎链球菌在老鼠体内的毒性和 T2 噬菌体感染大肠杆菌。
这两个实验中主要的论点证据是： (C)(a)从被感染的生物体内重新分离得到DNA，作为疾病的致病剂(b)DNA突变导致毒性丧失(c)生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能(d)DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子2、1953年Watson和Crick提出：(A)（a）多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋（b）DNA的复制是半保留的，常常形成亲本—子代双螺旋杂合链（c）三个连续的核苷酸代表一个遗传密码（d）遗传物质通常是DNA 而非RNA3、下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述(B)（a）σ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物（b）全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物（c）三个全酶在转录起始点形成的复合物（d）σ因子、核心酶和促旋酶形成的复合物4、与pCAGCT互补的DNA序列是：（A）A.pAGCTGB.pGTCGAC.pGUCGAD.pAGCUGE.pTCGAC5、色氨酸操纵子的调控需要：（C）A.增强子B.转录子C.衰减子D.顺反子E.调节子6、下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码：（A）A.甲硫氨酸B.S-腺苷蛋氨酸C.苯丙氨酸D.丙氨酸E.以上都不是，而是TAG7、真核生物基因组中没有：A.内含子B.外显子C.转录因子D.插入序列E.高度重复序列8、DNA的半保留复制需要（E）A.核心酶和单链DNA结合蛋白B.模板 DNA和四种 NTPC.引物和RNA聚合酶D.DNA引物和连接酶E.冈崎片段和终止因子9、在乳糖操纵子中，阻遏蛋白结合的是：（A）A.操纵基因B.调节基因C.启动基因D.结构基因E.终止基因10、氨基酸活化酶：A.能识别一组同功tRNAB.催化磷酸二酯键的形成C.催化氨基酸结合到 tRNAD.催化氨基酸的氨基与tRNA结合E.催化氨基酸的羧基与GTP反应11. 细菌培养物中某种质粒的存在通常用来确定。
分子生物学基因工程生物化学复习题
1、蛋白质分子（多肽链）的方向性（即：N末端和C末端）是如何确定的？答：由肽键决定即通过氨基酸NH2和氨基酸COOH的脱水缩合，形成了N末端在左，C末端在右2、什么是多肽链的肽平面？什么是二面角？答：肽平面：肽键具有一定程度的双键性质，参与肽键的六个原子C、H、O、N、C1、C2不能自由转动，位于同一平面。
二面角：一个碳原子相连的两个肽平面，由于N1—C1和C1—C2（羧基碳）两个键为单键。
肽平面可以分别围绕这两个键旋转，从而构成不同的构象。
3、维持蛋白质分子的三级结构有哪几种力？次级键包括哪几种？答：二硫键、（氢键疏水性相互作用力、离子键、范德法力。
）第二小题4、如何将蛋白质变性？如何复性？答：加热、加乙醇等有机溶剂、强酸、强碱、重金属离子及生物碱试剂等；去除上述因素，若变性程度较轻即可复性。
5、伴侣分子有哪两种类型？其功能如何？答：分子伴侣和伴侣蛋白；辅助新生肽链折叠的，催化对形成功能所必需的共价键盘变化6、人热休克蛋白在新生蛋白质折叠过程的作用是什么？答：辅助新生肽链正确折叠7、膜蛋白分为哪两种类型？它们各通过何种化学键与膜相结合？答；外周膜蛋白和内在膜蛋白。
1）共价键2）疏水性相互作用力8、疯牛病得病因是什么？蛋白质构象发生改变而凝集使其由可溶性变成不可溶性。
9、蛋白质翻译后需要进行哪些形式的加工才能具有活性？肽键N末端甲硫氨酸残基的切除，蛋白质前体的酶切修饰以及氨基残基侧链基团的化学修饰。
10、胃和胰腺分泌的消化蛋白酶的酶原如何加工才能具有活性？酶切加工11、什么是蛋白质的可逆磷酸化？蛋白质的磷酸化和去磷酸化分别由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化完成。
12、什么是蛋白质的靶向输送？靶向输送的蛋白质的N端通常有何序列？定向动送送执行功能的目的地的过程；信号肽13、何谓‘信号肽’？其结构特点是什么？信号肽：分泌蛋白新生肽段N端的一段能被细胞转动系统识别的特征性的序列。
特点：该序列约为16~30个氨基酸残基分为N端碱性区、疏水核心区及加工区三个区段，紧接其后的是被信号肽酶裂解的点。
(完整版)分子生物学与基因工程原理
分子生物学与基因工程原理复习资料一、名词解释1。
分子生物学：是研究核酸、蛋白质等生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学；是人类从分子水平上真正揭开生物世界的奥秘，由被动地适应自然界转向主动地改造和重组自然界的基础学科。
2。
染色体:是细胞在有丝分裂时遗传物质存在的特定形式，是间期细胞染色质结构紧密包装的结果。
3.DNA多态性：是指DNA序列中发生变异而导致的个体间核苷酸序列的差异，主要包括单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）和串联重复序列多态性（tandem repeats polymorphism）两类.4.DNA的半保留复制：DNA复制过程中,由亲代DNA生成子代DNA时，每个新形成的子代DNA中，一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式称半保留复制。
5.冈崎片段：在DNA复制过程中,前导链能连续合成,而滞后链只能是断续的合成5®¢3¢的多个短片段，这些不连续的小片段称为冈崎片段。
6.SNP：single nucleotide polymorphism，单核苷酸多样性,是基因组DNA序列中单个核苷酸的突变引起的多态性。
7。
“基因”的分子生物学定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核甘酸序列。
8。
获得性遗传：是有机体在生长发育过程中由于环境的影响而不是基因突变所形成的新的遗传性状。
9。
DNA甲基化:是基因的表观修饰方式之一,指生物体在（DNA methyltransferase，DNMT)的催化下，以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,将甲基转移到特定的碱基上的过程。
10。
cDNA文库:以mRNA为模板，经反转录酶催化，体外合成cDNA，与适当的载体(常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA,并能繁殖扩增。
这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞cDNA文库。
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分子生物学与基因工程绪论1、分子生物学与基因工程的含义从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。
基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
2、分子生物学与基因工程的发展简史，特别是里程碑事件，要求掌握其必要的理由上个世纪50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型；60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型；70年代，Berg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子；80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术；90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，分子生物学进入“基因组时代”3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用。
核酸概述1、核酸的化学组成2、核酸的种类与特点：DNA和RNA的区别（1）DNA含的糖分子是脱氧核糖，RNA含的是核糖；（2）DNA含有的碱基是腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T），RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同，只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶（U）所代替；（3）DNA通常是双链，而RNA主要为单链；（4）DNA的分子链一般较长，而RNA分子链较短。
3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据；间接：（1）一种生物不同组织的细胞，不论年龄大小，功能如何，它的DNA含量是恒定的，而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。
多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的，但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。
（2）DNA在代谢上较稳定。
（3）DNA是所有生物的染色体所共有的，而某些生物的染色体上则没有蛋白质。
（4）DNA通常只存在于细胞核染色体上，但某些能自体复制的细胞器，如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。
（5）在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。
直接：肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验4、DNA的变性与复性：两者的含义与特点及应用变性：它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上（接近100ºC）时，它就失去生理活性。
这时DNA双股链间的氢键断裂，最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。
简而言之，就是DNA从双链变成单链的过程。
增色效应：它是指在DNA的变性过程中，它在260 nm的吸收值先是缓慢上升，到达某一温度后即骤然上升的效应。
复性：它是指热变性的DNA如缓慢冷却，已分开的互补链又可能重新缔合成双螺旋的过程。
复性的速度与DNA的浓度有关，因为两互补序列间的配对决定于它们碰撞频率。
DNA复性的应用-分子杂交：由DNA复性研究发展成的一种实验技术是分子杂交技术。
杂交可发生在DNA和DNA或DNA与RNA间。
5、Tm的含义与影响因素Tm的含义：是指吸收值增加的中点。
影响因素：1）DNA序列中G + C的含量或比例含量越高，Tm值也越大（决定性因素）；2）溶液的离子强度3）核酸分子的长度有关：核酸分子越长，Tm值越大4）某些化学物质5）溶液pH值6、DNA的一级结构的含义与特点，包括化学本质7、DNA双螺旋模型的发现过程、基本内容与生物学意义（1）两条多核苷酸链以右手螺旋的形式彼此以一定的空间距离，平行地环绕于同一轴上；（2）两条多核苷酸链走向为反向平行，即一条链磷酸二酯键为5’－3’方向，而另一条为3’一5’方向，二者刚好相反；（3）每条长链的内侧是扁平的盘状碱基，碱基一方面与脱氧核糖相联系，另一方面通过氢键与它互补的碱基相联系。
互补碱基对A与T之间形成两对氢键，而C与G之间形成三对氢键。
上下碱基对之间的距离为0.34nm；（4）每个螺旋为3.4nm长，刚好含有10个碱基对，其直径约为2nm；（5）在双螺旋分子的表面大沟和小沟交替出现。
3、DNA精细结构的含义与重要参数（1）依赖于序列的B-DNA构象变化；（2）连续AT序列的构象；（3）含错配碱基对的B-DNA；（4）DNA的局部构象与DNA结合蛋白4、DNA超螺旋结构的形成与鉴定超螺旋DNA可采取两种拓扑学上相当的形式。
一种相当于双螺旋绕圆柱体旋转；另一种相当于双螺旋相互盘绕。
超螺旋的这两种形式可以相互转变。
天然的DNA都呈负超螺旋，但在体外可得正超螺旋5、DNA不寻常结构有哪些，有何作用？交替的嘧啶、嘌呤重复序列倾向形成Z-DNA反向重复序列倾向形成十字形结构构成镜像重复的同型嘧啶-同型嘌呤序列可能形成三链结构：在形成三链DNA过程中游离出来的多聚嘌呤链则保持单链状态。
故三链DNA对S1核酸酶的作用敏感。
由于三链DNA含有镜像重复，故可形成两种异构体：一是多聚嘌呤链的5’部分成单链；另一是3’部分成单链。
富含G的序列可能形成四链结构：端粒DNA的序列具有一定的取向特征。
在每一染色体末端，富含G的一股链由5’向3’-末端延伸，并突出于互补的富含C一股链12～16核苷酸。
染色体的末端与特定的蛋白质形成复合物。
染色体与基因组的结构1、真核生物染色体的结构，包括基本单元的化学组成染色体是由染色质构成的，染色质是由DNA、RNA和蛋白质形成的复合体。
染色体是动态的物体，其外观随细胞周期的不同阶段发生明显的改变。
仅当细胞分裂时，每个染色体才呈现出凝聚型。
（1）组蛋白：组蛋白在翻译后是受到修饰的，其中包括特异精、组、赖、丝和苏氨酸残基的甲基化、乙酰基化和磷酸化（2）核小体（3）30 nm 纤丝（4）辐射的环2、真核生物基因组的C值与特点在真核生物中，每种生物的单倍体基因组的DNA总量是恒定的，称之为C值。
3、基因组中DNA的大小、形状与序列组织：包括卫星DNA和微卫星DNA的含义DNA一般为长而无分支的双股线性分子，但有些为环型，也有少数为单股环型。
不同的DNA大小相差悬殊。
例如，SV40含 5.1 kb，而南美肺鱼的基因组含102 000 000 kb。
虽然一般而言，复杂的有机体需要更多的DNA，但不存在严格的对应关系。
真核生物DNA碱基组成上的异质性主要由于存在着以下3类DNA序列：①高度重复序列；②中度重复序列；③单一序列。
4、真核生物的基因组特点（与原核生物比较）真核生物基因组与原核生物的相比，主要有以下几方面的差异（特点）：（1）分布部位（2）基因特性（3）遗传信息的传递过程（4）自身的复制过程蛋白质的结构与功能1、蛋白质的含义蛋白质一词最早来自希腊语“proteios”，其含义为“第一重要的”。
现代科学研究表明，蛋白质是由20种左右的 -氨基酸通过肽键相互连接而成的一类具有特定的空间构象和生物学功能的高分子有机化合物。
1、二十种氨基酸的英文简称，要求掌握一个字母的含义1、蛋白质一级结构的含义它是指蛋白质多肽链中氨基酸残基的排列顺序，也是蛋白质最基本的结构。
它是由基因上遗传密码的排列顺序所决定的。
各种氨基酸按遗传密码的顺序，通过肽键连接起来，成为多肽链，故肽键是蛋白质结构中的主键。
2、蛋白质二级结构的类型，包括阿尔法结构与DNA双螺旋的异同点α-螺旋、β-折迭、β-转角、无规则卷曲（填空题）（1）多个肽键平面通过α-碳原子旋转，相互之间紧密盘曲成稳固的右手螺旋；（2）主链呈螺旋上升，每3.6个氨基酸残基上升一圈，相当于0.54nm，这与X衍射图符合；（3）相邻两圈螺旋之间借肽键中C＝O和硫氢基形成许多链内氢健，即每一个氨基酸残基中的NH和前面相隔三个残基的C＝O之间形成氢键，这是稳定α-螺旋的主要键；（4）肽链中氨基酸侧链R分布在螺旋外侧，其形状、大小及电荷影响α-螺旋的形成。
酸性或碱性氨基酸集中的区域，由于同电荷相斥，不利于α-螺旋形成；较大的R(如苯丙氨酸、色氨酸、异亮氨酸)集中的区域，也妨碍α-螺旋形成；脯氨酸因其α-碳原子位于五元环上，不易扭转，加之它是亚氨基酸，不易形成氢键，故不易形成上述α-螺旋；甘氨酸的R基为H，空间占位很小，也会影响该处螺旋的稳定。
1、蛋白质结构与功能的关系（1）蛋白质一级结构与功能的关系：蛋白质一级结构是空间结构的基础，特定的空间构象主要是由蛋白质分子中肽链和侧链R基团形成的次级键来维持，在生物体内，蛋白质的多肽链一旦被合成后，即可根据一级结构的特点自然折叠和盘曲，形成一定的空间构象。
（2）蛋白质空间构象与功能活性的关系：蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关，蛋白质的空间构象是其功能活性的基础，构象发生变化，其功能活性也随之改变。
蛋白质变性时，由于其空间构象被破坏，故引起功能活性丧失，变性蛋白质在复性后，构象复原，活性即能恢复。
血红蛋白是红细胞中所含有的一种结合蛋白质，它的蛋白质部分称为珠蛋白，非蛋白质部分(辅基)称为血红素（x）DNA复制1、一些基本概念：复制子、复制单元、复制起始点、半保留复制、半不连续复制、前导链、随后链、冈崎片段。
DNA在复制时首先两条链之间的氢键断裂使两条链分开，然后以每一条链分别做模板各自合成一条新的DNA链，这样新合成的子代DNA分子中一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式为半保留复制。
连续合成的链比不连续合成的链超前一步，称为前导链。
2、不连续合成的链要滞后一步，称为后随链。
前导链连续复制和后随链的不连续复制，称为DNA的半不连续复制。
随从链的前进方向是与复制叉的打开方向相反的。
随从链只能先以片段的形式合成，这些片段就叫做冈崎片段。
复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫做复制起始点。
生物体的单个复制单位称为复制子。
1、要求掌握DNA定点双向复制4、单链结合蛋白的作用它与解开的单链DNA结合，使其稳定不会再度螺旋化并且避免核酸内切酶对单链DNA的水解，保证了单链DNA做为模板时的伸展状态，SSBP可以重复利用。
5、DNA复制的酶学基础及原核生物复制的一般过程，包括DNA复制前导链和随后链的起始、延长和终止6、真核生物DNA复制的特点（1）与原核生物不同，真核生物DNA复制有许多起始点（2）在真核生物DNA复制叉处，需要两种不同的酶。
（3）由于真核生物染色体是线性DNA，它的两端叫做端区，端区是由重复的寡核苷酸序列构成的。
（4）真核生物具有多重复制原点，原核生物只有一个。
RNA生物合成及其加工1、一些基本概念：不对称转录、编码链（信息链）、模板链、启动子、转录因子在DNA的两条多苷酸链中只有其中一条链作为模板，这条链叫做模板链，又叫反义链。
DNA双链中另一条不做为模板的链叫做编码链，又叫有意义链。
编码链的的序列与转录本RNA的序列相同，只是在编码链上的T在转录本RNA为U，由于RNA的转录合成是以DNA的一条链为模板而进行的，所以这种转录方式又叫做不对称转录。