复红染色液配制
常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
常用染色液的配制
常用染色液的配制1.染料饱和酒精溶液的配制配制染色液常先将染料配成可长期保存的饱和酒精溶液,用时再予以稀释配制。
配制饱和酒精溶液,应先用少量95%酒精先在研钵中徐徐研磨,使染料充分溶解,再按其溶解度加于95%酒精之中,贮存于棕色瓶中即可。
附表1 几种常用染料在95%酒精中的溶解度(26℃)染料名称美蓝结晶紫龙胆紫碱性复红沙黄溶100mL95%酒精中的重量(g) 1.4813.8710.003.203.412.常用染色液的配制(1)碱性美蓝(亦称骆氏美蓝)染色液:取美蓝饱和酒精溶液30ml,加入0.01%氢氧化钾水溶液l00mL,混合即成。
此染色液在密闭条件下可保存多年。
若将其在瓶中贮至半满,松塞棉塞,每日拔塞摇振数分钟,并不时加水补充失去的水分,约1年后可获得多色性,成为多色美蓝染色液。
(2)草酸铵结晶紫(亦称赫克结晶紫)染色液:取结晶紫饱和酒精溶液2mL,加蒸馏水18mL稀释10倍,再加入1%草酸铵水溶液80mL,混合过滤即成。
(3)革兰氏碘溶液:将碘化钾2g置乳钵中,加蒸馏水约5mL。
再加入碘片1g,予以研磨,并徐徐加水,至完全溶解后,注入瓶中,被加蒸馏水至全量为300mL即成。
此液可保存半年以上,当产生沉淀或褪色后即不能再用。
(4)沙黄水溶液:沙黄也称番红花红。
将沙黄饱和酒精溶液以蒸馏水稀释10倍即成。
此液保存期以不超过4个月为宜。
(5)石炭酸复红染色液:取3%复红酒精溶液10mL,加入5%石炭酸水溶液90mL混和过滤即成。
(6)稀释石炭酸复红染色液:将石炭酸复红染色液以蒸馏水稀释10倍即成。
(7)3%盐酸酒精(亦称含酸酒精):加浓盐酸3mL于95%酒精97mL中即成。
(8)瑞士染色色液:取瑞氏染料0.1g置乳钵中,徐徐加入甲醇,研磨以促其溶解。
将溶液倾入有色中性玻瓶中,并数次以甲醇洗涤乳钵,亦倾入瓶内,最后使全量为60mL即可。
将此瓶置暗处过夜,次日滤过即成。
此染色液须置于暗处,其保存期约为数月。
染色液配制方法
常用染色液的配制1.骆氏美蓝染色液甲液:美蓝0.3g 95%酒精溶液 30ml乙液:0.01%氢氧化钠溶液 100ml甲液与乙液相混合即成。
2.1%美蓝酒精溶液美蓝1g 95%酒精溶液 100ml,充分混合溶解即可。
3.革兰氏染色液(1)草酸铵结晶紫染液甲液:结晶紫2.0g 95%酒精20ml乙液:草酸铵0.8g 蒸馏水80ml用时先以蒸馏水将甲液稀释5倍,然后加20ml于80ml乙液中,混合即成。
(2)革兰氏碘溶液碘片 1g 碘化钾 2g蒸馏水 300ml先将碘化钾置于干净的乳钵中,加入蒸馏水少许(约5ml),待碘化钾完全溶解后,再加入碘片,略作研磨,使碘片完全溶解,然后徐徐加水,充分混合,直至足量。
切忌将碘片与碘化钾一起直接加入瓶中,一次加水配制。
否则,碘片往往不能完全溶解而影响碘的浓度。
(3)95%酒精(4)复染色液可用碱性复红或沙黄液及稀释的石炭酸复红液。
碱性复红液:碱性复红0.1g 蒸馏水100ml,混合即成。
沙黄液:3.41%沙黄酒精溶液10ml、蒸馏水90ml。
稀释石炭酸复红液:石炭酸复红液10ml、蒸馏水90ml,混合即成。
4.抗酸染色液(1)石炭酸复红液 3%碱性复红酒精溶液10ml、5%石炭酸水溶液90ml,二液混合即成。
(2)盐酸酒精溶液浓盐酸3ml、95%酒精溶液97ml,二液混合即成。
5.瑞氏染色液瑞氏染料粉0.1g、纯甘油1.0ml、中性甲醇60ml。
置染料粉于乳钵中,加入甘油,充分研磨,再徐徐加入甲醇,边研磨边搅拌,促其溶解,然后盛于棕色瓶中,置暗处过夜,次日以滤纸滤过后,仍盛于棕色瓶中,保存于暗处备用。
磷酸盐缓冲液:溶液一:Na2HPO4.12H2O(磷酸二氢钠)23.864g、蒸馏水1000ml。
溶液二:KH2PO4(磷酸二氢钾)9.078g、蒸馏水1000ml。
用时以溶液一4份与溶液二1份混合即成。
6.姬姆萨氏染色液取姬姆萨氏染料粉0.6g,加入甘油50ml,置于55—60度温度中1.5—2h,再加入甲醇50ml,静置一日以上,滤过后即可作染料原液用。
实验用染色液的配制
实验用染色液的配制1.黑色素液水溶性黑素10g,蒸馏水100mL, 甲醛(福尔马林)0.5mL。
可用作荚膜的背景染色。
2.墨汁染色液国产绘图墨汁40mL,甘油2mL,液体石炭酸2mL。
先将墨汁用多层纱布过滤,加甘油混匀后,水浴加热,再加石炭酸搅匀,冷却后备用。
用作荚膜的背景染色。
3.吕氏(Loeffier)美蓝染色液A液:美蓝(methylene blue, 又名甲烯蓝)0.3g, 95%乙醇30mL;B液:0.0l% KOH l00mL。
混合A液和B液即成,用于细菌单染色,可长期保存。
根据需要可配制成稀释美蓝液,按1:10或1:100稀释均可。
4.革兰氏染色液(1)结晶紫(crystal violet)液:结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL,1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。
此液不易保存,如有沉淀出现,需重新配制。
(2)卢戈(Lugol)氏碘液:碘1g,碘化钾2g,蒸馏水300mL。
先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,然后加入碘使之完全溶解,再加蒸馏水至300mL即成。
配成后贮于棕色瓶内备用,如变为浅黄色即不能使用。
(3)95%乙醇:用于脱色,脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。
(4)稀释石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和液(碱性复红1g, 95%乙醇l0mL, 5%石炭酸90mL混合溶解即成碱性复红乙醇饱和液),取石炭酸复红饱和液l0mL加蒸馏水90mL即成。
(5)番红溶液:番红O(safranine,又称沙黄O)2.5g, 95%乙醇100mL,溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中,用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。
以上染液配合使用,可区分出革兰氏染色阳性(G+)或阴性(G-)细菌,G-被染成蓝紫色,G+被染成淡红色5. 鞭毛染色液A液:丹宁酸5.0g, FeCl3 1.5g,15%甲醛(福尔马林)2.0mL,l%NaOH 1.0mL,蒸馏水l00mL;B液:AgNO3 2.0g, 蒸馏水100mL。
实验室常用染色液和试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方【很全】实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red) 2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
精子染色液(酸性复红美蓝法)
第1页共1页精子染色液(酸性复红美蓝法)
货号:G2579
规格:100ml
保存:RT,避光,12个月
产品内容:
物证精斑确证试验目前广泛首选精子检出法。
检出精子的方法很多,实践中大多采用酸性复红美蓝染色法,它是一种混合染色液的复染法。
精子染色液(酸性复红美蓝法)采用改良的酸性复红染色液,操作简单,染色效果好。
本染色液仅用于科研实验。
操作步骤(仅供参考):
一、取检材少许,置载玻片上,用少许蒸馏水浸泡,分离针分离、涂片,烘干。
二、滴加染色液覆盖检材,染色4min。
三、滴加无水乙醇洗掉染色液,挥干后镜检。
必要时,可用中性树胶封片,长期保存。
染色结果:
精子头部
紫红色精子尾部蓝色。
常用染色液的配制
常用染色液的配制常用染色液的配制1.吕氏(Loefflev)美蓝染色液A液:2%美蓝(Methylene blue)95%酒精溶液B液:10%KOH溶液取A液30ml、B液0.1ml与100ml蒸馏水混合。
2.石炭酸复红染色液A液:4%碱性复红(basic fuchsin)95%酒精溶液将碱性复红在研钵中研磨后,逐渐加入95%酒精,继续研磨使其溶解、配成A液。
B液:5%石炭酸溶液取A液10ml、B液90ml混合即可。
一般可将此溶液稀释5-10倍使用。
但稀释液易变质失效,一次不宜多配。
3.革兰氏(gram)染色液(1)草酸铵结晶紫染液:A液:1%结晶紫(Crystal violet)95%酒精溶液B液:1%草酸铵(Ammonium oxalate)溶液取A液20mlB液80ml,静置48/小时后使用。
(2)路哥氏(Lugol)碘液:碘片1.0g、碘化钾2.0g、蒸馏水300ml先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液另,待碘全部溶解后,加够水即成。
(3)95%酒精溶液(4)蕃红(沙黄)复染液:2.5%蕃红(Safranlne O)95%酒精溶液。
取此液10ml与90ml蒸馏水混匀即成。
4.芽孢染色液(1)5%孔雀绿(Malachite green)溶液。
(2)0.5%蕃红溶液。
(3)苯酚品红溶液称取11g碱性品红溶于100ml无水酒精中。
再取上述溶液10ml与100ml 5%的苯酚溶液混合,过滤备用。
(4)黑色素(nigrosin)溶液10%黑色素溶液,置沸水浴中30min后,滤纸过滤二次,补加水到100ml,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
5.荚膜染色液(1)黑色素水溶液将黑色素在蒸馏水中煮沸5min,配成5%溶液,然后加入40%甲醛0.5%(v/v)作防腐剂。
(2)蕃红染色液与革兰氏染色液中的蕃红复染液相同。
6.鞭毛染色液A液:单宁酸5.0g、FeC131.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B 液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
结核杆菌涂片检查标准操作程序
SOP_15-16 结核杆菌涂片检查标准操作程序一、目的:统一项目操作规程,严格检验质量标准,为临床提供及时、可靠的结果报告。
二、适用范围:结核杆菌涂片检查三、操作人员:检验科授权工作人员四、操作步骤:1、原理抗酸染色的基本原理是抗酸菌具有耐受酸性介质脱色的生物性状。
此类细菌在石碳酸(苯酚)的协同作用下,被复红染色剂着色,能够耐受酸性乙醇脱色,显微镜观察时保持紫红色;而其它脱落细胞或标本中的非抗酸菌被酸性乙醇脱色后,可被复染剂亚甲蓝染为蓝色。
2、染色液的配制2.1碳酸复红染液:全省统一配送2.2 5%盐酸乙醇脱色液:35%浓盐酸5mL与95%乙醇混合2.3亚亚甲蓝染色液:全省统一配送3、载玻片的准备:用于AFB检查的载玻片要求:⑴一张载玻只能涂抹一份痰标本。
⑵每张载玻片只能使用一次,不得清洗后再次用于AFB涂片检查。
新的载玻片放入95%乙醇中浸泡2小时脱脂,用摄子夹出放干净纱布上阴干,放无尘容器(培养皿)中备用。
4、本的采集、运送及处理4.1初诊病人应送3份痰标本(夜间痰、晨痰和即时痰)。
如无夜间痰,在留晨痰后2-3小时再留取一份痰标本;或在送痰时,留取两份即时痰。
疗程中或复诊随访病人按期每次送检2份痰(晨痰和夜间痰)。
痰标本性质:干酪痰、血痰、粘液痰为合格标本;唾液或口水为不合格标本,除照常进行涂片检查外,应要求患者重新送检。
4.2收集标本的容器应采用WHO推荐的标准痰瓶,或采用直径4厘米、高2厘米的可密封塑料盒或蜡纸盒(我省统一采用蜡纸盒)。
★痰容器上就注明与检验单一致的病人姓名、编号(初诊病人门诊序号或随访病人登记号)、★检查项目和容器序号1、2、3(1为当日即时痰,2为夜间痰。
3为晨痰)。
5、涂片的制备5.1 编号:取经干燥、清洁、无油污、无划痕的新载玻片制备涂片,在玻片背面左端1/3处注明实验室序号(56001递增)及标本序号(按1递增)(如使用的载玻片一端无磨砂面,须用玻璃刻刀注明编号;如使用的载玻片一端有磨砂面,可用2B铅笔在磨砂面上直接书写)。
细菌的革兰氏染色及染色液的配制
革兰氏染色的一般步骤革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。
未经染色之细菌,由于其与周围环境折光率差别甚小,故在显微镜下极难观察。
染色后细菌与环境形成鲜明对比,可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征,而用以分类鉴定。
革兰氏染色属复染法,即将标本固定后,先用结晶紫染色1分钟后水洗,然后加革兰碘液媒染一分钟后用酒精脱色,再用稀释石炭酸复红复染。
染色后除可以看到细菌形态外,还可将细菌分为两大类,即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌(G+)。
被酒精脱色复染成红色者为革兰氏阴性菌(Gˉ)。
革兰氏染色原理尚不肯定,可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。
致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。
百日咳杆菌、大肠杆菌(大肠埃希菌)、铜绿假单胞菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、沙门菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性菌。
所以根据细菌的革兰氏染色性质,可以缩小鉴定范围,有利于进一步分离鉴定,以对疾病做出诊断。
又由于各种抗生素的抗菌谱不同,革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是:1)涂片固定。
2)草酸铵结晶紫染1分钟。
3)纯化水冲洗。
4)加碘液覆盖涂面染1分钟。
5)水洗,用吸水纸吸去水分。
6)加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,30秒后水洗,吸去水分。
7)番红染色液(稀)染10秒钟后,纯化水冲洗。
干燥,镜检。
染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。
实验三细菌的革兰氏染色法一、目的要求了解革兰氏染色的原理,学习并掌握革兰氏染色的方法。
二、基本原理革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884年由丹麦医师Gram创立的。
革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类:染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌,用G+表示;染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌,用G-表示。
寄生虫常见检测方法
摘要:原虫体积微小,基本结构包括表膜、胞质及胞核。
原虫的运动细胞器有伪足、鞭毛及纤毛三种,运动方式有伪足运动、鞭毛运动和纤毛运动。
胞核多为泡状核,少数为实质核,原虫的营养期大多只含一个核,少数可有两个或更多。
经染色后胞核的形态特征是鉴别医学原虫的重要依据。
寄生原虫的生殖方式分无性生殖(二分裂,多分裂和出芽生殖)和有性生殖(接合生殖和配子生殖)。
原虫病呈世界性分布,以热带和亚热带地区尤为多见。
一般根据虫体寄生的部位,将原虫病分为:肠道原虫感染;肝脏及胆道原虫感染;血液及淋巴系统原虫感染;神经系统原虫病染;皮肤和肌肉原虫感染;肺部原虫感染;眼部原虫感染;泌尿生殖系原虫感染。
主要包括以下四点:①虫体大量增殖,破坏寄主细胞和组织,并影响其功能。
如果不及时治疗,不终止原虫的繁殖,最终将导致寄主病情的恶化,以至死亡;原虫的代谢产物和崩溃的虫体所产生的毒性、溶解和致敏作用;③感染原虫后寄主会产生一定的免疫力,虫体通过抗原的变异或其他途径而设法逃避这种免疫力的作用,从而使寄主与虫体保持暂时的平衡。
当寄主全身或局部抵抗力下降时,则可使隐性感染转变为临床发作。
此外,在寄主对原虫产生体液和细胞免疫反应的同时,也可出现变态反应,引起自身免疫性病理损害;④原虫的致病作用常与同时存在的病原微生物有协同作用。
原虫的主要检查方法一、活滋养体检查:涂片应较薄,方法同查蠕虫卵。
气温愈接近体温,滋养体的活动愈明显。
必要时可用保温台保持温度。
二、包囊的碘液染色检查:直接涂片方法同上,以一滴碘液代替生理盐水,粪便涂抹方法同上。
若同时需检查活滋养体,可在玻片另一侧滴一滴生理盐水。
同上法涂抹粪便标本,再盖上盖片。
片中滴碘液的一侧查包囊;另一侧查活滋养体。
碘液配方:碘化钾4g,碘2g,蒸馏水100ml。
三、隐孢子虫卵囊染色检查:目前最佳的方法为金安-酚改良抗酸染色法。
其次为金胺酚染色法和改良抗酸染色法。
对于新鲜粪便或经10%福尔马林固定保存(4℃1个月内)的含卵囊粪便都可用这三种方法染色。
石炭酸复红染液配制及使用方法全版.docx
石炭酸复红染液(苯酚品红染液)产品说明:石炭酸复红染色液又称苯酚品红染色液。
该染色液与醋酸洋红有相似之处,醋酸洋红是一种比拟常用的碱性染料, 常用于细胞核染色、染色体的固定和染色。
生物学上也常用石炭酸复红染色液作观察细胞分裂时染色体形态的染色剂。
染色体染色时用醋酸洋红染色液染色, 虽然染色效果较好, 但却存在着染色需时较长的问题。
石炭酸复红染色液常用于植物组织的压片法和涂片法,染液稳定,主要用于染色体染色如体细胞染色体和减数分裂染色,是很好的细胞核、线粒体染色剂。
使⽤步骤〔仅供参考〕:1. 固定将经过预处理或没有预处理的材料,放到卡诺氏固定液〔3 份甲醇:1 份冰乙酸〕中固定2~24h,再分别在95%和85%乙醇中各30min ,再转入70%酒精中,可4℃保存备用。
2. 解离取固定好的植物组织,用蒸馏水漂洗2~3 次,放入1N HCl 溶液中60℃水解8~12min,再用蒸馏水洗净。
3. 染色将组织放在载玻片中央,用镊子或解剖针将材料轻轻捣碎。
滴加苯酚品红染液,染色8~15min 后,盖上盖玻片。
4. 压片在盖玻片上面铺上滤纸,固定好盖玻片,用拇指垂直压片,然后用铅笔的橡皮头轻轻均匀地敲打盖片,至肉眼见材料呈雾状即可,使细胞核染色体分散。
5. 镜检观察显微镜下观察染色形态和计数,对典型分裂相细胞进展摄影记录。
考前须知:1. 组织4℃保存时间最好不超过二个月。
2. 为了您的平安和安康,请穿实验服并戴手套操作。
产地:国产提示:本品仅用于科研实验,不能用作医疗及临床诊断。
储存条件:室温密封保存,有效期12 个月。
关键词:石炭酸复红染液(苯酚品红染液) 石炭酸复红染液(苯酚品红染液)相关染色产品:。
常用染色液的配制
常用染色液的配制一、骆氏美蓝染色液(碱性美蓝染色液)甲液:美蓝0.3克,95%酒精30ML乙液:0.01%氢氧化钾溶液100ML甲、乙混合即可,密闭保存,一年后可获多色性。
二、革兰氏染色液1、草酸铵结晶紫染液甲液:结晶紫2G,95%酒精20ML,或结晶紫饱和酒精溶液2ML加蒸馏水18ML。
乙液:草酸铵0.8克,蒸馏水80ML。
甲、乙混合,静置48小时,过滤后备用,可较久贮存。
2、革兰氏碘溶液碘片1G,碘化钾2G,蒸馏水300ML碘化钾+3-5ML蒸馏水,溶解后+碘片,摇匀后+蒸馏水至足量。
3、95%酒精,用作脱色剂4、碱性复红染色液碱性复红(一品红)0.1G,蒸馏水100ML可用沙黄水溶液或稀释石炭酸复红液代替此液。
沙黄水溶液:沙黄饱和酒精溶液+10倍蒸馏水,保存期小于4个月。
稀释石炭酸复红染色液:石炭酸复红液10ML+蒸馏水90ML三、抗酸染色液1、石炭酸复红染色液3%碱性复红酒精溶液10ML+5%石炭酸水溶液90ML,过滤即可。
2、盐酸酒精液浓盐酸3ML+95%酒精97ML四、克利特氏荚膜染色液1、美蓝溶液:美蓝1G+96%酒精10ML+100ML蒸馏水2、碱性红溶液:碱性复红0.03G+1ML96%酒精+99ML蒸馏水五、瑞特氏染色液1、0.1G瑞特氏染粉研磨,再加中性甘油3ML,充分研磨,后徐徐加入甲醇液60ML,边研边搅,存于棕色瓶中过夜,过滤后贮于棕色瓶中,越久越好。
2、磷酸盐缓冲液甲液:磷酸氢二钠23.86G,1000ML蒸馏水。
乙液:磷酸二氢钾9.07G,1000ML蒸馏水。
4份甲液+1份乙液即可。
实验室常用染色液配方
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffl er)美蓝染色液A液:美蓝(Methyl ene blue) 0.3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basicfuchsi n) 0.3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclke r改订)A液:结晶紫(Crysta i violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘 1.0克碘化钾2.0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safran in O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malach ite green) 5.0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigros in) 10.0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congored)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。